HPLC HP Série 1050

Pôle Chimie de l'AJIR
HPLC HP Série 1050
Indications concernant l’appareil
Marque : HEWLETT PACKARD Série 1050
Logiciel utilisé : AZUR Version 4.6.0.0
Matériel inclus à l’appareil :
- Echantillonneur automatique avec 21 positions
- Pompes quaternaires HPLC 79852A
- Détecteur de longueurs d’onde UV visible 79853
Autres pompes, détecteurs et échantillonneurs disponibles
(Voir http://www.gmi-inc.com/Products/hp1050.htm pour les détails)
Indications sur la sécurité
Conditions opératoires :
- Produits : Méthanol (Nocif et Inflammable), Acétonitrile (Toxique et Inflammable)
- Pression : Air reconstitué 4,6 bars, Hélium 4,4 bars
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Pôle Chimie de l’AJIR
Risques :
- Fuite de gaz (Hélium)
- Fuite de solvants
- Choc électrique
Contrôles à effectuer avant utilisation :
- Vérifier que la bouteille de récupération des solvants n’est pas pleine.
En cas d’anomalie :
Prévenir : Mr MARCOTTE, Responsable du laboratoire
Manipulations à effectuer :
- Couper l’arriver d’air en fermant le robinet.
- Couper l’arriver d’hélium en débranchant le tuyau et fermer la bouteille de gaz.
- Arrêter l’appareil en appuyant sur les 3 interrupteurs qui se situent sur le devant.
Principe de l’appareil
L'HPLC permet l'identification, la séparation et le dosage de composés chimiques dans un mélange. Sa
grande précision permet la recherche de traces et il est possible de la coupler à un spectromètre de masse.
Spécificité du détecteur de longueurs d’onde UV visible :
Il mesure l'absorbance absolue d'un solvant et d’un soluté ou la différence d'absorbance entre le solvant et
le solvant et soluté (en présence d'une cellule de référence) à longueur d'onde fixe de 254 ou 280 nm ou à
longueur d'onde variable entre 190 et 800 nm ou à longueurs d'onde multiples comme les réseaux de
diodes.
Caractéristiques
Avantages :
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- Sensibilité : détection de substances de concentration égale à 5.10 et 5.10 mol.L par utilisation
de cuvette de volume aussi petit que 5 mL (trajectoire optique = 1 cm).
- Sélectivité :
- Possibilité de choisir une ou plusieurs longueurs d'onde qui permettront de voir
apparaître le pic correspondant à certaines substances choisies plutôt que toutes.
- Renseignements spectraux sur les substances par le spectre UV (réseau de diodes).
- Peu sensible aux variations de débit et de température.
- Utilisation facile.
- Peut être utilisé en mode gradient d'élution.
Inconvénients :
- Les substances doivent être chromophores.
- Facteurs de réponse différents pour chaque composé.
- Bandes passantes souvent trop larges (réseau de diodes).
- Emploi plus difficile (réseau de diodes).
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