Électrophorèse des lipoprotéines

Après coloration du gel avec un colorant spécifique des
lipides, il est possible d’effectuer une densitométrie de
chacune des bandes obtenues. Les valeurs physiologiques habituellement retenues pour la répartition des
lipoprotéines, chez un patient à jeun depuis plus de
12 heures, sont les suivantes :
• chylomicrons : absence ;
• â-lipoprotéines : 42,3 à 69,5 % ;
• pré-â-lipoprotéines : 2 à 31,2 % ;
• α-lipoprotéines : 15,1 à 39,9 %.
La comparaison de ce profil normal avec les tracés électrophorétiques a permis à Fredrickson de proposer une
classification des hyperlipoprotéinémies dont les principales caractéristiques sont rappelées dans le tableau 1.
Certaines lipoprotéines qualitativement anormales :
IDL (intermediary density lipoprotein) du type III de
Fredrickson, Lp(x) des cholestases, peuvent être détectées sur ces électrophorèses. En effet, la Lp(x), dont
c’est le seul moyen de détection, migre à l’inverse des
autres lipoprotéines et sera retrouvée avant les chylomicrons.
Le lipidogramme est donc utilisable pour le typage
d’une dyslipoprotéinémie, mais le suivi d’un patient
(sous régime ou sous traitement) est très difficile à effectuer par cette technique. Il est alors plus judicieux de
lui préférer le dosage de chacun des paramètres : cholestérol, triglycérides, LpA1, apolipoprotéines.
Électrophorèse des lipoprotéines
Les lipoprotéines sont des associations de lipides et de
protéines. Ces dernières assurent la solubilisation des
lipides dans le milieu aqueux qu’est le sérum. Cependant, ces lipoprotéines restent très hétérogènes quant à
leur composition relative en protéines et lipides, ce qui
signifie qu’elles sont de densité et de charge électrique
variables, permettant leur séparation.
La méthode de séparation de référence est l’ultracentrifugation analytique, qui a permis d’obtenir quatre
classes de lipoprotéines, individualisées en fonction de
leur densité. On différencie, par ordre de densité croissante, les chylomicrons, les VLDL (very low density
lipoproteins), les LDL (low density lipoproteins) et les
HDL (high density lipoproteins).
L’électrophorèse en gel d’agarose ou électrophorèse de
zone est la méthode courante de séparation, car la plus
rapide et automatisable. Elle permet de différencier
quatre groupes correspondant globalement à ceux issus
de l’ultracentrifugation. Par ordre de mobilité décroissante, sont retrouvés les α-lipoprotéines (HDL), les préâ-lipoprotéines (VLDL), les â-lipoprotéines (LDL) et les
chylomicrons qui, normalement, restent au niveau du
dépôt. Cette classification a été effectuée par assimilation au tracé électrophorétique des protéines.
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Cholestérol et ses fractions
Tableau 1. Interprétation du bilan lipidique
Type d’hyperlipémie
Cholestérol total
g/l
mmol/l
Triglycérides
g/l
mmol/l
Aspect du sérum
Chylomicrons
Type I
Type II a
Type II b
Type III
Type IV
Type V
2–4
3–10
2,8–3,5
3–5
< 2,7
≤5
5,2–10,4
7,8–26
7,3–9,1
7,8–13
<7
≤ 13
30–70
34–79
< 1,6
<2
2–5
2,3–5,6
2–9
2,3–10,2
2–10
2,3–11,3
≤ 30
≤ 34
Lactescent
++++
Clair
0
Clair à légèrement trouble
0
Clair à légèrement trouble
0
Trouble
0
Lactescent
++++
LDL
–––
+++
++
++ soudure
–
––
VLDL
Normal à – – –
Normal
++
++
+++
++
HDL
–––
Normal à –
Normal à –
–
–
–