simmons citrate 61834 64834
Transcription
simmons citrate 61834 64834
SIMMONS CITRATE 61834 64834 AGAR / MEDIUM FOR THE DIFFERENTIATION OF ENTEROBACTERIACEAE 1- INTENDED USE Simmons citrate agar (sodium citrate minimum mineral medium) is used for the differentiation of Gram negative bacilli. It enables the detection of sodium citrate as the sole source of carbon and energy for bacteria. This medium contributes to demonstration of the identification characteristics of Enterobacteriaceae. 2- PRINCIPLE Bacteria able to utilise sodium citrate as sole carbon source are able to grow on this medium. Fermentation of sodium citrate induces acidification, causing a blue colour change of the medium in the presence of bromothymol blue (pH indicator). 3- HOW SUPPLIED • Ready to use medium: - 25 x 7 ml slant tubes • Dehydrated medium - bottle of 500 g code 61834 code 64834 4- THEORETICAL COMPOSITION (g/l of distilled water) Simmons citrate agar is prepared according to the formula described by Simmons (1) Sodium citrate 1 Sodium chloride 5 Magnesium sulphate 0.2 Ammonium dihydrogen phosphate 1 Dipotassium phosphate 1 Bromothymol blue 0.08 Agar 15 Preparation of the medium: Homogenize the powder contained in the bottle. Add 21 grams of dehydrated medium to 1 litre of sterile distilled water. Heat gently, shaking frequently, then heat to boiling for 1 minute. If necessary, adjust the pH to 6.8. Sterilize in the autoclave at 121°C for 20 minutes. Dispense into tubes or bottles. Cool the tubes in an inclined position to obtain a long slope without a mass of agar in the bottom of the tube. 5- STORAGE • Ready to use medium: at +2-8°C in a dark place. • Dehydrated medium: tightly sealed bottle in a dry place at +15-25°C. The expiry date and batch number are indicated on the packaging. 6- INSTRUCTIONS Material: • Material provided: Simmons Citrate medium Inoculation: This medium must be inoculated with a pure, fresh culture of Enterobacteriaceae grown on agar medium. A culture in broth or peptone water must never be used, as these media would provide other nutrients that may lead to erroneous results. Inoculate on the surface, by a central, longitudinal streak. Incubation: Incubate in the incubator at 37°C for 1 to 7 days. Reading: Observe the culture daily. “Citrate-positive” bacteria turn this medium blue and often show abundant growth. “Citrate-negative” bacteria do not grow on this medium and do not turn the medium blue, even after several days of incubation. (+): positive in the majority of cases. Citrate + Salmonella subspecies 1 (in general) S. arizonae BE II Citrobacter Levinea P. rettgeri Providencia K. pneumoniae K. oxytoca Enterobacter aerogenes E. cloacae E. agglomerans (in general) Serratia Vibrio cholerae P. aeruginosa Pseudomonas sp. Citrate – S. paratyphi A S. typhi Edwardsiella Escherichia coli E. coli biotype A.D. Shigella P. morganii Citrate-variable (depending on the biochemical type S. paratyphi B: (+) S. typhimurium: (+) S. enteritidis: (+) K. rhinoscleromatis P. mirabilis P. vulgaris K. ozaenae Hafnia alvei (late utilisation at 22-30°C) Yersinia enterocolitica Yersinia pseudotuberculosis (except serotype 4) Plesiomonas X. maltophilia Pasteurella Aeromonas hydrophila Vibrio NAG Acinetobacter 7- PERFORMANCE/QUALITY CONTROL OF THE TEST • Appearance of the ready to use medium: clear green agar. • Appearance of the dehydrated medium: greenish powder. • The growth performances of Simmons Citrate medium are verified with the following strains: STRAINS Salmonella Enteritidis ATCC 13076 Klebsiella pneumoniae ATCC 13883 Proteus vulgaris ATCC 13315 Escherichia coli ATCC 25922 CULTURE RESULT AFTER 1 to 7 DAYS at 37°C Positive Positive Negative Negative 8- QUALITY CONTROL OF THE MANUFACTURER All manufactured reagents are prepared according to our Quality System, starting from reception of raw material to the final commercialization of the product. Each lot is submitted to quality control assessments and is only released to the market, after conforming to pre-defined acceptance criteria. The records relating to production and control of each single lot are kept within Bio-Rad. 9- LIMITS OF USE • It is very important not to add any other nutrients to the medium during inoculation, as any additional nutrients can lead to erroneous results. • Certain “citrate-positive” bacteria may take several days to turn the medium blue. • Complementary tests must be performed to identify the species of the strain isolated. • Pure, fresh cultures must always be used to obtain interpretable results. 10- REFERENCES 1. SIMMONS, J.S. 1926. A culture medium for differenciating organisms of typhoid-colon aerogenes groups and for isolation of certain fungi. J. Infect. Dis., 1926, 39 : 209. SIMMONS CITRATE 61834 64834 GÉLOSE / MILIEU DE DIFFÉRENCIATION DES ENTÉROBACTÉRIES IVD 1- APPLICATION La gélose Simmons citrate (milieu minéral minimum au citrate de sodium) est utilisé pour la différenciation des bacilles Gram négatifs. Il permet la recherche du citrate de sodium comme seule source de carbone et d'énergie pour les bactéries. Ce milieu contribue à la mise en évidence des caractères d'identification des Entérobactéries. 2- PRINCIPE Les bactéries capables d'utiliser le citrate de sodium comme seule source de carbone pourront se développer sur ce milieu. La fermentation du citrate de sodium entraîne alors une acidification qui provoque une coloration bleue du milieu en présence de bleu de bromothymol (indicateur de pH). 3- PRÉSENTATION • Milieu prêt à l’emploi - 25 tubes inclinés de 7 ml code 61834 • Milieu déshydraté - flacon de 500 g code 64834 4- COMPOSITION THÉORIQUE (en g/l d’eau distillée) La gélose Simmons citrate est préparée selon la formule décrite par Simmons (1) Citrate de sodium 1 Chlorure de sodium 5 Sulfate de magnésium 0,2 Phosphate mono-ammonique 1 Phosphate dipotassique 1 Bleu de bromothymol 0,08 Agar 15 Préparation du milieu : Homogénéiser la poudre contenue dans le flacon. Mettre 21 grammes de milieu déshydraté dans 1 litre d’eau distillée stérile. Chauffer lentement en agitant fréquemment, puis porter à ébullition pendant 1 minute. Si nécéssaire, ajuster le pH à 6,8. Stériliser à l’autoclave à 121°C pendant 20 minutes. Répartir en tubes ou en flacons. Refroidir les tubes en position inclinée pour obtenir une pente longue sans culot. 5- CONSERVATION • Milieu prêt à l'emploi : à + 2 - 8°C et à l'obscurité. • Milieu déshydraté : flacon soigneusement fermé dans un endroit sec à+15-25°C. La date de péremption et le numéro de lot sont indiqués sur le conditionnement. 6- UTILISATION Matériel : • Matériel fourni : milieu Simmons Citrate 1 Ensemencement : Ce milieu doit être ensemencé à partir d'une culture pure et fraîche d’Entérobactéries prélevée sur milieu gélosé. En aucun cas, on ne doit se servir d'une culture en bouillon ou en eau peptonée, qui apporterait avec les bactéries des éléments nutritifs susceptibles de fausser les résultats. Ensemencer en surface, par une strie centrale et longitudinale. Incubation : Incuber à l'étuve à 37°C pendant 1 à 7 jours. Lecture : Observer la culture tous les jours. Les bactéries "citrate positive" bleuissent ce milieu en donnant une culture souvent abondante. Les bactéries "citrate négative" ne donnent ni culture, ni bleuissement du milieu, même après plusieurs jours d'étuve. (+) : positif dans la majorité des cas. Citrate + Citrate - Salmonella Sous espèces 1 (en général) S. arizonae SE II Citrobacter Citrate variable (suivant le type biochimique) S. Paratyphi A S. Typhi Edwardsiella Levinea S. Paratyphi B : (+) S. Typhimurium : (+) S. Enteritidis : (+) Escherichia coli E. coli biotype A.D. Shigella P. rettgeri Providencia K. pneumoniae K. oxytoca Enterobacter aerogenes E. cloacae E. agglomerans (en général) Serratia P. morganii P. mirabilis P. vulgaris K. rhinoscleromatis K. ozaenae Hafnia alvei (utilisation tardive à 22-30°C) Vibrio cholerae Yersinia enterocolitica Yersinia pseudotuberculosis (sauf sérotype 4) Plesiomonas Aeromonas hydrophila X. maltophilia Pasteurella Acinetobacter P. aeruginosa Pseudomonas sp. Vibrio NAG 7- PERFORMANCES / CONTRÔLE QUALITÉ DU TEST • Aspect du milieu prêt à l’emploi : gélose limpide verte. • Aspect du milieu déshydraté : poudre verdâtre. • Les performances culturales du milieu Simmons Citrate sont contrôlées à l’aide des souches suivantes : SOUCHES Salmonella Enteritidis ATCC 13076 Klebsiella pneumoniae ATCC 13883 RÉSULTATS APRES 1 À 7 JOURS À 37°C Positif Positif Proteus vulgaris ATCC 13315 Négatif Escherichia coli ATCC 25922 Négatif 8- CONTRÔLE QUALITÉ DU FABRICANT Tous les produits fabriqués et commercialisés par la société Bio-Rad sont placés sous un système d'assurance qualité de la réception des matières premières jusqu'à la commercialisation des produits finis. Chaque lot de produit fini fait l'objet d'un contrôle de qualité et n'est commercialisé que s'il est conforme aux critères d'acceptation. La documentation relative à la production et au contrôle de chaque lot est conservée par le fabricant. 2 9- LIMITES D'UTILISATION • Il est très important de n'apporter aucun élément nutritif dans le milieu lors de l'ensemencement. Tout apport supplémentaire peut entraîner de faux résultats. • Certaines bactéries "citrate positive" peuvent nécessiter plusieurs jours pour bleuir les milieux. • Il est nécessaire de faire des tests complémentaires pour une identification d'espèce de la souche isolée. • Il est indispensable de procéder à partir de cultures pures et fraîches pour que les résultats puissent être interprétés. 10-RÉFÉRENCES BIBLIOGRAPHIQUES 1.SIMMONS, J.S. 1926. A culture medium for differenciating organisms of typhoid-colon aerogenes groups and for isolation of certain fungi. J. Infect. Dis., 1926, 39 : 209. Bio-Rad 3, boulevard Raymond Poincaré 92430 Marnes-la-Coquette France Tel. : +33 (0) 1 47 95 60 00 Fax : +33 (0) 1 47 41 91 33 07/2003 code: 18011 - A4 3 SIMMONS CITRATE 61834 64834 AGAR / MEDIO PARA LA DIFERENCIACIÓN DE ENTEROBACTERIACEAE 1- USO PREVISTO El agar citrato Simmons (medio de citrato sódico con mineral mínimo) se usa para la diferenciación de los bacilos gramnegativos. Permite la detección de citrato sódico como fuente única de carbono y energía para las bacterias. Este medio contribuye a la demostración de las características de identificación de las Enterobacteriaceae. 2- PRINCIPIO Las bacterias capaces de usar el citrato sódico como fuente exclusiva de carbono pueden crecer en este medio. La fermentación del citrato sódico induce acidificación, produciendo un cambio de color azul del medio en presencia de azul bromotimol (indicador de pH). 3- CÓMO SE SUMINISTRA • Medio listo para usar: - 25 tubes tubos inclinados de 7 ml • Medio deshidratado - frasco de 500 g código 61834 código 64834 4- COMPOSICIÓN TEÓRICA (g/l de agua destilada) El agar citrato Simmons se elabora de acuerdo con la fórmula descrita por Simmons (1). Citrato sódico 1 Cloruro sódico 5 Sulfato magnésico 0,2 Fosfato de amonio dihidrogenado 1 Fosfato dipotásico 1 Azul bromotimol 0,08 Agar 15 Preparación del medio: Homogeneice el polvo contenido en el frasco. Añada 21 gramos de medio deshidratado a un litro de agua destilada estéril. Caliente suavemente, agitando con frecuencia y luego caliente hasta hervir durante 1 minuto. Si es necesario, ajuste el pH a 6.8. Esterilice en el autoclave a 121°C durante 20 minutos. Dispense en tubos o frascos. Enfríe los tubos en una posición inclinada para obtener una pendiente larga sin una masa de agar en el fondo del tubo. 5- CONSERVACIÓN • Medio listo para usar: a +2-8°C en un lugar oscuro. • Medio deshidratado: frasco cerrado herméticamente en un lugar seco a +15-25°C. La fecha de caducidad y el número de lote están indicados en el envasado. 6- INSTRUCCIONES Material: • Material suministrado: Medio citrato Simmons Inoculación: Este medio debe inocularse con un cultivo puro, fresco, de Enterobacteriaceae cultivado en medio agar. Nunca debe usarse un cultivo en caldo o agua peptona, porque estos medios aportarían otros nutrientes que pueden conducir a resultados erróneos. Inocule sobre la superficie, mediante una línea central, longitudinal. Incubación: Incube en el incubador a 37°C durante 1 a 7 días. Lectura: Observe el cultivo diariamente. Las bacterias “citrato positivas” vuelven azul este medio y a menudo muestran un crecimiento abundante. Las bacterias “citrato negativas” no crecen en este medio y no lo vuelven azul, incluso después de varios días de incubación. (+): positivo en la mayoría de los casos. Citrato + Citrato – Salmonella subespecie 1 (en general) S. arizonae BE II Citrobacter Levinea P. rettgeri Providencia K. pneumoniae K. oxytoca Enterobacter aerogenes E. cloacae E. agglomerans (en general) Serratia Vibrio cholerae P. aeruginosa Esp. de Pseudomonas S. paratyphi A S. typhi Edwardsiella Escherichia coli E. coli biotipo A.D. Shigella P. morganii Citrato variable (dependiendo del tipo bioquímico) S. paratyphi B: (+) S. typhimurium: (+) S. enteritidis: (+) P. mirabilis P. vulgaris K. ozaenae K. rhinoscleromatis Hafnia alvei (utilización tardía a 2230°C) Yersinia enterocolitica Yersinia pseudotuberculosis (excepto el serotipo 4) Plesiomonas X. maltophilia Pasteurella Aeromonas hydrophila Vibrio NAG Acinetobacter 7- RENDIMIENTO / CONTROL DE CALIDAD DE LA PRUEBA • Aspecto del medio listo para usar: agar transparente verde • Aspecto del medio deshidratado: polvo verduzco. • Los rendimientos de crecimiento del medio citrato Simmons se verifican con las siguientes cepas: CEPAS Salmonella Enteritidis ATCC 13076 Klebsiella pneumoniae ATCC 13883 Proteus vulgaris ATCC 13315 Escherichia coli ATCC 25922 RESULTADO DEL CULTIVO DESPUÉS DE 1 a 7 DÍAS a 37 °C Positivo Positivo Negativo Negativo 8- CONTROL DE CALIDAD DEL FABRICANTE Todos los reactivos fabricados se elaboran según nuestro sistema de calidad, que va desde la recepción de las materias primas hasta la comercialización final del producto. Cada lote se somete a valoraciones de control de calidad y sale al mercado sólo cuando está de acuerdo con los criterios de aceptación predefinidos. Los registros relativos a la producción y al control de cada lote se conservan en Bio-Rad. 9- LÍMITES DE USO • Es muy importante no añadir ningún otro nutriente al medio durante la inoculación, puesto que cualquier nutriente adicional puede llevar a resultados erróneos. • Determinadas bacterias “citrato-positivas” pueden tardar varios días en volver azul el medio. • Deben realizarse pruebas complementarias para identificar la especie de la cepa aislada. • Deben usarse siempre cultivos puros, frescos, para obtener resultados interpretables. 10- BIBLIOGRAFÍA 1. SIMMONS, J.S. 1926. A culture medium for differenciating organisms of typhoid-colon aerogenes groups and for isolation of certain fungi. J. Infect. Dis., 1926, 39 : 209. SIMMONS CITRATE 61834 64834 AGAR / MEDIUM FÜR DIE DIFFERENZIERUNG VON ENTEROBACTERIACEAE 1- VERWENDUNGSZWECK Simmons-Citrat-Agar (Natriumcitrat-Minimalmineralmedium) wird für die Differenzierung gramnegativer Bazillen verwendet. Es ermöglicht den Nachweis von Natriumcitrat als einziger Kohlenstoff- und Energiequelle für Bakterien. Dieses Medium trägt zur Identifizierung der typischen Merkmale von Enterobacteriaceae bei. 2- PRINZIP Bakterien, die in der Lage sind, Natriumcitrat als einzige Kohlenstoffquelle zu nutzen, können auf diesem Medium wachsen. Die Fermentierung von Natriumcitrat führt zur Säuerung, die das Medium in Anwesenheit von Bromthymolblau (pH-Indikator) blau verfärbt. 3• • DARREICHUNGSFORM Gebrauchsfertiges Medium: - 25 x 7 ml-Schrägröhrchen Dehydriertes Medium - Fläschchen für 500 g Art.-Nr. 61834 Art.-Nr. 64834 4- THEORETISCHE ZUSAMMENSETZUNG (g/l destilliertes Wasser) Simmons-Citrat-Medium wird anhand der von Simmons beschriebenen Formel vorbereitet (1). Natriumcitrat 1 Natriumchlorid 5 Magnesiumsulfat 0,2 Ammoniumdihydrogenphosphat 1 Dikaliumphosphat 1 Bromthymolblau 0,08 Agar 15 Vorbereitung des Mediums: Das in der Flasche enthaltene Pulver homogenisieren. 21 g des dehydrierten Mediums in 1 l steriles destilliertes Wasser geben. Vorsichtig unter häufigem Schwenken erhitzen, anschließend 1 Minute kochen lassen. Falls nötig, den pH-Wert auf 6.8 einstellen. In einem Autoklaven 20 Minuten bei 121°C sterilisieren. In Röhrchen oder Gefäße pipettieren. Die Röhrchen in geneigter Position abkühlen lassen, um eine lange geneigte Oberfläche zu erhalten, ohne dass sich Agarmasse auf dem Röhrchenboden sammelt. LAGERUNG Gebrauchsfertiges Medium: lichtgeschützt bei +2 - 8°C. Dehydriertes Medium: in fest verschlossenen Gefäßen an einem trockenen Ort bei +15 - 25°C. Das Verfallsdatum und die Chargennummer sind auf der Verpackung angegeben. 5• • 6- GEBRAUCHSANWEISUNG Material: • Geliefertes Material: Simmons-Citrat-Medium Beimpfung: Dieses Medium kann mit frischer, auf Agarmedium gewachsener Reinkultur an Enterobacteriaceae beimpft werden. Eine Kultur in Bouillon oder Peptonwasser darf nicht verwendet werden, da diese Medien andere Nährstoffe enthalten und zu falschen Ergebnissen führen können. Durch einen Längsausstrich in der Mitte an der Oberfläche beimpfen. Inkubation: Bei 37°C 1 bis 7 Tage lang im Inkubator inkubieren. Ablesen der Ergebnisse: Die Kultur täglich beobachten. “Citrat-positive” Bakterien verfärben dieses Medium blau und weisen häufig starkes Wachstum auf. “Citrate-negative” Bakterien wachsen auf diesem Medium nicht und verfärben das Medium selbst nach mehreren Tagen der Inkubation nicht. (+): in den meisten Fällen positiv. Citrat + Salmonella Subspezies 1 (im Allg.) S. arizonae BE II Citrobacter Levinea P. rettgeri Providencia K. pneumoniae K. oxytoca Enterobacter aerogenes E. cloacae E. agglomerans (im Allg.) Serratia Vibrio cholerae P. aeruginosa Pseudomonas sp. 7• • • Citrat – S. paratyphi A S. typhi Edwardsiella Escherichia coli E. coli Biotyp A.D. Shigella P. morganii K. rhinoscleromatis Citrat-variabel (je nach biochemischem Typ) S. paratyphi B: (+) S. typhimurium: (+) S. enteritidis: (+) P. mirabilis P. vulgaris K. ozaenae Hafnia alvei (späte Verwendung bei 22-30°C) Yersinia enterocolitica Yersinia pseudotuberculosis (außer Serotyp 4) Plesiomonas X. maltophilia Pasteurella Aeromonas hydrophila Vibrio NAG Acinetobacter LEISTUNG/QUALITÄTSKONTROLLE DES TESTS Erscheinung des gebrauchsfertigen Mediums: hell-grüner Agar. Erscheinung des dehydrierten Mediums: grünliches Pulver. Die Leistungsmerkmale des Wachstums des Simmons-Citrat-Mediums werden mit folgenden Stämmen überprüft: STÄMME Salmonella Enteritidis ATCC 13076 Klebsiella pneumoniae ATCC 13883 Proteus vulgaris ATCC 13315 Escherichia coli ATCC 25922 KULTURERGEBNIS NACH 1 bis 7 TAGEN bei 37°C Positiv Positiv Negativ Negativ 8- QUALITÄTSKONTROLLE DES HERSTELLERS Alle von der Firma Bio-Rad hergestellten Reagenzien unterliegen einem Qualitätssicherungssystem vom Rohstoffeingang bis zur Vermarktung der Fertigprodukte. Jede Fertigproduktcharge wird einer Qualitätskontrolle unterzogen und nur dann verkauft, wenn sie den Freigabekriterien entspricht. Die Unterlagen bezüglich Herstellung und Kontrolle der einzelnen Chargen werden bei Bio-Rad aufbewahrt. 9• • • • GRENZEN DES TESTS Es dürfen dem Medium während der Beimpfung keine weiteren Nährstoffe zugesetzt werden, da andere Nährstoffe zu falschen Ergebnissen führen können. Bei manchen “Citrat-positiven” Bakterien kann es mehrere Tage dauern, bis sich das Medium blau verfärbt. Zur Identifizierung der Spezies des isolierten Stammes müssen zusätzliche Tests durchgeführt werden. Um interpretierbare Ergebnisse zu erhalten, müssen immer frische Reinkulturen verwendet werden. 10- LITERATUR 1. SIMMONS, J.S. 1926. A culture medium for differenciating organisms of typhoid-colon aerogenes groups and for isolation of certain fungi. J. Infect. Dis., 1926, 39 : 209. SIMMONS CITRATE 61834 64834 AGAR / MEZZO PER LA DIFFERENZIAZIONE DI ENTEROBACTERIACEAE 1- USO PREVISTO L’agar Simmons citrato (mezzo minerale minimo di citrato sodico) è usato per la differenziazione di bacilli Gram negativi. Consente l’individuazione di citrato di sodio come unica fonte di carbonio e di energia per i batteri. Questo mezzo contribuisce alla dimostrazione delle caratteristiche di identificazione di Enterobacteriaceae. 2- PRINCIPIO Batteri in grado di utilizzare sodio citrato come unica fonte di carbonio sono in grado di crescere su questo mezzo. La fermentazione di citrato di sodio induce acidificazione, determinando una variazione di colore blu del mezzo in presenza di blu bromotimolo (indicatore di pH). 3• • PRESENTAZIONE Mezzo pronto all’uso: - 25 x 7 ml tubi di coltura a becco di clarino Mezzo disidratato - flacone da 500 g codice 61834 codice 64834 4- COMPOSIZIONE TEORICA (IN G/L DI ACQUA DISTILLATA) L’agar Simmons citrato è preparato secondo la formula descritta da Simmons (1). Citrato di sodio 1 Cloruro di sodio 5 Solfato di magnesio 0,2 Ammonio diidrogenfosfato 1 Dipotassio fosfato 1 Blu di bromotimolo 0,08 Agar 15 Preparazione del mezzo: Omogeneizzare la polvere contenuta nel flacone. Aggiungere 21 grammi di mezzo disidratato per un litro di acqua distillata sterile. Riscaldare leggermente, agitando spesso e riscaldare fino a ebollizione per 1 minuto. Se necessario, regolare il pH a 6.8. Sterilizzare in autoclave a 121°C per 20 minuti. Erogare in tubi o flaconi. Raffreddare i tubi in posizione inclinata per ottenere una lunga pendenza e non una massa di agar sul fondo del tubo. CONSERVAZIONE Mezzo pronto all’uso: at +2-8°C in a dark place. Mezzo disidratato: bottiglia sigillata ermeticamente in un luogo asciutto a +15-25°C. La data di scadenza e il numero di lotto sono indicati sulla confezione. 5- • • 6- ISTRUZIONI Materiale: • Materiale fornito: Mezzo Simmons Citrato Inoculazione: Questo mezzo deve essere inoculato con una coltura nuova e pura di Enterobacteriaceae cresciute su mezzo agar. Non si devono mai usare coltura in brodo o acqua di peptone, poiché questi mezzi fornirebbero altre sostanze nutrienti che possono portare a risultati errati. Inoculare sulla superficie, con uno striscio centrale, longitudinale. Incubazione: Incubare nell’incubatrice a 37°C per 1-7 giorni. Lettura: Osservare quotidianamente la coltura. Batteri “positivi al citrato” danno a questo mezzo una colorazione blu e spesso evidenziano crescita abbondante. Batteri “negativi al citrato” non crescono su questo mezzo e non danno al mezzo una colorazione blu, anche dopo diversi giorni di incubazione. (+): positivo nella maggioranza dei casi Citrato + sottospecie 1 di Salmonella (in generale) S. arizonae BE II Citrobacter Levinea P. rettgeri Providencia K. pneumoniae K. oxytoca Enterobacter aerogenes E. cloacae E. agglomerans (in generale) Serratia Vibrio cholerae P. aeruginosa Pseudomonas sp. 7- • • • Citrato S. paratyphi A S. typhi Edwardsiella Escherichia coli biotipo di E. coli A.D. Shigella P. morganii Citrato-variabile In base alla tipologia biochimica S. paratyphi B: (+) S. typhimurium: (+) S. enteritidis: (+) P. mirabilis P. vulgaris K. ozaenae K. rhinoscleromatis Hafnia alvei (ultimo utilizzo a 22-30°C) Yersinia enterocolitica Yersinia pseudotuberculosis (eccetto serotipo 4) Plesiomonas X. maltophila Pasteurella Aeromonas hydrophila Vibrio NAG Acinetobacter CONTROLLO DI QUALITÀ / PRESTAZIONE DEL TEST Aspetto del mezzo pronto all’uso: agar verde chiaro Aspetto del mezzo disidratato: polvere di colore verdastro. Le prestazioni di crescita del mezzo Simmons Citrato sono verificate sui ceppi seguenti: CEPPI Salmonella Enteritidis ATCC 13076 Klebsiella pneumoniae ATCC 13883 Proteus vulgaris ATCC 13315 Escherichia coli ATCC 25922 RISULTATO DELLA COLTURA DOPO 1 - 7 GIORNI a 37°C Positivo Positivo Negativo Negativo 8- CONTROLLO DI QUALITÀ DEL PRODUTTORE Tutti i reagenti realizzati sono preparati in base al nostro Sistema di Assicurazione di Qualità dal ricevimento delle materie prime, alla commercializzazione finale del prodotto. Ciascun lotto di prodotto finito è sottoposto a un controllo di qualità e viene messo in commercio soltanto se risulta conforme ai criteri di approvazione predefiniti. La documentazione relativa alla produzione e al controllo di ciascun singolo lotto è conservata presso Bio-Rad. 9• • • • LIMITI DI UTILIZZO È molto importante non aggiungere altre sostanze nutrienti al mezzo durante l’inoculazione, poiché eventuali sostanze nutrienti aggiuntive potrebbero portare a risultati errati. Per alcuni batteri “positivi al citrato” potrebbero essere necessari diversi giorni per dare al mezzo una colorazione blu. Allo scopo di identificare le specie del ceppo isolato, dovranno essere eseguiti test complementari. Al fine di ottenere risultati validi per l'interpretazione, utilizzare sempre colture pure e nuove. 10- BIBLIOGRAFIA 1. SIMMONS, J.S. 1926. A culture medium for differenciating organisms of typhoid-colon aerogenes groups and for isolation of certain fungi. J. Infect. Dis., 1926, 39 : 209. SIMMONS CITRATE 61834 64834 GELOSE / MEIO PARA A DIFERENCIAÇÃO DE ENTEROBACTÉRIAS 1- UTILIZAÇÃO PRETENDIDA A gelose de Simmons com citrato (meio mineral mínimo de citrato de sódio) é utilizada para a diferenciação de bacilos Gram negativos. Permite a detecção do citrato de sódio como única fonte de carbono e energia para as bactérias. Este meio contribui para a demonstração das características de identificação das Enterobactérias. 2- PRINCÍPIO As bactérias capazes de utilizarem o citrato de sódio como única fonte de carbono conseguem desenvolver-se neste meio. A fermentação do citrato de sódio induz uma acidificação, dando origem a uma alteração na coloração do meio que se torna azul na presença de azul de bromotimol (indicador de pH). 3• • APRESENTAÇÃO Meio pronto a usar: - 25 tubos inclinados x 7 ml Meio desidratado - frasco de 500 g código 61834 código 64834 4- COMPOSIÇÃO TEÓRICA (g/l de água destilada) A gelose de Simmons com citrato é preparada em conformidade com a fórmula descrita por Simmons (1) Citrato de sódio 1 Cloreto de sódio 5 Sulfato de magnésio 0,2 Dihidrogenofosfato de amónio 1 Fosfato dipotássico 1 Azul de bromotimol 0,08 Gelose 15 Preparação do meio: Homogenize o pó contido no frasco. Adicione 21 gramas de meio desidratado a 1 litro de água destilada estéril. Aqueça suavemente, agitando com frequência, e deixe ferver durante 1 minuto. Caso seja necessário, ajuste o pH a 6.8. Esterilize na autoclave a 121°C durante 20 minutos. Coloque em tubos ou frascos. Arrefeça os tubos numa posição inclinada de forma a obter um grande declive sem uma massa de gelose no fundo do tubo. 5- CONSERVAÇÃO • Meio pronto a usar: a +2-8°C ao abrigo da luz. • Meio desidratado: frasco bem fechado em local seco a +15-25°C. O prazo de validade e o número do lote estão indicados na embalagem. 6- INSTRUÇÕES Material: • Material fornecido: meio de Simmons com Citrato Inoculação: Este meio deve ser inoculado com uma cultura pura e recente de Enterobactérias desenvolvida num meio gelosado. Nunca deverá utilizar-se uma cultura desenvolvida num caldo ou em água peptonada, pois estes meios proporcionariam outros nutrientes que poderiam originar resultados erróneos. Inocule à superfície, através de uma estria central e longitudinal. Incubação: Incube na estufa a 37°C durante 1 a 7 dias. Leitura: Observe a cultura diariamente. Uma bactéria “Citrato-positiva” torna este meio azul e apresenta, frequentemente, um crescimento abundante. Uma bacteria “Citrato-negativa” não cresce neste meio e não torna o meio azul, mesmo após vários dias de incubação. (+): positiva na maioria dos casos. Citrato + Salmonella sub-espécie 1 (em geral) S. arizonae BE II Citrobacter Levinea P. rettgeri Providencia K. pneumoniae K. oxytoca Enterobacter aerogenes E. cloacae E. agglomerans (em geral) Serratia Vibrio cholerae P. aeruginosa Pseudomonas sp. Citrato – S. paratyphi A S. typhi Edwardsiella Escherichia coli E. coli biotipo A.D. Shigella P. morganii K. rhinoscleromatis Citrato-variável (dependendo do tipo bioquímico) S. paratyphi B: (+) S. typhimurium: (+) S. enteritidis: (+) P. mirabilis P. vulgaris K. ozaenae Hafnia alvei (utilização tardia a 2230°C) Yersinia enterocolitica Yersinia pseudotuberculosis (excepto o serotipo 4) Plesiomonas X. maltophilia Pasteurella Aeromonas hydrophila Vibrio NAG Acinetobacter 7- DESEMPENHO/CONTROLO DE QUALIDADE DO ENSAIO • Aspecto do meio pronto a usar: gelose transparente com uma coloração verde. • Aspecto do meio desidratado: pó esverdeado. • As taxas de crescimento do meio de Simmons com Citrato são verificadas com as seguintes estirpes: ESTIRPES Salmonella Enteritidis ATCC 13076 Klebsiella pneumoniae ATCC 13883 Proteus vulgaris ATCC 13315 Escherichia coli ATCC 25922 RESULTADO DA CULTURA APÓS 1 a 7 DIAS a 37°C Positivo Positivo Negativo Negativo 8- CONTROLO DE QUALIDADE DO FABRICANTE Todos os reagentes fabricados são preparados de acordo com o nosso Sistema de Qualidade, desde a recepção das matérias primas até à comercialização final do produto. Cada lote é submetido a avaliações de controlo de qualidade, sendo apenas colocado no mercado se estiver em conformidade com os critérios de aceitação pré-definidas. Os registos relativos à produção e controlo de cada lote são conservados pela Bio-Rad. 9- LIMITES PARA A SUA UTILIZAÇÃO • É muito importante que não adicione quaisquer outros nutrientes ao meio durante a inoculação, pois quaisquer nutrientes adicionais poderão dar origem a resultados erróneos. • Poderão ser necessários vários dias para algumas bactérias “citrato-positivas” alterarem a cor do meio para azul. • Devem realizar-se ensaios complementares para identificar a espécie da estirpe isolada. • Devem usar-se sempre culturas puras e recentes para obtenção de resultados interpretáveis. 10- REFERENCIAS 1. SIMMONS, J.S. 1926. A culture medium for differenciating organisms of typhoid-colon aerogenes groups and for isolation of certain fungi. J. Infect. Dis., 1926, 39 : 209. SIMMONS CITRATE 61834 64834 AGAR / MEDIUM FÖR DIFFERENTIERING AV ENTEROBACTERIACEAE 1- ANVÄNDNINGSOMRÅDE Simmons citratagar (natriumcitrat minimum mineral-medium) används för differentiering av gramnegativa baciller. Mediet möjliggör detektion av natriumcitrat som enda kol- och energikälla för bakterier. Mediet bidrar till påvisande av egenskaper för identifiering av Enterobacteriaceae. 2- PRINCIP Bakterier som kan utnyttja natriumcitrat som enda kolkälla kan växa på detta medium. Jäsning av natriumcitrat framkallar försurning, vilket ger en blå färgförändring av mediet i närvaro av bromtymolblått (pH-indikator). 3• • INNEHÅLL Medium färdigt att använda: - 25 x 7 ml lutande rör Dehydrerat medium - flaska à 500 g kod 61834 kod 64834 4- TEORETISK SAMMANSÄTTNING (i g/l destillerat vatten) Simmons citratagar bereds i enlighet med den formel som beskrivs av Simmons (1) Natriumcitrat 1 Natriumklorid 5 Magnesiumsulfat 0,2 Ammoniumdivätefosfat 1 Dikaliumfosfat 1 Bromtymolblått 0,08 Agar 15 Beredning av mediet: Homogenisera pulvret som finns i flaskan. Tillsätt 21 gram dehydrerat medium till 1 liter sterilt destillerat vatten. Värm försiktigt och skaka ofta. Värm därefter till kokpunkten i 1 minut. Justera pH-värdet till 6.8 om nödvändigt. Sterilisera i autoklav i 121°C i 20 minuter. Fördela i rör eller flaskor. Kyl rören i lutande position så att en lång lutning erhålls utan stor agarmassa i botten av röret. FÖRVARING Medium färdigt att använda: +2–8 °C, mörkt. Dehydrerat medium: tätt försluten flaska på torr plats i +15–25 °C. Utgångsdatum och partinummer står på förpackningen. 5• • 6- INSTRUKTIONER Material: • Material som medföljer: Simmons citratmedium Inokulering: Mediet ska inokuleras med en ren, färsk odling av Enterobacteriaceae som tillväxt på agarmedium. Odling i buljong eller peptonvatten får inte användas, eftersom dessa medier tillhandahåller andra näringsämnen vilket kan leda till felaktiga resultat. Inokulera på utan genom ett längsgående utstryk i mitten. Inkubering: Inkubera i 37 °C i inlubator i 1 till 7 dagar. Avläsning: Iakttag odlingen varje dag. ”Citratpositiva” bakterier gör detta medium blått och visar ofta riklig tillväxt. ”Citratnegativa” bakterier växer inte på detta medium och gör inte mediet blått ens efter flera dagars inkubering. (+): positivt i de flesta fall. Citrat + Salmonella subspecies 1 (i allmänhet) S. arizonae BE II Citrobacter Levinea P. rettgeri Providencia K. pneumoniae K. oxytoca Enterobacter aerogenes E. cloacae E. agglomerans (i allmänhet) Serratia Vibrio cholerae P. aeruginosa Pseudomonas sp. 7• • • Citrat – S. paratyphi A S. typhi Edwardsiella Escherichia coli E. coli biotyp A.D. Shigella P. morganii Citrat-variabla (beroende på den biokemiska typen) S. paratyphi B: (+) S. typhimurium: (+) S. enteritidis: (+) P. mirabilis P. vulgaris K. ozaenae K. rhinoscleromatis Hafnia alvei (sent utnyttjande i 22– 30 °C) Yersinia enterocolitica Yersinia pseudotuberculosis (utom serotyp 4) Plesiomonas X. maltophilia Pasteurella Aeromonas hydrophila Vibrio NAG Acinetobacter TESTRESULTAT/KVALITETSKONTROLL AV TESTET Mediets utseende (färdigt att använda): klar grön agar. Det dehydrerade mediets utseende: grönaktigt pulver. Tillväxtresultatet för Simmons citrat-medium verifieras med följande stammar: STAMMAR Salmonella Enteritidis ATCC 13076 Klebsiella pneumoniae ATCC 13883 Proteus vulgaris ATCC 13315 Escherichia coli ATCC 25922 ODLINGSRESULTAT EFTER 1 till 7 DAGAR i 37 °C Positivt Positivt Negativt Negativt 8- TILLVERKARENS KVALITETSKONTROLL Alla reagenser tillverkas och bereds i enlighet med vårt kvalitetssystem, från mottagandet av råmaterial till den slutliga marknadsföringen av produkten. Varje parti genomgår en kvalitetskontroll och släpps endast ut på marknaden om det överensstämmer med fördefinierade acceptanskriterier. Handlingar som beskriver produktion och kontroll av varje enskilt parti sparas hos Bio-Rad. 9• • • • ANVÄNDNINGENS BEGRÄNSNINGAR Det är mycket viktigt att inga andra näringsämnen tillsätts till mediet under inokulering, eftersom ytterligare näringsämnen kan leda till felaktiga resultat. Det kan ta flera dagar för vissa ”citrat-positiva” bakterier att färga mediet blått. Kompletterande tester måste utföras för att identifiera arterna i den isolerade stammen. Rena, färska odlingar måste alltid användas för att tydbara resultat ska erhållas. 10- REFERENSER 1. SIMMONS, J.S. 1926. A culture medium for differenciating organisms of typhoid-colon aerogenes groups and for isolation of certain fungi. J. Infect. Dis., 1926, 39 : 209. SIMMONS CITRATE 61834 64834 AGAR/MEDIUM TIL DIFFERENTIERING AF ENTEROBACTERIACEAE 1- FORMÅL Simmons-citratagar (natriumcitrat minimum mineralmedium) anvendes til differentiering af Gram-negative bakterier. Agaren muliggør konstatering af natriumcitrat som bakteriers eneste kulstof- og energikilde. Dette medium bidrager til påvisning af de karakteristika, der identificerer Enterobacteriaceae. 2- PRINCIP Bakterier, der er i stand til at anvende natriumcitrat som eneste kulstofkilde, kan gro på dette medium. Gæring af natriumcitrat fremkalder syredannelse, og mediets farve ændres til blå, hvis pH-indikatoren Bromothymol Blue er til stede. 3• • PRODUKTETS INDHOLD Brugsklart medium: - 25 x 7 ml-skrårør Dehydreret medium - flaske med 500 g kode 61834 kode 64834 4- TEORETISK SAMMENSÆTNING (g/l destilleret vand) Simmons-citratagar forberedes ifølge den formel, der er beskrevet af Simmons (1) Natriumcitrat 1 Natriumchlorid 5 Magnesiumsulfat 0,2 Ammoniumdihydrogenfosfat 1 Dikaliumfosfat 1 Bromothymol Blue 0,08 Agar 15 Forberedelse af mediet: Homogeniser pulveret i flasken. Tilsæt 21 gram dehydreret medie til en liter sterilt, destilleret vand. Opvarm forsigtigt til kogepunkter under hyppig omrystning, og kog derefter i 1 minut. Juster pH til 6.8, hvis det er nødvendigt. Steriliser i autoklaven ved 121°C i 20 minutter. Fordel i rør eller flasker. Nedkøl rørene skråtliggende for at opnå en lang hældning uden en masse agar på rørets bund. OPBEVARING Brugsklart medium: ved +2-8°C på et mørkt sted. Dehydreret medium: fuldstændig forseglet flaske på et tørt sted ved +15-25°C. Udløbsdatoen og partinummeret er angivet på emballagen. 5• • 6- BRUGSVEJLEDNING Materialer: • Materialer, der medfølger: Simmons-citratmedium Inokulation: Dette medium skal inokuleres med en ren, frisk kultur af Enterobacteriaceae dyrket på agarmedium. Der må aldrig dyrkes i suppe eller peptonevand, da disse medier tilfører andre næringsstoffer, som kan fremkalde fejlagtige resultater. Inokuler på overfladens midte med en udstrygning i længderetningen. Inkubation: Inkuber i inkubatoren ved 37°C i 1-7 dage. Aflæsning: Hold øje med kulturen dagligt. “Citrat-positive” bakterier farver mediet blåt og viser ofte kraftig vækst. “Citrat-negative” bakterier gror ikke på dette medium og farver ikke mediet blåt, end ikke efter flere dages inkubation. (+): positiv i de fleste tilfælde. Citrat + Salmonella-underarter 1 (generelt) S. arizonae BE II Citrobacter Levinea P. rettgeri Providencia K. pneumoniae K. oxytoca Enterobacter aerogenes E. cloacae E. agglomerans (generelt) Serratia Vibrio cholerae P. aeruginosa Pseudomonas sp. 7• • • Citrat – S. paratyphi A S. typhi Edwardsiella Escherichia coli E. coli biotype A.D. Shigella P. morganii Citratvariabel (afhængig af den biokemiske type) S. paratyphi A (+) S. typhimurium: (+) S. enteritidis: (+) P. mirabilis P. vulgaris K. ozaenae K. rhinoscleromatis Hafnia alvei (sen brug ved 22-30°C) Yersinia enterocolitica Yersinia pseudotuberculosis (undtagen serotype 4) Plesiomonas X. maltophilia Pasteurella Aeromonas hydrophila Vibrio NAG Acinetobacter YDEEVNE/KVALITETSKONTROL AF TESTEN Brugsklart mediums præsentation: klar grøn agar. Dehydreret mediums præsentation: grønligt pulver. Vækstresultaterne for Simmons-citratmedium bekræftes med følgende stammer: STAMMER Salmonella Enteritidis ATCC 13076 Klebsiella pneumoniae ATCC 13883 Proteus vulgaris ATCC 13315 Escherichia coli ATCC 25922 KULTURRESULTAT EFTER 1-7 DAGE ved 37°C Positiv Positiv Negativ Negativ 8- PRODUCENTENS KVALITETSKONTROL Alle producerede reagenser fremstilles ifølge vores kvalitetssikringssystem, lige fra modtagelsen af råmaterialerne til markedsføringen af slutproduktet. Hvert parti af slutproduktet gennemgår kvalitetskontrol og markedsføres kun, hvis det opfylder de foruddefinerede kvalitetskriterier. Dokumentation vedrørende produktion og kontrol af hvert parti opbevares inden for virksomheden. 9• • • • BEGRÆNSNINGER FOR BRUG Det er meget vigtigt ikke at tilsætte andre næringsstoffer til mediet under inokulationen, da ethvert yderligere næringsstof kan fremkalde fejlagtige resultater. For visse “citrat-positive” bakterier kan det tage flere dage at farve mediet blåt. Der skal udføres supplerende test for at kunne identificere den isolerede stammes artsbestemmelser. Der skal altid anvendes rene, friske kulturer for at opnå resultater, der kan fortolkes. 10- REFERENCER 1. SIMMONS, J.S. 1926. A culture medium for differenciating organisms of typhoid-colon aerogenes groups and for isolation of certain fungi. J. Infect. Dis., 1926, 39 : 209. SIMMONS CITRÁT 61834 64834 AGAR / TÁPTALAJ ENTEROBAKTÉRIUMOK DIFFERENCIÁLÁSÁHOZ 1- FELHASZNÁLÁS A Simmons citrátos agart (nátrium-citrátos, minimális mennyiségű ásványi anyagot tartalmazó közeget) Gram-negatív pálcák differenciálásához használjuk. Segítségével kimutathatjuk a nátrium-citrátot, mint a baktérium növekedés egyedüli szén- és energiaforrását. A közeg felhasználható az enterobaktériumok identifikálásában. 2- ALAPELV Az olyan baktériumok, amelyek képesek nátrium-citráton, mint egyedüli szénforráson szaporodni, növekedni tudnak ezen a közegen. A nátrium-citrát fermentatív átalakítása megsavanyítja a közeget, s az brómtimolkék (pH-indikátor) jelenlétében kék színt ölt. 3- KISZERELÉS • Felhasználásra kész közeg: - 25 db 7 ml-es ferdeagaros cső • Portáptalaj: - 500 g-os doboz kódszám 61834 kódszám 64834 4- ELVI ÖSSZETÉTEL (g/l desztillált víz) A Simmons citrátos agar a Simmons által leírt recept szerint készül (1). Nátrium-citrát 1 Nátrium-klorid 5 Magnézium-szulfát 0,2 Ammónium-dihidrogén-foszfát 1 Kálium-hidrogén-foszfát 1 Brómtimolkék 0,08 Agar 15 Végső pH-érték: 7,1 ± 0,2 A táptalaj elkészítése: Keverjük fel a dobozban található port. Adjunk 23 grammnyit a portáptalajból 1 liter steril desztillált vízhez. Óvatosan melegítsük, gyakori rázogatás mellett, majd 1 percig forraljuk. Sterilezzük autoklávban 121°C-on, 15 percig. Öntsük ki csövekbe vagy palackokba. Ferdén döntve hűtsük le a csöveket, hogy egészen a cső fenekéig húzódjon a ferde rész, és magas agar ne is maradjon a cső alján. 5- TÁROLÁS • A felhasználásra kész táptalajt +2-8°C között tároljuk, sötét helyen. • A portáptalajt szorosan lezárt dobozban, száraz helyen, +15-25°C között tároljuk. A szavatossági idő és a gyártási sorozat száma a csomagoláson olvasható. 6- HASZNÁLATI ÚTMUTATÓ Anyag: • A forgalmazó által szállított Simmons citrátos közeg. Leoltás: A közeget agar táptalajon tenyésztett bélbaktériumok tiszta, friss tenyészetével kell beoltani. Sohase használjunk bouillonon vagy pepton levesen szaporított tenyészetet, mivel ezekben más tápanyagok is vannak, amelyek hamis eredményeket okozhatnak. A felületre oltsunk, középen, egy hosszirányú vonással. Inkubálás: Inkubáljunk 37°C-os termosztátban 1 – 7 napig. Leolvasás: Naponta ellenőrizzük a tenyészetet. A „citrát-pozitív” baktériumok kékre színezik a közeget, és gyakran nagymértékben felszaporodnak. A „citrát-negatív” baktériumok nem növekszenek ezen a táptalajon, és nem kékítik meg a közeget, még több napi inkubálás után sem. (+): az esetek többségében pozitív. Citrát + Salmonella 1 alfaj (általában) S. arizonae BE II Citrobacter Levinea P. rettgeri Providencia K. pneumoniae K. oxytoca Enterobacter aerogenes E. cloacae E. agglomerans (általában) Serratia Vibrio cholerae P. aeruginosa Pseudomonas sp. 7• • • Citrát – S. paratyphi A S. typhi Edwardsiella Escherichia coli E. coli A.D. biotípus Shigella P. morganii Változó citrátbontás (a biokémiai típustól függően) S. paratyphi B: (+) S. typhimurium: (+) S. enteritidis: (+) K. rhinoscleromatis P. mirabilis P. vulgaris K. ozaenae Hafnia alvei (kései hasznosítás 2230°C-on) Yersinia enterocolitica Yersinia pseudotuberculosis (kivéve 4-es szerotípus) Plesiomonas X. maltophilia Pasteurella Aeromonas hydrophila Vibrio NAG Acinetobacter MINŐSÉG/A TÁPTALAJ MINŐSÉGÉNEK ELLENŐRZÉSE A felhasználásra kész közeg megjelenés: víztiszta, zöld agar. A portáptalaj megjelenése: zöldes színű por. A Simmons citrátos táptalaj szaporítóképességét az alábbi törzsekkel ellenőrizzük: TÖRZSEK Salmonella Typhimurium ATCC 14028 Salmonella Typhi ATCC 19430 Enterobacter aerogenes ATCC 13048 Proteus vulgaris ATCC 13315 Escherichia coli ATCC 25922 EREDMÉNYEK 1 – 7 napos, 37°C-os TENYÉSZTÉS UTÁN Pozitív Negatív Pozitív Negatív Negatív 8- A GYÁRTÓNÁL FOLYÓ MINŐSÉGELLENŐRZÉS Az összes termékünk a saját minőségellenőrző rendszerünk szerint készült, a nyersanyag átvételétől kezdve a termék forgalmazásáig. Minden egyes gyártási sorozat minőségét ellenőrizzük, és csak akkor hozzuk forgalomba, ha az megfelel az előre felállított kritériumoknak. Minden sorozat gyártási és minőségellenőrzési jegyzőkönyve megtalálható a Bio-Radnál. 9- AZ ALKALMAZÁS KORLÁTAI • Nagyon fontos, hogy a leoltással ne vigyünk be semmilyen más tápanyagot a közegbe, mivel az meghamisíthatja az eredményt. • Egyes „citrát-pozitív” baktériumok esetében több napba is beletelik, amíg a közeg megkékül. • Kiegészítő vizsgálatokat is kell végezni az izolált törzshöz tartozó fajok identifikálásához. • Ha értékelhető eredményeket akarunk kapni, akkor mindig tiszta, friss tenyészetekkel dolgozzunk. 10- HIVATKOZÁSOK 1. SIMMONS, J.S. 1926. A culture medium for differenciating organisms of typhoid-colon aerogenes groups and for isolation of certain fungi. J. Infect. Dis., 1926, 39 : 209.