Validation - Le CHU de Nîmes
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Validation Nom Fonction Date S. Finge Biologiste RAQ 14/11/2012 Vérification : E. Mercier Responsable Qualité 16/11/2012 Validation : T. Lavabre‐ Bertrand Chef de Pôle 19/11/2012 Emission : Visa Seule la version papier est émargée "Toute reproduction et/ou diffusion est soumise à autorisation. Toute copie non authentifiée est exclue du système documentaire" Manuel du préleveur 1. INTRODUCTION 1.1. BUT La qualité du prélèvement de l'échantillon primaire conditionne la qualité du résultat de l'analyse biologique effectuée. Les échantillons biologiques qui sont prélevés, identifiés, transportés ou prétraités de façon inadéquate sont susceptibles de conduire à des résultats erronés, à un diagnostic imprécis, à un traitement inapproprié ou à des risques de contamination. Le manuel du préleveur est un document, élaboré par les laboratoires du pôle Biologies, il regroupe : ● Les informations nécessaires pour aider le préleveur à effectuer un prélèvement de qualité en vue d'obtenir un échantillon biologique conforme. ● Les consignes à respecter pour l'identification, la conservation et l'acheminement des échantillons biologiques vers le laboratoire. Ce manuel permet de respecter les exigences auxquelles sont soumis officiellement : ● Les laboratoires du fait du référentiel GBEA (Guide de Bonne Exécution des Analyses en biologie médicale) et selon la norme d'accréditation ISO 15189. ● Les établissements de santé du fait des référentiels de certification de l'HAS (Haute Autorité en Santé). 1.2. DIFFUSION Ce manuel est accessible, sous format électronique dans les laboratoires et via Clinicom pour les utilisateurs au niveau des services de soins intra-hospitaliers. Le portail du CHU donne accès à une version WEB et à une version PDF (imprimable) pour les utilisateurs externes. 1.3. MISE A JOUR Toute correction, modification ou nouveauté entraînera une mise à jour du manuel en temps réel. Le manuel fait partie de la structure documentaire du pôle Biologies, il sera révisé et mis à jour si nécessaire selon la « procédure annuelle de relecture des documents qualité » avec un changement de version. Des modifications mineures peuvent être enregistrées sans changement de version. 1.4. LEXIQUE Echantillon biologique primaire : Partie du matériel humain, destinée à l'examen, la préparation, l'analyse et/ou le stockage. Souvent cette notion est également désignée par les termes « spécimen », « prélèvement » ou « pièces » Echantillon biologique secondaire : partie issue du pré-traitement de l'échantillon primaire est destinée à l'analyse et/ou stockage DASRI : Déchets d'Activité de Soins à Risques Infectieux © 2013 - CHU de Nîmes - Tous droits réservés | Référent : Dr Sanae FINGE - Tél : 0466683574 | Webmaster : Olivier FRIGOUT - Tél :0466683985 | page 1/40 2. PRESENTATION DES SECTEURS DU POLE BIOLOGIES Numéros utiles Secteurs 04 66 68 suivi de Centre de prélèvements Horaires Fonctionnement Lundi au vendredi 8h-16h 8h-16h Astreinte spécifique Samedi Dimanche jours fériés 18h-8h 12h-8h 8h-8h Oui 8h-18h 8h-12h 18h-8h 12h-8h 8h-8h Oui 8h-18h 8h-12h 18h-8h 12h-8h 8h-18h 8h-12h Consultations de Biologie Tél : 3161 Prélèvements Pr. J.C. Gris Laboratoire Garde Biochimie Tél : 3653 Bip : 3207 de Biochimie Biochimie générale, Hormonologie et Marqueurs tumoraux, Toxicologie Réception des prélèvements: 7426 / 4537 Garde Hématologie Tél : 4076 Consultations Secrétariat (RV consultations): 3211 / 3212 24h/24h Secrétariat : 3207 Pr. S. Lumbroso Laboratoire d'Hématologie Bip : 3211 Hémostase Pr. J.C. Gris Hémato -cellulaire 24h/24h Réception des prélèvements: 7425 Secrétariat résultats: 3211 ou 3212 Tél : 4076 Bip : 3211 Garde Immunologie Immunologie / Allergie Laboratoire de Cytologie Clinique, Cytogénétique, Immunologie, Allergie et AMP Pr. T. Lavabre-Bertrand Réception des prélèvements: 7425 8h-8h 24h/24h Secrétariat Résultats: 3211 ou 3212 Secrétariat (RV consultations): 3109 Cytologie clinique 8h-17h Réception des prélèvements: 4160 Secrétariat (RV consultations): 4160 Cytogénétique 8h-17h Réception des prélèvements: 4160 Secrétariat (RV consultations): 3224 AMP 8h-16h30 Réception des prélèvements: 4160 Laboratoire Garde Microbiologie Tél : 3102 Bactériologie Secrétariat : 3202 de Microbiologie Dr S. Charachon Bip : 4396 Réception des prélèvements: 3102 24h/24h 18h-8h 12h-8h 8h-18h 8h-12h 8h-8h Oui 8h- 17h Virologie / Parasitologie Réception des prélèvements: 3996 Laboratoire Anatomie et Cytologie pathologiques Secrétariat: 3451 et 3197 Réception des prélèvements: 8274 8h-17h Pr P. Roger © 2013 - CHU de Nîmes - Tous droits réservés | Référent : Dr Sanae FINGE - Tél : 0466683574 | Webmaster : Olivier FRIGOUT - Tél :0466683985 | page 2/40 3. LES MISSIONS DU LABORATOIRE Informer les correspondants internes et externes des conditions pré-analytiques nécessaires à la réalisation des prélèvements et des examens biologiques. - Prendre en charge la réalisation des prélèvements pour les patients externes. - Exécuter la prescription médicale, en son absence un formulaire spécifique doit être signé par le patient. - Réaliser les examens avec fiabilité et exactitude. - Valider les résultats. - Les Biologistes : ● peuvent donner, à la demande du patient, des commentaires concernant les résultats, le médecin prescripteur reste le seul interlocuteur pour les interpréter en fonction de la clinique et de la thérapeutique éventuelle. ● informent le médecin prescripteur des résultats pathologiques ou ayant un caractère d'urgence. - Transmettre les résultats aux patients et aux prescripteurs : ● Les résultats des patients hospitalisés sont disponibles dans les meilleurs délais sur le serveur des résultats, excepté les sérologies HIV, les analyses de génétique et d'anatomo-cyto-pathologie. ● Les résultats sont systématiquement transmis au prescripteur externe (sauf demande contraire) par envoi postal mais aussi par Fax sur demande explicite du prescripteur ou du patient et sous condition de vérification de l'identité du receveur. ● Les résultats sont remis au patient externe personnellement ou, à sa demande, à un tiers sous pli cacheté ou transmis par la poste. ● La communication téléphonique des résultats nécessite une vérification d'identité ou l'échange d'un code confidentiel et est interdite pour certaines analyses. ● Les résultats des examens concernant les patients mineurs, ceux demandés par la Médecine du Travail ou des compagnies d'assurances sont soumis à une réglementation précise, respectée par le Laboratoire. Tout ceci par du personnel recruté selon les exigences réglementaires, habilité sur site après formation initiale complétée par une formation continue, le personnel est soumis au secret professionnel. © 2013 - CHU de Nîmes - Tous droits réservés | Référent : Dr Sanae FINGE - Tél : 0466683574 | Webmaster : Olivier FRIGOUT - Tél :0466683985 | page 3/40 4. LA PRESCRIPTION 4.1. LES PRESCRIPTEURS La prescription des analyses, par la personne habilitée à le faire est le point départ de la phase pré-analytique. Les personnes autorisées à prescrire des examens de biologie médicale sont les médecins, les sages-femmes et les biologistes. 4.2. LES SUPPORTS DE PRESCRIPTION 4.2.1. LES CRITERES DE VALIDITE DUNE ORDONNANCE L'ordonnance doit être rédigée par le prescripteur et doit mentionner : ● ● ● ● Le nom, les coordonnées, le numéro RPPS, et la signature du prescripteur. L'identification univoque du patient (nom, prénom, date de naissance). Les examens à réaliser. En fonction des circonstances cliniques, les renseignements cliniques requis. © 2013 - CHU de Nîmes - Tous droits réservés | Référent : Dr Sanae FINGE - Tél : 0466683574 | Webmaster : Olivier FRIGOUT - Tél :0466683985 | page 4/40 4.2.2. LES IMPRIMES HOSPITALIERS DE DEMANDE DANALYSE Les feuilles de demande utilisées dans les unités de soins sont spécifiques à chaque laboratoire exécutant, elles sont identifiées par le nom du laboratoire, une couleur et un code d'enregistrement. Ce sont des supports qui font partie de la structure documentaire et sont soumis à une mise à jour annuelle avec un changement de version. Afin de s'assurer du choix du bon support, il est possible de consulter le guide des analyses à la page de l'analyse souhaitée. Toute demande d'analyse, pour patient hospitalisé, doit être retranscrite sur la feuille de demande du laboratoire destinataire. Les analyses urgentes sont demandées sur la feuille de prescription marquée « URGENT ». Le préleveur doit : - Coller dans le cadre(1) l'étiquette du patient en ayant pris soin de vérifier que les informations de l'étiquette correspondent au patient à prélever (nom, prénom, nom de jeune fille, date de naissance, sexe) et au service prescripteur (code UF, nom du service). - Remplir lisiblement : ● ● ● ● la date et l'heure du prélèvement dans les items prévus en (2) le numéro de téléphone du service demandeur en (3) le nom du préleveur en (4) le nom du prescripteur en (5) - Cocher les analyses souhaitées. - Si l'examen à réaliser n'est pas répertorié sur la feuille de demande, écrire le libellé au niveau de l'encart « Autres ». - En fonction de l'analyse demandée, noter les renseignements cliniques et thérapeutiques. - Noter les éventuels problèmes ou incidents rencontrés lors du prélèvement. Pour les consultations externes hospitalières : - La prescription peut être retranscrite sur une feuille de demande hospitalière comme décrit ci-dessus, dans ce cas, reporter le code de l'UF de consultation en (6). - S'il n'y a pas retranscription, reporter l'identité du préleveur ainsi que la date et l'heure du prélèvement sur l'ordonnance. 4.2.3. DEMANDE D'ANALYSE(S) COMPLEMENTAIRE(S) Le prescripteur peut demander oralement un rajout d'analyse(s) sur un échantillon utilisé pour un examen antérieur. Le laboratoire acceptera ou non la demande en fonction des conditions pré-analytiques et la quantité d'échantillon requises pour l'examen demandé. Les prescripteurs externes sont tenus d'envoyer, dans un deuxième temps, le complément de prescription par courrier ou par fax. © 2013 - CHU de Nîmes - Tous droits réservés | Référent : Dr Sanae FINGE - Tél : 0466683574 | Webmaster : Olivier FRIGOUT - Tél :0466683985 | page 5/40 4.3. LES RENSEIGNEMENTS CLINIQUES Dans certains cas, des renseignements sont indispensables pour le calcul du résultat: ● ● La diurèse si examen sur urines de 24H ou temps calculé La taille et le poids pour la clairance à la créatinine corrigée par rapport à la surface corporelle Selon le cas, des informations peuvent aider à la validation biologique des résultats: ● ● ● Le nom et la posologie de l'anticoagulant pour les analyses d'hémostase. Le nom du médicament, la posologie, la date et l'heure de la dernière prise pour le dosage sérique d'un médicament. Date des dernières règles et traitement hormonal pour les dosages hormonaux. 4.4. LES DOCUMENTS ASSOCIES Pour certains examens, des imprimés (fiche de renseignements, consentement du patient, etc.) à renseigner et à joindre à la demande sont indispensables à la réalisation de l'analyse. Ces imprimés sont imprimables à partir de la page de l'examen au niveau du guide des analyses. Si l'examen souhaité n'est pas répertorié au niveau du guide des analyses, il est indispensable d'appeler le laboratoire avant d'effectuer le prélèvement. L'absence de document associé peut conduire au rejet de la demande. © 2013 - CHU de Nîmes - Tous droits réservés | Référent : Dr Sanae FINGE - Tél : 0466683574 | Webmaster : Olivier FRIGOUT - Tél :0466683985 | page 6/40 5. LES CONDITIONS PRE-ANALYTIQUES PARTICULIERES 5.1. ETAT DE JEUNE 5.1.1. ETRE A JEUN « Etre à jeun » se définit par un délai de 12 heures entre le dernier repas et la prise de sang. En général, pour des prélèvements effectués le matin. Le laboratoire préconise d'être à jeun pour une prise de sang, car L'alimentation apporte elle-même certains éléments dosés. Dans ce cas, il est recommandé de prendre un repas léger et pauvre en matières grasses la veille au soir. 5.1.2. A DISTANCE D'UN REPAS Signifie un jeûne de 3 à 4 heures entre le dernier repas et la prise de sang, après le repas la qualité de l'échantillon sanguin est modifiée (trouble, viscosité), ces modifications peuvent perturber le fonctionnement des appareils d'analyse ou gêner la lecture (recherche de cryoglobuline) et conduire à des résultats erronés. Pour les prélèvements urgents : pas de conditions particulières. Les exigences de jeûne et d'horaire sont détaillées par analyse dans le guide des analyses au niveau du paragraphe « Recommandations ». 5.2. LES HORAIRES DE PRELEVEMENT Le respect de l'heure de prélèvement est primordial car : ● Pour la majeur partie des examens, les valeurs de référence ont été établies à jeun et au lever. Il est donc nécessaire de respecter ces conditions pour pouvoir comparer le résultat obtenu aux valeurs de référence et faire le suivi des résultats si le test est répété dans le temps. ● Certains paramètres varient naturellement en cours de journée (rythme circadien). ● Pour le dosage des médicaments, il est indispensable de respecter un certain délai entre le début du traitement et le moment du prélèvement (lorsque l'atteinte d'un état stable est nécessaire). Il convient également de s'assurer du délai nécessaire entre le prélèvement et la dernière administration du médicament lorsque l'on cherche à déterminer des concentrations à un temps précis (Concentration maximale = pic = quelques minutes après la dernière prise ou Concentration résiduelle = vallée = quelques minutes avant la prise suivante). ● Respect de période de repos pour le dosage de la prolactine. Les exigences de jeûne et d'horaire sont détaillées par analyse dans le guide des analyses au niveau du paragraphe « Recommandations ». 5.3. REGIME ALIMENTAIRE PARTICULIER Certaines analyses exigent un régime alimentaire particulier pendant une période déterminée précédant le prélèvement. Le guide des analyses dans son paragraphe « recommandations » détaille le régime alimentaire à respecter quand cela est nécessaire. © 2013 - CHU de Nîmes - Tous droits réservés | Référent : Dr Sanae FINGE - Tél : 0466683574 | Webmaster : Olivier FRIGOUT - Tél :0466683985 | page 7/40 6. LE PRELEVEMENT 6.1. LES PRELEVEURS AUTORISES Un prélèvement biologique est un acte de soins qui consiste à prélever un échantillon biologique en vue d'examen de biologie ou de diagnostic cytologique et histologique. Le but est de réaliser un prélèvement de qualité dans des conditions d'hygiène et de sécurité pour le patient et le personnel. Parmi le personnel du laboratoire, les préleveurs autorisés sont : INFIRMIERE BIOLOGISTE INTERNE Ponction de moelle osseuse * * Frottis cervico-vaginaux * * Prélèvements urétraux * * Recueil aseptique des urines * Sondage pour prélèvement urinaire * Sang artériel pour gazométrie * Sang veineux et capillaire * Tests dynamiques avec injection * Tests dynamiques sans injection * TECHNICIEN(1) * * * * * Téguments, phanères et muqueuses Facilement accessibles Téguments, phanères et muqueuses Directement accessibles * * * * * * * * Test à la sueur (1) Les techniciens de laboratoire titulaires de certificat de prélèvement sanguin. 6.2. LES PRECAUTIONS DE BASE POUR EFFECTUER UN PRELEVEMENT En se basant sur le principe selon lequel tout échantillon biologique est potentiellement infectieux, il est nécessaire de respecter des précautions de base lors de la manipulation de tout produit biologique (sang, liquides, tissus, etc.) de tous les patients, et de tous les matériels ayant été en contact avec un produit biologique, notamment : ● ● Porter un équipement de protection adapté aux diverses situations (gants, blouse, masque, lunettes, etc.) Se laver les mains avant et après chaque acte technique, les désinfecter ensuite en cas de souillure avec un produit biologique. ● Ne pas recapuchonner les aiguilles. ● Manipuler avec soins les objets coupants et piquants et les déposer immédiatement après usage dans des conteneurs adaptés. © 2013 - CHU de Nîmes - Tous droits réservés | Référent : Dr Sanae FINGE - Tél : 0466683574 | Webmaster : Olivier FRIGOUT - Tél :0466683985 | page 8/40 6.3. IDENTIFICATION DU PATIENT ET RECUEIL DE RENSEIGNEMENTS Avant d'effectuer le prélèvement : - Vérifier l'identité du patient : faire décliner et si possible faire épeler au patient: son nom, son prénom, +/- son nom de naissance, et sa date de naissance. ● ● Préleveur externe : s'assurer de la concordance entre l'identité complète du patient et celle portée sur l'ordonnance. Préleveurs hospitaliers : vérifier la concordance entre l'identité complète du patient, l'identité figurant sur le support de prescription et celle des étiquettes auto-collantes hospitalières. (Dans la mesure ou le patient est dans l'incapacité de décliner son identité se reporter préférentiellement à un bracelet d'identification s'il existe) - Recueillir les renseignements physiopathologiques, thérapeutiques et risque allergique (latex, etc.) - S'assurer du respect des recommandations pré-analytiques requises pour la réalisation de l'analyse demandée (préparation particulière, état de jeûne, régime, etc.) 6.4. LES PRELEVEMENTS SANGUINS 6.4.1. LE MATERIEL UTILISE ● ● ● ● ● ● ● ● Aiguilles. Tubes à prélèvements sous vide. Garrot. Coton. Alcool à 70°. Pansements. Gel pour la désinfection des mains. Boîte récupératrice d'aiguilles, poubelle pour déchets contaminés et poubelle pour déchets non contaminés. 6.4.2. LE SANG ARTERIEL Le recueil de sang artériel pour les gaz du sang est généralement réalisé par ponction de l'artère radiale. 23G (6/10e) Prélèvement artériel avec aiguille Seringue BD Preset™ avec aiguille sécurité BD Eclipse™ et bouchon sécurité type BD Hemogard™ 22G (7/10e) Prélèvement sur ligne artérielle Seringue BD Preset™ sans aiguille avec bouchon sécurité type BD Hemogard™ 6.4.3. LE SANG CAPILLAIRE Le recueil du sang capillaire se fait à l'aide d'une lancette pour analyse immédiate par bandelette (glycémie) ou chez les enfants difficiles à piquer. © 2013 - CHU de Nîmes - Tous droits réservés | Référent : Dr Sanae FINGE - Tél : 0466683574 | Webmaster : Olivier FRIGOUT - Tél :0466683985 | page 9/40 6.4.4. LES PRELEVEMENTS VEINEUX Le sang veineux est obtenu par ponction d'une veine à l'aide de matériel approprié pour analyse ou hémoculture. Ne jamais piquer un bras: ● ● ● ● ● Avec un dispositif de perfusion en cours Avec un dispositif de fistule rénale (hémodialyse) Du côté du sein opéré chez une femme mammectomisée Du côté paralysé chez un hémiplégique Si dermatose Une vigilance particulière sera portée aux personnes sous traitement anticoagulant ou qui souffrent de troubles de la coagulation. LE MATERIEL DE PONCTION Choisir le matériel de ponction en fonction de la qualité de la veine et du type de prélèvement à effectuer. - Le système vacutainer® sous vide est un dispositif qui permet une bonne protection des soignants. Corps de prélèvement Aiguille (taille, couleur) 8/10e 32mm 7/10e 32mm Aiguille Sécurité BD Eclipse™ - Le système à hémoculture Aiguille (taille, couleur) Corps de prélèvement 23G (6/10e) tubulure courte 178mm Unité à prélèvement de sang sécurité BD Safety-Lok™ 21G (8/10e) tubulure courte 178 mm - Les aiguilles épicrâniennes avec adaptateur vacutainer® ou aiguilles de ponction, sont utilisées en pédiatrie et pour les personnes dont le capital veineux est pauvre. Corps de prélèvement Epicrânienne Adaptateur BD Vacutainer™ - Les cathéters courts avec adaptateur Vacutainer™ pour perfusion intraveineuse permet également de prélever du sang veineux (protocole spécifique à respecter) Corps de prélèvement Adaptateur BD Vacutainer™ © 2013 - CHU de Nîmes - Tous droits réservés | Référent : Dr Sanae FINGE - Tél : 0466683574 | Webmaster : Olivier FRIGOUT - Tél :0466683985 | page 10/40 NATURE ET QUANTITE DE TUBES A PRELEVER Choisir les tubes de prélèvement en fonction de la prescription. Les tubes peuvent être sans additif, avec ou sans gel séparateur, pour les analyses sur sérum ; ou avec un anticoagulant pour les analyses sur sang total ou plasma. Le guide des analyses précise pour chaque examen le ou les matériel(s) adapté(s) à l'échantillon et à l'analyse souhaitée. ● ● ● ● Tous les tubes de type vacutainer™ sont sous vide, il ne faut en aucun cas les ouvrir. Le vide permet l'aspiration d'un volume de sang calculé pour respecter le ratio sang / anticoagulant. Chaque tube est identifiable par une couleur de bouchon et une étiquette spécifiques. Comme pour tout matériel stérile, la date de péremption des tubes doit être vérifiée et les tubes périmés doivent être éliminés. Les tableaux qui suivent donnent une indication sur le nombre de tubes nécessaires ainsi que les associations d'examens possibles sur le même échantillon : LABORATOIRE DE BIOCHIMIE Biochimie générale: 1 tube jaune avec gel Hormonologie: 1 tube jaune avec gel 4,5ml (SSTII) pour la majorité des examens 4,5ml (SSTII) pour la majorité des examens Médicaments et toxiques: 1 tube rouge 4,5ml (Sec) pour la majorité des examens LABORATOIRE D'HEMATOLOGIE Hémostase: Bilan standard (TP, TCA, Fibrine) : 1 tube Bilan de thrombophilie : 5 tubes 4,5ml (citrate) 4,5ml (citrate) Hématologie cellulaire: 1 tube violet 4,5ml (EDTA) LABORATOIRE D'IMMUNOLOGIE Allergie: 1 tube jaune avec gel 4,5ml (SSTII) pour 15 allergènes Auto-Immunité: 1 tube jaune avec gel Immuno-Chimie: 1 tube jaune avec gel 4,5ml (SSTII) pour 3 examens 4,5ml (SSTII) pour l'ensemble des examens MICROBIOLOGIE Sérologies infectieuses: 1 tube jaune avec gel 4,5ml (SSTII) pour 5 sérologies © 2013 - CHU de Nîmes - Tous droits réservés | Référent : Dr Sanae FINGE - Tél : 0466683574 | Webmaster : Olivier FRIGOUT - Tél :0466683985 | page 11/40 CHOISIR LE SITE DE PONCTION ET POSER LE GARROT Un prélèvement veineux peut se faire sur tout le réseau veineux superficiel du pli du coude, de l'avant bras et du dos de la main. Le garrot doit être posé à 7,5/10 cm au dessus du point de ponction, le pouls doit demeurer perceptible et le temps de pose du garrot ne doit pas dépasser 1 minute. ● ● Au-delà d'une minute de pose, la stase veineuse provoque une hémoconcentration. Lors de la recherche du site de ponction, si le garrot est posé depuis plus d'1 minute, le desserrer pendant 2 à 3 minutes et le remettre en place. ● Avec les tubes sous vide, dès que le sang afflue dans le tube, le garrot doit être desserré. ● Eliminer le garrot s'il est contaminé lors du prélèvement. © 2013 - CHU de Nîmes - Tous droits réservés | Référent : Dr Sanae FINGE - Tél : 0466683574 | Webmaster : Olivier FRIGOUT - Tél :0466683985 | page 12/40 EFFECTUER LA PONCTION - ORDRE DE PRELEVEMENT DES TUBES ● ● ● ● Mettre des gants non stériles. Désinfecter le site de la ponction et laisser sécher avant de réaliser le prélèvement. Ne jamais palper le site après désinfection. Lors du prélèvement positionner le tube, étiquette vers le bas pour pouvoir visualiser l'arrivée du sang dans le tube. ● ● Si le tube a été introduit dans le corps de prélèvement et percuté avec l'étiquette au-dessus, gênant la visibilité du remplissage du tube, le retirer du corps, le tourner (étiquette en dessous) et le réintroduire.Cette manipulation n'entraîne pas de perte de vide. Ne jamais faire tourner le tube dans le corps de prélèvement lorsqu'il est déjà percuté. Effectuer le prélèvement des tubes selon l'ordre recommandé dans le tableau qui suit et veiller au bon remplissage des tubes Système à ailettes Piqûre avec aiguille (ponction franche) 1. Avec hémoculture Citrate et CTAD (remplissage > 90%)* Sans hémoculture 1. 1. 2. 2. Sec 2. (sans gel et sans additif) Sec Citrate et CTAD (remplissage > 90%) Citrate et CTAD (remplissage > 90%) 3. 3. (tube neutre ou sec) 3. Sec (sans gel et sans additif) Sec (avec gel et sans additif) SSTII (sans gel et sans additif) 4. Hépariné 4. EDTA 5. 6 6. 5. Hépariné 6. EDTA Hépariné Fluoré 7. Autres (ACD, VS, Aprotinine et Sec (avec gel et sans additif) SSTII Sec (avec gel et sans additif) SSTII 5. 4. EDTA 7. Fluoré Thrombine toujours en dernier) 7. Fluoré 8. Autres (ACD, VS, Aprotinine et 8. Autres (ACD, VS, Aprotinine et Thrombine toujours en dernier Thrombine toujours en dernier) Homogénéiser tous les tubes par plusieurs retournements lents, immédiatement après leur retrait du corps de prélèvement * Recommandations pré-analytiques GEHT : En cas de bilan comportant un examen unique d'hémostase, le premier tube peut être conservé, si la ponction veineuse est franche et si le bilan ne comporte que des tests courants de coagulation. Cette recommandation s'applique particulièrement pour la surveillance des traitements par antivitamines K. © 2013 - CHU de Nîmes - Tous droits réservés | Référent : Dr Sanae FINGE - Tél : 0466683574 | Webmaster : Olivier FRIGOUT - Tél :0466683985 | page 13/40 6.5. LES TESTS DYNAMIQUES Contacter le laboratoire de Biochimie 6.6. LES CRYOGLOBULINES ● ● Le Patient doit être au chaud et à jeun. Le matériel de prélèvement spécial (boîte isotherme contenant 3 tubes secs, une aiguille et un corps de pompe dans un sac plastique contenant 3 packs de gel eutectique, le tout maintenu à 37°C) est fourni par le laboratoire à la demande de l'unité de soin. ● Avant 11 H, du lundi au vendredi et en dehors des jours fériés. ● Le temps écoulé entre le départ de la boîte du laboratoire et son retour avec le prélèvement du service ne doit pas dépasser 30 minutes. Toute demande de cryoglobuline ne respectant pas ces modalités sera refusée par le laboratoire, car toute baisse de température peut être responsable de la perte en proportion variable de la cryoglobuline pouvant même aboutir à un résultat faussement négatif. 6.7. LES RECUEILS D'URINES 6.7.1. RECUEIL D'URINES PAR LE PATIENT MICTION 1. Se laver les mains au savon. 2. Faire une toilette intime minutieuse (méat urinaire) avec un antiseptique 3. Ouvrez le pot de recueil stérile: ● Pot à couvercle bleu avec adaptateur pour tubes vacutainers: ● ● ● ● ne pas soulever l'étiquette ne pas toucher la canule intégrée ne pas toucher l'intérieur du couvercle Pot à bouchon rouge (ne pas toucher l'intérieur du couvercle) 4. Uriner le premier jet dans les toilettes. 5. recueillir le 2ème jet d'urine dans le flacon stérile, le refermer immédiatement (volume minimum 10 ml). 6. Apporterle flacon au laboratoire le plus rapidement possible (moins de 2h ), 1 conservation possible 24h entre 2-8°C. © 2013 - CHU de Nîmes - Tous droits réservés | Référent : Dr Sanae FINGE - Tél : 0466683574 | Webmaster : Olivier FRIGOUT - Tél :0466683985 | page 14/40 RECUEIL DES URINES DE 24 HEURES 1. Le matin au lever, uriner aux toilettes (jeter les urines). 2. Noter l'heure. 3. Jusqu'au lendemain matin, même heure, recueillir toutes les urines des 24 heures dans le flacon remis par le laboratoire 4. Pendant la durée du recueil, conserver le flacon entre 2-8°C. 5. A la fin du recueil, apporter le flacon au laboratoire. RECUEIL DES URINES DE LA NUIT 1. Recueillir les urines de 22H à 6H du matin dans le flacon donné par le laboratoire 2. A la fin du recueil, apporter le flacon au laboratoire. 6.7.2. RECUEIL D'URINES PAR LE PERSONNEL SOIGNANT A PARTIR DU FLACON STERILE 1. Homogénéiser les urines 2. Retirer l'étiquette de protection (ne pas la jeter). 3. Insérer le tube (sans additif puis avec additif ) dans l'orifice et le percuter. 4. Le maintenir en position jusqu'à ce que le remplissage s'arrête. 5. Homogénéiser par 8 à 10 retournements. 6. Durée de conservation : 48 heures à température ambiante (sauf pour les gonocoques : 24 heures) A PARTIR DU CONTAINER DE 24H 1. Mesurer le volume total d'urines recueillies sur 24h (noter diurèse). 2. 3. Plonger la canule dans le flacon contenant les urines de 24h. Insérer le tube à urines sans additif (tube de chimie) et le percuter 4. Attendre le remplissage complet du tube et le retirer. 5. Identifier le tube et indiquer le volume total des urines recueillies sur 24h sur la feuille de demande d'analyses. 6. Transmettre le tube au laboratoire, à température ambiante, dans les meilleurs délais (voir le guide des analyses). © 2013 - CHU de Nîmes - Tous droits réservés | Référent : Dr Sanae FINGE - Tél : 0466683574 | Webmaster : Olivier FRIGOUT - Tél :0466683985 | page 15/40 A PARTIR D'UNE POCHE AUTO-COLLANTE 1. Maintenir la poche contenant les urines verticalement et y plonger la canule de transfert. 2. Avec une main, maintenir la canule en place. 3. De l'autre main, introduire à fond le tube dans le corps de la canule. 4. Attendre le remplissage complet du tube. 5. Homogénéiser l'échantillon par 8 à 10 retournements du tube. 6. Identifier le tube et le transmettre au laboratoire dans les meilleurs délais (voir le guide des analyses). PRELEVEMENT D'URINES SUR SONDE 1. Clamper la tubulure (A) 2. Vérifier la quantité d'urine présente dans la tubulure. 3. Désinfecter le site de prélèvement de la sonde (B) selon le protocole recommandé. 4. Percuter le site avec l'aiguille ou avec l'adaptateur (selon la nature du site). 5. Insérer les tubes et les percuter selon l'ordre recommandé ( puis ) 6. Maintenir le tube en position jusqu'à ce que le remplissage soit complet, veiller à remplir le tube jusqu'au repère de remplissage minimum indiqué sur l'étiquette. 7. Homogénéiser les tubes par 8 à 10 retournements. 8. Identifier les échantillons et les transmettre au laboratoire, à température ambiante, dans les meilleurs délais (voir le guide des analyses). © 2013 - CHU de Nîmes - Tous droits réservés | Référent : Dr Sanae FINGE - Tél : 0466683574 | Webmaster : Olivier FRIGOUT - Tél :0466683985 | page 16/40 6.8. EXAMEN PHYSIQUE ET CHIMIQUE DES SELLES Ce chapitre présente les recommandations générales avant prélèvement et les modalités de recueil du prélèvement pour tout examen de selles mais les conditions préanalytiques précises (température de conservation, durée du recueil, quantité de prélèvement, etc.) pour chaque type d'examen de selles doivent être consultées sur le guide des analyses. Les recommandations avant prélèvement ● Eviter la consommation d'oléagineux les 2 jours précédant le recueil et les 3 jours du recueil, ainsi que les laxatifs durant la même période. ● Eviter chez les enfants le recueil sur couches, car la déshydratation entraîne un tableau de fausse constipation : préférer un recueil sur une poche ● Pour le dosage de stéatorrhée (recherche de graisses dans les selles) un régime surchargé en graisses peut être demandé au patient ● Faire des recueils avant une investigation par imagerie ou au moins 1 semaine après. ● Pour une recherche de sang dans les selles, le prélèvement ne doit pas être effectué pendant la période des règles ou si le patient souffre de saignement hémorroïdal ou urinaire. Pendant les 48h précédant le recueil, le patient doit éviter de consommer des substances qui peuvent causer des irritations gastro-intestinales et provoquer un saignement occulte (alcool, aspirine ou certains médicaments) Les modalités de prélèvement et de conservation ● Pour les analyses nécessitant un recueil sur 24h (Clairance alpha1 antitrypsine, Fécalogramme, recherche de laxatifs, Stéatorrhées, Créatorrhées, ionogramme), le recueil de la totalité des selles s'effectue dans un récipient sec (pot à selles d'1 litre) différent pour chacune des journées (si recueil sur 3 jours) et sans contact urinaire. La conservation avant acheminement au laboratoire de biochimie est réalisée à +4°C. ● Pour les analyses nécessitant un simple échantillon (Calprotectine, Elastase, Porphyrines, sang dans les selles) tout en respectant les masses minimales recommandées dans le guide des analyses, un flacon non stérile, propre et sec de 40 mL à bouchon blanc est utilisé. La conservation avant acheminement au laboratoire de biochimie est réalisée à +4°C. Mettre à l'abri de la lumière pour le dosage des porphyrines. 6.9. LES PRELEVEMENTS MICROBIOLOGIQUES 6.9.1. RECOMMANDATIONS GENERALES ● ● ● Prélever avant le début de l'antibiothérapie si possible, sinon prévenir le laboratoire de l'antibiothérapie en cours. Fournir les renseignements cliniques. Préciser au mieux la demande d'examen: demande explicite pour la recherche d'agents infectieux particuliers, nature et localisation précise de l'échantillon. ● Si plusieurs échantillons, numéroter et identifier précisément les échantillons (sur flacons / écouvillons et sur le bon de demande). ● Réalisation du prélèvement: ● Se laver les mains. ● Mettre des gants à usage unique (non stériles ou stérile en fonction du prélèvement). ● Porter un masque à usage unique si risque d'inhalation d'agents pathogènes. © 2013 - CHU de Nîmes - Tous droits réservés | Référent : Dr Sanae FINGE - Tél : 0466683574 | Webmaster : Olivier FRIGOUT - Tél :0466683985 | page 17/40 6.9.2. HEMOCULTURES HEMOCULTURE POUR ADULTE MATERIEL Flacons BD BACTEC: aérobie (bouchon bleu) et anaérobie (bouchon violet) MODE DE PRELEVEMENT Cf. Instruction institutionnelle validée par le CLIN (IHYG028) et le chapitre 6.4.4 Prélèvements veineux du présent manuel. Points importants: ● ● ● ● ● Conditions d'asepsie rigoureuses. Désinfection du bouchon du flacon avant de prélever +++ Remplir d'abord le flacon aérobie PUIS le flacon anaérobie, et éventuellement les autres tubes de sang ensuite. Volume de sang recommandé par flacon: 8-10 ml (min 5 ml). ATTENTION: Une quantité trop faible ou trop importante de sang fausse le résultat. © 2013 - CHU de Nîmes - Tous droits réservés | Référent : Dr Sanae FINGE - Tél : 0466683574 | Webmaster : Olivier FRIGOUT - Tél :0466683985 | page 18/40 HEMOCULTURE POUR ENFANT MATERIEL Flacon BD BACTEC pédiatrique (bouchon argenté) MODE DE PRELEVEMENT Cf. Instruction institutionnelle validée par le CLIN (IHYG028) et le chapitre 6.4.4 Prélèvements veineux du présent manuel. Points importants: ● ● ● ● Conditions d'asepsie rigoureuses Désinfection du bouchon du flacon avant de prélever +++ Volume de sang recommandé par flacon: 1 à 3 ml. ATTENTION: Une quantité trop faible ou trop importante de sang fausse le résultat. HEMOCULTURE POUR RECHERCHE DE MYCOBACTERIES MATERIEL Flacon BD BACTEC mycobactéries (bouchon rouge) MODE DE PRELEVEMENT Cf. Instruction institutionnelle validée par le CLIN (IHYG028) et le chap. 6.4.4 Prélèvements veineux du présent manuel. Points importants : ● ● ● ● Conditions d'asepsie rigoureuses. Désinfection du bouchon du flacon avant de prélever +++. Volume de sang recommandé par flacon: 5 ml. ATTENTION: Une quantité trop faible ou trop importante de sang fausse le résultat. © 2013 - CHU de Nîmes - Tous droits réservés | Référent : Dr Sanae FINGE - Tél : 0466683574 | Webmaster : Olivier FRIGOUT - Tél :0466683985 | page 19/40 6.9.3. RECUEIL DES URINES ECBU Nature du prélèvement et/ou de la demande ECBU Matériel Mode de prélèvement Tube à urine avec additif Cf. chapitre 6.7 Recueils d'urine (bouchon vert) Points importants: - Conditions d'asepsie rigoureuses - De préférence, recueillir les premières urines du matin (ou s'abstenir d'uriner 2-3 heures avant le prélèvement). - Recueil du milieu de jet - Transférer immédiatement du flacon stérile vers le tube à bouchon vert ECBU sur patient sondé Tube à urine avec additif Cf. chapitre 6.7 Recueils d'urine (bouchon vert) Points importants: - Conditions d'asepsie rigoureuses - Signaler sur le bon de demande que le prélèvement est réalisé sur sonde urinaire. ECBU chez le nourrisson (à Tube à urine avec additif Mise en place de la poche auto-collante: partir d'une poche auto-collante) (bouchon vert) - Conditions d'asepsie rigoureuses: Procéder à une toilette soigneuse de la région vulvaire, du méat et du périnée ou du gland et du prépuce (savon doux, lingettes). - Poser le sac collecteur. - Ne pas laisser en place plus de 30 minutes. - Détacher doucement la poche en soulevant un coin, puis en tirant doucement - Recueil des urines: Cf. chapitre 6.7 Recueils d'urine ECBU sur patient appareillé Tube à urine avec additif Prélèvement réalisé par personnel habilité. Points importants: (bouchon vert) Préciser origine de échantillon d'urine: Urine pyélique droite ou gauche, néphrostomie, urétérostomie, etc. Ponction vésicale sus-pubienne Tube à urine avec additif Prélèvement réalisé par personnel habilité. (bouchon vert) URINES 1er JET Nature du prélèvement et/ou de la demande Matériel Mode de prélèvement Urine premier jet pour recherche de: Tube à urine Points importants: Gonocoque (Neisseria gonorrhoeae), Chlamydia trachomatis et/ou mycoplasmes génitaux avec additif Si écoulement urétral, prélever à l'écouvillon au préalable: (bouchon vert) Cf. Chapitre 6.9.9.6 Prélèvement urétral. De préférence, recueillir les premières urines du matin (ou s'abstenir d'uriner 2-3 heures avant le prélèvement). Recueil du premier jet (5-10 ml) © 2013 - CHU de Nîmes - Tous droits réservés | Référent : Dr Sanae FINGE - Tél : 0466683574 | Webmaster : Olivier FRIGOUT - Tél :0466683985 | page 20/40 RECHERCHE DE MYCOBACTERIES MATERIEL Cf. chapitre 6.7 Recueils d'urine du présent manuel MODE DE PRELEVEMENT ● ● Recherche effectuée uniquement si premier ECBU négatif avec leucocyturie > ou égale à 20 000/ml. La recherche s'effectue sur la totalité des urines du matin après restriction hydrique et pendant 3 jours consécutifs. RECHERCHE DE SCHISTOSOMES MATERIEL MODE DE PRELEVEMENT Recherche des œufs de schistosomes (bilharzies) dans les urines de 24h ou de préférence la 1ère miction matinale après un effort physique. 6.9.4. SELLES BACTERIOLOGIE, MYCOLOGIE ET VIROLOGIE Nature du prélèvement et/ou de la demande Coproculture Matériel Pot blanc à bouchon marron Mode de prélèvement La prescription d'une seule coproculture est en général suffisante. ● Analyse bactériologique et/ou mycologique ● Recherche de toxine de Clostridium difficile Fournir au patient un récipient propre où les selles fraîchement émises ne seront pas souillées d'urines, d'eau, où d'autres éléments contaminants (sang des règles, papier hygiénique, etc.) Après avoir enfilé des gants non stériles à usage unique, prélever une aliquote de la selle, du volume d'une noisette à une noix, à l'aide d'un flacon-cuillère ou d'une spatule puis transférer dans un pot blanc à bouchon marron (conteneur hermétique propre à usage unique). La partie muco-purulente ou sanglante doit être privilégiée, en cas de présence. Fermer hermétiquement le pot. Recherche de virus (Rotavirus, Adenovirus) Ecouvillonnage rectal pour examen bactériologique Ecouvillon avec milieu de transport Possibilité de pratiquer un écouvillonnage rectal notamment chez le nourrisson et le petit enfant et en particulier dans le cadre d'un SHU post-diarrhée. © 2013 - CHU de Nîmes - Tous droits réservés | Référent : Dr Sanae FINGE - Tél : 0466683574 | Webmaster : Olivier FRIGOUT - Tél :0466683985 | page 21/40 PARASITOLOGIE Nature du prélèvement et/ou de la demande Parasitologie des selles Matériel Gros pot à bouchon rouge Mode de prélèvement Recueil des selles chez un patient qui n'aura pas subi une coloscopie ou un examen radiologique récent du tube digestif avec usage d'un produit de contraste (transit oeso-gastro-duodénal, lavement baryté) et qui se sera abstenu au moins pendant deux jours de la prise de poudres insolubles (gel d'alumine, charbon, argiles, etc.), de mucilages, de lubrifiants (huile de paraffine), de laxatifs contenant des métaux lourds ou de suppositoires - Fournir au patient un récipient propre où les selles fraichement émises ne seront pas souillées d'urines, d'eau, où d'autres éléments contaminants (sang des règles, papier hygiénique, etc.) - Après avoir enfilé des gants non stériles à usage unique, prélever à l'aide d'une spatule l'équivalent de 4 noix de selles et le placer dans un récipient propre (gros pot à bouchon rouge), stérile, à large ouverture et fermant bien Parasitologie des selles avec recherche d'amibes Gros pot à bouchon rouge Les selles sont de préférence émises et recueillies au laboratoire, sinon elles doivent être acheminées dans l'heure qui suit l'émission Scotch test anal ou test à la cellophane adhésive pour recherche d'œufs d'helminthes Cellophane adhésive Appliquer un morceau de scotch au niveau de la marge anale le matin, avant transparente, lame porte objet défécation et avant toute toilette intime. et boite de transport pour lame porte objet Appliquer le scotch sur une lame porte objet Identifier la boite et la lame avec nom et prénom. 6.9.5. LES SECRETIONS BRONCHO-PULMONAIRES EXPECTORATION HORS RECHERCHE DE MYCOBACTERIES Nature du prélèvement et/ou de la demande Matériel Expectoration pour examen mycologique Flacon stérile à ou examen cyto-bactériologique de bouchon rouge crachat (ECBC) Mode de prélèvement Effectuer de préférence le matin au réveil (sécrétions accumulées dans les bronches au cours de la nuit) et à jeun. Le recueil peut nécessiter l'aide d'un kinésithérapeute (« clapping »). Après brossage des dents et rinçage de bouche à l'eau stérile, au liquide physiologique ou au moyen d'une solution antiseptique (afin de limiter la contamination oro-pharyngée) Indications limitées: Mucoviscidose, dilatation des bronches et éventuellement pneumonies graves Expliquer au patient l'importance de faire un effort de toux après avoir pris plusieurs respirations profondes. Pas d'examen virologique Faire cracher le patient et recueillir l'échantillon en fin de toux dans le flacon stérile. ASPIRATION ENDO-BRONCHIQUE Nature du prélèvement et/ou de la demande Aspiration endo-bronchique pour examen bactériologique ou mycologique Matériel Flacon piège Mode de prélèvement Méthode alternative lorsque les méthodes invasives sont contre-indiquées. Aspiration des sécrétions broncho-pulmonaires par la sonde d'intubation ou de trachéotomie pour les patients de réanimation ou de soins intensifs. © 2013 - CHU de Nîmes - Tous droits réservés | Référent : Dr Sanae FINGE - Tél : 0466683574 | Webmaster : Olivier FRIGOUT - Tél :0466683985 | page 22/40 PRELEVEMENTS PROTEGES Nature du prélèvement et/ou de la demande Prélèvements cathéters Brun Buisson Bronchique (CBB ou combicath) ou mini LBA pour examen bactériologique ou mycologique Matériel Mode de prélèvement Flacon stérile à bouchon Prélèvement réalisé par un médecin habilité de réanimation chez les patients intubés. rouge ou Tube stérile transparent "LCR" + 1ml de sérum physiologique stérile Mini lavage (mini LBA) par instillation d'un volume inférieur à 20 ou 25 ml, souvent à l'aveugle, permettant de recueillir 2 à 3 ml ou extrémité du cathéter bronchique mis dans un tube avec 1ml de sérum physiologique stérile ou Prélèvement distal protégé (brosse) Tube stérile transparent pour examen bactériologique ou "LCR" + 1ml de sérum mycologique physiologique Acheminement urgent au laboratoire +++ Prélèvement réalisé sous fibroscopie par médecin habilité. Produit de brossage bronchique (brosse télescopique protégée de Wimberley ou cathéter) recueilli dans un tube stérile contenant 1 ml de sérum physiologique stérile. Bien boucher le tube et agiter au lit du malade. Acheminement urgent au laboratoire +++ Liquide de lavage Flacon stérile à bouchon bronchiolo-alvéolaire (LBA) pour rouge examen bactériologique, virologique ou mycologique Prélèvement réalisé sous fibroscopie par médecin habilité. Lavage d'un territoire pulmonaire par du sérum physiologique stérile par fractions de 50 ml, jusqu'à 300 ml, permettant de recueillir entre 20 et 60 % de la quantité injectée. Acheminement urgent au laboratoire +++ RECHERCHE DE MYCOBACTERIES, NOCARDIA ET ACTINOMYCES Nature du prélèvement et/ou de la demande ECBC pour recherche de mycobactéries Matériel Flacon stérile à bouchon rouge Mode de prélèvement Répéter le prélèvement (idem ci-dessus) 3 jours de suite le matin, au réveil et à jeun. Récupérer 2 à 3 ml minimum. Tubage gastrique pour recherche Flacon stérile à bouchon de mycobactéries uniquement rouge Effectuer le prélèvement chez un sujet à jeun, maintenu alité depuis la veille et le plus tôt possible après le réveil. Après avoir descendu la sonde dans l'estomac, aspirer à l'aide d'une seringue adaptée environ 5ml de liquide gastrique et recueillir dans un flacon stérile. Répéter le prélèvement (idem ci-dessus) 3 jours de suite. Aspiration bronchique ou Liquide Flacon stérile à bouchon de lavage bronchiolo-alvéolaire rouge (LBA) sous fibroscopie pour recherche de mycobactéries, Nocardia, Actinomyces Prélèvement réalisé sous fibroscopie par médecin habilité. Remarque: la fibroscopie est responsable d'une irritation se manifestant dans les heures suivantes par l'émission de crachats qui peuvent être recueillis pour analyse. © 2013 - CHU de Nîmes - Tous droits réservés | Référent : Dr Sanae FINGE - Tél : 0466683574 | Webmaster : Olivier FRIGOUT - Tél :0466683985 | page 23/40 6.9.6. PRELEVEMENTS CUTANEO-MUQUEUX PRINCIPES DE PRELEVEMENT SUR ECOUVILLON ● ● ● ● Se laver les mains. Mettre des gants (non stériles, à usage unique). Sortir l'écouvillon stérile de son emballage en le saisissant par le bouchon à l'extrémité de la tige sans la toucher. En cas de lésion sèche, humecter l'écouvillon d'un peu de sérum physiologique stérile en dosette unitaire (1 à 2 gouttes). ● Prélever d'une main « ferme » en faisant tourner l'écouvillon pour charger toute la surface. ● Utilisation d'un écouvillon avec milieu de transport liquide (tube bouchon violet): casser l'extrémité de l'écouvillon dans le tube contenant le milieu liquide (cf schéma ci-dessous) et étiqueter soigneusement. ● Si utilisation d'un écouvillon sec (sans milieu de transport), replacer l'écouvillon dans son étui d'origine et acheminement urgent au laboratoire ++ (moins de 2h) : à éviter en bactériologie. Ecouvillon avec milieu de transport liquide Ecouvillon sans milieu de transport © 2013 - CHU de Nîmes - Tous droits réservés | Référent : Dr Sanae FINGE - Tél : 0466683574 | Webmaster : Olivier FRIGOUT - Tél :0466683985 | page 24/40 PRELEVEMENTS ORL: BOUCHE / GORGE Nature du prélèvement et/ou de la demande Prélèvement buccal pour examen mycologique Matériel Ecouvillon avec milieu de transport Mode de prélèvement Prélever au niveau de la face interne des lèvres et des joues, du frein de la langue, du palais, des faces externes et internes des gencives (au niveau des collets) et de la langue. Pas d'examen bactériologique ++ En cas d'hypertrophie de la muqueuse linguale, un grattage préalable au moyen d'un abaisse-langue permet une abrasion des dépôts saburraux et des villosités, donc une meilleure pénétration de l'écouvillon passé ensuite dans les cryptes. Prélèvement buccal pour examen virologique Ecouvillon sec Prélèvement de gorge pour examen Ecouvillon avec milieu de bactériologique transport Prélever à la périphérie des lésions érosives. Si présence de vésicules, presser avec l'écouvillon pour recueillir les sérosités. Si besoin, s'aider d'un abaisse-langue. Demander au patient de dire "Aaaaaa". Prélever sur les amygdales au niveau des zones inflammatoires ou nécrotiques. Eviter de toucher la langue ou la luette. © 2013 - CHU de Nîmes - Tous droits réservés | Référent : Dr Sanae FINGE - Tél : 0466683574 | Webmaster : Olivier FRIGOUT - Tél :0466683985 | page 25/40 PRELEVEMENTS ORL: NEZ / SINUS Nature du prélèvement et/ou de la demande Prélèvement nasal pour recherche de portage bactérien (S.aureus) Matériel Ecouvillon avec milieu de transport Mode de prélèvement Frotter l'écouvillon au niveau de la partie antérieure des deux fosses nasales. Utiliser un seul écouvillon. Ecouvillon pour recherche de virus Prélèvement avec écouvillon (plutôt chez adulte): Patient assis. Introduire doucement l'écouvillon horizontalement (de avant vers arrière) dans une narine, en le faisant tourner sur lui-même, sur quelques centimètres pour atteindre la paroi post du pharynx. Prélèvement naso-pharyngé pour recherche de VRS, PCR grippe ou coqueluche Dose de sérum physiologique Injecter quelques ml de serum physiologique par une narine, puis immédiatement stérile Flacon stérile à bouchon recueillir les sécrétions pharyngées dans le flacon stérile en demandant au patient de rouge ou flacon piège pour se moucher en tenant le flacon sous son nez. aspiration Utilisation possible d'un flacon piège pour aspiration des sécrétions naso-pharyngées avec une seringue (pratique chez le petit enfant) ou Prélèvement de pus de sinus Ecouvillon avec milieu de transport ou flacon piège pour aspiration ou Flacon stérile bouchon rouge Prélèvement réalisé par médecin habilité © 2013 - CHU de Nîmes - Tous droits réservés | Référent : Dr Sanae FINGE - Tél : 0466683574 | Webmaster : Olivier FRIGOUT - Tél :0466683985 | page 26/40 PRELEVEMENTS ORL: OREILLE Nature du prélèvement et/ou de la demande Prélèvement auriculaire pour examen bactériologique ou mycologique Matériel Ecouvillon avec milieu de transport Mode de prélèvement Introduire l'écouvillon dans le conduit auditif externe et le faire tourner plusieurs fois. Prélever au niveau des lésions si visibles. Prélèvement de pus de paracentèse Ecouvillon avec milieu de transport ou Flacon stérile bouchon rouge Prélèvement réalisé par médecin habilité ou © 2013 - CHU de Nîmes - Tous droits réservés | Référent : Dr Sanae FINGE - Tél : 0466683574 | Webmaster : Olivier FRIGOUT - Tél :0466683985 | page 27/40 PRELEVEMENTS OCULAIRES Nature du prélèvement et/ou de la demande Matériel Mode de prélèvement Prélèvement conjonctival pour examen Ecouvillon avec milieu de bactériologique ou mycologique transport Prélever les sécrétions ou le pus par frottis conjonctival et dans angle interne de œil sans toucher la peau Prélèvement conjonctival pour examen Ecouvillon sec virologique Prélever les sécrétions lacrymales dans l'angle interne de l'œil. Prélèvement conjonctival pour recherche de Chlamydiae Ecouvillon spécifique avec Grattage conjonctival des paupières supérieure et inférieure après retournement. milieu de transport Chlamydiae (à demander au laboratoire) Remarque: il est important de récupérer des cellules. Ouvrir le tube contenant le milieu de transport liquide, y plonger l'écouvillon puis le casser en appuyant la tige sur le bord du tube (écouvillon sécable) Bien reboucher le tube avec le fragment de l'écouvillon à l'intérieur. Recherche d'acanthamibes : Ecouvillon sec ou pot stérile Grattage cornéen déposé sur écouvillon sec, - Prélèvement de cornée, Lentilles de contact envoyées dans un pot stérile, - Liquide de lentilles, Boîtiers et solutions d'entretien utilisés pour les lentilles de contact. - Lentilles Prélèvement de cornée Ponction de chambre antérieure ou vitré, humeur aqueuse ou Ecouvillon sec ou pot stérile rélèvement réalisé par médecin habilité. Acheminement urgent au laboratoire +++ ou © 2013 - CHU de Nîmes - Tous droits réservés | Référent : Dr Sanae FINGE - Tél : 0466683574 | Webmaster : Olivier FRIGOUT - Tél :0466683985 | page 28/40 BACTERIOLOGIE / VIROLOGIE: PRELEVEMENTS CUTANES Nature du prélèvement et/ou de la demande Matériel Mode de prélèvement Prélèvement de lésion cutanée superficielle (furoncle, impétigo, folliculite, etc.) pour examen bactériologique Ecouvillon avec milieu de transport Prélever avec un écouvillon (+/- imbibé avec une goutte de sérum physiologique stérile si la lésion est sèche) en frottant au niveau de la lésion. Prélèvement de plaie, ulcère, suppuration cutanée pour examen bactériologique Ecouvillon avec milieu de transport ou Flacon stérile Prélèvement réalisé par personnel habilité - Ne prélever qu'en présence de signes locaux d'inflammation +++ - Eviter si possible de prélever à l'écouvillon. Contre-indication formelle pour la recherche de mycobactéries. - Antisepsie sur la zone cutanée proximale de la lésion. Rincer au sérum physiologique stérile. ou - Plaie du site opératoire (cicatrice): prélever l'écoulement de la cicatrice de préférence par aspiration à la seringue, puis transférer dans flacon stérile ou, si écoulement spontané, prélever avec un écouvillon préalablement imbibé de sérum physiologique - Morsure: Aspirer le liquide présent dans la blessure avec une seringue, puis transférer dans flacon stérile. A défaut, pratiquer un écouvillonnage profond. - Ulcère, lésions nécrotiques: Biopsie ou ponction à l'aiguille montée sur seringue, puis transfert dans flacon stérile. L'écouvillonnage simple des escarres est proscrit (reflet de la colonisation bactérienne!) Prélèvement de pied diabétique pour examen bactériologique Ecouvillon avec milieu de transport ou Flacon stérile Prélèvement réalisé par un médecin habilité en suivant les recommandations du GP30 Références: Recommandations Le Pied Diabétique Infecté: Les prélèvements ou Prélèvement cutané pour examen virologique Ecouvillon sec Prélever à la périphérie des lésions érosives. Si présence de vésicules, presser avec l'écouvillon pour recueillir les sérosités. © 2013 - CHU de Nîmes - Tous droits réservés | Référent : Dr Sanae FINGE - Tél : 0466683574 | Webmaster : Olivier FRIGOUT - Tél :0466683985 | page 29/40 6.9.7. LES PRELEVEMENTS POUR MYCOLOGIE / PARASITOLOGIE MYCOLOGIE: PRELEVEMENTS DE PEAU Nature du prélèvement et/ou de la demande Matériel Mode de prélèvement Prélèvement de peau Matériel chirurgical particulier stérile Prélèvement réalisé par médecin habilité. pour examen mycologique et en bon état: curette de Brocq fenêtrée, scalpel mousse ou vaccinostyle, ciseaux fins, pince à En cas de lésions multiples, les échantillons biologiques d'origines différentes doivent être nettement individualisés. épiler, etc. Flacon stérile à bouchon rouge - Prélever au minimum une vingtaine de squames (ou plus si possible), au-dessus du flacon, avec un scalpel mousse ou une curette, sur toute la surface d'une lésion dyschromique (notamment au niveau des éventuelles zones fluorescentes sous lampe de Wood), en périphérie d'un intertrigo humide, sur le relief érythémato-vésiculo-squameux en périphérie d'une lésion circinée (le centre est en voie de guérison), sur les faces latérales macérées des orteils, etc. - Prélever au moins une quinzaine de poils cassés courts, prélevés à la pince à épiler, au besoin en pinçant les squames qui les engluent. - Pour ces types de prélèvements, l'utilisation du seul écouvillon (préalablement humecté de quelques gouttes de sérum physiologique stérile) doit rester exceptionnelle (otite externe, blépharite, lésions pustuleuses ou très suintantes,...) et toujours venir en complément du recueil de squames (fond du pli Ecouvillon avec milieu de transport des intertrigos humides et suintants) et de poils (gouttelette de pus qui sourd par l'ostium après prélèvement). L'écouvillon ne doit en aucun cas être utilisé seul pour les lésions sèches. MYCOLOGIE: PRELEVEMENTS D'ONGLES Nature du prélèvement et/ou de la demande Prélèvement d'ongles pour examen mycologique Matériel Mode de prélèvement Matériel chirurgical particulier stérile Prélèvement réalisé par médecin habilité. et en bon état: curette de Brocq fenêtrée, scalpel mousse ou vaccinostyle, ciseaux fins, pince à Le préleveur ne doit en aucune manière « compter son temps », brusquer le patient, ni rendre le prélèvement inutilement douloureux. épiler, etc. Flacon stérile à bouchon rouge En cas de lésions cutanées associées (fréquemment, un intertrigo inter-digitoplantaire), les échantillons biologiques doivent être nettement individualisés, en terminant par le prélèvement unguéal. Prélever un maximum de fragments d'ongle et de matière sous-unguéale, recueillis dans un flacon à l'aide d'une curette et/ou d'un scalpel au niveau d'une lésion proximale de candidose, jusqu'à la limite de décollement de la tablette en cas de dermatophytose sous-unguéale latéro-distale, par grattage des zones superficielles de leuconychie ou sous le repli proximal en cas de paronychie Ecouvillon avec milieu de transport Il convient d'insister sur le fait que, pour ces types de prélèvements, l'écouvillon ne doit en aucun cas être utilisé seul mais doit toujours venir, préalablement humecté de liquide physiologique, en complément du recueil de fragments d'ongle et de matière sous-unguéale (pus d'un péri-onyxis, …) © 2013 - CHU de Nîmes - Tous droits réservés | Référent : Dr Sanae FINGE - Tél : 0466683574 | Webmaster : Olivier FRIGOUT - Tél :0466683985 | page 30/40 MYCOLOGIE: PRELEVEMENTS DE CHEVEUX Nature du prélèvement et/ou de la demande Prélèvement de cheveux, cuir chevelu pour examen mycologique Matériel Mode de prélèvement Matériel chirurgical particulier stérile Prélèvement réalisé par médecin habilité. et en bon état: curette de Brocq fenêtrée, scalpel mousse ou vaccinostyle, ciseaux fins, pince à épiler, etc. Flacon stérile à bouchon rouge - Prélever avec un scalpel mousse un maximum de squames au-dessus d'un flacon sur toute la surface des zones squameuses lors d'une suspicion de pityriasis capitis, au moins une quinzaine de cheveux courts prélevés à la pince à épiler sur les plaques d'alopécie ou les placards inflammatoires, au besoin en pinçant les squames qui les engluent (teigne trichophytique), le contenu des godets, exprimé à la curette, en cas d'éventuel favus. - Pour ces types de prélèvements, l'utilisation de l'écouvillon (préalablement humecté de quelques gouttes de liquide physiologique stérile) ne se justifie que pour humidifier et Ecouvillon avec milieu de transport décoller préalablement les croûtes recouvrant les plaques d'une teigne trichophytique et pour recueillir, après prélèvement à la pince à épiler, les squames restées collées sur le cuir chevelu ou la gouttelette de pus qui sourd par l'ostium des cheveux prélevés ; l'écouvillon ne doit en aucun cas être utilisé seul. PARASITOLOGIE: SCOTCH-TEST Nature du prélèvement et/ou de la demande Scotch test cutané pour le diagnostic de pityriasis versicolor Matériel Mode de prélèvement Cellophane adhésive transparente, Appliquer un morceau de scotch au niveau de la lésion cutanée. Lame porte objet et boite de transport pour lame porte objet Appliquer le scotch sur une lame porte objet Identifier la lame et la boite avec nom et prénom. 6.9.8. RECHERCHE DE PORTAGE DE BACTERIES MULTIRESISTANTES (BMR) Nature du prélèvement et/ou de la demande Prélèvement nasal pour recherche de portage de SARM (S.aureus résistant à méticilline) Matériel Ecouvillon avec milieu de transport Mode de prélèvement Frotter l'écouvillon au niveau de la partie antérieure des deux fosses nasales. Utiliser un seul écouvillon Prélèvement ano-rectal pour recherche de portage de bactéries entériques multirésistantes (Entérobactéries BMR, Entérocoque résistant à la vancomycine (ERV), Acinetobacter totorésistant...) Ecouvillon avec milieu de transport Insérer l'écouvillon au niveau de l'anus. © 2013 - CHU de Nîmes - Tous droits réservés | Référent : Dr Sanae FINGE - Tél : 0466683574 | Webmaster : Olivier FRIGOUT - Tél :0466683985 | page 31/40 6.9.9. PRELEVEMENTS GENITAUX PRELEVEMENT GENITAL EXTERNE Nature du prélèvement Matériel Mode de prélèvement et/ou de la demande Prélèvement génital externe (vulve, grandes Ecouvillon avec milieu de lèvres, petites lèvres chez la femme; gland, transport sillon balano-préputial chez l'homme) Lésion érosive : Prélever avec un écouvillon (+/- imbibé avec une goutte de sérum physiologique stérile si la lésion est sèche) en frottant au niveau de la lésion. Utiliser un écouvillon avec milieu de transport pour examen mycologique +/- bactériologique (Staphylococcus aureus, Streptococcus pyogenes) (hors chancre) Prélèvement au niveau d'un chancre (suspicion de Syphilis ou chancre mou) Scalpel mousse ou vaccinostyle Prendre contact avec le laboratoire: prélèvement à analyser en extemporané+++ Lame de verre/lamelle Gratter avec un vaccinostyle après avoir éliminé les tissus nécrosés. Prélever à la périphérie du chancre les sérosités qui apparaissent après grattage pour examen au microscope à fond noir pour le diagnostic de la Syphilis ou mise en culture pour le diagnostic de H.ducreyi Prélèvement génital externe pour examen virologique Ecouvillon sec Prélever à la périphérie des lésions érosives. Si présence de vésicules, presser avec l'écouvillon pour recueillir les sérosités. PRELEVEMENT VAGINAL Nature du prélèvement et/ou de la demande Prélèvement vaginal Matériel Ecouvillon avec milieu de transport +/- Spéculum Mode de prélèvement Prélèvement réalisé par médecin ou sage-femme habilités Recommandations pour la patiente: S'abstenir de toilette ou de rapport sexuel dans les 24h précédentes. Eviter la période des règles. Prélever sous spéculum, sans lubrifiant. Noter l'aspect des leucorrhées. Mise en place du spéculum: Choisir la taille du spéculum en fonction de l'âge, de la parité de la patiente (ex: 25x90 chez la femme nullipare ou femme âgée, 35x90 chez la multipare). Maintenir les petites lèvres écartées avec deux doigts de la main gauche. Introduire le spéculum en appuyant sur la fourchette, pour éviter la zone sous-urétrale sensible et le clitoris, parallèlement à l'axe de la vulve en tournant de 90° tout en l'enfonçant pour le ramener dans le plan de la cavité vaginale. Après introduction sur 5-6cm, l'ouverture légère du spéculum permet le contrôle visuel de sa progression vers le sacrum selon un axe de 45° par rapport au plan de la table d'examen. Dès visualisation du col, écarter avec la vis les deux valves qui se placent l'une dans le cul-de-sac ant, l'autre dans le cul-de-sac post. Lorsque le spéculum est bien en place, le col correctement exposé, bien éclairer pour réaliser le(s) prélèvement(s). Prélever avec écouvillon au niveau de lésions visibles ou recueillir les sécrétions anormales en chargeant bien l'écouvillon. Prélèvement sans spéculum : introduire l'écouvillon dans la première partie du vagin et faire tourner l'écouvillon sur lui-même pour recueillir un maximum de sécrétions. © 2013 - CHU de Nîmes - Tous droits réservés | Référent : Dr Sanae FINGE - Tél : 0466683574 | Webmaster : Olivier FRIGOUT - Tél :0466683985 | page 32/40 DEPISTAGE PERINATAL DU STREPTOCOQUE B PAR PCR Dépistage vaginal/rectal du streptocoque groupe B par PCR Double écouvillon avec milieu de transport (à demander au laboratoire) Prélèvement sans spéculum : 1. Retirez du sachet les deux cotons-tiges comportant une marque. 2. Introduisez délicatement les deux cotons-tiges dans le vagin de la patiente. Prélevez les sécrétions au niveau de la muqueuse du tiers inférieur du vagin. Faites pivoter les cotons-tiges trois fois pour garantir un échantillon uniforme sur les deux cotons-tiges. 3. Optionnel : Introduisez délicatement les deux mêmes cotons-tiges dans le sphincter anal, à une profondeur d'environ 2,5 cm, puis faites-les pivoter doucement pour prélever les sécrétions des cryptes anales. Remarque : Le prélèvement dans la partie inférieure du vagin et du rectum produit de meilleurs résultats par rapport à l'échantillonnage du col de l'utérus ou du vagin sans prélèvement du rectum. 4. Placez les deux cotons-tiges dans le récipient de transport. Acheminer en urgence à T° ambiante AUTO PRELEVEMENT VAGINAL Nature du prélèvement Matériel Mode de prélèvement et/ou de la demande Auto-prélèvement vaginal Ecouvillon avec milieu de transport Prélèvement réalisée par la patiente, après lui avoir remis la note explicative. Introduire l'écouvillon dans le vagin en écartant les grandes lèvres, l'enfoncer de quelques centimètres, puis le retirer et remettre l'écouvillon dans le tube contenant le milieu de transport. © 2013 - CHU de Nîmes - Tous droits réservés | Référent : Dr Sanae FINGE - Tél : 0466683574 | Webmaster : Olivier FRIGOUT - Tél :0466683985 | page 33/40 PRELEVEMENT D'ENDOCOL Nature du prélèvement et/ou de la demande Prélèvement endocervical pour examen bactériologique + recherche de Chlamydia trachomatis +/- mycoplasmes génitaux Matériel Mode de prélèvement Ecouvillon avec milieu de transport Prélèvement réalisé par médecin ou sage-femme habilités Préciser le site de prélèvement (endocol) sur le bon de demande Mettre en place le spéculum (Cf. ci-dessus). Nettoyage soigneux de l'exocol avec pince longue et compresse imbibée d'antiseptique. Laisser agir 1 minute, puis recommencer l'opération une 2ème fois. Rincer avec une compresse imbibée de sérum physiologique. Ecouvillon spécifique avec milieu de transport Chlamydiae (à demander au laboratoire) Introduire l'écouvillon jusque dans la cavité fusiforme de l'endocol et, par un frottement léger, ramener de la glaire cervicale et des cellules endocervicales. Faire un écouvillon (+ milieu de transport bouchon violet) pour la recherche des bactéries, un 2ème écouvillon (+ milieu de transport spécifique bouchon rouge) pour la recherche de Chlamydia trachomatis+/- recherche de mycoplasmes génitaux. GLANDE DE BARTOLIN Nature du prélèvement et/ou de la demande Prélèvement à l'orifice de la glande de Bartholin Matériel Ecouvillon avec milieu de transport Mode de prélèvement Prélèvement réalisé par médecin habilité Désinfecter la région péri-orificielle, puis recueillir le pus avec l'écouvillon après une pression douce sur la glande PRELEVEMENT URETRAL Nature du prélèvement et/ou de la demande Matériel Prélèvement urétral pour recherche Ecouvillon fin de Gonocoque (Neisseria gonorrhoeae) + utiliser tube avec milieu de transport pour bactérie Mode de prélèvement Prélèvement réalisé par médecin habilité Si une goutte de pus s'écoule au niveau du méat, la recueillir sur un écouvillon. Sinon, prélever au niveau du canal urétral en introduisant l'écouvillon sur environ + Ecouvillon spécifique avec 1 cm, puis tourner délicatement. milieu de transport Chlamydiae (à demander au laboratoire) Faire un écouvillon pour la recherche des bactéries, un 2ème écouvillon (spécifique en dacron) pour la recherche de Chlamydia trachomatis. Recherche de Chlamydia trachomatis Ouvrir le tube contenant le milieu de transport liquide pour Chlamydiae, y plonger l'écouvillon puis le casser en appuyant la tige sur le bord du tube (écouvillon sécable) Bien reboucher le tube avec le fragment de l'écouvillon à l'intérieur. Ce prélèvement peut-être associé (ou remplacé) à un prélèvement de premier jet urinaire. © 2013 - CHU de Nîmes - Tous droits réservés | Référent : Dr Sanae FINGE - Tél : 0466683574 | Webmaster : Olivier FRIGOUT - Tél :0466683985 | page 34/40 PRELEVEMENT DE SPERME Nature du prélèvement et/ou de la demande Prélèvement de sperme pour spermoculture Matériel Mode de prélèvement Flacon stérile à bouchon rouge Prélèvement réalisé par le patient après 2 ou 3 jours d'abstinence. Boire abondamment (1,5 L) la veille. Recueil du sperme : - Uriner avant le recueil. - Se laver les mains, puis désinfecter soigneusement le gland, le méat, le sillon balano-préputial et le prépuce au savon antiseptique ; puis rincer avec du sérum physiologique stérile. - Effectuer le recueil par masturbation dans le flacon stérile fourni : recueil de la totalité de l'éjaculat. - Attention ! le recueil doit être le plus aseptique possible : Eviter de toucher l'intérieur du flacon, le coït interrompu est à proscrire. - Bien refermer le flacon après le recueil. - Le prélèvement doit être transmis au laboratoire rapidement (1h au maximum) à température ambiante. 6.9.10. PUS PROFOND, ABCES, COLLECTION FERMEE, LIQUIDES DE PONCTION PRINCIPES DE PRELEVEMENT ● ● ● ● ● Prélèvement réalisé par médecin habilité Prélever avant début de antibiothérapie si possible, sinon prévenir le laboratoire de antibiothérapie en cours. Avant ponction, antisepsie de type chirurgical. Fermer hermétiquement les flacons pour le transport au laboratoire. Acheminement urgent au laboratoire +++ © 2013 - CHU de Nîmes - Tous droits réservés | Référent : Dr Sanae FINGE - Tél : 0466683574 | Webmaster : Olivier FRIGOUT - Tél :0466683985 | page 35/40 PARTICULARITES EN FONCTION DE LA LOCALISATION Nature du prélèvement et/ou de la demande Prélèvement pour examen bactériologique avec recherche de bactéries anaérobies, ou examen mycologique Matériel Flacon stérile Mode de prélèvement Avant ponction d'un foyer fermé, antisepsie de type chirurgical. Prélèvements liquides: Ponction à l'aiguille montée sur seringue, puis transfert dans flacon stérile. Une paire de flacon d'hémoculture (aérobie et anaérobie) peut être ensemencée avec le liquide ponctionné pour augmenter la sensibilité (respecter les règles de ponction d'un flacon d'hémoculture en particulier la désinfection du bouchon), sauf si le liquide résulte de la perforation d'un organe creux avec contenu septique. et Flacon hémoculture aérobie ( bouchon bleu) et anaérobie ( bouchon violet) Prélèvements solides, Biopsies: Recueil de fragments tissulaires de volume suffisamment important dans flacon stérile, sans conservateur, sans liquide. et Prélèvement de LCR Tube stérile transparent "LCR" Le LCR est recueilli successivement dans 3 ou 4 tubes stériles sans bouchon blanc anticoagulant, numérotés de 1 à 3 (ou 4) destinés respectivement à l'examen biochimique et microbiologique. La quantité de LCR nécessaire est de 2 à 5 ml chez l'adulte, idéalement de 2 ml chez l'enfant. Prélèvements dans le cadre des infections ostéo- articulaires sur matériel Effectué par le chirurgien en fonction des recommandations de pratique clinique: infections ostéo-articulaires sur matériel (prothèse, implant, ostéosynthèse) 2009 6.9.11. PRELEVEMENT DE CATHETER Nature du prélèvement et/ou de la demande Prélèvement avec ablation du matériel: Cathéter pour examen bactériologique ou mycologique Matériel Flacon stérile Mode de prélèvement L'examen systématique des cathéters n'est pas justifié en dehors de signes locaux et/ou généraux d'infection Procéder stérilement au retrait du matériel, couper stérilement les 5 cm de l'extrémité distale pour les cathéters longs et la partie insérée pour les cathéters courts. Les placer dans un flacon stérile. En aucun cas n'envoyer la partie externalisée du cathéter (ailettes, fil...) Prélèvement avec ablation du matériel: Cathéter pour analyse microbiologique semi-quantitative Tube stérile transparent "LCR" Procéder stérilement au retrait du matériel, couper stérilement les 5 cm de + 1ml de sérum physiologique l'extrémité distale pour les cathéters longs et la partie insérée pour les cathéters courts. Les placer dans un tube stérile. Ajouter 1 ml de sérum physiologique stérile. Acheminement urgent au laboratoire Prélèvement effectué matériel en place: Hémocultures "appariées" (avec différentiel de délai de positivité) Flacons BD BACTEC aérobie (bouchon bleu) et anaérobie (bouchon violet) Réaliser antisepsie adéquate. Prélever en même temps ( et © 2013 - CHU de Nîmes - Tous droits réservés | Référent : Dr Sanae FINGE - Tél : 0466683574 | Webmaster : Olivier FRIGOUT - Tél :0466683985 | page 36/40 7. ELIMINATION DES DECHETS D'ACTIVITE DE SOINS A RISQUE INFECTIEUX 7.1. PAR LE PERSONNEL DE SANTE Voir la documentation hospitalière sur les DASRI 7.2. PAR LE PATIENT art. R 1335-2 du Code de Santé publique « Toute personne qui produit des DASRI est tenue de les éliminer » ● La législation contraint les patients produisant des déchets de soin piquants ou coupants à les jeter dans une boîte spécifique. ● Ces boîtes sont disponibles au niveau des pharmacies depuis le 1er novembre 2011. ● Il est formellement interdit d'utiliser d'autres récipients (boîtes de conserve, bouteilles en verre ou en plastique...) sous peine d'amende ou d'emprisonnement, notamment en cas d'accident des agents de tri. ● Ne pas remplir le collecteur au-delà du trait supérieur et le fermer définitivement avant élimination au niveau d'une borne de récupération des DASRI. Le délai de stockage ne doit pas dépasser 3 mois. Ranger les boîtes jaunes hors de portée des enfants. © 2013 - CHU de Nîmes - Tous droits réservés | Référent : Dr Sanae FINGE - Tél : 0466683574 | Webmaster : Olivier FRIGOUT - Tél :0466683985 | page 37/40 8. IDENTIFICATION DES PRELEVEMENTS 8.1. IDENTIFICATION PRIMAIRE DES ECHANTILLONS L'identification des échantillons doit être effectuée par le préleveur au moment du prélèvement. Décret n° 2002-660 du 30 avril 2002, Art. 20-5 : « Les prélèvements destinés à être transmis à un laboratoire de biologie médicale effectués par les professionnels de santé, y compris ceux exerçant au sein des établissements et des centres de santé ne disposant pas de laboratoire d'analyses de biologie médicale, doivent être parfaitement identifiés. Ils le sont par le nom patronymique, le nom marital ou usuel, le prénom, la date de naissance et le sexe du patient, mentionnés par le professionnel de santé au moment du prélèvement. Ce dernier spécifie son nom et précise la date et l'heure du prélèvement. » 8.1.1. PRELEVEMENTS EFFECTUES AU SEIN DU CHU PATIENT HOSPITALISE L'enregistrement du patient hospitalisé permet l'édition d'étiquettes à code-barres portant l'identification complète et univoque du patient (nom, prénom, nom de jeune fille, date de naissance et sexe), son statut en tant qu'hospitalisé (H) ainsi que son unité d'hospitalisation. PATIENT CONSULTANT EXTERNE L'enregistrement du patient au bureau des entrées, avant son arrivée à l'office de prélèvements du laboratoire ou dans les unités de consultations hospitalières, permet l'édition d'une planche d'étiquettes à code-barres portant l'identification complète et univoque du patient (nom, prénom, nom de jeune fille, date de naissance et sexe), son statut en tant qu'externe (E ou E+) ainsi que son unité de consultation. 8.1.2. PRELEVEMENTS EFFECTUES PAR DES PRELEVEURS EXTERNES Le préleveur peut être le patient lui-même, les infirmiers libéraux, les centres de soins, les offices de santé, etc. Les échantillons peuvent être identifiés de façon manuscrite ou à l'aide d'étiquettes auto-collantes. Les informations obligatoires qui doivent figurer sur les échantillons et sur la fiche de transmission sont: nom, prénom, nom de jeune fille, date de naissance et sexe. L'étiquette hospitalière sera collée à postériori sur l'échantillon au niveau du laboratoire. 8.2. IDENTIFICATION SECONDAIRE AU LABORATOIRE L'enregistrement du dossier dans le SIL (système informatique du laboratoire) engendre l'édition d'étiquettes à code-barres avec l'identité complète du patient et les numéros internes du dossier et des échantillons. © 2013 - CHU de Nîmes - Tous droits réservés | Référent : Dr Sanae FINGE - Tél : 0466683574 | Webmaster : Olivier FRIGOUT - Tél :0466683985 | page 38/40 9. CONDUITE A TENIR EN CAS D'INCIDENT DE PRELEVEMENT Quels que soient la nature et le site du prélèvement, le préleveur doit noter sur le support de prescription toute difficulté ou incident rencontrés lors de la réalisation du prélèvement. Le tableau suivant présente les mesures à prendre concernant le patient en cas d'incident de prélèvement. Incident ou Accident Malaise du patient sans perte de connaissance Cause Anxiété, jeûne, etc. Conduite à tenir Rassurer le patient. Arrêter le prélèvement et comprimer le point de prélèvement. Incliner le dossier du fauteuil de manière à ce qu'il soit le plus allongé possible. Relever les jambes du patient de manière à ce qu'elles soient plus hautes que la tête et le couvrir si nécessaire. Essayer de retenir l'attention du patient pour éviter la perte de connaissance. Faire prévenir un biologiste ou un personnel titulaire de l'AFGSU Formation aux Gestes et Soins d'Urgence (liste) sans laisser le patient seul. Noter l'incident sur le support de prescription. Hématome au point de prélèvement Garrot trop serré, veine trop fine, piqûre hésitante, etc. Rassurer le patient. Compresser le point de prélèvement Poser une compresse alcoolisée Noter l'incident sur le support de prescription. Perte de connaissance du patient Anxiété, jeûne, causes médicales, etc. Arrêter le prélèvement. Incliner le dossier du fauteuil de manière à ce qu'il soit le plus allongé possible. Relever les jambes du patient de manière à ce qu'elles soient plus hautes que la tête et le couvrir si nécessaire. Faire prévenir un biologiste ou un personnel titulaire de l'AFGSU sans laisser le patient seul. Si nécessaire appeler le 15 Noter l'incident sur le support de prescription. Crise d'épilepsie Prendre toutes les précautions nécessaires pour éviter que le patient ne se blesse. Noter l'incident sur le support de prescription. Appeler le 15 (83329) Choc anaphylactique Vaccination, injection de fer , etc. © 2013 - CHU de Nîmes - Tous droits réservés | Référent : Dr Sanae FINGE - Tél : 0466683574 | Webmaster : Olivier FRIGOUT - Tél :0466683985 | page 39/40 10. CONDITIONNEMENT ET ACHEMINEMENT DES ECHANTILLONS BIOLOGIQUES L'acheminement des prélèvements biologiques doit respecter l'obligation réglementaire du triple emballage. Les températures de conservation ainsi que les délais d'acheminement doivent respecter les recommandations du Guide des analyses. ● Conditionnement pour les prélèvements intra-hospitaliers Les échantillons sont mis dans des sachets en plastique étanches munis d'une poche kangourou pour le support de prescription afin d'éviter le contact entre ce dernier et le contenant de l'échantillon biologique. L'ensemble étant transporté dans des valisettes fermées pour assurer la sécurité du personnel, la préservation des échantillons et la confidentialité quant à l'identité figurant sur les étiquettes. ● Conditionnement pour les prélèvements extra-hospitaliers Les emballages doivent être respectueux de la réglementation et de la température préconisée pour l'analyse en question. © 2013 - CHU de Nîmes - Tous droits réservés | Référent : Dr Sanae FINGE - Tél : 0466683574 | Webmaster : Olivier FRIGOUT - Tél :0466683985 | page 40/40