pseudomonas aeruginosa

Transcription

PSEUDOMONAS AERUGINOSA
55857
63914
64804
SELECTIVE MEDIUM FOR THE ISOLATION OF PSEUDOMONAS AERUGINOSA
1- INTENDED USE
Pseudomonas aeruginosa agar is a selective medium for the isolation and presumptive identification of Pseudomonas species,
from pathological specimens or hygiene specimens (surfaces, surgical instruments or antiseptic solutions).
2- PRINCIPLE
The selectivity of this medium is based on the presence of a quaternary ammonium (cetrimide) which inhibits the growth of
bacteria other than Pseudomonas aeruginosa.
Pseudomonas aeruginosa is characterized by the production of two pigments: pyoverdin (fluorescent pigment) and pyocyanin.
Pyocyanin production is promoted by the presence of magnesium chloride and potassium sulphate.
3- HOW SUPPLIED
• Ready to use medium:
- box of 20 Petri dishes (90 mm) (PYO)
• Ready to use medium (to be dispensed)
- 6 x 200 ml bottles (PYO)
• Dehydrated medium
- bottle of 500 g
code 63914
code 55857
code 64804
4- THEORETICAL COMPOSITION (g/l of distilled water)
Pseudomonas aeruginosa medium is prepared according to the theoretical formula of Medium N of the European
Pharmacopoeia 4 (2002).
Peptone
20
Potassium sulphate
10
Magnesium chloride
1.4
Cetrimide
0.3
Agar
13.6
Glycerol
10 ml
Final pH 7.1 ± 0.2
Preparation of the medium:
Homogenize the powder contained in the bottle.
Add 47 grams of dehydrated medium to one litre of freshly distilled water. Add 10 ml of glycerol and heat gently to boiling until
complete dissolution. If necessary, adjust the pH to 7.1. Sterilize in the autoclave at 120°C for 15 minutes.
Dispense into Petri dishes or bottles.
5- STORAGE
• Ready to use medium: at +2-8°C
• Ready to use medium (to be dispensed): at +2-25°C
• Dehydrated medium: tightly sealed bottle in a dry place at +15-25°C.
The expiry date and batch number are indicated on the packaging.
6- INSTRUCTIONS
Material:
• Material provided: Pseudomonas aeruginosa medium
• Specific material not provided: glycerol
Inoculation:
Inoculate the surface of the agar with a loop, a swab or by application of a filtration membrane, depending on the field of use.
Incubation:
Incubate for 24 to 48 hours at 37°C.
Reading:
Colonies of P. aeruginosa growing on agar have a greenish-yellow colour and their fluorescence can be demonstrated in
ultraviolet light. They are harvested for more detailed identification of the strain. The serotype should be determined by slide
agglutination using specific immune sera for epidemiological studies.
7- PERFORMANCE/QUALITY CONTROL OF THE TEST
• Appearance of the ready to use medium: slightly opalescent agar.
• Appearance of the dehydrated medium: beige powder.
• The growth performances of Pseudomonas aeruginosa medium are verified with the following strains:
STRAINS
Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853
Escherichia coli ATCC 25922
Enterococcus faecalis CCM 2541
CULTURE RESULT AFTER 24 to 48 hours at 37°C
Fluorescent green and yellow colonies
No growth
No growth
8- QUALITY CONTROL OF THE MANUFACTURER
All manufactured reagents are prepared according to our Quality System, starting from reception of raw material to the final
commercialization of the product. Each lot is submitted to quality control assessments and is only released to the market, after
conforming to pre-defined acceptance criteria. The records relating to production and control of each single lot are kept within
Bio-Rad.
9•
•
•
•
•
•
101.
2.
3.
4.
5.
LIMITS OF USE
The formation of nonpigmented colonies does not formally exclude the diagnosis of Pseudomonas aeruginosa.
Colonies of Pseudomonas producing pyocyanin and pyoverdin must be distinguished from other strains of Pseudomonas
that only produce pyoverdin. The temperature can be a decisive factor, as most pyoverdin-producing strains only grow at
25-30°C and do not grow at a temperature exceeding 35°C (4).
Some strains may not grow on this medium due to their nutritional requirements.
Some strains may not be inhibited.
The inhibitory effect is decreased in the presence of an excessive quantity of inoculum.
Complementary tests must be performed to identify the species of the strain isolated.
REFERENCES
BROWN V.I. et LOWBURY E.J.L., J. Clin. Path., 1965, 18 p. 752-756.
GOTTOS S. et ENAMOTOS. S., Jap. J. Microbiol., 1970, 14 p. 65-72.
LOWBURY E.J. et COLLINS. A.B., J. Clin., Path., 1955, 8 p. 47-48.
MACFADDIN J.F. Media for isolation-cultivation-identification-maintenance medical bacteria, vol. 1. Williams & Wilkins, MD,
1985, Baltimore.
Pharmacopée Européenne, Addendum 4.2 de la IVe édition, 2002, p. 2841.
55857
63914
64804
MILIEU D’ISOLEMENT SELECTIF DE PSEUDOMONAS AERUGINOSA
IVD
1. APPLICATION
La gélose Pseudomonas aeruginosa est un milieu sélectif pour l’isolement et l’identification présomptive de Pseudomonas, soit à
partir de prélèvements pathologiques, soit en hygiène (surfaces, matériel chirurgical ou solutions antiseptiques).
2. PRINCIPE
La sélectivité de ce milieu est basée sur la présence d'un ammonium quaternaire (cétrimide) qui inhibe les germes autres que
Pseudomonas aeruginosa.
Pseudomonas aeruginosa se caractérise par la production de 2 pigments : la pyoverdine (pigment fluorescent) et la pyocyanine.
La production de pyocyanine est favorisée, par la présence de chlorure de magnésium et de sulfate de potassium.
3. PRESENTATION
• Milieu prêt à l’emploi
- coffret de 20 boîtes de Petri (90 mm) (PYO)
code 63914
• Milieu prêt à l’emploi (à répartir)
- 6 flacons de 200 ml (PYO)
code 55857
• Milieu déshydraté
- flacon de 500 g
code 64804
4. COMPOSITION THEORIQUE (en g/l d’eau distillée)
Le milieu Pseudomonas aeruginosa est préparé selon la formule théorique du Milieu N de la Pharmacopée Européenne IV (2002).
Peptone
20
Sulfate de potassium
10
Chlorure de magnésium
1,4
Cétrimide
0,3
Agar
13,6
Glycérol
10 ml
Préparation du milieu :
Homogénéiser la poudre contenue dans le flacon.
Mettre 47 grammes de milieu déshydraté dans un litre d’eau fraîchement distillée. Ajouter 10 ml de glycérol, puis porter doucement
à ébullition jusqu’à dissolution complète. Ajuster, si nécessaire, le pH à 7,1. Stériliser à l’autoclave à 120°C pendant 15 minutes.
Répartir en boîte de Petri ou en flacon.
5. CONSERVATION
• Milieu prêt à l’emploi : à +2-8°C
• Milieu prêt à l’emploi (à répartir) : à +2-25°C
• Milieu déshydraté : flacon soigneusement fermé dans un endroit sec à +15-25°C.
La date de péremption et le numéro de lot sont indiqués sur le conditionnement.
1
6. UTILISATION
Matériel :
• Matériel fourni : milieu Pseudomonas aeruginosa
• Matériel spécifique non fourni : glycérol
Ensemencement :
Ensemencer la surface de la gélose à l’aide d’une öse, d’un écouvillon ou par l’application d’une membrane filtrante, suivant le
domaine d’utilisation.
Incubation
Incuber pendant 24 à 48 heures à 37°C.
Lecture :
Les colonies de P. aeruginosa qui se développent sur la gélose sont jaunes-vertes et leur fluorescence peut être mise en évidence en
lumière ultra-violette; elles sont prélevées en vue d’une identification plus poussée de la souche. Il est conseillé d’en déterminer le
sérotype par agglutination sur lame à l’aide d’immunsérums spécifiques pour les études épidémiologiques.
7. PERFORMANCES / CONTRÔLE QUALITE DU TEST
• Aspect du milieu prêt à l’emploi : gélose légèrement opalescente.
• Aspect du milieu déshydraté : poudre beige.
• Les performances culturales du milieu Pseudomonas aeruginosa sont contrôlées à l’aide des souches suivantes :
SOUCHES
RÉSULTAT DE LA CULTURE EN 24-48 H à 37°C
Colonies jaunes et vertes fluorescentes
Inhibition
Inhibition
8. CONTROLE QUALITE DU FABRICANT
Tous les produits fabriqués et commercialisés par la société Bio-Rad sont placés sous un système d’assurance qualité de la réception
des matières premières jusqu’à la commercialisation des produits finis. Chaque lot de produit fini fait l’objet d’un contrôle de qualité
et n’est commercialisé que s’il est conforme aux critères d’acceptations. La documentation relative à la production et au contrôle de
chaque lot est conservée par le fabricant.
9. LIMITES D’UTILISATION
• La formation de colonies non pigmentées ne permet pas d’exclure totalement Pseudomonas aeruginosa du diagnostic.
• Pour différencier les colonies de Pseudomonas qui produisent la pyocyanine et la pyoverdine des autres souches Pseudomonas
qui produisent uniquement de la pyoverdine, la température peut être un facteur déterminant. La plupart des souches produisant
uniquement de la pyoverdine se développent surtout à 25-30°C et ne poussent pas à une température supérieure à 35°C (4).
• Du fait des exigences nutritonnelles des microorganismes, certaines souches peuvent ne pas se développer sur ce milieu.
• Certaines souches peuvent ne pas être inhibées.
• L’effet inhibiteur est amoindri quand la quantité d’inoculum est trop importante.
• Il est nécessaire de faire des tests complémentaires pour une identification d’espèce de la souche isolée.
10.RÉFÉRENCES BIBLIOGRAPHIQUES
1.BROWN V.I. et LOWBURY E.J.L., J. Clin. Path., 1965, 18 p. 752-756.
2.GOTTOS S. et ENAMOTOS. S., Jap. J. Microbiol., 1970, 14 p. 65-72.
3.LOWBURY E.J. et COLLINS. A.B., J. Clin., Path., 1955, 8 p. 47-48.
4.MACFADDIN J.F. Media for isolation-cultivation-identification-maintenance medical bacteria, vol. 1. Williams & Wilkins, MD,
1985, Baltimore.
5.Pharmacopée Européenne, Addendum 4.2 de la IVe édition, 2002, p. 2841.
Bio-Rad
3, boulevard Raymond Poincaré
92430 Marnes-la-Coquette France
Tel. : +33 (0) 1 47 95 60 00
Fax : +33 (0) 1 47 41 91 33
07/2003
code: 18039 - A4
2
55857
63914
64804
MEDIO PARA EL AISLAMIENTO Y LA DIFERENCIACIÓN DE ESPECIES DE ENTEROBACTERIACEAE
LACTOSA (+) Y LACTOSA (-).
1-
USO PREVISTO
El agar Bromocresol Púrpura (B.C.P.) lactosa es un medio no selectivo para el aislamiento y la enumeración de las
Enterobacteriaceae. También permite la diferenciación de las especies fermentadoras y no fermentadoras de la lactosa. Este
medio se usa con frecuencia para el examen bacteriológico de la orina y las heces.
2- PRINCIPIO
La diferenciación de las Enterobacteriaceae se basa en su capacidad de fermentar la lactosa. La fermentación de la lactosa
induce acidificación, produciendo un color amarillo de la colonia en presencia de bromocresol púrpura (indicador de pH).
3- CÓMO SE SUMINISTRA
• Medio listo para usar:
caja de 20 placas de Petri (90 mm) (BCP) código 63854
• Medio listo para usar (para dispensar)
- 6 frascos de 200 ml (BCP)
código 54376
• Medio deshidratado 500 g
código 64444
4-
COMPOSICIÓN TEÓRICA (G/L DE AGUA DESTILADA)
El medio se elabora de acuerdo con la fórmula descrita por HAJNA y DAMON (1).
Casitona
7,5
Extracto de levadura
2
Lactosa
10
Agar
25
Púrpura de bromocresol
0,02
Preparación del medio:
Homogeneice el polvo contenido en el frasco.
Añada 29 gramos de medio deshidratado a un litro de agua destilada estéril. Mezcle hasta que se obtenga una suspensión
homogénea.
Caliente suavemente, agitando con frecuencia y luego caliente hasta hervir y que se consiga la disolución completa. Esterilice a
121°C durante 15 minutos, luego dispense en placas de Petri o frascos.
CONSERVACIÓN
Medio listo para usar: +2-20°C.
Medio listo para usar (para dispensar): +2-25°C.
•
Medio deshidratado: frasco cerrado herméticamente en un lugar fresco, seco.
La fecha de caducidad y el número de lote están indicados en el envasado.
5•
•
6- INSTRUCCIONES
Material:
• Material suministrado: Medio B.C.P.
Inoculación:
Inocule tomando directamente de la muestra a examinar (suspensión de heces, orina). Consúltense las recomendaciones
actuales para la conservación de muestras biológicas (2).
Incubación:
Incube durante 24 horas a 37°C.
Lectura:
•
Lactosa (+): Colonias amarillas
•
Lactosa (-): colonias azules
Las colonias lactosa (+) pueden tener un aspecto variable:
•
colonias mucoides: Klebsiella y E. coli, variedad mucoide (antígeno A)
•
colonias translúcidas “lisas” o “rugosas”: E. coli, Citrobacter. Esta característica permite a estas colonias distinguirse de las
colonias opacas formadas por Bacillus y Micrococcus.
•
colonias amarillas, ligeramente azuladas en la periferia: Escherichia lentamente lactosa (+)
RENDIMIENTO / CONTROL DE CALIDAD DE LA PRUEBA
Aspecto del medio: agar violeta claro.
Aspecto del medio deshidratado: polvo ligeramente púrpura
Los rendimientos de crecimiento del medio B.C.P. se verifican con las siguientes cepas:
7•
•
•
CEPAS
RESULTADO DEL CULTIVO DESPUÉS DE 24 a 48
horas a 37 °C
Colonias fluorescentes verdes y amarillas
Sin crecimiento
Sin crecimiento
8- CONTROL DE CALIDAD DEL FABRICANTE
Todos los reactivos fabricados se elaboran según nuestro sistema de calidad, que va desde la recepción de las materias
primas hasta la comercialización final del producto. Cada lote se somete a valoraciones de control de calidad y sale al mercado
sólo cuando está de acuerdo con los criterios de aceptación predefinidos. Los registros relativos a la producción y al control de
cada lote se conservan en Bio-Rad.
9- LÍMITES DE USO
Debido a los requisitos nutricionales, algunas cepas pueden no crecer en este medio.
No supere el período de incubación para evitar errores de interpretación. difusión del color amarillo hacia el medio,
realcalinización rápida.
Deben realizarse pruebas complementarias para identificar la especie de la cepa aislada.
101.
2.
3.
4.
5.
BIBLIOGRAFÍA
1985, Baltimore.
55857
63914
64804
MEDIUM FÜR DIE ISOLIERUNG UND DIFFERENZIERUNG VON LAKTOSE (+)- UND LACTOSE (-)ENTEROBACTERIACEAE-SPEZIES
1-
VERWENDUNGSZWECK
Bromkresolpurpur (B.C.P)-Laktose-Agar ist ein nicht selektives Medium für die Isolierung und Zählung von Enterobacteriaceae.
Es wird auch für die Differenzierung von Laktose-fermentierenden und Laktose-nicht-fermentierenden Spezies verwendet.
Dieses Medium wird im Allgemeinen für die bakteriologische Untersuchung von Urin- und Stuhlproben verwendet.
2- PRINZIP
Die Differenzierung von Enterobacteriaceae basiert auf der Fähigkeit, Laktose zu fermentieren. Die Fermentierung von Laktose
führt zur Säuerung, die das Medium in Anwesenheit von Bromkresolpurpur (pH-Indikator) gelb verfärbt.
3•
•
•
DARREICHUNGSFORM
Gebrauchsfertiges Medium:
- Packung mit 20 Petri-Schalen (90 mm) (BCP)
Kat.-Nr. 63854
Gebrauchsfertiges Medium (pipettierfertig):
- 6 x 200 ml-Fläschchen (BCP)
Kat.-Nr. 54376
Dehydriertes Medium 500 g
Kat.-Nr. 64444
4- THEORETISCHE ZUSAMMENSETZUNG (g/l destilliertes Wasser)
Das Medium wird anhand der von HAJNA und DAMON beschriebenen Formel vorbereitet (1).
Casiton
7,5
Hefeextrakt
2
Laktose
10
Agar
25
Bromkresolpurpur
0,02
Vorbereitung des Mediums:
Das in der Flasche enthaltene Pulver homogenisieren.
29 g des dehydrierten Mediums in 1 l steriles destilliertes Wasser geben. Mischen, bis eine homogene Suspension hergestellt
ist.
Vorsichtig unter häufigem Schwenken erhitzen, anschließend bis zur vollständigen Auflösung zum Kochen bringen. 15 Minuten
bei 121°C sterilisieren, anschließend in Petri-Schalen oder Gefäße pipettieren.
LAGERUNG
Gebrauchsfertiges Medium: +2 - 20°C.
Gebrauchsfertiges Medium (pipettierfertig): +2 - 25°C.
Dehydriertes Medium: in fest verschlossenen Gefäßen an einem trockenen Ort.
Das Verfallsdatum und die Chargennummer sind auf der Verpackung angegeben.
5-
•
•
•
6- GEBRAUCHSANWEISUNG
Material:
• Geliefertes Material: B.C.P.-Medium.
Beimpfung:
Beimpfen durch Abstreichen direkt von der Testprobe (Stuhlsuspension, Urin). Die Lagerbedingungen für biologische Proben
entnehmen Sie bitte den aktuellen Empfehlungen (2).
Inkubation:
Bei 37°C 24 Stunden inkubieren.
Ablesen der Ergebnisse:
•
Laktose (+): gelbe Kolonien
•
Laktose (-): blaue Kolonien
Laktose (+)-Kolonien können ein unterschiedliches Erscheinungsbild aufweisen:
•
mukoide Kolonien: Klebsiella und E. coli, mukoide Varianz (Antigen A)
•
“weiche” bzw. “raue” durchsichtige Kolonien: E. coli, Citrobacter. Anhand dieses Merkmals können diese Kolonien von
trüben Kolonien, die von Bacillus und Micrococcus gebildet werden, unterschieden werden.
•
gelbe Kolonien, die am äußeren Rand leicht bläulich sind: langsame Laktose (+)-Escherichia.
LEISTUNG/QUALITÄTSKONTROLLE DES TESTS
Erscheinung des Mediums: hell-violetter Agar.
Erscheinung des dehydrierten Mediums: leicht violettes Pulver.
Die Leistungsmerkmale des Wachstums auf B.C.P.-Medium werden mit folgenden Stämmen überprüft:
7-
•
•
•
STÄMME
KULTURERGEBNIS nach 24 bis 48 Stunden bei 37°C
Fluoreszente grüne und gelbe Kolonien
Kein Wachstum
Kein Wachstum
8- QUALITÄTSKONTROLLE DES HERSTELLERS
Alle von der Firma Bio-Rad hergestellten Reagenzien unterliegen einem Qualitätssicherungssystem vom Rohstoffeingang bis
zur Vermarktung der Fertigprodukte. Jede Fertigproduktcharge wird einer Qualitätskontrolle unterzogen und nur dann verkauft,
wenn sie den Freigabekriterien entspricht. Die Unterlagen bezüglich Herstellung und Kontrolle der einzelnen Chargen werden
bei Bio-Rad aufbewahrt.
9- GRENZEN DES TESTS
Aufgrund spezifischer Anforderungen an die Nährstoffe wachsen unter Umständen manche Stämme auf diesem Medium nicht.
Um eine fehlerhafte Interpretation der Ergebnisse zu vermeiden, die Inkubationszeiten nicht überschreiten: Diffusion der gelben
Färbung in das Medium, rasche Realkalisierung.
Zur Identifizierung der Spezies des isolierten Stammes müssen zusätzliche Tests durchgeführt werden.
101.
2.
3.
4.
5.
LITERATUR
1985, Baltimore.
55857
63914
64804
MEZZO PER L’ISOLAMENTO E LA DIFFERENZIAZIONE DI SPECIE LATTOSIO (+) E LATTOSIO (-)DI
ENTEROBACTERIACEAE
1-
USO PREVISTO
L’agar di Lattosio Porpora Bromocresolo (B.C.P.) è un mezzo non selettivo per l’isolamento e il calcolo di Enterobacteriaceae.
Consente anche la differenziazione di specie che fermentano il lattosio e di specie che non fermentano il lattosio. Questo mezzo
è comunemente usato per l’esame batteriologico di urine e feci.
2- PRINCIPIO
La differenziazione di Enterobacteriaceae è basata sulla loro capacità di fermentare lattosio e/o saccarosio. La fermentazione di
lattosio induce acidificazione, determinando un colore giallo della colonia in presenza di porpora bromocresolo (indicatore di
pH).
3•
•
•
•
•
PRESENTAZIONE
Mezzo pronto all’uso:
scatola da 20 piastre Petri (90 mm) (BCP)
codice 63854
Mezzo pronto all’uso (per l’erogazione)
-6 flaconi da 200 ml (BCP)
codice 54376
Mezzo disidratato 500 g
codice 64444
4- COMPOSIZIONE TEORICA (G/L DI ACQUA DISTILLATA)
Il mezzo è preparato in base alla formula descritta da HAJNA e DAMON (1).
Casitone
7,5
Estratto di lievito
2
Lattosio
10
Agar
25
Porpora di Bromocresolo
0,02
Preparazione del mezzo:
Omogeneizzare la polvere contenuta nel flacone.
Aggiungere 29 grammi di mezzo disidratato a un litro di acqua appena distillata. Miscelare finché si ottiene una sospensione
omogenea.
Scaldare gradualmente, agitando frequentemente, poi riscaldare a ebollizione fino a completo scioglimento. Sterilizzare a 121°C
per 15 minuti poi erogare su piastre Petri o in flaconi.
CONSERVAZIONE
Mezzo pronto all’uso: + 2-20°C
Mezzo pronto all’uso (per l’erogazione): + 2-25°C
Mezzo disidratato: flacone chiuso ermeticamente in un luogo fresco, e asciutto.
La data di scadenza e il numero di lotto sono indicati sulla confezione.
5-
•
•
•
6- ISTRUZIONI
Materiale:
• Materiale fornito: mezzo B.C.P.
Inoculazione:
Inoculare mediante striscio direttamente dal campione da esaminare (sospensione fecale, urina). Per le condizioni di
conservazione di campioni biologici, fare riferimento alle raccomandazioni vigenti (2).
Incubazione:
Incubare per 24 ore a 37°C
Lettura:
•
Lattosio Colonie gialle
•
Lattosio colonie blu
Le colonie di lattosio (+) possono avere un aspetto variabile.
•
colonie mucoidi: Klebsiella and E. coli, varietà mucoide (antigene A)
•
colonie traslucide “lisce” o “ruvide”: E. coli, Citrobacter. Questa caratteristica consente alle colonie di essere distinte dalle
colonie opache di Bacillus et Micrococcus.
•
colonie gialle, leggermente bluastre verso il perimetro. lentamente lattosio (+) Escherichia.
PERFORMANCE / CONTROLLO DI QUALITÀ DEL TEST
Preparazione del mezzo agar violetto chiaro.
Aspetto del mezzo disidratato: polvere colore porpora chiaro
Le prestazioni di crescita del mezzo B.C.P. sono verificate sui ceppi seguenti:
7-
•
•
•
CEPPI
RISULTATO DELLA COLTURA DOPO 24 - 48 ore a 37°C
Colonie verdi e gialle fluorescenti
Nessuna crescita
Nessuna crescita
8- CONTROLLO DI QUALITÀ DEL PRODUTTORE
Tutti i reagenti realizzati sono preparati in base al nostro Sistema di Assicurazione di Qualità dal ricevimento delle materie
prime, alla commercializzazione finale del prodotto. Ciascun lotto di prodotto finito è sottoposto a un controllo di qualità e viene
messo in commercio soltanto se risulta conforme ai criteri di approvazione predefiniti. La documentazione relativa alla
produzione e al controllo di ciascun singolo lotto è conservata presso Bio-Rad.
9- LIMITI DI UTILIZZO
È possibile che alcuni ceppi non crescano su questo mezzo a causa delle loro necessità nutrizionali.
Non superare il periodo di incubazione per evitare errori di interpretazione: diffusione del colore giallo nel mezzo, rapida
rialcalinizzazione.
Test complementari devono essere effettuati per identificare la specie del ceppo isolato.
101.
2.
3.
4.
5.
BIBLIOGRAFIA
1985, Baltimore.
55857
63914
64804
MEIO PARA O ISOLAMENTO E DIFERENCIAÇÃO DE ESPÉCIES DE ENTEROBACTÉRIAS
LACTOSE (+) AND LACTOSE (-)
1-
UTILIZAÇÃO PRETENDIDA
O meio gelosado de Púrpura de Bromocresol (B.C.P)-Lactose é um meio não selectivo para o isolamento e contagem de
Enterobactérias. Também permite a diferenciação de espécies fermentadoras de lactose e espécies não fermentadoras de
lactose. Este meio é frequentemente utilizado para análises bacteriológicas de urina e fezes.
2- PRINCÍPIO
A diferenciação das Enterobactérias baseia-se na sua capacidade de fermentação da lactose. A fermentação da lactose induz
acidificação, dando origem a uma coloração amarela das colónias na presença de púrpura de bromocresol (indicador de pH).
3•
•
•
APRESENTAÇÃO
Meio pronto a usar:
- embalagem com 20 caixas de Petri (90 mm) (BCP)
Meio pronto a usar (a ser fornecido)
- 6 frascos x 200 ml (BCP)
Meio desidratado 500 g
código 63854
código 54376
código 64444
4- COMPOSIÇÃO TEÓRICA (g/l de água destilada)
O meio é preparado em conformidade com a fórmula descrita por HAJNA e DAMON (1).
Casitona
7,5
Extracto de levedura
2
Lactose
10
Gelose
25
Púrpura de Bromocresol
0,02
Preparação do meio:
Homogenize o pó contido no frasco.
Adicione 29 gramas de meio desidratado a um litro de água destilada estéril. Misture até obter uma suspensão homogénea.
Aqueça suavemente, agitando com frequência e, em seguida, deixe ferver até completa dissolução. Esterilize a 121°C durante
15 minutos e depois coloque em caixas de Petri ou frascos.
CONSERVAÇÃO
Meio pronto a usar: +2-20°C.
Meio pronto a usar (a ser fornecido): +2-25°C.
•
Meio desidratado: frasco bem fechado em local seco e fresco.
O prazo de validade e o número do lote estão indicados na embalagem.
5•
•
6- INSTRUÇÕES
Material:
• Material fornecido: meio B.C.P.
Inoculação:
Inocule directamente a partir da amostra em análise (suspensão de fezes, urina). Consulte as actuais recomendações para
conservação de amostras biológicas (2).
Incubação:
Incube durante 24 horas a 37°C.
Leitura:
•
Lactose (+): colónias amarelas
•
Lactose (-): colónias azuis
As colónias lactose (+) podem ter um aspecto variável:
•
colónias mucóides: Klebsiella e E. coli, variedade mucóide (antigénio A)
•
colónias “ligeiramente” ou “grosseiramente” translúcidas: E. coli, Citrobacter. Esta característica permite distinguir estas
colónias das colónias opacas formadas pelos Bacillus e pelos Micrococcus.
•
colónias amarelas, ligeiramente azuladas na periferia: Escherichia lactose (+) de lento desenvolvimento.
DESEMPENHO/CONTROLO DE QUALIDADE DO ENSAIO
Aspecto do meio pronto a usar: gelose com uma coloração violeta pálida.
Aspecto do meio desidratado: pó com uma coloração ligeiramente púrpura.
As taxas de crescimento do meio B.C.P. são verificadas com as seguintes estirpes:
7•
•
•
ESTIRPES
RESULTADO DA CULTURA APÓS 24 a 48 horas a 37°C
Colónias fluorescentes verdes e amarelas
Inexistência de crescimento
Inexistência de crescimento
8- CONTROLO DE QUALIDADE DO FABRICANTE
Todos os reagentes fabricados são preparados de acordo com o nosso Sistema de Qualidade, desde a recepção das matérias
primas até à comercialização final do produto. Cada lote é submetido a avaliações de controlo de qualidade, sendo apenas
colocado no mercado se estiver em conformidade com os critérios de aceitação pré-definidos. Os registos relativos à produção
e controlo de cada lote são conservados pela Bio-Rad.
9- LIMITES PARA A SUA UTILIZAÇÃO
Algumas estirpes podem não se desenvolver neste meio devido aos seus requisitos nutricionais.
Não ultrapasse o período de incubação para evitar erros de interpretação: difusão da coloração amarela para o meio, rápida realcalinização.
Devem realizar-se ensaios complementares para identificar a espécie da estirpe isolada.
101.
2.
3.
4.
5.
REFERÊNCIAS
1985, Baltimore.
55857
63914
64804
MEDIUM FÖR ISOLERING OCH DIFFERENTIERING AV LAKTOSPOSITIVA OCH LAKTOSNEGATIVA
ARTER AV ENTEROBACTERIACEAE
1-
ANVÄNDNINGSOMRÅDE
Bromkresolpurpur (B.C.P) laktos-agar är ett icke-selektivt medium för isolering och räkning av Enterobacteriaceae. Mediet
möjliggör även differentiering av laktosjäsande och icke laktosjäsande arter. Detta medium används allmänt för bakteriologisk
undersökning av urin och avföring.
2- PRINCIP
Differentieringen av Enterobacteriaceae baseras på deras förmåga att jäsa laktos. Jäsning av laktos orsakar försurning, vilket
ger kolonin en gul färg i närvaro av bromkresolpurpur (pH-indikator).
3•
•
•
INNEHÅLL
Medium färdigt att använda:
- ask med 20 Petri-skålar (90 mm) (BCP)
Medium färdigt att använda (att fördelas)
- 6 x 200 ml flaskor (BCP)
Dehydrerat medium 500 g
kod 63854
kod 54376
kod 64444
4- TEORETISK SAMMANSÄTTNING (i g/l destillerat vatten)
Mediet bereds i enlighet med den formel som beskrivs av HAJNA och DAMON (1).
Casitone
7,5
Jästextrakt
2
Laktos
10
Agar
25
Bromkresolpurpur
0,02
Beredning av mediet:
Homogenisera pulvret som finns i flaskan.
Tillsätt 29 gram dehydrerat medium till en liter sterilt destillerat vatten. Blanda tills en homogen suspension erhålls.
Värm försiktigt och skaka ofta. Värm därefter till kokpunkten tills mediet är fullständigt upplöst. Sterilisera i 121 °C i 15 minuter
och fördela sedan i Petri-skålar eller flaskor.
FÖRVARING
Medium färdigt att använda: +2–20 °C .
Medium färdigt att använda (att fördelas): +2–25 °C .
Dehydrerat medium: väl försluten flaska på sval, torr plats.
Utgångsdatum och partinummer står på förpackningen.
5-
•
•
•
6- INSTRUKTIONER
Material:
• Material som medföljer: B.C.P.-medium.
Inokulering:
Inokulera genom utstryk direkt från det prov som ska undersökas (avföringssuspension, urin) Följ aktuella rekommendationer
vid förvaring av biologiska prover (2).
Inkubering:
Inkubera i 24 timmar i 37 °C.
Avläsning:
•
Laktos (+): gula kolonier
•
Laktos (-): blå kolonier
Laktos (+) kolonier kan ha varierande utseende:
•
slemliknande kolonier: Klebsiella och E. coli, en rad slemliknande varianter (antigen A)
•
”släta” eller ”ojämna” genomskinliga kolonier: E. coli, Citrobacter. Denna karakteristik gör att kolonierna kan skiljas från de
opaka kolonier som bildas av Bacillus och Micrococcus.
•
gula kolonier, lätt blåaktiga i periferin: långsamt laktos (+) Escherichia.
TESTRESULTAT/KVALITETSKONTROLL AV TESTET
Utseende på mediet: svagt violett agar.
Det dehydrerade mediets utseende: något lila pulver.
Tillväxtresultatet för B.C.P.-medium verifieras med följande stammar:
7-
•
•
•
STAMMAR
ODLINGSRESULTAT EFTER 24 till 48 timmar i
37 °C
Fluorescerande gröna och gula kolonier
Ingen tillväxt
Ingen tillväxt
8- TILLVERKARENS KVALITETSKONTROLL
Alla reagenser tillverkas och bereds i enlighet med vårt kvalitetssystem, från mottagandet av råmaterial till den slutliga
marknadsföringen av produkten. Varje parti genomgår en kvalitetskontroll och släpps endast ut på marknaden om det
överensstämmer med fördefinierade acceptanskriterier. Handlingar som beskriver produktion och kontroll av varje enskilt parti
sparas hos Bio-Rad.
9- ANVÄNDNINGENS BEGRÄNSNINGAR
Vissa stammar kan inte växa på det här mediet på grund av deras krav på näring.
Överskrid inte inkuberingstiden, eftersom det kan orsaka feltolkning: diffusion av den gula färgen in i mediet, snabb förnyad
alkalisering.
Kompletterande tester måste utföras för att identifiera arterna i den isolerade stammen.
101.
2.
3.
4.
5.
REFERENSER
1985, Baltimore.
55857
63914
64804
MEDIUM TIL ISOLATION OG DIFFERENTIERING AF LAKTOSE(+)- OG LAKTOSE(-)-ARTER AF
ENTEROBACTERIACEAE
1- FORMÅL
Bromkresolpurpur (BCP)-laktoseagar er et uselektivt medium til isolation og optælling af Enterobacteriaceae. Det muliggør også
en differentiering mellem laktosegærende og ikke-laktosegærende arter. Dette medium anvendes normalt til bakteriologisk
undersøgelse af urin og afføring.
2- PRINCIP
Differentiering af Enterobacteriaceae er baseret på deres evne til at lade laktose gære. Gæring af laktose fremmer
syredannelsen, hvilket fremkalder en gul farvning af kolonien, når der forekommer bromkresolpurpur (pH-indikator).
3- PRODUKTETS INDHOLD
• Brugsklart medium:
- kasse med 20 Petri-skåle (90 mm) (BCP) kode 63854
• Brugsklart medium (til fordeling):
- 6 flasker á 200 ml (BCP)
kode 54376
• 500 g dehydreret medium
kode 64444
4- TEORETISK SAMMENSÆTNING (G/L DESTILLERET VAND)
Mediet forberedes ifølge den formular, der er beskrevet af HAJNA og DAMON (1).
Casitone
7,5
Gærekstrakt
2
Laktose
10
Agar
25
Bromkresolpurpur
0,02
Forberedelse af mediet:
Homogeniser det pulver, som flasken indeholder.
Tilsæt 29 gram dehydreret medium i en liter sterilt, destilleret vand. Bland, indtil opløsningen er homogen.
Opvarm forsigtigt, mens flasken omrystes, og opvarm derefter til kogepunktet, indtil pulveret er helt opløst. Steriliser ved 121°C i
15 minutter, og fordel derefter opløsningen i Petri-skåle eller flasker.
OPBEVARING
Brugsklart medium: +2 – 20°C
Brugsklart medium (til fordeling): +2 – 25°C
Dehydreret medium: Tæt forseglet flaske, på et køligt, tørt sted.
Udløbsdatoen og partinummeret er angivet på emballagen.
5-
•
•
•
6- BRUGSVEJLEDNING
Materialer:
• Materialer, der medfølger: BCP-medium.
Inokulation:
Inokuler ved at stryge direkte fra den prøve, der skal undersøges (afføringsopløsning, urin). Se de gældende anbefalinger for
opbevaring af biologiske prøver (2).
Inkubation:
Inkuber i 24 timer ved 37°C.
Aflæsning:
•
Laktose (+): Gule kolonier
•
Laktose (-): blå kolonier
Laktose(+)-kolonier kan se forskellige ud:
•
mucoide kolonier: Klebsiella og E. coli, mucoid variation (antigen A)
•
“glatte” eller “grove” gennemskinnelige kolonier: E. coli, Citrobacter. Disse egenskaber gør det muligt at skelne disse
kolonier fra de uigennemsigtige kolonier, der dannes af Bacillus og Micrococcus.
•
Gule kolonier, der er svagt blålige i kanten: langsom laktose (+)-reaktion for Escherichia.
YDEEVNE OG KVALITETSKONTROL AF TESTEN
Mediets udseende: lyslilla agar.
Det dehydrerede mediums udseende: let purpurfarvet pudder.
Vækstraterne for BCP-mediet kontrolleres med følgende stammer:
7-
•
•
•
STAMMER
KULTURRESULTAT EFTER 24-48 timer ved 37°C
Fluorescerende grønne og gule kolonier
Ingen vækst
Ingen vækst
8- PRODUCENTENS KVALITETSKONTROL
Alle producerede reagenser fremstilles ifølge vores kvalitetssikringssystem, lige fra modtagelsen af råmaterialerne til
markedsføringen af slutproduktet. Hvert parti af slutproduktet gennemgår kvalitetskontrol og markedsføres kun, hvis det opfylder
de foruddefinerede kvalitetskriterier. Dokumentation vedrørende produktion og kontrol af hvert parti opbevares inden for
virksomheden.
9- BEGRÆNSNINGER FOR BRUG
Nogle stammer kan muligvis ikke gro på dette medium på grund af de ernæringsmæssige krav.
Undgå at overskride inkubationsperioden for at undgå fejl i fortolkningen. Spredning af den gule farve i mediet er tegn på hurtig
genalkalisering.
Der skal udføres supplerende test for at identificere arterne af den isolerede stamme.
101.
2.
3.
4.
5.
REFERENCER
1985, Baltimore.
55857
63914
64804
ΥΛΙΚΟ ΕΠΙΛΕΚΤΙΚΗΣ ΑΠΟΜΟΝΩΣΗΣ ΤΟΥ PSEUDOMONAS AERUGINOSA
1- ΠΡΟΒΛΕΠΟΜΕΝΗ ΧΡΗΣΗ
Το άγαρ Pseudomonas aeruginosa είναι ένα επιλεκτικό µέσον αποµόνωσης και συµπερασµατικής ταυτοποίησης των ειδών
Pseudomonas σε παθολογικά δείγµατα ή σε δέιγµατα που σχετίζονται µε την υγιεινή (επιφάνειες, χειρουργικά όργανα ή
αντισηπτικά διαλύµατα).
2- ΒΑΣΙΚΗ ΑΡΧΗ
Η επιλεκτικότητα του υλικού αυτού βασίζεται στην παρουσία ενώσεως τεταρτοταγούς αµµωνίου (σετριµίδη) η οποία αναστέλλει
την ανάπτυξη όλων των βακτηρίων µε εξαίρεση το Pseudomonas aeruginosa.
Το χαρακτηριστικό του Pseudomonas aeruginosa είναι η παραγωγή δύο χρωστικών ουσιών: της πυοβερδίνης (φθορίζουσα
χρωστική ουσία) και της πυοκυανίνης.
Η παραγωγή της πυοκυανίνης ευνοείται από την παρουσία του χλωριούχου µαγνησίου και του θειικού καλίου.
3•
•
•
ΠΑΡΕΧΟΜΕΝΟ ΥΛΙΚΟ
Υλικό έτοιµο προς χρήση:
- κουτί των 20 τρυβλίων Petri (90 mm) (PYO)
Υλικό έτοιµο προς χρήση (προς διανοµή)
- 6 φιάλες των 200 ml (PYO)
Αφυδατωµένο υλικό
- φιάλη των 500 g
κωδικός 63914
4- ΘΕΩΡΗΤΙΚΗ ΣΥΝΘΕΣΗ (σε g/l απεσταγµένου νερού)
Το µέσον Pseudomonas aeruginosa παρασκευάζεται σύµφωνα µε τη θεωρητική σύνθεση του υλικού Medium N όπως αυτή
αναφέρεται στην Ευρωπαϊκή Φαρµακοποιία 4 (2002).
Πεπτόνη
20
Θειικό κάλιο
10
Χλωριούχο µαγνήσιο
1.4
Σετριµίδη
0.3
Άγαρ
13.6
Γλυκερόλη
10 ml
Τελικό pH:7,1 ± 0,2
Προετοιµασία του µέσου:
Οµογενοποιήστε τη σκόνη που περιέχεται στη φιάλη.
Προσθέστε 47 γραµµάρια αφυδατωµένου υλικού σε 1 λίτρο φρέσκου απεσταγµένου νερού. Προσθέστε 10 ml γλυκερόλης και
θερµάνετε ελαφρώς το µείγµα µέχρι βρασµού έως ότου το υλικό διαλυθεί πλήρως. Ρυθµίστε το pH στην τιµή 7,1 εφόσον κριθεί
αναγκαίο. Αποστειρώστε σε αυτόκαυστο στους 120°C για 15 λεπτά.
∆ιανείµετε σε τρυβλία Petri ή σε φιάλες.
5-
ΦΥΛΑΞΗ
Υλικό έτοιµο προς χρήση: φυλάσσεται σε θερµοκρασία από 2 έως 8°C.
Υλικό έτοιµο προς χρήση (προς διανοµή) φυλάσσεται σε θερµοκρασία από 2 έως 25°C.
Αφυδατωµένο υλικό: φυλάσσεται σε ερµητικά κλειστή φιάλη, σε ξηρό µέρος και σε θερµοκρασία από 15 έως 25°C
Η ηµεροµηνία λήξεως καθώς και ο αριθµός παρτίδας αναγράφονται στη συσκευασία.
•
•
•
6- Ο∆ΗΓΙΕΣ
Υλικό:
•
Παρεχόµενο υλικό: Μέσον Pseudomonas aeruginosa
•
Μη παρεχόµενο ειδικό υλικό: γλυκερόλη
Ενοφθαλµισµός:
Ενοφθαλµίστε την επιφάνεια του άγαρ µε τη βοήθεια κρίκου, στειλεού ή διηθητικής µεµβράνης, ανάλογα µε το πλαίσιο
εφαρµογής.
Επώαση:
Επωάστε επί 24 έως 48 ώρες στους 37 °C.
Ανάγνωση:
Οι αποικίες του P. aeruginosa οι οποίες αναπτύσσονται στο άγαρ εµφανίζουν κιτρινοπράσινο χρώµα, ενώ ο φθορισµός τους
αποδεικνύεται µέσω υπεριωδών ακτίνων. Οι αποικίες συλλέγονται για περαιτέρω ταυτοποίηση του στελέχους. Ο προσδιορισµός
των οροτύπων πραγµατοποιείται µε αντικειµενοφόρο πλάκα συγκόλλησης χρησιµοποιώντας ειδικούς ανοσοορούς,
κατάλληλους για επιδηµιολογικές µελέτες.
7•
•
•
ΕΠΙ∆ΟΣΕΙΣ/ ΠΟΙΟΤΙΚΟΣ ΕΛΕΓΧΟΣ ΤΗΣ ∆ΟΚΙΜΗΣ
Όψη του έτοιµου προς χρήση υλικού: ελαφρώς ιριδίζον άγαρ
Όψη του αφυδατωµένου υλικού: σκόνη µπεζ χρώµατος.
Η επιβεβαίωση των επιδόσεων του µέσου Pseudomonas aeruginosa ως προς την ανάπτυξη πραγµατοποιείται µε βάση τα
ακόλουθα στελέχη:
ΣΤΕΛΕΧΗ
ΑΠΟΤΕΛΕΣΜΑΤΑ ΚΑΛΛΙΕΡΓΕΙΑΣ ΜΕΤΑ ΑΠΟ 24
έως 48 ώρες σε θερµοκρασία 37°C
Φθορίζουσες αποικίες πράσινου και κίτρινου χρώµατος
Απουσία ανάπτυξης
Απουσία ανάπτυξης
8- ΕΛΕΓΧΟΣ ΠΟΙΟΤΗΤΑΣ ΕΚ ΜΕΡΟΥΣ ΤΟΥ ΚΑΤΑΣΚΕΥΑΣΤΗ
Όλα τα προϊόντα που κατασκευάζονται και διατίθενται στο εµπόριο από την εταιρία µας υποβάλλονται σε όλες τις διεργασίες του
συστήµατος διασφάλισης ποιότητας, από την παραλαβή των πρώτων υλών έως την εµπορευµατοποίηση των τελικών
προϊόντων. Κάθε παρτίδα τελικού προϊόντος υποβάλλεται σε έλεγχο ποιότητας και διατίθεται στο εµπόριο µόνον όταν
συµµορφώνεται προς τα κριτήρια αποδοχής. Η τεκµηρίωση σχετικά µε την παραγωγή και τον έλεγχο κάθε παρτίδας τηρείται
εντός της εταιρίας Bio-Rad.
9•
•
•
•
•
•
ΟΡΙΑ ΧΡΗΣΗΣ
Ο σχηµατισµός µη χρωµατισµένων αποικιών τυπικά δεν αποκλείει τη διάγνωση του Pseudomonas aeruginosa.
Οι αποικίες των Pseudomonas που παράγουν πυοκυανίνη και πυοβερδίνη πρέπει να διαφοροποιούνται από τα υπόλοιπα
στελέχη των Pseudomonas που παράγουν µόνο πυοβερδίνη. Η θερµοκρασία µπορεί να διαδραµατίσει αποφασιστικό ρόλο
καθώς τα περισσότερα στελέχη που παράγουν πυοβερδίνη αναπτύσσονται αποκλειστικά σε θερµοκρασίες από 25 έως
30°C και δεν αναπτύσσονται σε θερµοκρασίες που υπερβαίνουν τους 35°C (4).
Η ανάπτυξη ορισµένων στελεχών στο µέσον αυτό ενδέχεται να µην λάβει χώρα εξαιτίας των θρεπτικών τους απαιτήσεων.
Ορισµένα στελέχη ενδέχεται να µην αναστέλλονται.
Η ανασταλτική επίδραση µειώνεται παρουσία υπερβολικής ποσότητας ενοφθαλµίσµατος.
Για την ταυτοποίηση του είδους του αποµονωµένου στελέχους απαιτούνται συµπληρωµατικές δοκιµές.
10- ΒΙΒΛΙΟΓΡΑΦΙΑ
1. BROWN V.I. et LOWBURY E.J.L., J. Clin. Path., 1965, 18 p. 752-756.
2. GOTTOS S. et ENAMOTOS. S., Jap. J. Microbiol., 1970, 14 p. 65-72.
3. LOWBURY E.J. et COLLINS. A.B., J. Clin., Path., 1955, 8 p. 47-48.
4. MACFADDIN J.F. Media for isolation-cultivation-identification-maintenance medical bacteria, vol. 1. Williams & Wilkins, MD,
1985, Baltimore.
5. Pharmacopée Européenne, Addendum 4.2 de la IVe édition, 2002, p. 2841.
55857
63914
64804
SZELEKTÍV TÁPTALAJ PSEUDOMONAS AERUGINOSA IZOLÁLÁSÁHOZ
1- FELHASZNÁLÁS
A Pseudomonas aeruginosa agar szelektív közeg kóros mintákból vagy kórházhigiénés vizsgálati mintákból (felületekről,
sebészeti eszközökről vagy antiszeptikus oldatokból) származó Pseudomonas törzsek izolálásához és előzetes
azonosításához.
2- ALAPELV
A táptalaj szelektivitása kvaterner ammóniumvegyület (cetrimid) jelenlétének köszönhető, amely gátolja minden más baktérium
növekedését, kivéve a Pseudomonas aeruginosa-t.
A Pseudomonas aeruginosa jellegzetessége, hogy két pigmentet is termel: a pyoverdint (fluoreszcens festékanyag) és a pyocianint.
A pyocianin termelést elősegíti a magnézium-klorid és a kálium-szulfát jelenléte.
3- KISZERELÉS
• Felhasználásra kész közeg:
- 20 db Petri-csészét (90 mm) (PYO) tartalmazó doboz
• Felhasználásra kész (kiönthető) közeg:
- 6 db 200 ml-es üveg (PYO)
• Portáptalaj:
- 500 g-os doboz
4-
kódszám 63914
kódszám 55857
kódszám 64804
ELVI ÖSSZETÉTEL (g/l desztillált víz)
A Pseudomonas aeruginosa táptalajt az Európai Gyógyszerkönyv 4 (2002) N közegének elvi receptje szerint készítjük el.
Pepton
20
Kálium-szulfát
10
Magnézium-klorid
1,4
Cetrimid
0,3
Agar
13,6
Glicerin
10 ml
Végső pH-érték: 7,1 ± 0,2
A táptalaj elkészítése:
Keverjük el a dobozban található port.
A portáptalajból adjunk 47 grammot egy liter frissen desztillált vízhez. Tegyünk hozzá 10 ml glicerint és óvatosan melegítsük
egészen forrásig, amíg teljesen fel nem oldódik. Ha szükséges, állítsuk be 7,1-re a pH-ját. Sterilezzük autoklávban 120°C-on 15
percig.
Öntsük Petri-csészékbe, vagy palackokba.
5- TÁROLÁS
• A felhasználásra kész közeget +2-8°C között tároljuk.
• A felhasználásra kész (kiönthető) közeget +2-25°C között tároljuk.
• A száraz portáptalajt szorosan lezárt üvegben, száraz helyen, +15-25°C között tároljuk.
A szavatossági idő és a gyártási sorozat száma a csomagoláson olvasható.
6- HASZNÁLATI ÚTMUTATÓ
Anyag:
• A forgalmazó által szállított Pseudomonas aeruginosa közeg.
• Szükséges, de nem szállított anyag: glicerin.
Leoltás:
A felhasználási területtől függően kaccsal, tamponnal vagy szűrőmembrán felhelyezésével oltsuk be az agar felületét.
Inkubálás:
Inkubáljunk 24-48 órán át, 37°C-on.
Leolvasás:
Az agaron növekvő P. aeruginosa telepek zöldessárga színűek, és a fluoreszkálásuk ultraibolya fényben kimutatható. A
termelésük a törzs pontosabb identifikálásához szükséges. A szerotípust epidemiológiai vizsgálatokhoz használatos specifikus
immunszérummal végzett lemezagglutinációval kell meghatározni.
7- MINŐSÉG/A KÖZEG MINŐSÉGÉNEK ELLENŐRZÉSE
• A felhasználásra kész közeg megjelenése: kissé opálos agar.
• A portáptalaj megjelenése: bézsszínű por.
• A Pseudomonas aeruginosa táptalaj szaporítóképességét az alábbi törzsekkel ellenőrizzük:
TÖRZSEK
Enterococcus faecalis TLC 2541
EREDMÉNYEK 24-48-órás, 37°C-os TENYÉSZTÉS
UTÁN
Fluoreszcens, zöld és sárga telepek
Nincs növekedés
Nincs növekedés
8- A GYÁRTÓNÁL FOLYÓ MINŐSÉGELLENŐRZÉS
Az összes termékünk a saját minőségellenőrző rendszerünk szerint készült, a nyersanyag átvételétől kezdve a termék
forgalmazásáig. Minden egyes gyártási sorozat minőségét ellenőrizzük, és csak akkor hozzuk forgalomba, ha az megfelel az
előre felállított kritériumoknak. Minden sorozat gyártási és minőségellenőrzési jegyzőkönyve megtalálható a Bio-Radnál.
9•
•
•
•
•
•
AZ ALKALMAZÁS KORLÁTAI
A színtelen telepek keletkezése nem zárja ki automatikusan a Pseudomonas aeruginosa jelenlétét.
A pyocianint és pyoverdint egyaránt termelő Pseudomonas telepeket meg kell különböztetni más Pseudomonas törzsektől,
amelyek csak pyoverdint termelnek. A hőmérséklet meghatározó lehet, mivel a legtöbb pyoverdin termelő törzs csak 2530°C között növekszik, s 35°C fölött már nem tenyészik (4).
Előfordulhat, hogy egyes speciális tápanyagigényű törzsek nem növekszenek ezen a közegen.
Akadnak olyan törzsek, amelyeket nem gátol ez a közeg.
Nagy mennyiségű inokulum jelenlétében csökkenhet a gátló hatás.
Kiegészítő vizsgálatokat is kell végezni az izolált törzshöz tartozó fajok identifikálásához.
10- HIVATKOZÁSOK
1. BROWN V.I. et LOWBURY E.J.L., J. Clin. Path., 1965, 18 p. 752-756.
2. GOTTOS S. et ENAMOTOS. S., Jap. J. Microbiol., 1970, 14 p. 65-72.
3. LOWBURY E.J. et COLLINS. A.B., J. Clin., Path., 1955, 8 p. 47-48.
4. MACFADDIN J.F. Media for isolation-cultivation-identification-maintenance medical bacteria, vol. 1. Williams & Wilkins, MD,
1985, Baltimore.
5. Pharmacopée Européenne, Addendum 4.2 de la IVe édition, 2002, p. 2841.

pseudomonas aeruginosa

Transcription

Documents pareils

Pseudalert Procedure

62798_Platelia Candida Ag

SSANGYONG REXTON II

hyundai santa fe` 2006

muller-kauffmann tetrathionate

Colilert* 250 Verfahren

Colisure* Procedure