Comment investiguer une anémie aujourd`hui?

FORMULE SANGUINE (1)
ERYTHROPOÏESE
PHOTOMETRE
CHAMBRE
SEDIMENTATION
ANEMIE
Hb < 120 g./l. ♀
Hb < 135 g./l. ♂
RETICULOCYTES
50 – 120.109/L (G/L)
REGENERATIVE
RETICULOCYTES > 120 G/L
HEMOLYSE
BILIRUBINE INDIRECTE
L DH
HAPTOGLOBINE
- Test de Coombs
- Thrombocytes
- Morphologie EC
- Fragmentocytes
- Electrophorèse Hb
- ……
SPOLIATION
HEMORRAGIE
- Anamnèse
- Examen clinique
- Sang occulte selles
- Endoscopie
-........
HYPOREGENERATIVE
RETICULOCYTES < 120 G/L
MCV - Ferritine
- Saturation de la
transferrine
- Récepteurs solubles
de la transferrine
- CRP / VS
- Créatinine
- Electrophorèse Hb
- ……
MCV - Créatinine
- CRP / VS
- T4 / TSH
- EPO
- Electrophorèse
protéines
- Moelle osseuse
- .......
MCV - OH
- “Pilule”
- Folates
- Vitamine B 12
- Anticorps anti-FI
anti-cell. pariétales
- Tests coeliakie
- Moelle osseuse
- ........
PRINCIPE DE COULTER
COMPTEUR A IMPEDANCE ELECTRIQUE
Aspiration lente
d'un volume
donné
Modification mesurable du champ
électrique au passage de chaque cellule
par l'orifice capillaire avec impulsion
proportionnelle à la taille de la cellule.
Champ électrique produit entre 1 électrode
interne et 1 électrode externe.
Orifice capillaire par
lequel la suspension de
cellules peut être
aspirée
Suspension de
cellules dans
solution avec
électrolyte
ANALYSEURS
HEMATOLOGIE
FORMULE SANGUINE
ERYTHROPOÏESE
CYTOMETRIE DE FLUX (1)
CYTOMETRIE DE FLUX (2)
DIFFUSION LATERALE
DIFFUSION AXIALE
Mesure de la complexité cellulaire
(granulations, noyau, etc.)
Mesure du volume cellulaire
Mesure de la fluorescence
cellulaire
Mesure de l'Hb cellulaire
(EC et RC)
En fonction de l'angle d'analyse
de la diffusion latérale
CYTOMETRIE DE FLUX (3)
La coloration par des fluorochromes spécifiques de certains éléments cellulaires (p.ex.: peroxydase) permet le tri des cellules selon
le type de fluorescence (couleur émise) par des capteurs sensibles aux différentes émissions.
On peut aussi marquer, avec un colorant fluorescent, un anticorps dirigé contre certaines caractéristiques cellulaires
(p.ex.antigènes de surface)
Le niveau d'absorption de la lumière (avec ou sans coloration) par les cellules est un autre mode de mesure
Le logiciel de traitement des données permet de combiner les informations en histogrammes ou cytogrammes ("scattergrams").
FORMULE SANGUINE 2011
FORMULE SANGUINE
COMPLETE 2011
FORMULE SANGUINE
COMPLETE 2012
ADVIA 120
SIEMENS BAYER
IDR: Intervvalle de Distribution Rouges MTV : Volume moyen thrombocytes IDP : Intervalle de Distribution des Plaquettes
CHr : contenu en Hb réticulocytes LUC : Large Unstained Cells (grandes cellules négatives pour peroxydase)
FORMULE ROUGE
COMPLETE 2012
HISTOGRAMMES RBC
NUMERATION RETICS
CYTOGRAMME
DEGRES DE MATURATION
CYTOGRAMME RBC
HISTOGRAMME
HB CELLULAIRE (pg)
EC et RETICS (CHr)
ADVIA 120
IDR: Intervvalle de Distribution Rouges
CHr : contenu en Hb réticulocytes (= RTC CH )
RTC SCAT ABS : Diagramme de répartition des réticulocytes par contenu RNA
HISTOGRAMMES ERYTHROCYTAIRES
Histogramme des EC selon le volume
(permet le calcul du MCV)
60 fl
120 fl
220 g/L
410 g/L
Histogramme des EC selon la concentration
en Hb permet le calcul du MCH
HISTOGRAMME VOLUME EC
CYTOGRAMME ERYTHROCYTAIRE
CYTOGRAMME EC
280
410
HISTOGRAMME
CONCENTRATION HB EC
Document ADVIA 120
CYTOGRAMME ERYTHROCYTAIRE
120
Volume Erythrocytes (fl) Normocytaire
Normochrome
Hyperchrome
Macrocytaire
Microcytaire
280
410
Concentration Hb (g/L) Document ADVIA 120
CYTOGRAMMES ERYTHROCYTAIRES
PATHOLOGIQUES (1)
NORMAL
ANEMIE FERRIPRIVE
THALASSEMIE MINEURE
Population EC déplacée
vers le bas (microcytaire)
et la gauche (hypochrome)
Population EC déplacée vers
le bas (microcytaire)
mais peu vers la gauche
(encore normochrome)
CYTOGRAMMES ERYTHROCYTAIRES
PATHOLOGIQUES (2)
Macrocytose non
mégaloblastique
Population EC macrocytaire
mais concentration Hb peu
variable.
Anémie
mégaloblastique
Grand variabilité de la
taille cellulaire mais
normochromie
Anémie microcytaire
hypochrome transfusée
Double population EC avec
une population
microcytaire hypochrome
et une population
normocytaire normochrome.
(Image semblable en cas de
réponse au traitement de fer)
Syndrome
myélodysplasique
de type anémie
réfractaire avec
sidéroblastes
Population macrocytaire avec une
population microcytaire hypochrome
correspondant aux EC déficients en fer
en raison du trouble d'incorporation.
(Image presque pathognomonique).
CYTOGRAMMES ERYTHROCYTAIRES
PATHOLOGIQUES (3)
Sphérocytose
héréditaire
Status après
hémorragie sévère
Anémie hémolytique
auto-immune
Population d'érythrocytes
de grande taille
relativement hypochromes
= réticulocytes
Nombreux
microsphérocytes
(hémolyse)
Réticulocytes plus petits
car déjà en partie
sphérocytaires
RBC VHC
Population d'érythrocytes
hyperchromes de petite
taille = microsphérocytes
PARAMETRES DE LA LIGNEE
ERYTHROCYTAIRE
•
HGB
Hemoglobin level (g/L)
•
RBC
Red Blood cell Count (1012/L)
•
MCV
Mean Corpuscular Volume (fl)
•
HCT
Hematocrit (L/L)
•
MCH
Mean Corpuscular Hemoglobin (pg)
•
MCHC
Mean Corpuscular Hemoglobin Concentration (g/L)
•
CHCM
Corpuscular Hemoglobin Concentration Mean (g/L)
Identique MCHC
•
HDW
Hemoglobin concentration Distribution Width (%)
Anisochromie
•
CH
Corpuscular Hemoglobin (pg)
Synthèse Hgb
•
RDW
Red cell volume Distribution Width (%)
Anisocytose
•
%MICRO
% RBC < 60 fL
EC microcytaire
•
%MACRO
% RBC > 120 fL
EC macrocytaires
•
%HYPO
% RBC < 280 g/L HGB
EC hypochromes
•
%HYPER
% RBC > 410 g/L HGB
EC "hyperchromes"
RETICULOCYTES (1)
Marquage de l'ARN résiduel des réticulocytes (RC) (p.ex. par Oxazine)
(colorant spécifique occasionnant une absorption de la lumière par les cellules qui le fixent)
-
Seuils de discrimination
►
B RC à absorption faible (matures)
Taille des cellules
A Erythrocytes matures (pas d'absorption)
C RC à absorption intermédiaire
D RC à absorption forte (immatures)
E Thrombocytes
F Autres signaux (grandes cellules sans absorption)
Intensité absorption lumière ►
RETICULOCYTES (2)
Histogramme combiné volume RC et EC
Histogramme combiné concentration Hb RC & EC
Histogramme combiné Hb cellulaire RC & EC (pg / cellule)
RETICULOCYTES (3)
Traitement par EPO
Début
Après 2 semaines
Après 4 jours
Après 1 mois
CORRECTION ETAT FERRIPRIVE
Paramètre
Résultat
Référence
avant
après
Hémoglobine
54
98
140-180 g/l
MCV
51
70
79-95 fl
Erythrocytes
hypochromes
75
42
< 5%
CHr
18
33
27-33 pg
PARAMETRES RETICULOCYTES
•
%RETIC
(% Reticulocytes)
•
#RETIC
(# Reticulocytes)
•
MCVr
(Mean Cell Volume reticulocytes) (fl)
Volume RETIC
•
CHr
(Cellular Hemoglobin content reticulocytes) (pg)
Synthèse HB récente
•
CHCMr
(Cell Hemoglobin Concentration Mean reticulocytes) (g/L)
Synthèse HB récente
•
IRF-H
(Immature Reticulocytes Fraction High) (%)
Production RETIC
•
IRF-M+H
(Immature Reticulocytes Fraction Medium + High) (%)
Production RETIC
ANEMIE
Hb < 120 g./l. ♀
Hb < 135 g./l. ♂
RETICULOCYTES
(G/L)
Numération automate
Paramètres RETIC
RETICULOCYTES > 120 G/L
et / ou
RETICULOCYTES < 120 G/L
et / ou
% RETIC IMMATURES
HYPOREGENERATIVE
% RETIC IMMATURES
REGENERATIVE
- CYTOGRAMME EC
BILIRUBINE INDIRECTE
L DH
HAPTOGLOBINE
ou MCV SPOLIATION
HEMORRAGIE
et / ou
CYTOGRAMME EC
% EC hypochromes
RC hypochromes
CHr
MCV CYTOGRAMME EC
MCV CYTOGRAMME EC
HEMOLYSE
- Ferritine
- Morphologie EC
- Fragmentocytes
- Test de Coombs
- Thrombocytes
- Anamnèse
- Examen clinique
- Sang occulte selles
- Endoscopie
- Saturation de la
transferrine
- Récepteurs solubles
de la transferrine
- Protoporphyrine
érythrocytaire
- CRP / VS
- Créatinine
- Hepcidine
- Créatinine
- CRP / VS
- T4 / TSH
- EPO
- Electrophorèse
protéines
- Moelle osseuse
- Hepcidine
- OH
- “Pilule”
- Folates
- Vitamine B 12
- Anticorps anti-FI
anti-cell. pariétales
- Tests coeliakie
- Moelle osseuse
METABOLISME DU FER
CELLULE DUODENALE
HEPCIDINE
MACROPHAGE
HEPCIDINE
ERYTHROPOÏESE
HEPCIDINE ►▼: Fonctionnement normal de la ferroportine. Fer à disposition de l'érythropoïèse
HEPCIDINE ▲: Blocage de la ferroportine (intestin et macrophages). Pas de fer à disposition de l'érythropoïèse.
ANEMIE INFLAMMATOIRE
INFECTION
INFLAMMATION
MALADIE AUTOIMMUNE
TUMEUR MALIGNE
INSUFFISANCE RENALE
Activation des
lymphocytes T
Activation des
monocytes
LYMPHOCYTE T
MONOCYTE
Interleukine-6
Interleukine-1
TNF-α
α
REIN
Erythropoïétine
FOIE
Hepcidine
TNF-α
α
Hémophagocytose
des érythrocytes
sénescents
Interleukine-1
TNF-α
α
γ-Interféron
MACROPHAGE
Inhibition de la
libération du fer des
macrophages
MOELLE
OSSEUSE
Erythropoïèse
Fe+++ / Transferrine
Carence fonctionnelle en fer
Absorption
intestinale du fer