Mission et organisation du CNR
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Mission et organisation du CNR
Annexe 1. Mission et organisation du CNR 1.1 Rappel des missions et objectifs majeurs du CNR et des laboratoires associés Apporter une expertise microbiologique : Développer et/ou valider les techniques diagnostiques sérologiques et moléculaires des arboviroses Mettre les techniques à disposition des laboratoires intéressés Disposer d’une expertise pour l’identification et la caractérisation des souches d’arbovirus autochtones et importées en France métropolitaine et dans les DOM Collaborer avec les structures expertes en entomologie pour suivre la situation des vecteurs potentiels en métropole et dans les DOM Contribuer à la surveillance épidémiologique, en lien avec l’Institut de veille sanitaire : En contribuant à la surveillance épidémiologique des arboviroses et à l’investigation d’éventuels cas groupés, en lien avec les CIRE concernées et selon les modalités définies par les plans concernant la lutte contre ces virus en vigueur en France métropolitaine et dans les DOM En contribuant aux réseaux de surveillance européens ou internationaux En contribuant avec les structures en charge de la surveillance des arboviroses chez l’animal Contribuer à l’alerte : En signalant à l’Institut de veille sanitaire et aux Cire concernées tout évenement inhabituel : augmentation de nombre de cas, apparition de cas groupés, modification des formes cliniques (répartition, modification de leur expression clinique, formes inhabituelles), introduction de nouveaux arbovirus sur le territoire, etc. Contribuer aux travaux du réseau national des laboratoires Biotox : Apporter son expertise spécifique au service des instances concernées de santé publique, de défense et de sécurité nationale Contribuer avec les instances chargées de leur pilotage, à l’animation du réseau des laboratoires Biotox Contribuer à la mise en place d’une collection nationale des souches des agents de la menace pour les besoins de la biodéfense. 1 1.2 Organisation des équipes du CNR et des laboratoires associés 1.2.1 Laboratoire coordinateur CNR arbovirus, IRBA Marseille Noms et prénoms Fonction Période de recrutement sur l’exercice en cours ETP Leparc-Goffart Isabelle, Responsable CNR arbovirus PhD, HDR Prat Christine, PhD Ajointe CNR arbovirus Personnel titularisé 1 CDD depuis le 27-08-2012 1 Plumet Sebastien, PhD Gravier Patrick Adjoint CNR arbovirus Technicien Personnel titularisé Personnel titularisé 0.2 1 Daries William Technicien Personnel titularisé 1 Tenebray Bernard Merle Olivier Technicien Technicien Personnel titularisé Personnel titularisé 1 1 Boubis Laetitia Technicien Personnel titularisé 1 Bacar Samira Secrétaire CDD 0 ,7 Remarque : Tous les techniciens de l’unité de Virologie de Marseille sont formés pour le diagnostic des arbovirus et peuvent donc tous intervenir dans cette activité si nécessaire. Chef de l’unité de Virologie (Marseille, Grenoble, Lyon) IRBA Christophe Peyrefitte, PharmD, PhD Responsable de l’antenne Marseille de l’unité de Virologie IRBA Isabelle Leparc-Goffart, PhD, HDR Equipe Recherche Arbovirus et Arénavirus Sébastien Emonet, PhD Vanessa Monteil, Etudiante en thèse Isabelle Drouet, Technicienne Responsable du CNR des arbovirus, coordinateur des CNR arbovirus Isabelle LeparcGoffart PhD, HDR Patrick Gravier, Technicien William Daries, Technicien Equipe Recherche et Technologie, support diagnostic arbovirus Adjoint au Diagnostic Sébastien Plumet, PhD / Christine Prat, PhD à partir du 27/08/2012 Laetitia Boubis, Technicienne Bernard Tenebray, Technicien Olivier Merle, Technicien Secrétaire Responsable qualité, Olivier Merle, Technicien Responsable risque chimique Henriette Pugelli, Ingénieur 2 1.2.2 Laboratoire associé CNR arbovirus, région Antilles Guyane, Institut Pasteur de Cayenne Six membres du laboratoire de virologie de l’Institut Pasteur de Guyane, un virologue, un ingénieur de recherche, trois techniciens et une secrétaire, sont impliqués dans les activités du laboratoire associé, CNR des Arbovirus pour la région Antilles-Guyane. L’année 2012 a été marquée par des modifications dans l’équipe avec le départ, fin mars, du responsable du laboratoire, Philippe Dussart, remplacé fin septembre 2012 par Dominique Rousset. Le responsable adjoint du laboratoire, Séverine Matheus, a ainsi assuré la direction du laboratoire pendant une grande partie de l’année. Nom DUSSART Prénom Philippe Fonction Qualification Organisme payeur ETP CNR Responsable Pharm; Ph,D IP, Paris 0,75 Ph,D IP, Paris 0,5 MD ; Ph,D IP, Paris 0,75 Arbovirus (Jusqu’au 30.03.12) Responsable adjoint MATHEUS Séverine (Jusqu’au 30 .03.12 puis à partir du 20.09.12) Responsable (du 01.04.12 au 19.09.12) ROUSSET Dominique Responsable (Depuis le 20.09.12) LABEAU Bhéty Technicienne supérieure DELAM IP, Guyane 1 MOUA David Technicienne BTS IP, Guyane 1 BREMAND Laetitia Technicienne BTS IP, Guyane 0,5 THOMAS NormaJean Secrétaire IP, Guyane 0,25 1.2.3 Laboratoire associé CNR arbovirus, région Océan Indien, CHU Saint Denis Réunion Nom Prénom Fonction Qualification ETP CNR JaffarBandjee Marie Christine Responsable du laboratoire de Virologie et du CNR associé Médecin biologiste, PhD 0,20 Belmonte Olivier Responsable adjointe du laboratoire de Virologie et du CNR associé Pharmacien biologiste 0,20 Lee Pat Yuen Gislaine Technicienne supérieure BTS 1,00 Crescence M-Line Technicienne supérieure BTS 0.20 Catherine Johanna Technicienne supérieure BTS 0,20 Bruniquet Zibel Sandrine Anne Technicienne supérieure Secrétaire BTS 0,20 0.20 3 La responsabilité scientifique du CNR associé est assurée par MC. Jaffar-Bandjee. Cette activité arbovirose s’inscrit dans une activité de virologie plus générale au sein du CHU de la Réunion (biologie moléculaire, culture, sérologie) réalisée par 4 techniciennes, y compris une activité de Biotox avec une astreinte 7j/7. L’activité Arbovirose est estimée à un ETP technicien en activité de base, qui doit être renforcé en cas d’épidémie dans la mesure du possible. 1.3 Organisation et description des locaux et des équipements du CNR et des laboratoires associés 1.3.1 Laboratoire coordinateur CNR arbovirus, IRBA Marseille Description des locaux : L'unité de virologie est installée dans des locaux d'une superficie totale de 500 m2, accueillant les activités de recherche et de diagnostic. Ces locaux comprennent des laboratoires standards ainsi qu’un laboratoire de confinement 3 (P3). Si une partie des locaux et équipements a une utilisation commune avec l’activité de recherche (P3, ultracentrifugeuse), l’ensemble des activités critiques du diagnostic est réalisé dans des pièces dédiées et/ou avec des matériels dédiés (réception et conditionnement des échantillons, analyses moléculaires : extraction des acides nucléiques, pré PCR, post PCR, analyses sérologiques, western blot, mise en culture : PSM et incubateur réservés en laboratoire P3). Les souches virales sont stockées dans des congélateurs -80°C dédiés, fermés à clé, eux même situés dans une pièce fermée à clé et munie d’une alarme. L’ensemble du site, militaire, est soumis à une surveillance 24h/24, 7j/7. Principaux Equipements : Plate-forme sérologie : chaînes ELISA ; automate pour western blot, Plate-forme biologie moléculaire : automate d’extraction des acides nucléiques ; automate PCR en temps réel ; thermocycleurs ; Autres équipements : lyophilisateur, ultracentrifugeuse, microscopes dont microscopes à fluorescence Culture : P3 de 20 m2 (PSM et incubateurs dédiés) ; P2 pour l’entretien des lignées cellulaires. Pièces à accès réglementé et sécurisées pour le stockage des souches (congélateurs et cuves à azote liquide). Autoclave 1.3.2 Laboratoire associé CNR arbovirus, région Antilles Guyane, Institut Pasteur de Guyane Description des locaux : Le laboratoire de virologie de l’IP Guyane dispose actuellement d’une superficie de 105 m2 de laboratoires : o Un laboratoire où sont réalisées les sérologies (surface de 34 m2). o Un laboratoire de confinement 2 (P2) servant spécifiquement à l’entretien des cultures cellulaires (surface de 18 m2). o Un laboratoire de confinement 3 (P3) pour les inoculations des cultures cellulaires à partir des sérums, des broyats de biopsies post mortem, ainsi que les préparations d’antigènes et l’extraction d’ARN viral (en cas de nécessité) (surface de 25 m2 ). o Pour la biologie moléculaire : D’un P2 comprenant une pièce dédiée à l’extraction de l’ARN viral, et une pièce dédiée à la préparation des mix (surface de 18 m2), D’une pièce où sont installés les thermocycleurs, 4 D’un laboratoire avec sas pour la migration des produits de PCR amplifiés et le clonage, D’une pièce dédiée à la PCR en temps réel. Les différentes pièces et laboratoires dédiés à la biologie moléculaire sont mutualisés avec le laboratoire des interactions Virus-Hôte (LIVH) de l’IP Guyane. Une séparation physique par un sas (P2) a été instaurée entre les pièces d’extraction et de préparation des mix (située au 1er étage, au sein du laboratoire de Virologie). De plus, les pièces où sont installés les thermocycleurs ainsi que celles où sont réalisées les électrophorèses se situent au rez de chaussée du bâtiment (au sein du LIVH). La pièce contenant l’appareil à PCR temps réel est située au sein d’une plate-forme technique commune à tous les laboratoires de l’IP Guyane. L’IP Guyane dispose également d’une animalerie souris et d’un laboratoire de type P2 équipé d’un poste de sécurité microbiologique de type 2 (PSM2). Cette animalerie présente toutes les caractéristiques nécessaires à l’accueil d’un élevage de souris (contrôle de la température, de l’hygrométrie, arrivée d’eau…). L’agrément nécessaire à l’exploitation de cette animalerie a été délivré par la Direction des Services Vétérinaires de la Guyane fin 2008. Principaux Equipements : o o o o o Le laboratoire de sérologie est équipé des équipements suivants : PSM2, centrifugeuse, bain-marie, incubateur, agitateurs magnétiques, pHmètre, balance de précision, un congélateur -20°C, un réfrigérateur et une machine à glace, l’automate EVOLIS® (chaine ELISA – Bio-Rad). Le P2 dédié à l’entretien des lignées cellulaires est équipé d’une hotte à flux laminaire, un microscope inversé, de deux incubateurs (28°C et 37°C), d’un congélateur -20°C, d’un réfrigérateur et d’une centrifugeuse. Le P3 est équipé de deux PSM2, d’une centrifugeuse, de 4 incubateurs (28°C, 37°C et 37°C atmosphère 5% CO2, 52°C), d’un microscope inversé, d’un plateau agitateur et un autoclave double entrée. Le laboratoire dispose par ailleurs de 2 gros congélateurs -20°C et de 2 congélateurs -80°C pour le stockage de la sérothèque et de la virothèque. Pour la biologie moléculaire, le laboratoire dispose de : Hotte à flux laminaire pour la préparation des mix réactionnels, hotte chimique pour l’extraction des ARN, centrifugeuse haute vitesse, minicentrifugeuses, microcentrifugeuses, 2 congélateurs -20°C, 2 réfrigérateurs, hotte UV pour dépôt du cDNA, un bain-marie et 2 blocs chauffant à sec. Trois thermocycleurs (GeneAmp 9700 Applied Biosystems), deux automates de PCR en temps réel (Applied Biosystems : 7300 et Step-One Plus) une hotte à UV est disposée dans une pièce attenante pour la réalisation des PCR nichées. Plusieurs générateurs et cuves d’électrophorèse horizontales/verticales, une hotte chimique, une enceinte UV reliée à une caméra numérique, un agitateur pour culture cellulaire, une balance de précision, 2 minicentrifugeuses, un congélateur -20°C et un réfrigérateur. 1.3.3 Laboratoire associé CNR arbovirus, région Océan Indien, CHU Saint Denis Réunion Description des locaux : L’activité CNR Arbovirus fait partie intégrante du laboratoire de virologie du CHU de la Réunion, sur l’Hôpital Félix Guyon à Saint-Denis. Ce laboratoire fait partie des laboratoires de niveau 2 du réseau Biotox-Piratox et dispose depuis juin 2005 d’un laboratoire de confinement P3 qui a été audité par l’afssaps en 2008. L’activité CNR Arbovirus dispose : 5 - De la salle de séro-immunologie (25m2) pour la réalisation des sérologies - Un laboratoire de confinement 2 pour la préparation des cultures cellulaires (10m2) - Du P3 d’une superficie de 90m2 comprend outre la pré-zone et les sas personnel et matériel, 3 pièces techniques (virologie, mycobactérie, microscope informatique). Ce laboratoire d’accès règlementé et sécurisé, est utilisé l’inoculation des cultures et la conservation des souches virales. L’activité Biologie Moléculaire, y compris celle des Arboviroses, est réalisée dans les pièces suivantes: une salle d’extraction 25 m2 une salle blanche 6 m2 1 salle de PCR de 20 m2 1 salle de post-PCR (commune avec l’activité recherche) 25 m - Nous disposons aussi pour l’activité de recherche et de développement des laboratoires de recherche du GRI (Groupe de Recherche sur l’immunopathogie et les maladies infectieuses, des laboratoires de recherche sur l’Hôpital Félix Guyon disposant notamment de cytomètre de flux, station de pipetage Ependorf pour préparation de plaques, microscope à fluorescence et sur le CYROI (Plateforme Cyclotron Recherche de l’Océan Indien) disposant entre autres de matériel de clonage, d’un microscope confocal. Principaux Equipements : Laboratoire de séro-immunologie : PSM2, centrifugeuse, bain-marie, incubateurs, laveur/lecteur de plaques, pHmètre, balance de précision, un congélateur -20°C, un réfrigérateur, l’automate LIAISON Biologie moléculaire : automates d’extraction des acides nucléiques (Easy-Mag, MagNa Compact), hotte Captair à flux laminaire, thermocycleurs en temps réel pour l’urgence (Smart-Cycler) et pour les séries (Lignt-Cycler 480,, Lignt-Cycler 1.5), thermocycleur classique (Eppendorf Mastercycler), réfrigérateurs, congélateurs -80°C, centrifugeuses, générateur et cuve d’électrophorèse Laboratoire P2 de culture cellulaire : PSM, centrifugeuse, incubateur, bain-marie, microscope inversé Laboratoire P3 : PSM, incubareurs, centrifugeuses, réfrigérateurs et congélateurs en double, microscope inversé 2 Activités d’expertise 2.1 Capacités techniques du CNR et des laboratoires associés En 2012, de nombreux échanges techniques ont été réalisés entre les 3 laboratoires pour avoir les mêmes capacités techniques en fonction de la situation épidémiologique des régions et les mêmes sensibilités en particulier pour la détection par biologie moléculaire des arbovirus. Nous avons aussi échangé des souches virales pour augmenter la capacité de chaque laboratoire à réaliser des séroneutralisations pour mieux caractériser la spécificité de la réponse anticorps pour certains patients. Liste des techniques disponibles : o Sérologie : ELISA indirect IgG, capture des IgM (MAC-ELISA), Immunofluorescence, séroneutralisation (test de neutralisation par réduction de titre), immunoblot o Détection d’ARN viral par RT-PCR en temps réel (méthode Taqman) o Détection de la protéine NS1 de la dengue par ELISA 6 o o o Génotypage (séquençage de produits d'amplification génique, analyse comparative et phylogénétique) : en collaboration avec la plate forme « Génotypage des pathogènes et santé publique » (PF8) de l’Institut Pasteur pour la réalisation de séquençage partiel, séquençage des génomes complets, développement de la collaboration pour l’utilisation des séquenceurs haut débit (Hiseq2000) Isolements viraux sur lignées cellulaires en culture (invertébrés et vertébrés), titrages de virus Production et validation de réactifs sérologiques : préparations antigéniques (cellules infectées fixées, surnageants viraux précipités et inactivés), protéines virales recombinantes à but diagnostic ; anticorps mono- et polyclonaux. 7 Sérologie Genre Virus * Culture Identification Elisa * (IgM / IF IgG) Biol. Moléculaire Neutrali- Western blot sation (IRBA) RT-PCR En temps RT-PCR * réels * Alphavirus ● Chikungunya ● ● ● ● ● O Nyong Nyong ● ● ● ● Ross River ● ● ● ● Sindbis ● ● ● ● Semliki Forest ● ● ● ● Mayaro ● ● ● ● ● Tonate ● ● ● ● ● Venezuelan Eq ● ● Enc ● ● ● ● Eastern Eq Enc ● ● ● ● Western Eq Enc ● ● ● ● Fièvre jaune ● ● ● ● ● ● Dengue # ● ● ● ● ● ● West Nile ● ● ● ● ● ● Usutu ● ● ● ● Wesselsbron ● ● ● ● Tick born Enc ● ● ● ● ● Japanese Enc ● ● ● ● ● Saint Louis Enc ● ● ● ● ● Zika ● ● ● ● Bunyamwera ● ● ● ● Tahyna Oropouche ● ● ● ● ● ● ● ● Catu ● ● ● Guama ● ● ● Murutucu ● ● ● Caraparu ● ● ● Oriboca ● ● ● Flavivirus ● ● ● ● Bunyavirus Phlebovirus ● Rift Valley fever ● ● ● ● ● Toscana ● ● ● ● ● Sandfly Sicilian† ● ● ● ● ● Sandfly Naples† ● ● ● ● ● Chagres ● ● Punta toro ● ● * : tests applicables sur sérum ; plasma ; LCR ; spot de sang sur papier buvard. # : Détection antigénique (antigène NS1) possible à l’aide de tests commerciaux de type immunoenzymatique et immunochromatographique dans le sérum de patients infectés pendant la phase aiguë de la maladie. Le CNR a introduit l’utilisation de l’un d’entre eux, le test Platelia™ Dengue NS1 Ag (Bio-Rad) dans sa pratique courante. 8 Collections de souches, antigènes ou immun-sérums de référence : Famille Genre Virus Souches Antigènes Flaviviridae Flavivirus Dengue West Nile Usutu Encéphalite de St Louis Encéphalite japonaise Fièvre jaune Wesselsbron TBE (langat) Ntaya Saboya Zika Rocio Chikungunya O’Nyong nyong Mayaro Semliki Forest Tonate Sindbis VEE OUI OUI OUI OUI OUI OUI OUI OUI OUI OUI OUI OUI OUI OUI OUI OUI OUI OUI OUI OUI OUI OUI OUI OUI OUI OUI OUI NON NON OUI NON OUI OUI OUI OUI OUI OUI OUI Togaviridae Bunyaviridae Alphavirus Orthobunyavirus Nairovirus Phlebovirus EEE OUI WEE OUI Ross River OUI Pixuna OUI Ockelbo OUI Babanki OUI Bunyamwera OUI Ilesha OUI Bwamba OUI Ingwavuma OUI Lumbo OUI Nyando OUI Bahig OUI Oropouche OUI Catu OUI Guama OUI Murutucu OUI Caraparu OUI Oriboca OUI Tahyna OUI Dugbe OUI Erve OUI Toscana OUI Sandfly Naples OUI Sandfly Sicilian OUI Fièvre de la vallée du OUI Rift Belterra OUI Immunsérums OUI OUI OUI OUI En cours NON OUI NON NON NON OUI NON NON NON NON NON NON OUI OUI OUI OUI OUI OUI OUI OUI NON OUI OUI OUI OUI OUI OUI OUI OUI NON NON NON NON OUI NON OUI NON OUI OUI En cours NON NON OUI NON NON NON OUI NON NON NON NON NON NON OUI OUI OUI OUI OUI OUI OUI OUI NON OUI NON OUI OUI OUI NON 9 Icoaraci Punta Toro Karimabad Chagres OUI OUI OUI OUI NON NON NON NON NON NON NON NON Conditions de stockage : -80°C et sécurisées Caractérisation des souches : Titrage, séquençage partiel ou complet, phylogénie. Mise à disposition : sous MTA pour traçabilité des souches (application de l’arrêté du 22 Septembre 2001 ; SANP012410A) ; vente des antigènes et immun-sérums pour les laboratoires privés (avec accord de l’InVS) ; distribution gratuite aux laboratoires impliqués dans les plan de surveillance des arbovirus dans la limite de disponibilité, en particulier pour les ascites. Pour le laboratoire associé CNR arbovirus, région Antilles Guyane, Institut Pasteur de Guyane Collections de souches, antigènes ou immun-sérums de référence : Le laboratoire de Virologie de l’IP Guyane détient une collection de virus de référence lyophilisés pouvant permettre d'élargir le panel d'antigènes en vue d'enquêtes épidémiologiques ou à des fins diagnostiques, ainsi que les ascites correspondantes. Il détient une collection d’échantillons biologiques d’origine humaine évaluée à environ 35000 sérums conservés à -20°C et environ 9000 sérums conservés à -80°C (infectés ou non par des arbovirus). Ces collections sont déclarées chaque année depuis 2007 à la Direction Médicale de l’Institut Pasteur à Paris, qui assure ensuite sa déclaration auprès du ministère de la Recherche. L’exploitation des prélèvements humains de ces biothèques pour les activités propres au CNR ou dans le cadre de demande de mise à disposition se fait sous conditions de l’obtention de la non-opposition des patients pour les prélèvements collectés depuis 2011 suite à la mise en place d’une procédure ad hoc par le laboratoire de Virologie à l’IP Guyane. Pour les prélèvements antérieurs une procédure de dérogation à l’obtention de la nonopposition est entreprise spécifiquement pour chaque étude auprès du CPP territorialement compétent. Conditions de stockage Les collections de prélèvements, d’isolats et de souches virales sont conservés à -80°C dans des congélateurs fermés à clefs et/ou localisés dans des zones à accès sécurisé par badge. Un système de sondes de mesure de température relié à un dispositif d’enregistrement continu et à une centrale d’alarme devrait être mis en place à l’IP Guyane courant 2013. Conditions de mise à disposition de ces collections : Le CNR, de par la valorisation de son savoir-faire et de son expertise sur le matériel biologique concerné qu’il contribue à caractériser, reste détenteur des prélèvements biologiques et données associées ou propriétaire des droits existants sur les souches et données associées y afférant, sachant que les autorisations administratives délivrées par les autorités sanitaires sont indépendantes des notions de propriété éventuelle portant sur le matériel biologique et les données associées. L’accès aux souches, aux prélèvements biologiques et données associées collectés dans le cadre de l’activité du CNR est conditionné par la mise en place de documents contractuels spécifiques. Ainsi, est exigée pour le transfert du matériel biologique et des données associées à des équipes extérieures, la mise en place à minima d’un accord de transfert de matériel biologique (MTA) ou d’un accord de collaboration selon la nature des interactions entre les deux parties. Suivant la nature industrielle ou académique du partenaire, ces accords donneront lieu ou non à une contrepartie financière. Ces accords ont notamment pour objet d’assurer le transfert de la détention physique du matériel au partenaire. Différents points essentiels sont appréhendés dans ces accords : 10 Le tiers partenaire s’engage à n’utiliser les souches, prélèvements biologiques et données associées que dans le cadre d’un programme de recherche défini spécifiquement. Les résultats issus du programme de recherche devront systématiquement être communiqués par le partenaire au CNR; le CNR sera également associé ou remercié dans les publications et/ou communications. Le tiers partenaire s’engage à ne pas transférer les souches, prélèvements biologiques et données associées à des tiers et à retourner ou détruire le matériel biologique à la fin du programme de recherche. En termes de valorisation, l’Institut Pasteur s’assure dans certaines circonstances de la copropriété des résultats issus des travaux effectués sur le matériel biologique et veille à ce que la valorisation du savoir-faire et de l’expertise du CNR ayant conservé, traité, trié et analysé le matériel biologique soit garantie au titre de l’accord. Lorsque le matériel biologique et les données associées sont mis à disposition dans le cadre d’une collaboration scientifique par laquelle les partenaires s’associent de manière plus conséquente à la réalisation du programme de recherche, la valorisation des travaux menés conjointement devra tenir compte des apports respectifs de chacun des partenaires. Les accords excluent toute garantie relative (i) à la nature appropriée des souches, des prélèvements biologiques et données associées pour une utilisation spécifique et (ii) à la qualité non-infectieuse du matériel biologique. L’interdiction de l’utilisation du matériel biologique sur l’homme et sur les animaux, le cas échéant, est également stipulée dans l’accord. Enfin, le CNR n’assume aucune responsabilité quant à l’utilisation du matériel biologique par le partenaire. 11