Resumé 1 - USAMV Cluj

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Echinococcus granulosus: Etiologie, épidemiologie, diagnostic et controle de maladie dans la wilaya de Djelfa (ALGERIE)
UNIVERSITATEA DE ŞTIINŢE AGRICOLE ŞI MEDICINĂ VETERINARĂ
CLUJ-NAPOCA
ŞCOALA DOCTORALĂ
FACULTATEA DE MEDICINĂ VETERINARĂ
RESUME DE LA THESE DE
DOCTORAT
ECHINOCOCCUS GRANULOSUS: ETIOLOGIE,
EPIDEMIOLOGIE, DIAGNOSTIC ET CONTROLE
DE MALADIE DANS LA WILAYA DE DJELFA
(ALGERIE)
Directeur Scientifique
Doctorante
HAMRAT.Khadidja
Prof. Dr. Vasile COZMA
Membre titulaire ASAS
Cluj-Napoca
2013
i
Résumé de la thèse
L’histoire de l’hydatidose est très impressionnante du fait quelle existait depuis
Hippocrate (4e siècle avant J.-C.) qui était le premier à découvrir le kyste hydatique
abdominal chez un de ses patients. En suite Galen (2e siècle avant J.-C.) qui avait noté la
similarité des kystes retrouvés chez l’homme et l’animal. Johann Wepfer (1620-1695)
met en œuvre les différentes formes de ce parasite et les espèces d’animaux qui
l’hébergeaient, ainsi que les cycles évolutifs de chaque espèce d’Echinococcus. Ce n’est
qu’en 1786, que le nom Echinococcus granulosus a était attribué par August Batsch
(1761-1802).
Karl Leuckart (1822-1898) et Karl Diesing (1800-1867) arrivaient a déterminé les
deux espèces E. multilocularis et E. oligarthrus. Et quelque temps après le rang d’espèce
fut attribué à E. granulosus, E. multilocularis, E. oligarthrus et à E. vogeli, variant
identifié en 1972 par Rausch et Bernstein. Kumaratilake L.M. and R.C Thompson.,
(1982).
Le cycle parasitaire se déroule habituellement entre chien comme hôte définitif et
les mammifères herbivores ou omnivores comme hôte intermédiaire, mais la maladie
peut également toucher l’homme en tant qu’hôte intermédiaire accidentel.
Cette anthropozoonose est cosmopolite mais s’observe avec une plus forte
fréquence dans les pays où subsiste l’élevage traditionnel des troupeaux de moutons
encadrés par des chiens de berger, (bassin méditerranéen; Canada; Amérique du sud;
Europe de l’est; Australie).
L’hydatidose autochtone de façon importante en Afrique du nord Dar et Alkarmi,
(1997); Eckert et al., (2001); Sadjjadi, (2006) et l’Algérie compte parmi les pays où cette
maladie persiste à croitre depuis longtemps de façon fugace et inaperçue. Ceci est dû
principalement au manque
des recherches sérieuses ou de projets qui évalue avec
précision le taux de progression de l’incidence et la prévalence, pour en arriver à une
situation réelle de la maladie et pouvoir lutter contre son extension et préserver la santé
humaine. Les ruminants (bovin, ovin, caprin, camelins) peuvent s’infecter en ingérant
des oncosphères éjectés dans les fèces des carnivores. Ces excréments contiennent
beaucoup d’oncosphères qui peuvent se propager dans l’environnement par le biais des
ii
animaux et des oiseaux à des grandes distances. Les espèces E. multilocularis et
E.granulosus dominent dans beaucoup de régions du monde surtout en Europe et en
Afrique, et l’Algérie fait parti des pays hyperendémiques.
L'historique de la maladie hydatique a donné de très bons résultats concernant son
diagnostic. Plusieurs techniques ont été misent en œuvre dans ce dernier siècle. Nous
citons l’ELISA et PCR, Echographie, Western blot …, qui ne sont guère utilisées dans le
nord africain sauf dans quelque pays comme le Maroc et la Tunisie.
Le diagnostic de l’échinococcose se révèle très difficile chez l’être humain car il repose
sur
des
arguments
épidémiologiques,
cliniques,
biologiques
et radiologiques.
Le traitement est essentiellement chirurgical, avec un pronostic défavorable. Aissam. E et
al., (2010).
Les travaux réalisés durant quatre années de recherche entre (2007-2011) dans
plusieurs régions de l’Algérie concernent l’étude de l’Echinococcus granulosus sur le
plan épidémiologique, étiologie, méthodes de diagnostic ainsi que son traitement.
De ce fait, l’objectif initial de cette thèse est de faire ressortir l’intérêt de quelques
techniques de diagnostic pour reconnaître la maladie hydatique chez les hôtes
intermédiaires et les hôtes définitifs qui composent le cycle de vie de l’échinococcose.
Cette thèse comprend deux importantes parties. La première partie est la
bibliographie visant à explorer tous les détails concernant le sujet de l’hydatidose qui sont
rapportés dans la littérature par plusieurs parasitologues et autres auteurs. C’est un volet
qui occupe 81 pages réparties en plusieurs chapitres à savoir : Etiologie de
l’échinococcose, pathogénie, aspect clinique, étude épidémiologique, méthodes de
diagnostique, traitement, contrôle et prévention.
La deuxième partie qui est la partie des recherches personnelles. Elle est répartie
en plusieurs chapitres, dont le premier concerne l’étude de la situation épidémiologique
de l’hydatidose en Algérie, ou nous avons évalué la dynamique de l’echinococcose par le
contrôle au niveau des abattoirs de 19 wilayas des quatre coins du pays (Nord, Sud, Est,
Ouest). L’objectif est de faire une enquête nationale sur la maladie hydatique, et d’établir
une situation actuelle et récente dans le temps et dans l’espace. Et aussi faire le calcul des
taux des prévalences chez les animaux représentant l’hôte intermédiaire, toute en sachant
iii
que plus de 40% d’animaux en espèce bovine, ovine et caprine et même cameline sont
abattus clandestinement, et échappent ainsi à l’inspection vétérinaire.
Les prévalences de l’échinococcose spécialement dans la wilaya de Djelfa ont été
abordées dans le deuxième chapitre dans le but d’évaluer les taux d’atteintes par le kyste
hydatique chez des bovins, ovins, et caprin de cette région, par la recherche des kystes et
l’appréciation des caractéristiques morphologiques.
Le troisième chapitre traite la fertilité et l’aspect morphostructurale des kystes
d’Echinococcus granulosus. Le diagnostic direct de l’hydatidose est basé sur l’examen
post mortem des animaux (représentant l’hote intermédiaire) qui permet aussi de
déterminer la forme et la consistance des kystes et leur de fertilité, par la recherche des
protoscolex dans le liquide hydatique.
L’histopathologie des kystes hydatiques chez le dromadaire est l’objectif du
quatrième chapitre. Il a comme intérêt de déterminer les différentes couches composantes
d’un kyste hydatique hépatique et pulmonaire. Il vise à identifier les particularités
pathologiques de la forme larvaire d'Echinococcus granulosus avec ses effets sur les
tissus et les organes du dromadaire.
Il s’agit d’une investigation morphologique ciblant l’action pathogène des larves
dans l'évolution de l'échinococcose, et reflétant la structure complexe de ce dernier qui se
définie par le concept du kyste hydatique, c'est-à-dire la liaison entre parasite et tissu
parasité.
Le cinquième chapitre traite le rôle de la biochimie sanguine dans la pathogénie
et le diagnostic de l’hydatidose chez des ruminants positifs en nécropsie. Le but est de
constaté les modifications lésionnelles survenues sur le foie, et pouvoir les comparer
aux valeurs biochimiques sanguines usuelles normales par tranche d’âge d’animaux. Il
met aussi en évidence la relation entre la maladie hydatique et la diversité raciale avec
les changements des valeurs biochimiques, pour aboutir à une comparaison entre un bilan
biochimique sanguin normal et celui d’animaux positive en nécropsie (post mortem) pour
les espèces bovine, ovine, caprine et cameline.
Dans les deux derniers chapitres, des études immunologiques sont effectués pour
le diagnostic de l’échinococcose chez les hôtes intermédiaires et définitif, on utilisant des
kits Echinotest, et kits copro-ELISA. Un test immunologique a été réalisé on utilisant des
iv
sérums sanguins prévenant des bovins, ovins, caprins, par la technique ELISA, pour
comparer les résultats avec ceux obtenus en nécropsie, et évaluer la sensibilité de cette
méthode dans le diagnostic précoce de l’hydatidose chez les hôtes intermédiaires. La
situation épidémiologique a été évaluée dans différents types de chiens (errants, berger
ovin, chiens du milieu rurale) en utilisant des excréments de chiens dilués et testés par la
méthode copro-ELISA.
Les résultats obtenus dans les différents chapitres sont comme suit :
Afin de mener une bonne enquête nationale sur la situation de l’hydatidose en
Algérie, nous avons procédé par tout les moyens de communication et avec l’aide du
ministère de l’agriculture et du développement rural pour connaitre la situation des
abattages des viandes rouges et des saisies d’organes pour motif d’échinococcose au
niveau de 19 wilaya de l’Algérie. Le travail a duré quatre années (2007-2010), les
résultats étaient importants en matière de prévalence des organes foie et poumon pour les
espèces bovine, ovine et caprine. Avec une intermittence des résultats, la plus part des
taux ont dépassé 50% d’atteinte en terme de moyenne.
Nous avons prie la wilaya de Djelfa comme échantillon d’étude localisée au
centre de l’Algérie. C’est une région steppique où les résultats ont montré une dominance
du kyste hydatique chez le bovin en premier lieu, ensuite l’espèce ovine et enfin le
caprin, avec aussi la dominance du sexe femelle sur le male, due principalement au taux
important d’abattage des femelles que les males, avec l’atteinte des animaux les plus âgés
par rapport à ceux moins âgés.
Une étude morphostructurale a concerné 2367 carcasses dont (350 bovins, 1230
ovins et 787 caprins) dans trois localités ou nous avons déduit que le taux de fertilité était
supérieur chez l’espèce ovine ensuite l’espèce bovine et en dernier lieu le caprin alors
que les kystes stériles ont concerné le caprin ensuite l’ovin et le bovin, cependant les
kystes calcifiés étaient beaucoup plus localisés chez l’espèce bovine.
La forme unikystique unilobulaire était la plus dominante chez pratiquement
toutes les espèces abattues. La forme unilobulaire polykystique existait avec des
consistances caséeuses et calcifiées qui étaient dépendante de l’âge de l’animal.
L’étude des particularités pathologiques de la forme larvaire d' Echinococcus
granulosus (kyste hydatique), sur des fragments d’organes des dromadaires sont réalisés
v
par une étude histopathologique. L’observation microscopique a montré que tous les
tissus présentaient des signes de réaction entre l'hôte (cellulaire) et kyste, marqué par une
infiltration de la couche adventice avec les neutrophiles, les éosinophiles et les
plasmocytes. En plus de cette infiltration inflammatoire, un espace entre le tissu du foie
et la paroi du kyste contenait les fibroblastes et les cellules mésenchymateuses
désorganisés.
La membrane cuticulaire stimule la prolifération importante du système
monocyte-macrophage de l’adventice qui est représenté par des cellules géantes
multinucléées et epithéloides sur de grandes surfaces. La couche des cellules epithéloides
est répartie uniformément autour de la circonférence kystique. Son épaisseur se retrouve
également dans des zones limitées par des cellules nécrotiques. Hiris A., (1989), cité par
C B Ould Ahmed.,et al (2010).
Les résultats obtenus en biochimie sanguine chez les ruminants, nous laisse
déduire que :
- La catégorie des jeunes animaux sont moins sensibles à l’hydatidose
- La catégorie des animaux adultes sont sensibles à l’Echinococcus granulosus
- La catégorie des animaux les plus âgés sont très susceptibles au kyste hydatique ce qui
est illustré par les atteintes hépatiques, stéatose hépatique et les cholestases, justifiés par
l’augmentation des ASAT, et GGT, protéines totaux, et la bilirubine.
Et donc l’analyse biochimique reste insuffisante pour avoir un diagnostic de
certitude sur le kyste hydatique surtout pour l’espèce cameline qui est un animal à
tempérament variable et dépend de plusieurs facteurs.
Le test ELISA réalisé sur 42 sérums bovins et 46 ovins et 92 caprins a montré
Une compatibilité entre la nécropsie et le test ELISA pour 35 bovins (57,14%, cas
positif, pour les deux tests, et 21,42% des cas négatifs pour les deux tests), 06 mouton
2,17% vrai positif et 10,87% vrai négatif dans les deux tests), 06 chèvres (5,43% vrai
positifs et 57,60% vrai négatif dans les deux tests). Résultats d’incompatibilité ont été
obtenus dans 7 cas chez le bovin (4,76% de faux positifs et 16,66% de faux négatifs), 41
ovins (86,95% faux positifs et 0% faux négatifs), 40 cas chez les caprins (26,08% de faux
positifs et 10,86% de faux négatifs)
vi
Le chien est l’agent responsable de la transmission de l’échinococcose kystique
chez les espèces du cycle évolutif de cette parasitose. Le diagnostic de l’hydatidose est
réalisé on utilisant des kits ELISA, réalisés sur les fèces des chiens (copro-ELISA).
Ces kits sont devenus très utilisés dans les pays européens, contrairement au pays
africains, toutefois ces tests ont des inconvénients concernant les méthodes de diagnostic
communs pour l’infestation par Echinococcus granulosus et Echinococcus multilocularis
canine, ils manquent de précision concernant l’espèce infectante.
Les anciennes techniques de diagnostic de l’hydatidose sont presque abandonnées
par les chercheurs suite à leur grand risque de contamination du manipulateur. Nous
citons la méthode de purgation avec le bromydrate d’arécoline, technique à haut risque de
diffusion par les oncosphères dans l’environnement, et l’autopsie des animaux. De
nombreuses recherches ont été réalisé à cet égard pour obtenir des méthodes plus fiables
avec moins de dommages et au vivant de l’animal.
Nos résultats en matière d’échinococcose intestinale par le test copro-ELISA sont :
de 13,04% chez les chiens errants, 23,07% pour les chiens de troupeau de mouton et
35,13%pour ceux des zones rurales.
De ce fait la connaissance des données épidémiologiques sur l’infestation à
Echinococcus chez les chiens est très importante pour le développement du programme
de contrôle dans la prévention de l'échinococcose kystique chez les humains et d'autres
mammifères hôtes intermédiaires Cosoroabă, (2005); Şuteu, (1996), Şuteu, (1998),
Dulceanu, (1995) ; Dulceanu et al, (2000).
Cette méthode de diagnostic est devenu, au fil des ans, de plus en plus utilisée
dans les projets épidémiologiques à grande échelle Eckert et al., (2001), par contre elle
n’est pas encore appliquée en Algérie pour identification de l’espèce Echinococcus chez
les chiens.
vii
Bibliographie sélective
1- Aissam Elmaataoui, Elmostafa Miss, Hicham Esselmani, Omar Derfoufi, Mostafa
Sabri, Mohamed Lyacoubi, Sarra Aoufi, (2010) Hydatidose vertébrale : à propos d'une
observation, annales de biologie clinique Volume 68, Numéro 6, 729-32.
2- C.B. Ould Ahmed Salem; F. Schneegans; J.Y. Chollet, M.H. Jemli, (2010) Prévalence
et aspects lésionnels de l’hydatidose chez les dromadaires et les petits ruminants au
nord de la Mauritanie, Revue Élev. Méd. vét. Pays trop.,63 (1-2) : 23-28
3- Cosoroabă I, (2005). Zoonoze parazitare, Ed. First Artpress, Timişoara, 158-188.
4- Dar et Alkarmi T. (1997). “Public health aspects of cystic echinococcosis in the Arab
countries”. Acta Tropica, 67: 125-31.
5- Dulceanu N, (1995) Parasitologie véterinaire. Vol.3, Edit. Moldova, Iaşi.
6- Dulceanu N, Terinte C, Mitrea L.I, Polcovnicu C, (2000). Dictionnaire encyclopédique
de la parasitologie. Modifier. Académie roumaine, Bucarest.
7- Eckert J, Gemmel M.A, Meslin F.X.
& Pawlowski Z.S. (2001).WHO/OIE
Manual on Echinococcosis in Humans and Animals: a Public Health Problem of
Global Concern. World Organization for Animal Health (OIE), Paris, France, pp 265.
8- Hiris A, Heath D.D, Lawrence J.B, Shaw R.J, (1989). Echinococcus granulosus
ultrastructure of epithelial changes during the first eight days of metacestode
development in vitro. Int. J. Parasitol., 19: 221-229.
9- Kumaratilake, L.M. and R.C. Thompson, (1982). A review of the taxonomy and
speciation of the genus Echinococcus Rudolphi 1801. Z Parasitenkd,68(2): p. 121-46.
10- Sadjjadi SM (2006) Present situation of echinococcosis in the Middle East and
Arabic North Africa. Parasitol Int 55(Suppl): S197–S202.
11- Şuteu I, (1996). Zoo parasitologie et l'environnement. Modifier. Genesis, ClujNapoca.
12- Şuteu I, (1998). Zoo parasitologie et les hôtes parasites. Cluj-Napoca "Genesis Tipo".
245-246.
viii
UNIVERSITATEA DE ŞTIINŢE AGRICOLE ŞI MEDICINĂ VETERINARĂ
CLUJ-NAPOCA
ŞCOALA DOCTORALĂ
ABSTRACT OF THE PHD
THESIS
ECHINOCOCCUS GRANULOSUS: ETIOLOGY,
EPIDEMIOLOGY, DIAGNOSIS AND CONTROL
OF DISEASE IN WILAYA DJELFA (ALGERIA)
PhD Student
Scientifical coordinator
HAMRAT. Khadidja
Titular member ASAS
Cluj-Napoca
2013
ix
The summary of the PhD thesis
The history of hydatid disease began in the 4th century BC with
Hippocrates, who was the first who discovered abdominal hydatid cyst in one of his
patients. Galen in the 2nd century BC cyst observed similarity between the cysts
identified in humans with those identified in to animals. Wepfer Johann (1620-1695)
describes various parasitic forms and associate animal species with evolutionary cycles of
each species of Echinococcus spp. In 1786, Batsch (1761-1802) is the one who gives the
name of the species Echinococcus granulosus.
Karl Leuckart (1822-1898) and Karl Diesing (1800-1867) identified two species of
the genus Echinococcus, E. multilocularis and E. oligarthrus respectively. In 1972,
Rausch and Bernstein awarded the rank of species E. granulosus, E. multilocularis, E.
vogeli and E. oligarthrus. Kumaratilake, LM and RC Thompson (1982).
Parasitic cycle usually takes place between dogs as definitive hosts and
herbivorous and omnivorous mammals as intermediate hosts, but the disease can also
affect people as accidental intermediate hosts. This anthropozoonosis is cosmopolitan,
but has a higher frequency in countries where the traditional raising of sheep herding
dogs framed is in practice (Mediterranean, Canada, South America, Eastern Europe,
Australia).
The prevalence of hydatidosis is higher in North Africa. Dar et Alkarmi (1997)
Eckert et al, (2001). Sadjjadi, (2006) and Algeria. Because were not implemented
monitoring programs to assess the rate of disease progression in livestock it’s not know
the actual prevalence and incidence or actual impact of disease on human health.
The ruminants (cattle, sheep and goats) can be easily infested by ingesting
oncospheres from carnivores feces. Feces containing an increased number of oncospheres
of Echinococcus spp. can be spread into the environment through wind, animals and birds
at great distances. E. multilocularis and E. granulosus species are dominant in many parts
of the world, especially in Europe and Africa, Algeria beeing one of the endemic
countries.
All researches have brought good results in terms of disease diagnosis. Many
diagnostic techniques have been implemented especially in the last century, especially
ELISA, PCR, ultrasound, Western Blot, etc., which have been used in many parts of the
world especially in national surveillance programs, except some countries in Africa
North (Morocco and Tunisia).
The diagnosis of cystic echinococcosis in the human population is difficult to
establish because it is based on several criteria such as epidemiological, clinical and
radiological situation. Treatment is primarily surgical, and the prognosis is unfavorable.
Aissam E et al., (2010).
The research undertaken during the 5 years of study, between 2007-2011, in
several regions of Algeria, was performed to determine the status of etiology,
epidemiology, diagnostic methods and treatment for the specie Echinococcus granulosus.
The aim of this thesis was the implementation of new diagnostic methods for
hydatidosis/echinococcosis in definitive and intermediate hosts involved in the life cycle
of the genus Echinococcus.
The PhD thesis is divided into two major parts. The first part contains a
bibliographic study and its purpose and details hydatid disease. It is composed of 75
pages divided into several chapters: echinococcosis etiology, pathogenesis, clinical,
epidemiological, diagnostic methods, treatment, control and prevention.
The second part, the own researches, is divided into several chapters. The first
chapter includes the study of the epidemiological situation of hydatidosis in Algeria. It
was evaluated the dynamic of echinococcosis in Algeria during by carrying out the
slaughter of 19 Wilaya of the country (North, South, East and West). A national
surveillance of hydatidosis was made in order to establish the current situation and
inclusion of the parasite in time and space. It was calculated the prevalence of cystic
echinococcosis in intermediate hosts, indicating that more than 40% of animals (cattle,
sheep, goats and camels) can escape the slaughterhouse inspection due to illegal
slaughter.
The prevalence of hydatid disease in the province of Djelfa is studied in the
second chapter. It was monitored epidemiological situation of cystic echinococcosis in
cattle, sheep and goats in this region by determining the presence of hydatid cysts and
evaluation their morphological characteristics.
The third chapter traits the fertility and morpho-structural aspects of the
Echinococcus granulosus cysts. The direct diagnostic techniques for hydatidosis is based
on the postmortem evaluation of animal (intermediate hosts), methods that can determine
the form and consistency of cysts and their degree of fertility by examining the hydatid
fluid to highlight the protoscolecs.
The histopathological characteristics evaluation of hydatid cysts from dromedaries
was the objective of the fourth chapter. Membrane components were evaluated from
pulmonary and hepatic hydatid cysts for identifying pathological features of
Echinococcus granulosus larval stages of the species and their effects on tissues and
organs.
The fifth chapter focuses on blood biochemical studies in ruminants. His purpose
was to assess the changes occurring in infected animals liver with hydatid cyst and
comparing these with normal tissues, considering the age of the animals. It were
evaluated biochemical changes in animals infected with hydatid cysts and in those
without cysts, depending on the species in cattle, sheep, goats and dromedaries.
In the two last chapters, immunological studies are made for the diagnostic of
echinococcosis in intermediate hosts using Echinotest and also coprological studies for
highlighting the coproantigens (copro-ELISA). An immunological testing was performed
using serum derived from bovine, sheep and goats by ELISA to compare the results with
those obtained at necropsy and evaluation of sensitivity of this method in early diagnosis
of hydatidosis in intermediate hosts. The epidemiological situation has been evaluated in
various types of dogs (stray dogs, guard dogs to herd sheep and dogs from rural areas)
using copro-ELISA method.
The results obtained for the different chapters are as follows:
In order to assess the epidemiological situation of hydatidosis in Algeria it has
been made a general study by the Ministry of Agriculture and Rural Development using
communications means and performing exams in 19 Wilaya slaughterhouse from the
country. The researches have been made in the past four years (2007-2010), significant
results were obtained by statistically recorded prevalence in cattle, sheep and goats, most
having a value exceeding 50%.
As a reference area in the study it was considered Djelfa region located in the
center of Algeria, in the steppe region. The results showed that the prevalence of
hydatidosis was higher for cattle compared to sheep and goats, and females were more
affected than males due to their prevalence at slaughter and also adult animals are more
infected than young.
A morphostructural study was conducted for hydatic cysts collected from 2367
cases (350 cattle, 1230 sheep and 787 goats) from three locations in the region.
Following the examinations we noted that cysts fertility rate was higher in sheep
compared to cattle and goats, and calcified cysts were found predominantly in cattle. The
unilobular unicystic form was dominant in all species investigated in the slaughterhouses.
Unilobular polycyst form had in generally a caseous and calcified consistency and it was
dependent on the age of animals.
The study of pathological features of larval stages of Echinococcus granulosus
(hydatid cyst) and their effects on organs and tissues from camel species was performed
by histopathological exam. Microscopic examination revealed that in the affected tissues
it was present a defense reaction of the host due to the development of cysts adjacent
adventitia area expressed by neutrophils, eosinophil and plasma cells infiltration.
Inflammatory infiltrate of liver tissue and cyst wall also contained fibroblasts and
disintegrated mesenchymal cells. Cystic membrane generates significant proliferation of
monocytes macrophages represented by epithelioid and multinucleated giant cells
distributed over large areas in the periphery of the cyst. The structure of the surrounding
area contained also cells in necrobiosis phase or cellular debris. Histological study of
hydatid cysts from camelina species revealed the presence of a thick cuticle on the
outside, a membrane capsule proligeră germination evident inside the cyst. Hiris A,
(1989), cited by C B Ould Ahmed, S et al. (2010).
For the blood biochemical studies performed in bovine animals, sheep, goats and
camels it was noted that youth camels are less sensitive than adults for
cystic
echinococcosis, as shown by the massive destructions in the liver, manifested by hepatic
steatosis and cholestasis that led to increased plasma levels of ASAT, GGT, total protein
and bilirubin. Biochemical determinations are insufficient for diagnosis of hydatidosis
especially for camels which are characterized by a variable temperament depending on
various factors.
ELISA test performed on a total of 42 cattle, 46 sheep and 92 goats showed a
necropsy compatibility for 35 cattle (57.14% bovine positive by both tests and 21.42%
also negative by both tests), 6 sheep (2.17% true positive and 10.87% true negative in
both tests) and 6 goats (5.43% true positive and 57.60% true negative in both tests).
Incompatibility results were obtained in 7 cases in cattle (4.76% false positives and
16.66% false negative), 41 cases in sheep (86.95% false positive and 0% false negative)
and 40 cases in goats (26.08% false positive and 10.86% false negative).
The carnivores are the main hosts responsible for the transmission of
echinococcosis in intermediate hosts represented mainly by ruminants (cattle, sheep,
goats and camels). Over the time diagnostics of intestinal echinococcosis have been
greatly developed in some countries in contrast with countries from Africa where the
diagnosis is still based on traditional methods, which have the disadvantage that they are
nonspecific. The techniques of purgation with hydrobromide arecoline is no longer used
in research because the risks of spreading oncospheres to the environment is major and
also it is possible the contamination of personnel handling the samples. Over the years it
was tried the obtaining of some diagnostic techniques that have minimal impact on the
health of the animals.
In this study it was obtained a prevalence for intestinal echinococcosis of 13.04%
in stray dogs, 23.07% for dogs from flocks of sheep and 35.13% for those from rural
areas.
Knowing the epidemiological status of Echinococcus granulosus infestation in
dogs is very important for the development of effective programs for prevention and
control of cystic echinococcosis especially human population and other mammalian
intermediate hosts. Cosoroabă, (2005)(; Şuteu (1996); Şuteu, (1998); Dulceanu (1995);
Dulceanu and al. (2000).
Selective bibliography
Sabri, Mohamed Lyacoubi, Sarra Aoufi, (2010) Hydatidose vertébrale : à propos d'une
2- C.B. Ould Ahmed Salem; F. Schneegans; J.Y. Chollet, M.H. Jemli, (2010) Prévalence
nord de la Mauritanie, Revue Élev. Méd. vét. Pays trop.,63 (1-2) : 23-28
3- Cosoroabă I, (2005). Zoonoze parazitare, Ed. First Artpress, Timişoara, 158-188.
4- Dar et Alkarmi T. (1997). “Public health aspects of cystic echinococcosis in the Arab
countries”. Acta Tropica, 67: 125-31.
5- Dulceanu N, (1995) Parasitologie véterinaire. Vol.3, Edit. Moldova, Iaşi.
de la parasitologie. Modifier. Académie roumaine, Bucarest.
7- Eckert J, Gemmel M.A, Meslin F.X.
& Pawlowski Z.S. (2001).WHO/OIE
Manual on Echinococcosis in Humans and Animals: a Public Health Problem of
Global Concern. World Organization for Animal Health (OIE), Paris, France, pp 265.
speciation of the genus Echinococcus Rudolphi 1801. Z Parasitenkd,68(2): p. 121-46.
10- Sadjjadi SM (2006) Present situation of echinococcosis in the Middle East and
Arabic North Africa. Parasitol Int 55(Suppl): S197–S202.
245-246.
UNIVERSITATEA DE ŞTIINŢE AGRICOLEŞI MEDICINĂ VETERINARĂ
CLUJ-NAPOCA
ŞCOALA DOCTORALĂ
REZUMATUL TEZEI DE
DOCTORAT
ECHINOCOCCUS GRANULOSUS: ETIOLOGIA,
EPIDEMIOLOGIA, DIAGNOSTICUL ŞI
CONTROLUL BOLII ÎN WILAYA DJELFA
(ALGERIA)
Doctorand
Conducătorştiinţific
HAMRAT Khadidja
Membru titular ASAS
Cluj-Napoca
2013
Rezumatultezei de doctorat
Istoria bolii hidatice a început în secolul 4 î.Hr. cu Hipocrate, care a fost primul
care a descoperit chistul hidatic abdominal la unul dintre pacienţii săi. Galen, în secolul 2
î.Hr. a remarcat similitudinea chisturilor identificate la om cu cele de la animale. Wepfer
Johann (1620-1695) descrie diferite forme parazitare şi face asocierea speciilor de animale
care le adăpostesc, precum şi ciclurile evolutive ale fiecărei specii de Echinococcus spp. În
anul 1786 Batsch (1761-1802) este cel care dă numele speciei Echinococcusgranulosus.
Karl Leuckart (1822-1898) şi Karl Diesing (1800-1867) au identificat încă două
specii ale genului Echinococcus, respectiv E. multilocularis şi E. oligarthrus. În 1972,
Rausch şi Bernstein au atribuit la rangul de specii E. granulosus, E. multilocularis, E.
oligarthrus şi E. vogeli(Kumaratilake şi Thompson, 1982).
Ciclul parazitar se desfăşoară de obicei între câini ca şi gazde definitive şi
mamiferele ierbivore şi omnivore ca şi gazde intermediare, dar boala poate afecta, de
asemenea, oameni ca şi gazde intermediare accidentale. Acestă anthropozoonoză este
cosmopolită, dar are o frecvență mai crescută în țările în care încă se practică creşterea
tradiţională a ovinelor în turme încadrate de câini ciobaneşti (bazinul mediteranean,
Canada, America de Sud, Europa de Est, Australia).
Prevalenţa
hidatidozei
este
crescută
în
Africa
de
Nord,
inclusiv
în
Algeria(Alkarmi,1997; Eckertşi col., 2001;Sadjjadi, 2006). Datorită faptului că nu au fost
implementate programe de supraveghere în vederea evaluării ratei de progresie a bolii în
efectivele de animale nu se ştie prevalenţa şi incidenţa reală a acesteia şi nici impactul real
al bolii asupra stării de sănătate umană.
Rumegătoarele (bovinele, ovinele şi caprinele) se pot infesta uşor prin ingerarea
oncosferelor eliberate prin intermediul fecalelor carnivorelor. Fecalele care conţin un
număr crescut de oncosfere de Echinococcusspp. pot fi răspândite în mediu prin
intermediul vântului, animalelor şi păsărilor la distanţe mari. Speciile E. multilocularis şi
E.granulosus sunt dominante în multe regiuni ale lumii, dar mai ales în Europa şi Africa,
Algeria făcând parte dintre ţările endemice.
Toate cercetările efectuate au adus rezultate foarte bune în ceea ce priveşte
diagnosticul bolii. Multe tehnici de diagnostic au fost implementate mai ales în ultimul
secol, mai ales testele ELISA, PCR, ecografia, Western Blot, etc, care au fost utilizate în
multe regiuni ale lumii mai ales în programe naţionale de supraveghere, excepţie făcând
unele ţări din Africa de Nord (Maroc şi Tunisia).
Diagnosticul echinococozei chistice la populaţia umană este dificil de stabilit
datorită faptului că se bazează pe mai multe criterii cum ar fi situaţia epidemiologică,
examenul clinic şi radiologic. Tratamentul este în principal chirurgical, iar prognosticul
este defavorabil(Aissamşi col., 2010).
Scopul acestei teze de doctorat a fost implementarea unor noi metode de diagnostic
a hidatidozei/echinococozei la gazde intermediare şi definitive, care sunt implicate în ciclul
biologic al speciilor genului Echinococcus.
Cercetărileefectuate pe durata a 5 ani de studiu, în perioada 2007-2011, în mai multe
regiuni din Algeria, au avut ca scop stabilirea statusului etiologic, epidemiologic, a
metodelor de diagnostic şi tratament în ceea ce priveşte specia Echinococcusgranulosus.
Teza de doctorat este structurată în două părţi importante. Prima parte cuprinde
studiul bibliografic şi are ca şi scop detalierea bolii hidatice. Aceasta este structurată în 75
de pagini împărțite în mai multe capitole: etiologia, patogeneza, aspectul clinic, studii
epidemiologice, metodele de diagnostic, tratament, control şi de prevenţie în echinococoză.
A doua parte, cea de cercetări proprii, este împărțită în mai multe capitole. Primul
capitol cuprinde studiul privind situația epidemiologică a hidatidozei în Algeria. A fost
evaluată dinamica echinococozei prin efectuarea de controale în abatoarele din 19 wilaya
ale ţării (Nord, Sud, Est şi Vest). A fost efectuată o supraveghere la nivel naţional a
hidatidozei, în vederea stabilirii situaţiei curente a parazitozei şi încadrarea acesteia în timp
şi spaţiu. A fost calculată rata prevalenţei echinococozei chistice la gazdele intermediare,
cu precizarea că mai mult de 40% dintre animale (bovine, ovine, caprine şi camelide) pot
scăpa inspecţiei de abator datorită sacrificărilor clandestine.
Prevalența bolii hidatice în provincia Djelfaa fost studiată în al doilea capitol. În
acest capitol a fost monitorizată situaţia epidemiologică a echinococozei chistice la bovine,
ovine şi caprine în regiunea Djelfa prin determinarea prezenţei chisturilor şi evaluarea
caracteristicilor morfologice ale acestora.
Al treilea capitol studiazăfertilitatea şi aspectele morfostructurale asupra chiștilorde
Echinococcusgranulosus.Tehnicile directe în vederea stabilirii diagnosticului de hidatidoză
se bazează pe evaluarea postmortem a animalelor gazde intermediare, metode prin care se
poate stabili forma şi consistenţa chisturilor şi gradul de fertilitate al acestora prin
examinarea lichidului hidatic în vederea punerii în evidenţă a protoscolecşilor.
Evaluarea caracterelor histopatologice ale chisturilor hidatice provenite de la
dromaderi a constituit obiectivul celui de-al patrulea capitol. Au fost evaluate
componentele membranelor chisturilor hidatice pulmonare şi hepatice în vederea
identificării
particularităţilor
structurale
ale
stadiilor
larvare
ale
speciei
Echinococcusgranulosusşi efectele acestora asupra ţesuturilor şi organelor.
Cel de-al cinceleacapitol se axează pe studiile biochimice ale sângelui la
rumegătoare.Scopul celui de-al cincelea capitol al părţii de cercetări proprii a fost evaluarea
modificărilor hepatice apărute la animalele infestate cu chisturi hidatice şi compararea
acestor ţesuri cu cele normale, luând în calcul vârsta animalelor. Au fost evaluate
comparativ modificările constantelor biochimice la animalele infestate cu chisturi hidatice
şi cele fără chisturi, în funcţie de specie, la bovine, ovine, caprine şi dromaderi.
Înultimeledouă
capitole
au
fostefectuatestudiiserologicepentru
a
diagnosticaechinococoza la gazdeintermediare.A fost efectuată o testare imunologică a
serului provenit de la speciile bovine, ovine şi caprine utilizând metoda ELISA în vederea
comparării rezultatelor cu cele obţinute la examenul necropsic şi evaluarea sensibilităţii
acestei metode în diagnosticul precoce al hidatidozei la gazde intermediare.
De asemenea a fost evaluată situaţia epidemiologică la diferite categorii de câini
(câini fără stăpân, câini de pază de la turmele de ovine şi câini proveniţi din mediul rural)
utilizând metoda copro-ELISA.
În vederea evaluării situaţiei epidemiologice a hidatidozei în Algeria, a fost efectuat
un studiu general cu ajutorul Ministerului Agriculturii şi Dezvoltării Rurale utilizând
mijloace de comunicaţii şi efectuând examene de abator în 19 wilaya ale ţării.
Cercetările au fost efectuate pe perioada a patru ani (2007-2010), fiind obţinute
rezultate semnificative din punct de vedere statistic ale prevalenţelor înregistrate la bovine,
ovine şi caprine, majoritatea având o valoare de peste 50%.
Ca şi zonă de referinţă a fost luată în studiu regiunea Djelfa, situată în centrul
Algeriei, în regiunea de stepă. Rezultatele obţinute au demonstrat faptul că prevalenţa
hidatidozei a fost mai mare în cazul bovinelor, comparativ cu ovinele şi caprinele, iar
femelele au fost mult mai afectate decât masculii datorită preponderenţei acestora la
sacrificare şi de asemenea animalele adulte sunt mai expuse la infecție,comparativ cu
tineretul.
A fost efectuat un studiumorfostructural al chisturilor hidatice recoltate de la 2367
de carcase (350 bovine, 1230 ovine şi 787 caprine) provenite din trei locaţii ale regiunii. În
urma examinărilor efectuate s-a observat faptul că rata fertilităţii chisturilor a fost mai mare
la ovine comparative cu bovinele şi caprinele, iar chisturile calcificate au fost identificate
preponderant la bovine.
Chistul unic cu formăunilobulară a fost dominant la toate speciile investigate la
examenul de abator. Chisturile polilobulare au avut în general consistenţă cazeoasă şi
calcificatădirect proporţional cu vârsta animalelor.
Studiul particularităţilor patologice ale stadiilor larvare de Echinococcusgranulosus
(chistul hidatic) şi efectele acestora asupra organelor şi ţesuturilor speciei cameline a fost
efectuat prin examen histopatologic. Examenul microscopic a relevat faptul că în ţesuturile
afectate a fost prezentă o reacţie de apărare a gazdei la zona limitrofă dezvoltării chisturilor
experimată prin infiltrarea zonei adventiţia cu neutrofile, eozinofile şi plasmocite.
Infiltratul inflamator dintre ţesutul hepatic şi peretele chistului a conţinut de asemenea
fibroblaste şi celule mezenchimale dezintegrate. Membrana chistică generează proliferarea
importantă a monocitelor macrofage reprezentate de celule gigante multinucleate şi
epiteloide distribuite pe suprafeţe mari la circumferinţa chistului. În structura zonei
limitrofe se mai întâlnesc şi celule în faza de necrobioză sau detritusuri celulare.
Studiul histologic al chisturilor hidatice de la specia camelină a pus în evidenţă
prezenţa unei cuticule groase la exterior, o membrană germinativă evidentă şi capsula
proligeră la interiorul chistului(Hiris,1989, citat de Ould Ahmed şi col., 2010).
În cazul studiului biochimic efectuat la speciile bovine, ovine, caprine şi camelide sa observat faptul că tineretul camelin este mai puţin sensibil la echinococoza chistică
comparativ cu adultele, fapt ilustrat de destrucţiile masive la nivel hepatic, manifestate prin
steatoză hepatică şi colestază ce au dus la creşterea nivelurilor plasmatice ale ASAT, GGT,
proteinelor totale şi bilirubinei. Determinările biochimice sunt insuficiente pentru stabilirea
diagnosticului de hidatidoză mai ales la specia camelină, care este caracterizată de un
temperament variabil în funcţie de diverşi factori.
Testarea ELISA efectuată pe un număr de 42 de bovine, 46 de ovine şi 92 de
caprine a arătat o compatibilitate cu examenul necropsic la 35 de bovine (57.14% bovine
pozitive prin ambele testări şi 21,42% negative de asemenea prin ambele testări), 6 ovine
(2.17% adevărat pozitive şi 10.87% adevărat negative la ambele testări) şi pentru 6 caprine
(5,43% adevărat pozitive şi 57,60% adevărat negative la ambele testări). Rezultate de
incompatibilitate au fost obţinute în 7 cazuri la bovine (4,76% fals pozitive şi 16,66% fals
negative), 41 de cazuri la ovine (86,95% fals pozitiv şi 0% fals negative) şi 40 de cazuri la
caprine (26,08% fals pozitiv şi 10,86% fals negative).
Carnivorele reprezintă principalele gazde responsabile pentru transmiterea
echinococozei la gazdele intermediare reprezentate preponderent de către rumegătoare
(bovine, ovine, caprine şi cameline). De-a lungul timpului metodele de diagnostic ale
echinococozei intestinale s-au dezvoltat foarte mult în ţările dezvoltate în contrast cu ţările
din Africa, unde diagnosticul încă se bazează pe metodele clasice, care au dezavantajul că
sunt nespecifice.
Tehnica de purgaţie cu arecolinăbromhidrică nu mai este folosită în cercetare
datorită faptului că riscurile de răspândire aleoncosferelor în mediul înconjurătorşi riscurile
de contaminare a personalului care manipulează probele sunt majore. De-a lungul anilor sa încercat obţinerea unor tehnici de diagnostic care au un impact minim asupra stării de
sănătate a animalelor.
În studiul se faţă s-a obţinut o prevalenţă de 13.04% a echinococozei intestinale la
câinii vagabonzi, 23.07% pentru câinii de la turmele de ovine şi 35.13% pentru cei
proveniţi din mediul rural.
Cunoaşterea statusului epidemiologic al infestaţiei cu Echinococcusgranulosus la
câini este foarte importantă pentru dezvoltarea unor programe eficiente de prevenţie şi
control mai ales a echinococozei chistice la populaţia umană şi alte gazde intermediare
mamifere (Cosoroabă, 2005; Şuteu, 1996; 1998;Dulceanu, 1995; Dulceanu şi col., 2000).
Bibliografie selectivă
Sabri, Mohamed Lyacoubi, SarraAoufi, (2010). Hydatidose vertébrale : à propos d'une
2- Ould Ahmed Salem C.B., F. Schneegans, J.Y. Chollet, M.H. Jemli, (2010). Prévalence
nord de la Mauritanie, Revue Élev. Méd. vét. Pays trop., 63 (1-2) : 23-28.
3- Cosoroabă I, (2005). Zoonozeparazitare, Ed. First Artpress, Timişoara, 158-188.
4- Dar et Alkarmi T., (1997). Public health aspects of cystic echinococcosis in the Arab
countries. ActaTropica, 67: 125-31.
5- Dulceanu N, (1995). Parasitologie véterinaire. Vol.3, Edit. Moldova, Iaşi.
de la parasitologie. Modifier. Académieroumaine, Bucarest.
7- Eckert J, Gemmel M.A, Meslin F.X., Pawlowski Z.S, (2001). WHO/OIE Manual on
Echinococcosis in Humans and Animals: a Public Health Problem of Global Concern.
World Organization for Animal Health (OIE), Paris, France, pp 265.
speciation of the genus EchinococcusRudolphi 1801. Z Parasitenkd,68(2): p. 121-46.
10- Sadjjadi SM, (2006). Present situation of echinococcosis in the Middle East and
Arabic North Africa. ParasitolInt 55(Suppl): S197–S202.
245-246.

Resumé 1 - USAMV Cluj

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