Minerals Modified Glutamate Medium

Minerals Modified Glutamate Medium
2.
DM883.Milieu pour la numération des coliformes dans les
eaux potables par la technique du nombre le plus probable
(MPN).
3.
Contenu: Voir l’étiquette de la boite.
Utilisation du milieu
1. Sélectionner les dilutions appropriées selon le tableau
ci-dessous.
Formule*
Concentration
dans le milieu
20,0g/litre
0,5g/litre
0,04g/litre
0,048g/litre
0,04g/litre
0,002g/litre
0,002g/litre
0,002g/litre
0,2g/litre
0,02g/litre
0,02g/litre
1,8g/litre
Lactose
Formate de sodium
L-Cystine
Acide aspartique L(-)
Arginine L(+)
Thiamine
Acide Nicotinique
Acide pantotènique
Sulfate de magnésium
Citrate d’ammonium ferrique
Chlorure de calcium
Hydrogénophosphate
dipotassique
Violet de bromocrésol
0,02g/litre
pH final : 6,7 ± 0,2
Conservation
Toutes les boîtes doivent impérativement être bien fermées
et stockées jusqu’à la date de péremption indiquée sur
l’étiquette dans un endroit sec à une température ne
dépassant pas 25°C. Certains milieux se conservent à 28°C, se référer à l’étiquette de l’emballage.
Précautions
Usage In Vitro uniquement. Observer les règles de sécurité
et d’hygiène en vigueur. Ne peut être utilisé que par du
personnel de laboratoire qualifié. Stériliser les effluents
biologiques dangereux avant de les éliminer. Se référer à la
fiche de sécurité du produit (disponible sur demande ou via
le site internet MAST).
Matériels nécessaires non fournis
Réactifs et équipements microbiologiques standards (anses,
suppléments sélectifs MAST, écouvillons, ensemenceurs,
autoclaves et incubateurs, etc…) ainsi que des réactifs
sérologiques et biochimiques et des additifs tels que le
sang.
Procédure
Se référer à l’étiquette de la boîte pour les volumes et
quantités nécessaires
Double concentration
1. Dissoudre 22,7g de poudre et 12,7g de glutamate de
sodium (MAST RM72A) dans 1 litre d’eau distillée ou
non ionisée contenant 5 g de chlorure d’ammonium.
2. Distribuer 10ml et 50ml dans les tubes et les flacons
avec les cloches de Durham.
3. Stériliser par autoclavage à 115°C pendant 10 minutes.
Simple concentration
1. Dissoudre 11,35g de poudre et 6,35g de glutamate de
sodium (MAST RM72A) dans 1 litre d’eau distillée ou
non ionisée contenant 2,5g de chlorure d’ammonium.
Distribuer 5ml de milieu dans les tubes avec cloches
Durham.
Stériliser par autoclavage à 115°C pendant 10 minutes.
Stocker les milieux préparés dans les tubes fermés à 28°C.
Type d’échantillon
Eau chlorée des canalisations
Eau courante, non chlorée
Puits profond ou trou
Puits peu profond
Pas d’information
Catégorie
A
B
C
D
2.
Catégorie
A, B
A, B, C
A, B, C
B, C, D
A, B, C, D
Procédure
50ml d’eau pour 50ml de milieu double
concentration
10ml d’eau dans 5 tubes contenant
chacun 10ml de milieu simple
concentration
1ml d’eau dans 5 tubes contenant chacun
5ml de milieu simple concentration
0,1ml d’eau dans 5 tubes contenant
chacun 5ml de milieu simple concentration
Incuber les tubes à 35-37°C pendant 46-48 heures.
Interprétation des résultats
Après incubation, noter le nombre de tubes montrant une
acidification du milieu (couleur jaune) et la production de
gaz. Percer quelques tubes ne montrant aucune production
de gaz,une bulle devrait se former dans le tube Durham’s.
Consulter les tables standard MPN pour le plus grand
nombre probable de bacilles coliformes présomptifs. Les
tubes positifs présomptifs doivent être confirmés en utilisant
le bouillon à la bile et au vert brillant à 2% MAST (DM259),
de même qu’avec les tests biochimiques supplémentaires.
Contrôle de qualité
Vérifier tous signes de détérioration. Le contrôle de qualité
doit être effectué avec au moins une souche pour démontrer
un résultat conforme. Ne pas utiliser le produit si le résultat
d’une souche de contrôle est incorrect. La liste ci-dessous
montre la performance de souches de contrôle que
l'utilisateur peut se procurer facilement.
Souches test
Enterococcus faecalis
ATCC 19433
Escherichia coli
ATCC 25922
Salmonella typhimurium
ATCC 14028
Résultat
Pas de croissance
Croissance – acide positif+
production de gaz
Croissance – acide négatif
+production de gaz
Références
Bibliographie disponible sur demande.
IFU420 NB 06/08 V2
MAST est une marque déposée.
ATCC est une marque déposée de American
Type Culture Collection, Manassas, Virginia, USA.
*La formule peut varier pour optimiser les performances