Diagnostic par la biologie moléculaire
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Diagnostic par la biologie moléculaire
AIDE AU DIAGNOSTIC PAR LA BIOLOGIE MOLECULAIRE 1. Introduction le développement des techniques de biologie moléculaire et l’apparition de trousses commerciales permettant la recherche simultanée de différents organismes (bactéries, virus et parasites) responsables de pathologies diverses, ouvrent la voie à une nouvelle approche du diagnostic. Cela permet de mettre en évidence des pathogènes insoupçonnés ou de détecter des co-infections. Tout l’enjeu réside donc dans l’élimination rapide de l’hypothèse d’infection et dans l’identification du type de germe en cas d’infection avérée, pour une meilleure prise en charge du patient mais aussi pour une meilleure efficience médico-économique. Si le résultat s’avère négatif, et il le sera encore dans 90% des cas, cela permettra de statuer rapidement pour le patient. La PCR revêt un énorme intérêt quand elle est négative, puisqu’elle permet de dégager des dossiers, d’éliminer d’autres tests et d’aller vite (Dr Gibaud, CHU de Nantes 2015). 2. Technique utilisée Le système FilmArray® utilisé dans notre laboratoire est un système multiplexe en PCR (Polymérase Chain Reaction), certifié, intégrant en circuit fermé, en évitant ainsi des contaminations, la préparation de l’échantillon, l’amplification, la détection et l’analyse. Il est possible par ce moyen de détecter simultanément des virus, des parasites, et des bactéries. L’avantage principal est l’obtention de résultats fiables dans un délai très court, permettant au médecin de pouvoir décider rapidement d’un traitement si nécessaire. Un autre avantage est d’avoir deux profils principaux à disposition : le profil gastrointestinal et le profil respiratoire. 1 3. Profil gastro-intestinal L’OMS définit la diarrhée aiguë par l’occurrence d’au moins trois selles molles à liquides par jour, datant de moins de deux semaines. La majorité des cas est liée aux salmonelles et aux campylobacters. Organismes recherchés dans le profil gastro-intestinal PCR : Campylobacter Clostridium difficile Plesiomonas shigelloides Salmonella Cryptosporidium Yersinia enterolitica 40/41Astrovirus Norovirus GI/ GII Vibrio parahaemolyticus Vibrio cholerae Shigelle/ enteroinvasive Shiga-like-toxin producing Cyclospora cayetanensis Entamoeba hystolytica Rotavirus Enteroaggregative E. Coli Enteropathogenic E. Coli Enterotoxigenic E. Coli E. Coli O157 Gardia lamblia Adenovirus F Sapovirus (I, II, IV et V) Une étude parue dans le journal "Clinical Microbiology and Infection" en 2015 montre que la technique FilmArray® de Biofire, que nous utilisons dans notre laboratoire, détecte au moins un organisme dans 54% des échantillons proposés, comparé à au moins un organisme dans 18,1% des échantillons utilisant des protocoles traditionnels de laboratoires. En résumé, cette technique offre la capacité d’identifier un nombre plus grand d’organismes pathogènes associés à des maladies gastro-intestinales, tout en étant plus rapide, plus sensible, plus spécifique et plus simple à effectuer que les méthodes standards. 4. Profil respiratoire Organismes recherchés dans le profil respiratoire PCR : Adenovirus Coronavirus HKU1 Coronavirus OC43 Influenza A/H1 Parainfluenza 1 Influenza B Coronavirus NL63 Human Metapneumovirus Influenza A/H1-2009 Parainfluenza 2 2 Respiratory Syncitial Virus Coronavirus 229E Influenza A Influenza A /H3 Parainfluenza 3 Parainfluenza 4 Mycoplasma pneumoniae Bordetella pertussis Chlamydophila pneumon. Human Rhinovirus/Enterovirus Le diagnostic moléculaire des maladies infectieuses est de plus en plus important dans le cadre de la clinique, pour le traitement de la maladie et pour le contrôle de l’infection. Des tests récents, hautement sensibles et spécifiques, deviennent facilement disponibles, grâce au changement de tendance du test individuel au test multiplexe, ainsi qu’au passage de la centralisation à la décentralisation (Point-Of-Impact Testing, ou POIT). Le profil respiratoire que l’on propose chez TEST SA aide à prévenir l’usage inutile d’antibiotiques et offre un traitement plus opportun et efficace. Une surveillance active des voies respiratoires avec un test PCR peut aider à prédire des épidémies saisonnières respiratoires. 5. Positions tarifaires - profil respiratoire PCR : Frs 375.- profil gastro-intestinal PCR : Frs 451.- 6. Bibliographie - - - - • ARTICLES Spectrum of Enteropathogens detected by the FilmArray® GI Panel 24in a Multicentre Study of Community-acquired Gastroenteritis. Spina A., Kerr KG., Cormican M., Barbut F., Eigentler A., Zerva L., Tassios P., Popescu GA., Rafila A., Eerola E., Batista J., Maass M., Aschbacher R., Olsen KEP., Allerberger K.CLINICAL MICROBIOLOGY AND INFECTION 2015;21(8):719-28 Multiplex Gastrointestinal Pathogen Panels: Implications for Infection Control. 25 Rand K.H., Tremblay E.E., Hoidal M., Fisher L.B., Grau K.R., Karst S.M.DIAGNOSTIC MICROBIOLOGY AND INFECTIOUS DISEASE 2015;82(2):154-7 How Well Does Physician Selection of Microbiologic Tests Identify Clostridium difficile and 26other Pathogens in Paediatric Diarrhoea? Insights Using Multiplex PCR-Based Detection. Stockmann C., Rogatcheva M., Harrel B., Vaughn M., Crisp R., Poritz M., Thatcher S., Korgenski EK., Barney T., Daly J., Pavia A.T.CLINICAL MICROBIOLOGY AND INFECTIOUS DISEASES 2015;21(2):179 Multicenter Evaluation of the BioFire FilmArray® Gastrointestinal Panel 27for the Etiologic Diagnosis of Infectious Gastroenteritis. 3 - - - - Buss S.N., Leber A., Chapin K., Fey P.D., Bankowski M.J., Jones M.K., Rogatcheva M., Kanack K.J., Bourzac K.M.JOURNAL OF CLINICAL MICROBIOLOGY 2015;53(3):915-25 Multiplex Detection of Gastrointestinal Pathogens: A Comparative Evaluation of 28Two Commercial Panels Using Clinical Specimens. Khare R., Espy M.J., Cebelinski E., Boxrud D., Sloan L.M., Cunningham S.A., Pritt B.S., Patel R., Binnicker M.J.JOURNAL OF CLINICAL MICROBIOLOGY 2014;52(10):3667-73 Comparison of Turnaround Time (TAT) and Time to Oseltamivir Discontinuation 6between Two Respiratory Viral Panel Testing (RVP) Methodologies.Pettit N., Matushek S., Charnot-Katsikas A., Tesic V., Boonlayangoor S., Brielmaier B., Pisano J.JOURNAL OF MEDICAL MICROBIOLOGY 2015;64:312313 Impact of a Rapid Respiratory Panel Test on Patient Outcomes. Rogers B.B., Shankar P., Jerris R.C., Kotzbauer D., Anderson E.J., Watson JR., O'Brien L.A., Uwindatwa F, McNamara K, Bost J.E.ARCHIVES OF PATHOLOGY & LABORATORY MEDICINE 2015;139(5):636-41 Seasonality and Prevalence of Respiratory Pathogens detected by multiplex PCR at 8a Tertiary Care Medical Center. Litwin C.M., Bosley J.G.ARCHIVES OF VIROLOGY 2014;159(1):65-72 Implementation of Filmarray® Respiratory Viral Panel in a Core Laboratory 9Improves Testing Turnaround Time and Patient Care. Xu M., Qin X., Astion M.L., Rutledge JC., Simpson J., Jerome KR., Englund J.A., Zerr D.M., Migita R.T., Rich S., Childs J.C., Cent A., Del Beccaro M.A. AMERICAN JOURNAL OF CLINICAL PATHOLOGY 2013;139(1):118-23 • POSTERS - - Point-of-Impact Testing in the Emergency Department: Diagnostics for Respiratory Viral Infections. Poelman R., van der Meer J., van Leer-Buter C., Riezebos-Brilman A., Friedrich A., Niesters B.CLINICAL VIROLOGY SYMPOSIUM – 2015 – Poster #1126 Utilization and Impact of Rapid Respiratory Virus Panel Testing on Evaluation 12and Management of Children seen in a Pediatric Emergency Department. Fowler S.L., Nolte F.S.PEDIATRIC ACADEMIC SOCIETY ANNUAL MEETING – 2013 4