Inflammation cutanée

 MASTER 2 BIOLOGIE DE LA PEAU ANNEE 2016-­‐17 (STAGE DU 2 JANVIER AU 16 JUIN 2017) Titre du sujet de stage Identification de biomarqueurs spécifiques des lymphocytes T régulateurs dans l’inflammation cutanée. Nom, adresse de l’Unité d’accueil / Nom du responsable de l’Unité: INSERM U1111, CIRI-­‐Centre International de Recherche en Infectiologie, 21 Avenue Tony Garnier, 69395 Lyon cedex 07, France Responsable de l’Unité : François-­‐Loïc Le Cosset Nom, adresse de l’Equipe d’accueil/ Nom, tel, adresse e-­‐mail du responsable d’Equipe à contacter: Equipe 14 -­‐ Immunologie de l’Allergie Cutanée et Vaccination INSERM U1111, 21 Avenue Tony Garnier, 69395 Lyon cedex 07, France Responsables d’équipe : Jean-­‐François Nicolas (PU-­‐PH)/Marc Vocanson (CR1 INSERM) Responsable encadrement scientifique : Audrey Nosbaum (MCU-­‐PH) Tel : 04.37.28.23.48 audrey.nosbaum@chu-­‐lyon.fr Sujet de stage (1 page maxi) Rationnel : Les lymphocytes T régulateurs (Tregs) représentent une part importante des lymphocytes résidant dans la peau de l’homme. Ils ont un rôle essentiel dans le contrôle de l’inflammation immunologique. Leurs mécanismes suppresseurs ont été décrits jusqu’à présent dans les organes lymphoïdes. Des données récentes suggèrent néanmoins que l’activation des Tregs dans les tissus périphériques fait appel à des voies d’activation spécifiques, dépendant du tissu dans lequel ils se trouvent (Zaiss Cell 2013, Burzyn Cell 2014, Arpaia Cell 2015, Nosbaum JI 2016). Le but de ce projet est d’identifier les biomarqueurs spécifiques des Tregs dans la peau, au cours de l’inflammation cutanée. Matériel et Méthodes : Afin de comprendre quels sont les mécanismes moléculaires mis en jeu par les Tregs cutanés, nous procéderons tout d’abord à un séquençage de l’ARN de ces cellules. Nous étudierons le transcriptome des Tregs cutanés au cours des réactions d’hypersensibilité de contact (CHS). Nous comparerons les Tregs aux lymphocytes T effecteurs (Teffs), isolés à partir de peau inflammatoire, peau normale et du sang. Les biomarqueurs mis en évidence sur les Tregs cutanés seront ensuite confirmés au niveau protéique par cytométrie en flux et cytométrie de masse. Nous rechercherons ensuite quels sont les facteurs tissulaires qui induisent l’expression des biomarqueurs sur les Tregs cutanés. Des échantillons de peau inflammatoire seront analysés par PCR, pour identifier des ligands susceptibles d’activer les Tregs cutanés. Des Tregs isolés à partir de sang et de peau normale seront ensuite cultivés avec les ligands identifiés, afin de démontrer in vitro que l’expression des biomarqueurs exprimés par les Tregs en contexte inflammatoire est induite par ces molécules. Enfin, nous validerons fonctionnellement ces biomarqueurs en montrant que leur inhibition module la fonction suppressive des Tregs cutanés dans des tests d’inhibition in vitro. Conclusion/perspectives : L’ambition de ce projet est d’identifier de nouveaux mécanismes d’action des Tregs dans les tissus cutanés, pouvant être ciblés dans un but thérapeutique. Technologies utilisées qPCR, RNA sequencing, cytométrie en flux (FACS), cytométrie de masse (Cytof), culture cellulaire, tri cellulaire, tests fonctionnels d’inhibition cellulaire Mots clés Lymphocytes T régulateurs, inflammation cutanée, allergie, régulation, hypersensibilité de contact Publications d’intérêt (5 maxi) 1.
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Nosbaum A, Prevel N, Truong HA, Mehta P, Ettinger M, Scharschmidt TC, Ali NH, Pauli ML, Abbas
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Immunol. 2016;196(5):2010-4
Nosbaum A, Cortial A, Rozieres A, Baeck M, de Montjoye L, Grande S, Briançon S, Nicolas JF,
Vocanson M. Encapsulation of hydrophobic allergens into nanoparticles improves the in vitro
immunological diagnosis of allergic contact dermatitis. Nanomedicine. 2015.11(4):1029-33
Nosbaum A, Trad S, Vallat L, Launay D, Cabane J, Hatron PY, Hachulla E, Hanslik T,
Costedoat-Chalumeau N, Musset L, Frances C. Systemic scleroderma and prevalence of
monoclonal immunoglobulin. Autoimmun Rev. 2014. 13(12):1189-1194.
Nosbaum A, Rouzaire P, Mullet C, Diot N, Dubost R, Bienvenu F, Guilloux L, Piriou V, Bienvenu J,
Bérard F Immediate Allergic Hypersensitivity to Quinolones Associates with Neuromuscular Blocking
Agent Sensitization. J Allergy Clin Immunol In Practice 2013 ; 1(3):273-9.
Nosbaum A, Braire-Bourrel M, Dubost R, Faudel A, Parat S, Nicolas JF, Bérard F. Prevention of
nonsteroidal inflammatory drug-induced urticaria and/or angioedema. Ann Allergy Asthma
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