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Sérum : sang coagulé et centrifugé (dépourvu d’éléments figurés et des facteurs de la coagulation).
Electrophorèse de zone : électrophorèse où l’on obtient après migration une séparation en zones
distinctes des molécules chargées de la solution déposée. Ici on obtient 5 zones, chaque zone correspond
à une famille protéique.
Support : acétate de cellulose (cellulose acétylée).
Tampon : tampon véronal à pH = 8,6.
Migration : 15 minutes à 180 volts.
A pH = 8,6 toutes les protéines sériques ont une charge globale négative et vont migrer vers l’anode (pôle positif). Le dépôt est par
conséquent réalisé côté cathode.
Résultats pour un sérum normal :
Familles de protéines
sériques
γ
β
α2
α1
albumine
protéines
totales
% relatif des fractions
protéiques
16 à 23 %
10 à 14
%
7 à 10 %
3à5%
50 à 60 %
100 %
Concentration en g.l-1.
12 à 17
7 à 10
5à7
2à4
36 à 44
73
pHi
6,8-7,3
5,12
5
5
4,8
///
Poids moléculaire
150 103
125 103
200 103
130 103
69 103
///
(ou masse molaire g.l1
)
Tableau : les familles de protéines présentes dans le sérum
Lecture optique des bandes pour évaluer les concentrations des différentes protéines ou comment
transformer votre PC en densitomètre
Plus la concentration en protéines est forte dans une portion de gel, plus la coloration est forte. On peut
donc évaluer les concentrations des différentes catégories de protéines par mesure optique de la densité de
coloration sur la bande.
A défaut de système de lecture spécifique, on peut utiliser un scanner. La densité de couleur des images sera
ensuite lue avec les outils du logiciel Mesurim. C'est l'utilisation de ce logiciel qui est présentée dans la suite.
Si on dispose d'un scanner à plat compatible Twain, la scannérisation peut se faire à l'aide du logiciel Mesurim
(site SVT de l'académie d'Amiens) ce qui évitera d'avoir à créer une échelle pour l'image avant la mesure. C'est
l'utilitaire normal de scannérisation, propre au scanner qui est appelé par Mesurim.
Exemple de résultats par Mesurim