Test DRI®Creatinine-Detect - Fisher Scientific

Test DRI®Creatinine-Detect®
Pour usage diagnostique in vitro
Prélèvement et manipulation des échantillons
10015638 (3 kits de 18 mL)
1797 (kit de 500 mL)
Usage prévu
Le test DRI Creatinine-Detect® de est prévu pour la détermination quantitative de la créatinine
dans les urines humaines dans la détection de dénaturation de l'urine par dilution ou
substitution par une solution autre que de l'urine.
Résumé et explication du test
Un programme de détection de toxicomanie complet comprend en général la collecte
d'échantillon, un dépistage initial avec immunodosage, suivi d'un test de confirmation, tel que
la chromatographie en phase gazeuse/spectrométrie de masse (GC/MS), pour les échantillons
positifs.1 Beaucoup d'utilisateurs de médicaments tenteront d'échapper à la détection en
dénaturant leur échantillon afin de produire de faux résultats négatifs au cours du dépistage
initial avec immunodosage. Les méthodes de dénaturation sont notamment la dilution dans
l'eau, la substitution par un liquide exempt de médicament, l'ajout de substances que l'on trouve
facilement dans une maison (p. ex., vinaigre, bicarbonate, déboucheur de canalisations liquide,
détergent, etc.) ou la modification avec certains agents chimiques (p. ex., l'Urine-Aid, qui contient
du glutaraldéhyde ou le Klear, qui contient du nitrite de potassium).
De nombreuses méthodes ont été employées pour détecter la dénaturation des urines. Ces
méthodes sont notamment la mesure de la température, de la gravité spécifique, du pH et
des concentrations de créatinine dans l'échantillon. Les caractéristiques suivantes doivent
se retrouver dans des urines fraîches normales : une température entre 32,5 et 37,7 °C ou 90,5
et 99,8 °F,1 un pH compris entre 4,7 et 7,8,2,3 une gravité spécifique située dans une limite entre
1,003 et 1,035 g/mL2,4,5 et une concentration de créatinine entre 80 et 200 mg/dL.5-9. Si l'un de ces
paramètres est en dehors des limites spécifiées pour les urines, il y a des raisons de penser que
l'échantillon d'urine a été dénaturé.
La créatinine est sécrétée quotidiennement par les muscles dans les urines. En l'absence d'une
néphropathie, le taux de clairance de la créatinine chez un individu est relativement constant. La
dilution de l'urine dans l'eau, ou tout solution autre que de l'urine peut entraîner une concentration
plus faible en créatinine.
Le test DRI® Creatinine-Detect peut être effectué sur des analyseurs de chimie cliniques
automatiques afin de mesure la concentration de créatinine. Cette méthode est basée sur la
réaction de Jaff,10 par laquelle la concentration de créatinine est déterminée colorimétriquement
en utilisant du picrate alcalin pour former un complexe un complexe de Janovski rougeâtre
selon l'équation suivante :
NaOH
Créatinine + Acide picrique←
complexe de Janovski (Rouge)
L'intensité de la couleur est directement proportionnelle à la concentration de créatinine et est
mesurée spectrophotométriquement à 505 nm.
Matériaux fournis
Réactif 1 à Creatinine-Detect : Contient de l'hydroxyde de sodium dans une solution aqueuse.
Réactif 2 à Creatinine-Detect :. Contient de l'acide picrique dans une solution aqueuse.
Calibreurs et contrôles (vendus séparément) :
Kit d'étalonnage Creatinine-Detect : Contient 1 x 25 mL de 2,0 mg/dL de créatinine et 1 x 25 mL
de 20,0 mg/dL de créatinine dans une solution aqueuse.
Kit de contrôle Creatinine-Detect 1,3 mg/dL : Contient 1 x 25 mL de 1,3 mg/dL de créatinine.
Kit de contrôle Creatinine-Detect 7,5 mg/dL : Contient 1 x 25 mL de 7,5 mg/dL de créatinine.
Kit de contrôle Creatinine-Detect 23,0 mg/dL : Contient 1 x 25 mL de 23,0 mg/dL de créatinine.
Précautions et avertissements
1.
2.
3.
Ce test est réservé à un usage diagnostic in vitro uniquement. Les réactifs sont nocifs
en cas d'ingestion.
Le réactif 1 contient de l'hydroxyde de sodium, qui est caustique. Le réactif 2 contient
de l'acide picrique, qui peut provoquer des réactions allergiques locales ou généralisées Portez
des vêtements, des gants protecteurs et des protections pour les yeux et le visage adaptés.
Ne pas utiliser les réactifs au-delà de leur date de péremption.
Préparation et conservation des réactifs
Les réactifs sont prêts à l'emploi. Aucune préparation n'est requise pour les réactifs. Lorsqu'ils
sont conservés correctement, tous les composants du dosage sont stables jusqu'à la date
d'expiration indiquée sur l'étiquette. Les réactifs à Creatinine-Detect doivent être stockés à la
température ambiante de la pièce alors que les étalons et les contrôles doivent être stockés
entre 2 et 8 °C.
Prélever les échantillons d'urine dans des récipients en plastique ou en verre. Il est recommandé
de tester des échantillons d'urine frais. Le "Mandatory Guidelines for Federal Workplace
Drug Testing Programs: Final Guidelines: Notice (Guide pour les programmes de dépistage
obligatoire des drogues dans les services Fédéraux : Guide final : Avis) recommande de placer
les échantillons n'ayant pas subi de test initial dans les 7 jours suivant réception au laboratoire
dans des réfrigérateurs sécurisés. Manipuler tous les échantillons d'urines comme s'ils étaient
potentiellement infectieux.11
Procédure de dosage
Les analyseurs en mesure de maintenir une température constante, pipeter des échantillons,
mélanger des réactifs, mesurer l'absorption à 505 nm et prévoir la réaction avec précision peuvent
être utilisés pour effectuer ce dosage.
Avant de réaliser un dosage, se reporter à la fiche de protocoles spécifique à l'analyseur, qui
précise les paramètres et/ou donne des instructions supplémentaires.
Contrôle qualité et étalonnage
Utiliser les étalons de créatinine 2,0 et 20,0 mg/dL pour étalonner les tests. Les bonnes pratiques
de laboratoire suggèrent d'utiliser des échantillons de contrôle pour garantir des performances de
dosage correctes. Les contrôles de créatinine 1,3 mg/dL, 7,5 mg/dL et 23,0 mg/dL sont disponibles
chez Thermo Fisher Scientific à cet effet. S'assurer que les résultats des contrôles se situent
dans les plages définies. Ré-étalonner le système lorsque de nouveaux réactifs sont utilisés ou
que les valeurs de contrôles sont hors des limites établies. Toutes les exigences propres aux
contrôles de qualité doivent être appliquées conformément aux règlements locaux, régionaux
et/ou nationaux ou aux exigences d’agrément.
Interprétation des données et résultats
Une courbe d'étalonnage linéaire est généré pour calibrer le dosage. La concentration de
créatinine dans l'échantillon est extrapolée depuis la courbe d'étalonnage en utilisant la valeur
d'absorption de l'échantillon. La plupart des analyseurs de chimie cliniques ont un logiciel
intégré d'ajustement de courbe capable de calculer les valeurs de concentration de créatinine
automatiquement sans besoin supplémentaire de manipulation des données. L'étalon 2,0 mg/dL est
employé pour déterminer si l'échantillon d'urine est substitué et l'étalon 20,0 mg/dL est employé
pour déterminer si l'échantillon est dilué.
Valeurs attendues
La concentration de créatinine dans les échantillons normaux d'urines vont de 80 à 200 mg/dL. Des
échantillons d'urines avec un taux de créatinines < 20 mg/dL sont considérés comme dénaturés.
La dénaturation de l'urine par la substitution d'un échantillon d'urine par une solution autre que
de l'urine donnera une concentration de créatinine < 2 mg/dL.
Limites
Le dosage est optimisé pour la détermination quantitative de la créatinine dans les urines
humaines dans le cadre d'une dénaturation uniquement.
Caractéristiques de performance types
Les données de performances types suivantes ont été générées avec un analyseur de chimique
clinique Hitachi 717 :
Précision :
Précision intra-séries (n=60)
Contrôle
Moyenne ± ET
(mg/dL)
1,3
7,5
23,0
1,2 ± 0,04
7,4 ± 0,10
23,6 ± 0,30
Précision totale (n=60)
% CV
Moyenne ± ET
(mg/dL)
% CV
3,2
1,3
1,4
1,2 ± 0,04
7,4 ± 0,12
23,6 ± 0,40
3,5
1,7
1,5
Linearity (Linéarité)
Le dosage est linéaire de 0,78 mg/dL à 420 mg/dL. La linéarité du dosage a été déterminée par
une analyse des dilutions en série d'un échantillon de créatinine à 600 mg/dL. Une corrélation
de 1 000 a été obtenue lorsque la concentration de créatinine observée de chaque solution a été
indiquée en fonction des concentrations de créatinine attendues correspondantes.
Interférence par substances endogènes
L'interférence des substances endogènes dans les urines a été étudiée. Aucune interférence
n'a été observée lorsque les échantillons d'urines ont reçu des ajouts de substances endogènes
jusqu'à la concentration indiquée.
Composant
Acide ascorbique
Albumine
Galactose
Glucose
Hémoglobine
Riboflavine
Urée
Exactitude et corrélation
Concentration
20 mg/mL
500 mg/dL
10 mg/dL
3000 mg/dL
300 mg/dL
7,5 mg/dL
6000 mg/dL
Quatre-vingt échantillons d'urines ont été testés en utilisant les concentrations précédentes
de 5 et 20 mg/dL par les étalons disponibles (x) et les nouveaux étalons de 2,0 et 20,0 mg/dL (y).
L'analyse de corrélation a rapporté une équation de régression linéaire de y = 0,990 x +1 et un
coefficient de corrélation de 1 000.
Bibliographie
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11. Centers for Disease Control/National Institutes of Health Manual Biosafety in
Microbiological and Biomedical Laboratories. 2009.
Microgenics Corporation
46360 Fremont Blvd.
Fremont, CA 94538-6406 États-Unis
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2012 06