FACTEUR VIII

DOSAGE
DES FACTEURS
1. TECHNOCHROM® FVIII:C
Référence
4-5344101
Dosage colorimétrique
FACTEUR VIII
1 TECHNOCHROM® FVIII:C
Exemple : méthode manuelle ( cinétique et point final )
delta A/min
Composants du coffret :
• 2 flacons de Substrat FXa-1+ αNAPAP (2 mL)
• 2 flacons de Réactif A (Phospholipide, Albumine) (2 mL)
• 2 flacons de Réactif B (Facteur IXaß, Facteur X, Ca++, Albumine, Thrombin) (2 mL)
• 1 flacon de Ref. Stand. FVIII 1 (≈ 130 %) (1 mL)
• 1 flacon de Ref. Stand. FVIII 2 (≈ 70 %) (1 mL)
• 1 flacon de Ref. Stand. FVIII 3 (≈ 10 %) (1 mL)
• 1 flacon de Ref. Stand. FVIII 4 (< 0,5 %) (1 mL)
• 3 flacons de Tampon de dilution F VIII (30 mL)
• 2 flacons de Tampon de réaction FVIII (8 mL)
Le coffret TECHNOCHROM® FVIII:C contient des réactifs pour la détermination colorimétrique
de l’activité du facteur VIII dans le plasma et dans les dérivés plasmatiques. L’insuffisance du
facteur VIII ainsi que les thérapies de substitution du facteur VIII peuvent être surveillées.
1,2
kinetic method
endpoint method
0,25
Nombre de tests
2 x 20
Coffret de dosage colorimétrique du facteur VIII.
1,0
0,20
0,8
0,15
0,6
0,10
0,4
0,05
Absorbance (405 - 490 nm)
0,30
Conditionnement
coffret
Utilisation
• Linéarité : 0 - 144 (activité %).
• Limite de détection : 0 % (activité %)
• Incubation de 5 minutes et lecture sur 3 minutes.
• Point final ou cinétique
0,2
0,00
0
50
100
150
200
% F VIII
Points forts
• Stabilité des réactifs sur analyseurs de 24 h
Produits associés
Coagulation Reference
36
Coagulation Control N
Coagulation Control A
• Réactifs recongelables 15 jours à -20° C
DOSAGE
DES FACTEURS
1. ROX FACTOR IX
Référence
5-900020
Dosage colorimétrique
FACTEUR IX
1 ROX Factor IX
Conditionnement
coffret
Nombre de tests
2 x 50
Composants du coffret :
• 2 flacons de Réactif A (lyophilisat de facteurs humains VIII
et X, et de facteur V bovin, inhibiteur de la polymérisation
de la fibrine)
• 2 flacons de Réactif B (facteurs humains lyophilises XIa et
II, du chlorure de calcium et des phospholipides)
• 1 flacon de Substrat Chromogène du FXa (6 mL)
• 1 flacon de Tampon de Dilution (20 mL)
Coffret de dosage enzymatique du facteur IX humain dans les concentrés de
facteur IX humain et dans le plasma.
Points forts
Le coffret Rox Factor IX contient des réactifs pour la détermination colorimétrique de
l’activité du facteur IX dans le plasma et dans les dérivés plasmatiques. L’insuffisance du
facteur IX ainsi que les thérapies de substitution du facteur IX peuvent être surveillées.
• Linéarité : 0.005-2 UI/mL.
• Deux courbes possibles :
º Linéarité comprise entre 3 et 25 mIU/mL.
º Linéarité comprise entre 50 et 500 mIU/mL.
• Excellente sensibilité autour de 0,001 UI / mL avec un signal > 30 mA à 405 nm.
• Aucun plasma déficient en facteur IX n’est utilisé.
• Adaptation sur STAR et ACL Top
Courbe FIX log-log entre 3 et 25 mUI / mL
Le ROX FACTOR IX est un coffret de dosage enzymatique chromogénique pour la
détermination du facteur IX dans les concentrés de facteur IX humain. Les résultats
sont exprimés en UI. Les mesures s’effectuent sur le domaine 50-500 mUI/mL ou
3-25 mUI/mL. Cette méthode est basée sur l’activation du facteur IX humain par le
facteur XIa humain. Le facteur IXa ainsi formé active le facteur X en facteur Xa en
présence de facteur VIII, thrombine, phospholipides et d’ions calcium. La quantité
de facteur Xa générée est déterminée par l’hydrolyse d’un substrat chromogène du
facteur Xa.
La quantité de para-nitroaniline libérée lors de cette hydrolyse et mesurée à 405 nm
est proportionnelle à la concentration de facteur IXa dans le milieu réactionnel.
0.9 Absorbance (405 - 490 nm)
Caractéristiques
0.8 0.7 0.6 0.5 0.4 0.3 -
r2 = 0,99
0.2 0.1 -
3
Activité en mUI / mL
25
37
DOSAGE
DES FACTEURS
1. ROX FIX-A
Référence
5-950030
Dosage colorimétrique
FACTEUR IXa
1 ROX FIX-A
2 Factor IXa Calibrator
3 Factor IXa Control
Conditionnement
coffret
Nombre de tests
2 x 50
Composants du coffret :
• 2 flacons de Réactif A (facteurs humains VIII et X lyophilisés)
• 2 flacons de Réactif B (thrombine humaine lyophilisée, du
chlorure de calcium et des phospholipides)
• 1 flacon de Substrat Chromogène du FXa (6 mL)
• 1 flacon de Tampon de Dilution FIXa (20 mL)
Coffret de dosage enzymatique du facteur IXa humain dans les concentrés
de facteur IX humain.
Le coffret Rox Factor IXa contient des réactifs pour la détermination colorimétrique de
l’activité du facteur IXa dans le plasma et dans les dérivés plasmatiques. La présence très
faible de facteur IXa peut être mesurée.
2. FACTOR IXa CALIBRATOR
Points forts
• Linéarité comprise entre 0,02 et 0,8 mUI/mL
• Limite de quantification = 0,02 mUI FIXa / mUI FIX
• La sensibilité de 0,005 % est bien meilleure que celle de la méthode NAPTT.
• Réactifs stables 48 h à 2-8° C
• Calibrateur et contrôle fournis
Caractéristiques
Le ROX FIX-A est un coffret de dosage enzymatique chromogénique pour la
détermination de très faibles quantités de facteur IXa dans les concentrés de facteur
IX humain. Les résultats sont exprimés en UI.
La sensibilité du dosage est de 0,1 mUI/mL.
Cette méthode est basée sur l’activation du facteur X par le facteur IXa (considéré
comme un contaminant dans le concentré de facteur IX) en présence de facteur VIII,
thrombine, phospholipides et d’ions calcium. La quantité de facteur Xa générée est
déterminée par l’hydrolyse d’un substrat chromogène du facteur Xa.
La quantité de para-nitroaniline libérée lors de cette hydrolyse et mesurée à 405 nm
est proportionnelle à la concentration de facteur IXa dans le milieu réactionnel.
Référence
5-9599
Conditionnement
10 x 2,0 mL
Préparation purifiée de facteur IXa pour le
coffret ROX FIX-A, étalonnée contre le standard
international WHO (OMS).
Plasma de calibration pour le dosage du facteur IXa en colorimétrie, il est utilisable
directement sans dilution après reconstitution.
3. FACTOR IXa CONTROL
Référence
5-9588
Conditionnement
10 x 2,0 mL
Préparation purifiée de facteur IXa pour le
coffret ROX FIX-A, titrée contre le standard
international WHO (OMS).
Plasma de contrôle de qualité pour le dosage du facteur IXa en colorimétrie.
38
DOSAGE
DES FACTEURS
1. ROX FACTOR XIa
Référence
5-110050
Dosage colorimétrique
FACTEUR XIa
1 ROX Factor XIa
2 Factor XIa Calibrator
3 Factor XIa Control
Points forts
• Excellente sensibilité autour de 1,2 mUI / mL FXIa
• Aucun plasma déficient en facteur XI n’est utilisé
• Utilisable directement sans dilution après reconstitution
Caractéristiques
Le ROX FACTOR XIa est un coffret de dosage enzymatique quantitatif et
chromogénique pour la détermination de facteur XI activité dans les concentrés de
facteur XI humain. Les résultats sont exprimés en UI. Les mesures s’effectuent sur le
domaine 50-500 mUI/mL ou 3-25 mUI/mL. Cette méthode est basée sur l’activation du
facteur IX humain par le facteur XIa. Le IXa ainsi formé active le facteur X en facteur Xa
en présence de facteur VIII, thrombine, phospholipides et d’ions calcium. La quantité
de facteur Xa générée est déterminée par l’hydrolyse d’un substrat chromogène du
facteur Xa.
La quantité de para-nitroaniline libérée lors de cette hydrolyse et mesurée à 405 nm
est proportionnelle à la concentration de facteur IXa dans le milieu réactionnel.
Conditionnement
coffret
Nombre de tests
2 x 50
Composants du coffret :
• 2 flacons de Réactif A (facteurs humains IX et VIII lyophilisés)
• 2 flacons de Réactif B (lyophilisat de facteur humain X et
thrombine bovine, du chlorure de calcium et des phospholipides)
• 1 flacon de Substrat Chromogène (Z-D-Arg-Gly-Arg-pNA) (6 mL)
• 1 flacon de Tampon de Dilution (20 mL)
Coffret de dosage quantitatif du facteur XIa humain dans les préparations
enrichies ou hautement concentrées de facteur XIa humain. Non validé pour
les dosages plasmatiques.
Le coffret Rox Factor XIa contient des réactifs pour la détermination colorimétrique de
l’activité du facteur XIa dans le plasma et dans les dérivés plasmatiques. La présence très
faible de facteur XIa peut être mesurée.
2. FACTOR XIa CALIBRATOR
Référence
5-1199
Conditionnement
10 x 4,0 mL
-20°C
Préparation purifiée de facteur XIa pour le
coffret ROX FXIa, étalonnée contre le standard
international WHO (OMS).
Plasma de calibration pour le dosage du facteur XIa
3. FACTOR XIa CONTROL
Référence
5-1188
Conditionnement
10 x 4,0 mL
-20°C
Préparation purifiée de facteur XIa pour le coffret
ROX FXIa, titrée contre le standard international
WHO (OMS).
Plasma de contrôle de qualité pour le dosage du facteur XIa
39
DOSAGE
DES FACTEURS
1. TECHNOCHROM® FXIII
Référence
4-5360010
Dosages colorimétrique et ELISA
FACTEUR XIII
1 TECHNOCHROM® FXIII
2 Factor XIII Deficient Plasma
DOSAGES ELISA
Avantages
3 TECHNOZYM® FXIII Ag ELISA
La méthode est linéaire jusqu’à une activité FXIII de 300 %.
La limite de détection est de 0,6 % car le blanc réactif est inclus.
Les réactifs concurrents qui n’intègrent pas de blanc plasma surestiment les valeurs et
ont une limite de quantification > 3-5 % (H. P. KOHLER and all, Diagnosis and classification of factor
4 TECHNOZYM® FXIII-A Sub ELISA
5 TECHNOZYM® FXIII-B Sub ELISA
XIII deficiencies, journal of Thrombosis and Haemostasis, 9 : 1404–1406 July 2011).
Information
La déficience congénitale en FXIII est rare. On observe une déficience occasionnelle de la
cicatrisation et chez la femme des avortements à répétition. La déficience acquise en FXIII
due à des autoanticorps anti-FXIII est également une très importante cause de diathèse
hémorragique. La consommation en FXIII dans différentes maladies (infections malignes,
maladie de Chron, purpura Henoch-Schoenlein, chirurgie majeure, …) résulte habituellement
d’une baisse modérée du taux de FXIII.
Produits associés
40
Composants du coffret :
• 3 flacons d’Activateur (3 mL)
• 3 flacons de Réactif de Détection (3 mL)
• 3 flacons de Solution NADPH (3 mL)
• 3 flacons de Réactif Inhibiteur (1 mL)
• 1 flacon de Solution de Stabilisation (6 mL)
Le TECHNOCHROM® FXIII est un coffret de dosage enzymatique chromogénique pour la
détermination de l’activité du facteur XIII. Le facteur XIII présent dans le plasma est activé en
présence de thrombine et de calcium.
Le FXIIIa formé catalyse la transformation d’un substrat aminé d’éthylester de glycine (GEE) en
résidu glutaminé d’un substrat peptidique spécifique Pl(1-12) en libérant de l’ammoniaque.
Ce test peut donc être utilisé pour suivre les taux de facteur XIII lors de traitement visant à
complémenter le patient en facteur XIII.
PLASMA DÉFICIENT
Coagulation Control N
Nombre de tests
3 x 20
Coffret de dosage pour pour la détection des
déficiences congénitales ou acquises en FXIII, de taux de FXIII anormal avec
une activité faible ou de taux élevé en FXIII.
DOSAGE COLORIMÉTRIQUE
Coagulation Reference
Conditionnement
coffret
Coagulation Control A
2. FACTOR XIII DEFICIENT PLASMA
Référence
4-5194104
Conditionnement
5 x 1,0 mL
Coffret de plasma déficient en facteur XIII.
Le FACTOR XIII DEFICIENT Plasma est un plasma humain immunoadsorbé, stabilisé et lyophilisé
préparé à partir de plasma avec des anti-corps anti-HIV négatifs, et dont la contenance en
facteur XIII est inférieure à 1 %, considérant que tous les autres facteurs de coagulation
présentent des valeurs normales.
DOSAGE DES FACTEURS
3. TECHNOZYM® FXIII AG ELISA
Référence
4-5360100
Conditionnement
coffret
Composants du coffret :
• 12 x 8 puits
• 1 flacon
• 1 flacon
• 1 flacon de 100 mL
• 1 flacon de 100 mL
• 5 flacons de 0,25 mL
• 2 flacons de 0,25 mL
• 2 flacons de 12 mL
• 1 flacon de 12 mL
Nombre de tests
12 x 8
Barrette ELISA sécable de 8 puits
Anticorps de capture
Conjugué (anticorps de détection)
Tampon de lavage concentré
Tampon de dilution des échantillons
Calibrateurs numérotés de 1 à 5
Contrôles plasmatiques, niveau haut et bas
Substrat chromogène TMB
Solution d’arrêt
Information
Le déficit congénital en FXIII résulte d’une déficience du FXIII-A due à la mutation
du gène F13A1 localisé sur le chromosome 6 ou du FXIII-B causée par la mutation du
gène F13 B localisé sur le chromosome 1. Jusqu’en 2009, plus de 70 mutations du
gène du FXIII-A et quatre mutations du gène du FXIII-B ont été décrites [Muszbek
et al., 2011]. Les formes homozygotes ou hétérozygotes représentent les formes
graves de la maladie. Le déficit en FXIII-A peut-être quantitatif (type I) résultant d’une
diminution de synthèse de la protéine ou qualitatif (type II) lorsque la concentration
de FXIII-A est normale ou presque normale mais la protéine est défectueuse sur le plan
fonctionnel (figure 2). Le déficit en FXIII-B est relativement plus rare et les symptômes
hémorragiques sont mineurs [Kohler et al., 2011; Muszbek et al., 2011].
Spécificités et linéarité du coffret TECHNOZIM® FXIII Ag ELISA
1,8
Coffret de dosage ELISA du facteur XIII antigène de la sous unité A et B.
O.D. 450 nm
Le TECHNOZYM® FXIII Ag ELISA est un coffret de dosage ELISA pour la détermination du
facteur XIII antigène dans le plasma humain. Il permet de mesurer la concentration du complexe
hétérotétramère (FXIII A2B2) en utilisant des anticorps monoclonaux spécifiques du FXIII-A et
FXIII-B. Une gamme de 5 calibrateurs, 1 contrôle haut et bas sont inclus dans le coffret.
La linéarité est comprise entre 0 % et 160 %. La disponibilité peut ne pas être garantie.
1,2
A2B2
0,9
A2
0,6
B
Information
0,3
La détection des FXIII-A et B permet la classification de la déficience en FXIII et orientera
le choix du traitement de remplacement. La méthode ELISA est recommandée aux fins
du diagnostic et de la classification du FXIII parce qu’elle permet la mesure directe des
FXIII-A et B en utilisant des anticorps spécifiques et la surveillance thérapeutique de la
déficience en FXIII [Fadoo et al., 2013; Kessel et al., 2013; Kohler et al., 2011; Muszbek et
al., 2011; Schroeder et al., 2007].
0,0
4. TECHNOZYM® FXIII-A SUB ELISA
Référence
4-5360110
Conditionnement
coffret
Nombre de tests
12 x 8
1,80
1,5
0
10
20
30
40
50
60
Protéine concentration µg / mL
70
1,35
80
0,90
5. TECHNOZYM® FXIII-B SUB ELISA
Référence
4-5360120
Conditionnement
coffret
Nombre de tests
12 x 8
Coffret de dosage ELISA de la sous-unité A du
facteur XIII antigène.
Coffret de dosage ELISA de la sous-unité B du
facteur XIII antigène.
Le TECHNOZYM® FXIII-A ELISA est un coffret de dosage ELISA pour la détermination de
la sous unité A du facteur XIII antigène dans le plasma humain en utilisant des anticorps
monoclonaux spécifiques du FXIII-A. Une gamme de 5 calibrateurs, 1 contrôle haut et bas
sont inclus dans le coffret.
La linéarité est comprise entre 0 % et 160 %. La disponibilité peut ne pas être garantie.
Le TECHNOZYM® FXIII-B ELISA est un coffret de dosage ELISA pour la détermination de
la sous unité B du facteur XIII antigène dans le plasma humain en utilisant des anticorps
monoclonaux spécifiques du FXIII-B. Une gamme de 5 calibrateurs, 1 contrôle haut et bas
sont inclus dans le coffret.
La linéarité est comprise entre 0 % et 160 %. La disponibilité peut ne pas être garantie.
41
DOSAGE
DES FACTEURS
1. ROX FACTOR PROTHROMBIN
Référence
5-200040
Dosage colorimétrique
PROTHROMBINE
Conditionnement
coffret
Nombre de tests
4 x 30
Composants du coffret :
• 4 flacons de Réactif Activateur (facteur Xa humain, facteur Va bovin,
chlorure de calcium, phospholipides) (3 mL)
• 1 flacon de Substrat Chromogène (H-D-Phe-Pip-Arg-pNA) (6 mL)
• 1 flacon de Tampon de Dilution (20 mL)
Coffret de dosage enzymatique de la prothrombine humaine dans le plasma
humain et dans les concentrés sur plasma citraté ou EDTA.
1 ROX Factor Prothrombin
Le coffret Rox Prothrombin Factor contient des réactifs pour la détermination colorimétrique
de l’activité du facteur II dans le plasma et dans les dérivés plasmatiques. L’insuffisance du
facteur II ainsi que les thérapies de substitution du facteur II peuvent être surveillées.
Courbe FIX log-log entre 3 et 25 mUI / mL
Absorbance (405 - 490 nm)
0.9 -
Points forts
0.8 0.7 0.6 0.5 0.4 0.3 -
r2 = 0,99
0.2 0.1 -
3
Activité en mUI / mL
• Excellente sensibilité autour de 0,25 mUI / mL non affecté par l’hémoglobine, bilirubine,
triglycéride, héparines HNF et HBPM
• Basé sur le complexe de prothrombinase pour refléter l’activité biologique
• Dilution importante de l’échantillon qui limite la génération de la thrombine
• Dosage très robuste car activation complète de la prothrombine
• Le complexe prothrombinase est sensible à la gamma carboxylation et la DE gammaCarboxyProthrombine (DCP) n’est pas activé dans cette méthode contrairement aux
méthodes qui activent la prothrombine à l’aide d’un venin de serpent.
25
Information
Caractéristiques
L’activité fonctionnelle du facteur II est déterminée par méthode enzymatique de
la prothrombinase chromogénique dans laquelle le facteur II humain est activé en
thrombine (IIa) par le facteur Xa en présence de facteur V bovin, de phospholipides et
d’ions calcium. La quantité de facteur IIa ainsi générée est déterminée par l’hydrolyse
d’un substrat chromogène du facteur IIa. L’activité du facteur II de l’échantillon est
déterminée contre un standard concentré ou plasmatique et le résultat est exprimé
en Unité Internationale (UI).
42
La DE gamma-CarboxyProthrombine (DCP), également appelée protéine induite par
l’absence de vitamine K / antagoniste-II (PIVKA-II), est une protéine précurseur de la
prothrombine biologiquement inactive.
Normalement, le précurseur de la prothrombine subit une carboxylation posttraductionnelle (addition d’un groupe acide carboxylique) par gamma-glutamyl
carboxylase dans le foie avant la sécrétion dans le plasma. La DCP / PIVKA-II peut être
détectée chez les personnes avec une déficience de vitamine K (due à une mauvaise
nutrition ou malabsorption) et chez ceux prenant de la warfarine ou d’autres médicaments
qui inhibent l’action de la vitamine K.