( lymphokines, monokines).

exploration biochimique
d'un syndrome inflammatoire
1.- Mécanismes moléculaires de la réaction inflammatoir
- médiateurs locaux de l'inflammation
- Cytokines
-protéines de la réaction inflammatoire (PRI)
2- Exploration biochimique d’un syndrome inflammatoir
- électrophorèse des protéines
- protéines de l’inflammation
- (profil protéique)
3- conclusions sur l’ exploration de l'inflammation
1- Mécanismes moléculaires de
La réaction inflammatoire
stimulus inflammatoire
I ) initiation
cascades
complément
coagulation
Activation cellulaire
II) amplification
cytokines
eicosanoides histamine
PAF-acéther
Agrégation
plaquettaire
radicaux libres
protéases
Afflux cellulaire
lymphocytes, phagocytes
médiateurs locaux
Dégradés rapidement
Dérivés d ’acides aminés : histamine …
- les médiateurs lipidiques
Issus des phospholipides membranaires
Eicosanoides, PAF acéther
-kinines, protéases……..
-cytokines
Cytokines ( lymphokines, monokines)
Durée de vie plus longue : effet local
+ effet à long terme
Interleukine 1 (IL1β)
role dans l ’amplification : chimiotactique et stimulant
role dans la fièvre
Tumor necrosis factor (TNFα, cachectine)
meme role dans l ’amplification
role cytotoxique : antiviral, antitumoral
Interleukine 6 (IL6)
- récepteur hépatocytaire : induit la synthèse
des protéines de la réaction inflammatoire
- sécrétées par les cellules du foyer inflammatoire
- transportées dans le sang
-augmentent la transcription des PRI
en synergie
II) amplification
plaquettes, mastocytes, lymphocytes, phagocytes
cytokines
eicosanoides
PAF-acéther
Afflux cellulaire
histamine
radicaux libres
protéases
réactions systémiques
III) stabilisation
acquisition
d'un état immun,
fièvre
phagocytose
nettoyage
inhibition
des médiateurs
protéines de la réaction inflammatoire
protéines de la réaction inflammatoire
(Synthétisées par le foie)
Foie
1) protéines dont la concentration sérique
est diminuée : PRI-albumine : diminution de la synthèse hépatique
- transferrine : augmentation du catabolisme
synthèse peu modifiée
2) protéines dont la concentration sérique est
augmentée : augmentation de la synthèse hépatique
(par les cytokines) = PRI+
IL1, IL6, TNF
Foyer local
protéines de l ’inflammation
Protéine C réactive : CRP taux normal <5mg/l
-Augmentation précoce (qq heures) demi vie brève :
diminution rapide - très grande amplitude (Xqq100!) :
marqueur sensible de l ’inflammation aigue
Intérêt : - surveillance des poussées inflammatoires
- spécificité dans les infections bactériennes:
néonatologie
Changement de concentration plasmatique (g/l ou mg
C reactive protéin ( CRP)
Serum Amyloid A protein
Temps après un stimulus inflammatoire
Changement de concentration plasmatique (%
α1 antitrypsine
haptoglobine
orosomucoide
Temps après un stimulus inflammatoire
valeur normale : 0,5g/L
orosomucoide X2 à 3 fois dans l ’inflammation aigue
retour lent à la normale
α1 antitrypsine valeur normale : 2-4g/l , X par 1,5 à 2
protéine tardive
système des antiprotéases
valeur normale : 1g/l; cinétique lente,
haptoglobine X5 : marqueur sensible, forme un
complexe avec l ’hémoglobine
diminue dans l ’hémolyse
intravasculaire
inflammation + hémolyse :taux normal
amplification de la
réaction inflammatoire
résolution de la
réaction inflammatoire
antiprotéases
PRI
IL1
TNF
IL6
haptoglobine
céruléoplasmine
Cholestérol
phospholipides
SAA
2- Exploration Biochimique
d’un syndrome inflammatoire
2.1- Electrophorèse des protéines sériques
Support :agarose
Dépôt de sérum
acétate de cellulose
Tampon pH 8,6
-
+
Coloration, scan densitométrique et intégration
(Protéinogramme ou protidogramme)
Immunoglobulines
G &Mm
albumine
α1 orosomucoïde
Transferrine&
& α1 antitrypsine
β2 microglobuline
α2 macroglobuline&
haptoglobine
Résultat : 5 pics exprimés en % des protéines totale
transformés en g/l (protidémie)
Protéinogramme normal (« à peu près » pour
s’en souvenir) après coloration/quantification
%
g/l
Albumine
70
35-45
α1 globulines
3
1-4
α2 globulines
6
6-10
β globulines
9
6-13
γ globulines
12
7-15
protidémie
70 g/l
Un examen d’orientation diagnostique
(« dépistage »)
•
•
Anomalies multiples MAIS différentes dans des
pathologiques multiples
Exemples; dénutrition, syndromes inflammatoires aigus
et chroniques, « fuites » protéiques digestive ou urinaire,
myélomes (prolifération plasmocytaire), insuffisance
hépato-cellulaire, hémolyse,…..
Inflammation aigue
augmentation α1, α2,
Alb : 46%
α1 : 7,5%
α2 : 17,4%
β : 19,9%
γ : 15%
Haptoglobine &
α2 mcroglobuline
orosomucoid
Inflammation chronique Alb : 40%
α1
α2
β
γ
: 6,5%
: 15%
: 14%
: 25%
Inflammation subaigue et chronique: augmentation
α1, α2, Et augmentation « polyclonale » des
immunoglobulines
2.2- Dosages spécifiques des protéines
de l’inflammation (immunologiques)
Techniques sensibles, rapides, mais chères
La plus utilisée : CRP
dosage de plusieurs protéines de l’inflammation
Miniprofil inflammatoire : CRP+ OM+ HP:
peu utilisé, mais permettrait de suivre les poussées
inflammatoires dans les pathologies chroniques
Profil protéique complet : CRP
interet diagnostic?
cher
Albumine
alpha 1 antitrypsine
orosomucoide
haptoglobine
céruléoplasmine
α2 macroglobuline
(fibrinogène)
Ig G
Ig A
Ig M
alb
A1T
OM
Hp
Cer
A2M
Conclusion sur l’
Exploration d’une réaction inflammatoire
- vitesse de sédimentation ( VS)
non spécifique, se normalise très rapidement
(pas augmentée dans les inflammations subaigues)
-Médiateurs locaux, Cytokines : mesure complexe
taux circulant ou urinaire variable et inconstant
-Électrophorèse des protéines :
Facile, pas chère mais pas sensible, pas spécifique
-CRP ++++ : dosage spécifique, rapide, très utilisé
-Fibrinogène +
Nouveaux marqueurs?
PCT: intérêt à démontrer
Un marqueur idéal serait :
-sensible
-cinétique rapide, mais prolongée
-Spécifique
-Dépistage des poussées inflammatoires
-pas cher