80002 FT Albumine

BIOLABO
www.biolabo.fr
ALBUMINE Méthode BCG
FABRICANT :
BIOLABO SAS,
Réactif pour le dosage quantitatif de l’albumine
dans le plasma ou le sérum humains
Les Hautes Rives
02160, Maizy, France
REF 80002
R1 2 x 200 mL
R2 1 x 5 mL
CODE CNQ : UO
|
SUPPORT TECHNIQUE ET COMMANDES
Tel : (33) 03 23 25 15 50
IVD USAGE IN VITRO
Fax : (33) 03 23 256 256
INTERET CLINIQUE (3)
PREPARATION DES REACTIFS
L’albumine est la plus abondante des protéines plasmatiques. Sa
fonction principale est le maintien de la pression osmotique entre les
espaces vasculaires et extravasculaires. L’albumine a la capacité de
transporter une grande variété de substances (acides gras,
phospholipides, ions métalliques, acides aminés, médicaments,
hormones, bilirubine …).
Une augmentation mesurable du taux d’albumine est rencontrée
uniquement dans le cas de déshydratation aiguë et ne présente pas
d’intérêt clinique.
Une baisse du taux d’albumine peut être rencontrée dans le cas de
défaut de synthèse (malnutrition), élimination excessive (protéinurie)
ou une combinaison des deux (maladies hépatiques).
Le défaut de synthèse peut être primaire ou génétique (ex :
analbuminémie) ou acquis (ex : processus inflammatoire).
Les réactifs sont prêts à l’emploi.
STABILITE ET CONSERVATION
Stocker à l’abri de la lumière, dans le flacon d’origine bien
bouché à 2-8° C.
Etalon (flacon R2) : Transvaser la quantité nécessaire, bien reboucher
et stocker à 2-8° C.
• En l’absence de contamination, les réactifs sont stables jusqu'à la
date de péremption indiquée sur l’étiquette du coffret, s’ils sont
utilisés et conservés dans les conditions préconisées.
• Ne pas utiliser le réactif s’il est trouble ou si l’absorbance mesurée
à 630 nm est > 0,300.
PRELEVEMENT ET PREPARATION DU SPECIMEN (4)
PRINCIPE (1) (2)
Sérum ou plasma (voir § INTERFERENCES).
En milieu tamponné à pH 4,2 le vert de bromocrésol se combine à
l'albumine pour former un complexe coloré dont l’absorbance mesurée
à 630 nm (620-640) est proportionnelle à la concentration en albumine
dans le spécimen.
Stabilité de l'albumine dans le sérum :
72 h à 2-8° C.
6 mois à –20° C.
INTERFERENCES (4) (5) (6) (7)
REACTIFS
flacon R1
VERT DE BROMOCRESOL
Acide succinique
Vert de bromocrésol (BCG)
Hydroxide de sodium
Polyoxyéthylène monolauryl éther
Conservateur
flacon R2
Les plasmas héparinés donnent des résultats supérieurs à ceux
obtenus sur sérum. Cette interférence peut être éliminée en travaillant
en méthode bichromatique (la deuxième longueur d’onde choisie
pourra être 550 ou 700 nm).
Le clofibrate et la phenylbutazone produisent une interférence
négative avec cette méthode.
L’hémolyse ou la turbidité du sérum affectent peu le résultat du dosage
en raison du rapport de dilution élevé.
Young D.S. a publié une liste des substances interférant avec le
dosage.
83
167
50
1,00
mmol/L
µmol/L
mmol/L
g/L
ETALON
REACTIFS ET MATERIEL COMPLEMENTAIRES
Albumine bovine 50 g/L (725 µmol/L)
1. Equipement de base du laboratoire d’analyses médicales.
2. Sérums de contrôle normaux et pathologiques.
PRECAUTIONS
Les réactifs BIOLABO sont destinés à du personnel qualifié, pour un
usage in vitro.
• Vérifier l’intégrité des réactifs avant leur utilisation.
• Utiliser des équipements de protection (blouse, gants, lunettes).
• Ne pas pipeter avec la bouche.
• En cas de contact avec la peau ou les yeux, rincer abondamment à
l’eau et consulter un médecin
• Les réactifs contiennent de l’azide de sodium (concentration < 0,1%)
qui peut réagir avec les métaux tels que le cuivre ou le plomb des
canalisations. Rincer abondamment.
• La fiche de données de sécurité peut être obtenue sur simple
demande.
• Elimination des déchets : respecter la législation en vigueur.
Par mesure de sécurité, traiter tout spécimen comme potentiellement
infectieux. Respecter la législation en vigueur.
Made in France
CALIBRATION (8)
• Etalon du coffret (flacon R2) ou BIOLABOMulticalibrator
REF 95015 traçables sur SRM 927d.
• Ou tout calibrant raccordé sur une méthode ou un matériau de
référence.
La fréquence de calibration dépend des performances de l’analyseur
et des conditions de conservation du réactif.
Il est recommandé de calibrer à nouveau dans les cas suivants :
1. Changement du lot de réactif.
2. Après opérations de maintenance sur l’analyseur.
3. Les valeurs de contrôle obtenues sortent des limites de confiance,
même après utilisation d’un deuxième flacon de sérum de contrôle
fraîchement reconstitué.
Dernière version : www.biolabo.fr
Version : 25/07/2011
CONTRÔLE DE QUALITE
CODE CNQ : UO
•
BIOLABO EXATROL-N Taux I REF 95010.
•
BIOLABO EXATROL-P Taux II REF 95011.
•
Tout autre sérum de contrôle titré pour cette méthode.
•
Programme externe de contrôle de la qualité.
Il est recommandé de contrôler dans les cas suivants :
•
Au moins un contrôle par série.
•
Au moins un contrôle par 24 heures.
•
Changement de flacon de réactif.
•
Après opérations de maintenance sur l’analyseur.
Lorsqu’une valeur de contrôle se trouve en dehors des limites de
confiance indiquées, appliquer les actions suivantes :
1. Répéter le test en utilisant le même contrôle.
2. Si la valeur obtenue reste en dehors des limites, préparer un
sérum de contrôle fraichement reconstitué et répéter le test.
3. Si la valeur obtenue reste en dehors des limites, utiliser un autre
calibrant ou un calibrant fraichement reconstitué et répéter le test.
4. Si la valeur obtenue reste en dehors des limites, calibrer à
nouveau en utilisant un autre flacon de réactif et répéter le test.
Si la valeur obtenue reste en dehors des limites, contacter le service
technique BIOLABO ou le revendeur local.
MODE OPERATOIRE (TECHNIQUE MANUELLE) (7)
Ramener les réactifs et spécimens à température ambiante.
Mode opératoire n°1 : Volume spécimen 10 µL
Mesurer dans des tubes à
essais bien identifiés :
Blanc
Etalon
Dosage
Réactif
2 mL
2 mL
2 mL
Eau déminéralisée
10 µL
Spécimen
10 µL
Etalon
10 µL
Bien mélanger.
Lire les absorbances à 630 nm (620-640) dans les 3 minutes et si possible dès
la 1ère minute en temps fixé (Remarque 2) contre le blanc réactif.
Mode opératoire n°2 : Volume spécimen 5 µL
Mesurer dans des tubes à
essais bien identifiés :
INTERVALLES DE REFERENCE (4)
Réactif
Albumine
g/L
[µmol/L]
0 à 4 jours
28-44
[421-662]
Eau déminéralisée
4 jours à 14 ans
38-54
[572-813]
Spécimen
14 à 18 ans
32-45
[482-677]
18 à 60 ans
34-48
[512-722]
60 à 90 ans
32-46
[482-692]
> 90 ans
29-45
[436-677]
Il est recommandé à chaque laboratoire de définir ses propres valeurs
de référence pour la population concernée.
PERFORMANCES (7)
Blanc
Etalon
Dosage
2,5 mL
2,5 mL
2,5 mL
5 µL
5 µL
Etalon
5 µL
Bien mélanger.
Lire les absorbances à 630 nm (620-640) dans les 3 minutes et si possible, dès
la 1ère minute en temps fixé (Remarque 2) contre le blanc réactif.
Remarques :
1Des procédures spécifiques sont disponibles pour les
analyseurs automatiques. Contacter le service technique BIOLABO.
2Réduction de l’interférence des autres protéines en
particulier en cas de processus inflammatoire.
Selon mode opératoire n°2 :
Intra-série :
N = 20
Taux
faible :
Taux
normal :
Inter-série :
N = 20
Taux
faible :
Taux
normal :
Moyenne g/L
32,2
38,1
Moyenne g/L
32,8
38,5
S.D. g/L
0,34
0,40
S.D. g/L
0,80
0,82
C.V. %
1,07
1,05
C.V. %
2,4
2,1
Limite de détection :
CALCUL
Le résultat est déterminé d’après la formule suivante :
Résultat =
Abs (Dosage)
x concentration de l’Etalon
Abs (Etalon)
environ 3 g/L
Sensibilité pour 1 g/L : 0,006 Abs. à 630 nm.
REFERENCES
Comparaison avec réactif du commerce :
y = 1,0044 x – 0.340 r = 0,9954
(1)
La spécificité analytique est meilleure avec lecture dans la première
minute.
(2)
(3)
LIMITE DE LINEARITE
Mode opératoire n°1 : jusqu’à 60 g/L (903 µmol/L).
Mode opératoire n°2 : jusqu’à 100 g/L (1505 µmol/L).
Au delà, diluer le spécimen avec une solution NaCl à 9 g/L et refaire le
dosage en tenant compte de la dilution dans le calcul du résultat. La
limite de linéarité dépend du rapport de dilution spécimen/réactif.
(4)
(5)
(6)
(7)
(8)
IVD
SRM /Standard Reference Material ®
REF
Fabricant Date de péremption Usage “In vitro” Température de conservation Référence Produit
Made in France
Albumin standards and the measurement of serum albumin with
bromcresol green, DOUMAS B.T., WATSON W.A., BRIGGS H.G. - Clin.
Chim. Acta., 31, (1971), p. 87-96.
Determination of serum albumin, DOUMAS B.T. and BIGGS H.G. –
Standard methods of clinical chemistry – Acad. Press. N.Y. Vol 7 (1972) p.
175-188.
rd
TIETZ N.W. Text book of clinical chemistry, 3 Ed. C.A. Burtis, E.R.
Ashwood, W.B. Saunders (1999) p. 482-485.
th
Clinical Guide to Laboratory Test, 4 Ed., N.W. TIETZ (2006) p. 68-71
YOUNG D.S., Effect of Drugs on Clinical laboratory Tests, 4th Ed. (1995)
p.3-16 à 3-22
Overestimation of Albumin in Heparinized Plasma, HALLBACH J.,
HOFFMANN G.E., GUDER W.G., Clin. Chem. Vol 37 No 4 (1991), p. 566568.
Improved specificity of serum Albumin determination and estimation of
“acute phase reactants” by use of the bromcresol green reaction. Jan E. C.
Gustafsson, Clin. Chem., Vol 22,n°5, (1976) p.616-622
→
LOT
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Dernière version : www.biolabo.fr
Version : 25/07/2011