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Institut Pasteur d’Algérie RAPPORT D’ACTIVITE 2008 Route du Petit Staouèli, Dely Ibrahim - Alger Tel : 213 (0) 21 37 26 74 – Fax : 213 (0) 21 36 17 48 Site web : http://www.pasteur.dz Institut Pasteur d’Algérie 2 Sommaire Rapport d’Activité 2008 Institut Pasteur d’Algérie Rapport d’Activité 2008 Sommaire PRESENTATION DU PERSONNEL 7 ACTIVITE DES LABORATOIRES DE RECHERCHE / DIAGNOSTIC ♦ Bactériologie médicale, antibiothérapie et hygiène hospitalière 19 ♦ Immunologie 31 ♦ Tuberculose et mycobactéries 55 ♦ Anaérobies 65 ♦ Biologie parasitaire 73 ♦ Bio-Pathologie 83 ♦ Eco-épidémiologie et génétique des populations 91 ♦ Entérobactéries-vibrions 105 ♦ Entérovirus 113 ♦ Génétique 117 ♦ Helicobacter Pylori 119 ♦ Listeria 123 ♦ Microbiologie vétérinaire et Epizootiologie 125 ♦ Mycologie 135 ♦ Recherche et développement sur les venins 141 ♦ VIH et rétrovirus 149 ♦ Virologie humaine ♦ Grippe 153 Hépatites 157 Virus et cancers 163 ACTIVITE DES LABORATOIRES DE CONTROLE DE QUALITE ♦ Contrôle de la qualité bactériologique des aliments 177 ♦ Contrôle de la qualité bactériologique des eaux 181 ♦ Contrôle de la qualité des vaccins et sérums 185 Sommaire 3 Institut Pasteur d’Algérie Rapport d’Activité 2008 ACTIVITE DES LABORATOIRES DE PRODUCTION ♦ Animaux de laboratoire et de production 209 ♦ Milieux de culture 211 ♦ Mise en forme pharmaceutique 219 ♦ Sérums thérapeutiques 225 ♦ Vaccins bactériens 229 ♦ Vaccins et sérums antirabiques 239 ♦ Vaccins viraux vétérinaires 243 ACTIVITE DE L’UNITE D’EPIDEMIOLOGIE ET DES CENTRES MEDICAUX ♦ Unité d’épidémiologie, d’intervention et vaccinovigilance 247 ♦ Centre des prélèvements 251 ♦ Centre des vaccinations 257 ACTIVITE DES ANTENNES REGIONALES ♦ Antenne de Constantine 265 ♦ Antenne de M’sila 269 ♦ Antenne d’Oran 275 ACTIVITE DU SERVICE DE LA FORMATION 4 281 ACTIVITE DE LA BIBLIOTHEQUE 297 ABREVIATIONS 301 Sommaire Présentation du Personnel Institut Pasteur d’Algérie 6 Présentation du Personnel Rapport d’Activité 2008 Rapport d’Activité 2008 Institut Pasteur d’Algérie DIRECTIONS ET SERVICES TECHNICO-ADMINISTRATIFS DIRECTION GENERALE Directeur général: El Hadj Ahmed LEBRES (Doctorat en Microbiologie) Directeur Général Adjoint : Abdeslem KHAN Conseiller du Directeur Général : Djamel GHETARNI Secrétaires de direction : H. GUERBICHE : B. TAHRAOUI Chargé de missions : M. BARKAT (Ingénieur d’état en Electrotechnique) (Professeur en Biologie) DIRECTION DES FINANCES ET DE LA COMPTABILITE Directeur Encadrement Personnel de soutien : D. MAZOUNI : 15 : 18 DIRECTION COMMERCIALE Directeur Encadrement Personnel de soutien : N. GHERAIEB : 08 : 14 DIRECTION TECHNIQUE Directeur Encadrement : B. MAKHLOUF : 01 DIRECTION DES RESSOURCES HUMAINES Directeur Encadrement Personnel de soutien : M.S. BOUAÏCHI : 09 : 07 DIRECTION DES APPROVISIONNEMENTS Directeur Encadrement Personnel de soutien : S.K. LALIOUI : 04 : 20 DIRECTION DE LA MAINTENANCE TECHNIQUE ET DE L’ENTRETIEN Directeur Encadrement Personnel de maîtrise Personnel d’exécution : H. BENDALI-BRAHAM : 11 : 39 : 62 Présentation du Personnel 7 Rapport d’Activité 2008 Institut Pasteur d’Algérie SERVICE INFORMATIQUE Responsable : Y. KEMARI Personnel de soutien : 03 SERVICE DES MARCHES Responsable : L. BENSAADA Personnel de soutien : 01 SERVICE DE SECURITE PREVENTIVE Responsable Encadrement Personnel de maîtrise Personnel de sécurité 8 : A. GUIR : 05 : 14 : 65 Présentation du Personnel Rapport d’Activité 2008 Institut Pasteur d’Algérie SERVICES ET LABORATOIRES DE DIAGNOSTIC ET DE RECHERCHE 1. Service de Bactériologie médicale, antibiothérapie et hygiène hospitalière Chef de service : K. RAHAL (D.M. / Prof. INESSM) Assistants : N. TAHRAT : B. GUETTOU : O. LAFER : S. LAZIZI : N. ZOURDANI : R. OURAGHI : N. REZAOUI : R. LALIAM : D. GUESSOUM (Ing. d’Etat en Génie Biologie) (Ing. d’Etat en Biologie) (Ing. d’Etat en Biologie) (Ing. d’Etat en Biologie) (Ing. d’Etat en Biologie) (DES en Biologie) (DES en Biologie) (DES en Biologie) (DES en Biologie) Technicien sup. de labo. Technicien en informatique Technicien de labo Secrétaire médicale Personnel de soutien : 04 : 01 : 01 : 03 : 02 2. Service d’Immunologie Chef de service : M.C. ABBADI (Ph. / Prof. INESSM) Assistants : N. ATTAL : K. DJENOUHAT : H. AÏT-BELKACEM : K. BELANTEUR : N. KECHOUT : N. HADJ BEKKOUCHE : S.S. SALAH : R. RAACHE : N. KACI : A. HANNICHE : K.D. BERRIMI : S. AIT-SAID : S. KEBBAB : F. BOUSSA : N. BOUDABA : S. MARIR (Ph. / M.A. INESSM) (D.M. / M.A. INESSM) (D.M. / M.A. INESSM) (D.M. spécialiste) (D.M. / spécialiste) (D.M. / spécialiste) (Ph. spécialiste) (Biologiste spécialiste) (Biologiste spécialiste) (Ing. En Biologie) (DES en Biologie) (DES en Biologie) (DES en Biologie) (DES en Biologie) (DES en Biologie) (DES en Biologie) Tech. Sup. de labo Tech. de labo. Administrateur Secrétaire médicale Personnel de soutien : 03 : 01 : 01 : 01 : 04 3. Service de la Tuberculose et des Mycobactéries Chef de laboratoire Assistants : F. BOULAHBAL : D. YALA : A. DJOUAHRA : M. IFTICENE Tech. Sup. de labo Administrateur Secrétaire médicale Personnel de soutien : 09 : 01 : 01 : 05 (D.M. / Prof./ INESSM) (D.M / Docent/ INESSM) (D.M / M.A INESSM) (D.M. spécialiste) Présentation du Personnel 9 Rapport d’Activité 2008 Institut Pasteur d’Algérie 4. Laboratoire des Anaérobies et Botulisme Chef de laboratoire : A.S. MERAD (Ph. / M.A. INESSM) Assistantes : N. FERRAD : I. BETATECHE : H. ROBAINE : L. HAREB (D.M. microbiologiste) (D.V.) (D.V.) (Ing. d’Etat en Biologie) Tech. Sup. de labo Secrétaire médicale Personnel de soutien : 04 : 01 : 02 5. Laboratoire de Biologie Parasitaire Chef du laboratoire : F. BACHI (D.M. Docent INESSM) Assistantes : N. ZENAÏDI : E. GOURBDJI : L. LAZIZI : A. BENZITOUNI : L. TAOURIRT (D.M spécialiste) (Ph. spécialiste) (Ing. En Biologie) (Ing. En Biologie) (DES en Biologie) Tech. Sup. de labo. Tech. de labo. Secrétaire médicale Personnel de soutien : 07 : 01 : 01 : 05 6. Laboratoire de Bio-Pathologie Chef de laboratoire : A. BOUHADEF Tech. Sup. de labo. Personnel de soutien : 02 : 01 (Professeur, CA) 7. Laboratoire d’Eco-épidémiologie parasitaire et génétique des populations Chef de laboratoire : Z. HARRAT (D.M. Maître de recherche) Assistants : I. KHARACHI : S. BENIKHLEF : S.C. BOUBIDI : I. BITAM : N. EDDAIKRA : R. BENCHERIFA : R. GARNI : S. BENBETKA (Ing. en Biologie) (DES en Biologie) (DES en Biologie) (DES en Biologie) (DES en Biologie) (DES en Biologie) (DES en Biologie) (DES en Biologie) Tech. sup. de labo Personnel de soutien : 02 : 01 8. Laboratoire des Entérobactéries-Vibrions Chef de laboratoire : F. MOUFFOK (Ph. / M.A. INESSM) Assistants : C. BELKADER (DES en Biologie) Tech. sup. de labo Secrétaire médicale Personnel de soutien : 03 : 01 : 02 10 Présentation du Personnel Rapport d’Activité 2008 Institut Pasteur d’Algérie 9. Laboratoire des Entérovirus Chef de laboratoire : M. SEGHIER (D.M. /M.A. INESSM) Assistante : D.L. BOULAHBAL (D.V.) Tech. Sup. de labo. Personnel de soutien : 03 : 02 10. Laboratoire de Génétique (voir le laboratoire de biologie parasitaire) Chef de laboratoire : N. SERIDI (Biologiste spécialiste) Assistants : A. AIT AISSA : K. BENALLAL : L. BOUIBA : N. KARA (DES en Biologie) (DES en Biologie) (DES en Biologie) (DES en Biologie) 11. Laboratoire de Génétique constitutionnelle et d’onco-génétique Chef de laboratoire : H. KESRI (D.M./M.A.) Assistantes : N. BENFARES : N. SOUAI (Ing. en Biologie) (DES en Biologie) 12. Laboratoire Helicobacter pylori Chef de laboratoire : F. MOUFFOK (Ph. / M.A. INESSM) Assistant Tech. Sup. de labo. : F. KIAS : 01 (Ing. en Bactériologie) Chef de laboratoire : E.H. LEBRES (Directeur de recherche) Tech.Sup.de labo. : 01 13. Laboratoire des Listéria 14. Laboratoire de Microbiologie vétérinaire et épizootiologie : N. TOUARIGT (D.V.spécialiste) jusqu’au 1er août 2008 (D.V.) à partir du 1er août 2008 Assistants : E. ABDELATIF : A. ABOUN : M. MADANI : R.N. BENELMOUFFOK : A. AMARA-KORBA (D.V) (D.V) (D.V) (D.V) (Ing. d’Etat en Biologie) Tech. sup. de labo. Personnel de soutien : 05 : 03 Chef de laboratoire : A. TARIL 15. Laboratoire de Mycologie Chef de laboratoire : D. KELLOU (Ph. M.A. INESSM) Assistants : Z. HAMROUNE : A.B. BENELMOUFFOK (D.M. / M.A. INESSM) (Ing. d’Etat en Biologie) Secrétaire Personnel de soutien : 01 : 01 Présentation du Personnel 11 Rapport d’Activité 2008 Institut Pasteur d’Algérie 16. Laboratoire de Recherche sur les Venins Chef de laboratoire : F. LARABA-DJEBARI (Prof./ USTHB/ CA) Assistante : D. HAMOUDI-TRIKI : O. SADEDDINE (Biologiste spécialiste/CA) (Ing. en Biologie) Secrétaire médicale : 01 17. Laboratoire VIH et rétrovirus Chef de laboratoire Tech. Sup. de labo. Personnel de soutien : S. BOUZEGHOUB : 02 : 01 (D.M./ M.A./INESM) 18. Laboratoire de Virologie humaine Chef de laboratoire : F. DERRAR (D.M. spécialiste) Assistantes : A. BENSALEM : F. IGUER : S. BOUDJADJA : K.L. IZRI : N. TERFANI (D.M./ M.A./ INESSM) (Biologiste spécialiste) (Ing. En Biologie) (Ing. En Biologie) (DES en Biologie) Tech. Sup. de labo. Tech. de labo. Secrétaire médicale Personnel de soutien : 09 : 03 : 01 : 01 19. Laboratoire des virus et cancers Chef de laboratoire : A. BOUGUERMOUH (D.M. /Prof.) Assistants : H. MELOULI : N. SADOUKI : S. DAHMANI : F. TAIBI (Biologiste spécialiste) (Ing. d’Etat en Biologie) (Ing. d’Etat en Biologie) (Ing. d’Etat en Biologie) Tech. Sup. de labo. : 02 LABORATOIRES DE CONTROLE DE LA QUALITE 1. Laboratoire de contrôle de la qualité bactériologique des aliments Chefs de service : F. MOUFFOK (Ph. / M.A. INESSM) Assistants : E.H.A. LEBRES : H. AL AMIR : A.A. BENABBOU (Maitre de recherche) (Magister en agronomie) (Ing. d’état chimie industrielle) Tech. Sup. de labo Secrétaire médicale Tech. de labo. Personnel de soutien : 07 : 02 : 01 : 03 12 Présentation du Personnel Rapport d’Activité 2008 Institut Pasteur d’Algérie 2. Laboratoire de contrôle de la qualité bactériologique des eaux Chefs de service : F. MOUFFOK (Ph. / M.A. INESSM) Assistants : A. BENABOU : Y. HAFFERSSAS (Ing. en chimie) (Ing. en microbiologie) Tech. sup. de labo. : 02 3. Laboratoire de Contrôle de qualité des vaccins et sérums Chef de laboratoire : N. TOUABTI (Ph. D. en chimie) Assistants : S. KEZZAL : M. ALOUACHE : L.N. DAÏD : A. DJOUABRI : A. MOKRANI : L. AÏT-SAÏD : K. TAHAR-DJEBBAR : M. HAMLAT : S. BOUMENDIL : N. SEGHOUANI : A. ZAIDI (Pharmacien) (D.V) (Ing. d’état en biologie) (Ing. en chimie) (Ing. d’état en génie - chimique) (Ing. d’état en génie - biologique) (DES en Biologie) (DES en Biologie) (DES en Biologie) (DES en Biologie) (DES en Biologie) Tech. Sup. de labo. Secrétaire médicale Personnel de soutien : 05 : 02 : 03 LABORATOIRES DE PRODUCTION 1. Laboratoire des Animaux de laboratoire et de production Chef de laboratoire : N. TOUARIGHT : M. ISSAD Personnel de soutien : 06 (D.V.) jusqu’au 31 juillet 2008 (D.V.) à partir du 1er août 2008 2. Laboratoire des milieux de culture Chef de laboratoire : M. BENABDELKADER (Ing. d’Etat en Biologie) Assistants : F.Z. HAMADOUCHE : N. MADANI : S. BELLACHE : S. KEBILENE : K. MESBAH : L. TSABIT (Ing. d’Etat en Biologie) (Ing. d’Etat en Biologie) (DES en Biologie) (DES en Biologie) (DES en Biologie) (DES en Biologie) Tech. sup de labo Secrétaire médicale Tech. de labo. Personnel de soutien : 04 : 01 : 05 : 32 Présentation du Personnel 13 Rapport d’Activité 2008 Institut Pasteur d’Algérie 3. Laboratoire de mise en forme pharmaceutique Chef de laboratoire : F.Z. BEGHDADI-GHANASSI (Ph. / Docent INESSM) Assistants : K. GUERBICHE : S. BELHAMISSI ; M. BOUCHENE Tech. Sup. de labo Tech. de labo. Personnel de soutien : 01 : 05 : 13 (Ph.) (DES en Biologie) (DES en Biologie) 4. Laboratoire des Sérums thérapeutiques Chef de laboratoire : A.C. BENGUEDDA (D.V spécialiste) Assistants : M.M. ABDELLI : M.L. SAÏDANI : N. ICHALAMENE (D.V.) (D.V) (Ing. d’Etat en Biotechnologies) Tech. Sup. de labo Tech. de labo. Personnel de soutien : 01 : 01 : 15 5. Laboratoire des Vaccins bactériens Chef de laboratoire : F. GACEM (Biologiste spécialiste) Assistantes : N. KHECHA : B. MECHTI (DES en Biologie) (DES en Biologie) Tech. Sup. de labo Tech. de labo. Personnel de soutien : 02 : 01 : 02 6. Laboratoire des Vaccins et sérums antirabiques Chef de laboratoire : M. BRAHIMI (D.V. spécialiste) Assistants : F. SEGHOUANI : A. BOUKHANFRA : S. OUARED (Ing. d’Etat en Biologie) (DES en Biologie) (DES en Biologie) Tech. Sup. de labo. Tech. de labo. Personnel de soutien : 03 : 01 : 14 7. Laboratoire des Vaccins viraux vétérinaires Chef de laboratoire : A. TARIL : N. TOUARIGT Tech. Sup. de labo. Personnel de soutien : 03 : 03 14 Présentation du Personnel (D.V spécialiste) jusqu’au 1er août 2008 (D.V.) à partir du 1er août 2008 Rapport d’Activité 2008 Institut Pasteur d’Algérie LABORATOIRE D’EPIDEMIOLOGIE ET CENTRES MEDICAUX 1. Unité d’Epidémiologie Chef d’unité : A. SOUFI Personnel de soutien : 01 (D.M.) 2. Centre des Prélèvements Chef de centre Tech. Sup. en soins infirmier Tech. infirmier Secrétaire médicale Personnel de soutien : A. BRIKA : 01 : 01 : 01 : 07 (D.M.) Chef de centre : A.S. HARCHI (D.M.) Tech. Sup.en soins infirmier Assistant administratif Secrétaire médicale Personnel de soutien : 02 : 01 : 01 : 02 3. Centre des Vaccinations ANTENNES REGIONALES DE L’IPA Antenne de Constantine Responsable : F. KHELIFA (D.M. spécialiste) Assistants Tech Sup en soins infirmiers Personnel de soutien : L. DIF : 01 : 04 (DES en Biologie) Responsable : A. BOUDRISSA (Ing. d’Etat en biologie) Assistants : K. LADGHAME-CHICOUCHE : M. BELHOUT : N. BENHALIMA : O. DAHMANI : W.K. DJELLID : F. ZEROUAK : A. SEGHIOUR : M. M’HATEF : D. FAYALA (DES en Biologie) (DES en Biologie) (DES en Biologie) (DES en Biologie) (DES en Biologie) (DES en Biologie) (DES en Biologie) (DES en Biologie) (DES en Biologie) Tech. Sup. de labo. Tech. sup. en informatique Personnel de soutien : 01 : 01 : 06 Antenne de M’Sila Présentation du Personnel 15 Rapport d’Activité 2008 Institut Pasteur d’Algérie Antenne d’Oran Responsable : L. BELHABRI (D.M.) Assistants : D. AMARA : A. TOUAA : H. BELARIBI : K. ALLA : C. MEZAACHE : N.I. OSTMANE : R. TERBACHE (D.M.) (DES en Biologie) (DES en Biologie) (DES en Biologie) (DES en Biologie) (DES en Biologie) (DES en Biologie) Tech. Infirmier Personnel de soutien : 01 : 04 SERVICE DE LA FORMATION Responsable : S. NEDIR BIBLIOTHEQUE Responsable : F.Z AÏT-OUAMAR Secrétaire Personnel de soutien : 01 : 03 16 Présentation du Personnel Activités des services et laboratoires de diagnostic et de recherche Institut Pasteur d’Algérie 18 Services et laboratoires de Diagnostic et Recherche Rapport d’Activité 2008 Rapport d’Activité 2008 Institut Pasteur d’Algérie Service de Bactériologie et d’Hygiène Hospitalière Médicale, d’Antibiothérapie Chef de Service : Kheira RAHAL (DM. Professeur INESSM) Comme nous l’avons déjà mentionné, le service est divisé en deux parties : 1ère partie : - Recherche et biologie moléculaire - Informatique - Souchothèque - Germes dangereux 2ème partie : - Diagnostic et sérologie - Hygiène hospitalière - Assurance qualité Les deux assistantes Dr H. TALI-MAAMAR et le Dr N. BENAMROUCHE en assurent les responsabilités sous la direction du chef de service à tour de rôle (permutation tous les 6 mois). I. ACTIVITE DE DIAGNOSTIC 1- Diagnostic et sérologie Cette unité traite les prélèvements adressés par les CHU, secteurs sanitaires et EHS et cabinets privés. Services et laboratoires de Diagnostic et Recherche 19 Rapport d’Activité 2008 Institut Pasteur d’Algérie 1.1- Diagnostic bactériologique courant : N. REZAOUI, N. TAHRAT, M. BOUHERAOUA Tableau 1 : Prélèvements reçus par mois et par poste. Janvier Février Mars Avril Mai Juin Juillet Août Septembre Octobre Novembre Décembre Total ECBU Divers Spermoculture P.Vaginal P.Uréthral Hémoculture 72 70 72 94 61 48 40 20 47 70 37 66 21 25 25 36 47 27 47 11 17 28 10 43 09 04 12 12 21 05 15 00 02 04 10 00 25 28 37 33 27 46 53 00 18 35 35 34 03 02 05 03 03 07 02 00 03 08 00 00 02 03 01 06 06 02 05 02 05 01 00 00 697 337 94 371 36 33 Total des prélèvements reçus durant l’année 2008 pour les postes de diagnostic = 1568 Nous avons perdu 70% de nos activités de diagnostic ; nous aimerions récupérer un local au niveau du polyfonctionnel du Hamma pour y installer un autre centre de prélèvements qui seront acheminés vers le laboratoire de bactériologie médicale de Dely Ibrahim. Tableau 2 : Souches reçues pour identification durant l’année 2008 Souche Enterococcus faecium Flavimonas oryzihabitans Staphylococcus epidermidis Pseudomonas aeruginosa Acinetobacter baumanii Escherichia coli Klebsiella oxytoca Chryseomonas lutéola Enterobacter cloacae Klebsiella pneumoniae Rahnella aquatilis Enterococcus faecalis Proteus mirabilis Acinetobacter lwoffii Bacillus sp Staphylococcus capitis Citrobacter youngae Staphylococcus hominis Staphylococcus warnneri Staphylococcus haemolyticus Staphylococcus aureus Klebsiella ozaenae Total 20 Services et laboratoires de Diagnostic et Recherche Nombre 01 02 17 01 02 02 02 02 02 03 01 02 02 01 01 02 01 02 01 01 01 01 53 Rapport d’Activité 2008 Institut Pasteur d’Algérie Tableau 3 : Nombre total d’antibiogrammes réalisés selon les normes CLSI Types de prélèvements Nombre d’antibiogrammes réalisés Urines 189 Hémocultures 65 P urétral + Spermoculture+P vaginal 129 Divers 87 DPCA 03 Souche à identifier 53 Total 526 1.2- Diagnostic bactériologique des souches pouvant être à l’origine d’épidémies : a) Corynebacterium diphteriae (diphtérie) : (B. GUETTOU, M. LAZRI) Nombre de prélèvements reçus Corynebacteriu m diphteriae mitis Corynebacteriu m diphtheriae belfanti Recherche de la toxine par PCR Bouira 01 00 00 00 B.Messous 02 00 02 Négative Blida 06 00 03 Négative Externe 01 00 01 Négative 10 00 06 Négative Origine Total b) Brucella (brucellose) : (B. GUETTOU, M. LAZRI) Origine Type de prélèvement Nombre de prélèvements reçus Germe isolé BLIDA LCR 01 Brucella melitensis biovar 3 CNMS 2- hémoc 1- valve 03 Brucelle melitensis Biovar3 Total 04 Services et laboratoires de Diagnostic et Recherche 21 Rapport d’Activité 2008 Institut Pasteur d’Algérie c) Bordetella pertussis (coqueluche) : (B. GUETTOU, M. LAZRI) COIFFEUR Aspirations nasopharyngées Frottis nasopharyngés Sérums Souches isolées Akbou 00 00 20 00 Annaba 00 00 01 00 Bab el oued 00 00 01 00 HCA 01 00 00 00 El kettar 00 01 01 00 Tougourt 00 00 01 00 B messous 03 00 02 00 Tlemcen 00 00 01 00 Externe 09 00 18 00 13 01 45 00 Origine Total 1.3- Sérologie bactérienne : (H. SENOUCI, S. CHEMLI) Les analyses effectuées au sein de l’unité « sérologie bactérienne » sont : • Diagnostic indirect de la brucellose humaine. • Diagnostic indirect de la syphilis. • Diagnostic indirect de Mycoplasma pneumoniae. • Diagnostic indirect de Chlamydia pneumoniae. • Diagnostic indirect de Légionella pneumophila urinaire et sanguin. • Diagnostic indirect de la diphtérie par ELISA. • Diagnostic des bartonelloses par IFI. Brucellose : Le nombre de sérums reçus cette année 2008 est de 412 sérums avec 61 positifs répartis géographiquement comme suit : Tableau n°1 : Hôpitaux et secteurs sanitaires Externe 15 Boufarik Tizi Ouzou Médéa Douéra Blida 9 1 4 6 1 CHU El Kettar Parnet Ain Defla Adrar Beni Messous Ain Bessam CNMS Z’mirli 3 1 1 9 2 5 3 1 Total 22 Nombre de positifs Services et laboratoires de Diagnostic et Recherche 61 Rapport d’Activité 2008 Institut Pasteur d’Algérie Syphilis : Le nombre de prélèvements reçus est de 23 avec aucun positif. Bartonella quuntana et henselae : La recherche des anticorps anti-bartonella quuntana et henselae s’est effectuée sur 8 sérums avec aucun positif. Diphtérie : Nous avons reçu pour la recherche des antitoxines diphtériques 71 sérums. Diagnostic indirect des affections respiratoires atypiques : Le nombre de prélèvements (sérums et urines) reçus pour la recherche des atypiques bactériennes durant l’année 2008 a été de 114 sérums et de 45 urines répartis comme suit : Tableau n°2 : Nombre de positifs Nombres de sérums reçus Mycoplasma pneumoniae 29 114 Chlamydiae pneumoniae 22 114 Légionella pneumophila sanguin 10 114 Légionella pneumophila urinaire 5 45 66 159 Anticorps et antigènes recherchés Total des germes atypiques Conclusion : Le nombre d’analyses effectuées pour tous les paramètres : Brucellose, syphilis, bartonellose, diphteries, chlamydiae, Mycoplasma pneumoniae et Légionella pneumophila sanguin et urinaire s’élève à 673 prélèvements. Recherche : - Mise au point de la technique ELISA F1 peste (Yersinia pestis) - Mise au point de la PCR appliquée aux pneumopathies atypiques bactériennes : Légionella pneumophila type 1 Services et laboratoires de Diagnostic et Recherche 23 Institut Pasteur d’Algérie Rapport d’Activité 2008 2- Assurance qualité : R. OURAGHI, S. LAZIZI et Dj. GUESSOUM G Activités Assurance Qualité Mise en place de la base documentaire • Rédaction de modes opératoires : 9 Les modalités des prélèvements 9 Prélèvement urétral, de pus, de gorges, nasales et oculaires • Les techniques bactériologiques des prélèvements : 9 Prélèvement cervico-vaginal 9 ECBU G Activités de Contrôle de Qualité • Contrôle des milieux de culture A chaque nouveau lot, contrôle de fertilité et de stérilité. • Contrôle de l’antibiogramme A chaque nouveau lot, étude du PH, de la concentration en cations, de la concentration en thymine et thymidine et des diamètres des disques d’antibiotiques. • Contrôle des températures (étuves et chambre froide) Activités d’expertise Expertise de cinq lots de milieu Mueller Hinton Contrôle de qualité de 5 lots de gélose Mueller Hinton de fournisseurs différents. Etude du PH, de la concentration en cations, de la concentration en thymine et thymidine et des diamètres des disques d’antibiotiques. Expertise de cinq poudres d’amoxicilline pour le compte du LNCPP Etude comparative de l’activité de 5 lots de poudre d’amoxicilline de fournisseurs différents. Etude de la bactériostase par la détermination de la CMI et de la bactéricidie par la détermination de la CMB. 24 Services et laboratoires de Diagnostic et Recherche Rapport d’Activité 2008 Institut Pasteur d’Algérie 3- Hygiène hospitalière : N. ZOURDANI Enquêtes : Lieu Intervention Date SOMEDIAL Oued Semar El Harrach Enquête Janvier 2008 CHU Beni Messous Sce de Cardiologie Enquête Avril 2008 EPH Meftah – Bloc opératoire Pré-enquête Juillet 2008 EHS Aït Idir Sce de réanimation Enquête Septembre 2008 Contrôle d’environnement : Lieu Date Centre d’imagerie médicale Youghourta Mai 2008 Centre d’imagerie médicale Youghourta Décembre 2008 Hygiène intra service : Contrôle de l’eau, des paillasses, et de l’air. Contrôle des mains et des surfaces (ordinateurs, téléphones portables). Mise en place du système de pré-collecte des déchets conformément à la circulaire ministérielle. Contrôle de Stérilité : Contrôle de sang et sérum de cheval, sang de mouton, verrerie. Contrôle des hottes et des étuves. II. RECHERCHE 1- Développement de la Biologie Moléculaire : Mise au point de techniques : - Recherche du gène Mec A à l’origine de la résistance des Staphylocoques aureus à la méthicilline par PCR. - Recherche du gène Mec A et de la leucocidine de Panton Valentine chez S. aureus. - Identification des entérocoques et mise en évidence de la résistance à la vancomycine par les techniques de PCR et d'hybridation. Services et laboratoires de Diagnostic et Recherche 25 Institut Pasteur d’Algérie Rapport d’Activité 2008 2- Projets de recherche : - Projet PTR qnr : H. TALI-MAAMAR, F. ASSAOUS, O. LAFER, R. LALIAM Il s’agit d’un projet du programme transversal de recherche du réseau international des Instituts Pasteur. L’objectif est de déterminer chez les entérobactéries résistantes aux céphalosporines de 3ème génération, la proportion des résistances plasmidiques aux quinolones en Alfrique et en Asie. • Suite et fin de la collecte des souches. • Recherche des gènes qnr A, B et S, et aac(6’)-Ib par PCR. • Caractérisation des enzymes de résistance aux céphalosporines de 3ème génération. • Début de l’étude épidémiologique. - Projet N. meningitidis : H. TALI-MAAMAR, R. LALIAM • Contrôle de la conservation des souches. • Etude de la sensibilité aux antibiotiques par technique de CMI E test. • Collecte d’échantillons de LCR et commande de réactifs pour la mise en route du diagnostic des méningites par technique de PCR. - Projet : ß-lactamines à spectre élargi synthétisées par les Salmonella isolées en milieu hospitalier : M.N. OUAR-KORICHI, F. ASSAOUS Durant l’année 2008, nous avons complété l’étude moléculaire des différentes souches de Salmonella non typhoïdique par la technique de PCR en recherchant la présence d’intégrons de classe 1, de classe 2, de classe 3 et l’élément SXT. • L’étude a permis de révéler la présence d’intégrons classe 1 dans les souches isolées de 3 épidémies (El Oued, Sétif, Constantine). • Extractions plasmidiques par lyse alcaline : non concluantes (doivent être relancées). • Rédaction de la thèse en cours. - Projet : Caractérisation phénotypique et génotypique des souches de V.cholerae résistantes aux antibiotiques en Algérie : H. AMMARI, F. ASSAOUS Dans le cadre de la thèse, un stage de biologie moléculaire a été effectué au niveau de l’Institut Pasteur de Paris dans l’unité Plasticité du génome bactérien (Didier MAZEL) du au 15 au 30 juillet 2008. Ce stage a permis l’apprentissage de la technique de séquençage des produits d’amplification par PCR. Rédaction en cours d’un article scientifique intitulé : « Place des intégrons de classe 1 et de l’élément SXT dans la résistance aux antibiotiques chez Vibrio cholerae » Article à paraître dans les archives de l’Institut Pasteur d’Algérie. 26 Services et laboratoires de Diagnostic et Recherche Institut Pasteur d’Algérie Rapport d’Activité 2008 - Projet : Coqueluche diagnostic et prévention : Dj. TOUATI, M. LAZRI La coqueluche est une infection respiratoire contagieuse transmise par voie aérienne par l’intermédiaire de gouttelettes de salive à partir du réservoir humain. C’est une infection connue déjà au moyen âge. 1900 : Bordet et Gengou médecins bactériologistes belges découvrent l’agent de la coqueluche. 1906 : La culture fut possible sur un milieu enrichi en extrait de pomme de terre. La bactérie nommée au départ Bacillus pertussis puis Haemophilus pertussis. En 1952 la bactérie est nommée Bordetella pertussis en hommage à Bordet. C’est un coccobacille à Gram négatif appartenant à la famille des alcaligenaceae et fait partie des germes fastidieux, car nécessite de la nicotinamide de la cystéine. Il ne pousse qu’après 03 jours à 07 jours en aérobie. Bordetella pertussis produit une toxine pertussique (PTX). 1903 à 1960 : La coqueluche présentait des cycles tous les 03 à 04 ans, la plupart des enfants étaient infectés par Bordetella pertussis avant l’âge de 15 ans avec un pic à 05 ans, et les adultes étaient régulièrement exposés à la maladie et développaient une immunité naturelle et continue. La vaccination a été introduite en 1959 et généralisée en 1966. 1989 : On observe une résurgence de la coqueluche en France et aux Etats-Unis, avec un changement de l’épidémiologie. La coqueluche, est une maladie d’actualité selon toutes les études européennes, américaines, et asiatiques. Avec des tableaux cliniques variables voir atypiques. Le diagnostic clinique est difficile, il faut retenir : Les toux quinteuses. Les toux prolongées plus de 08 jours, mais inférieures à 02 mois. Toux émétisantes, avec des accès nocturnes. Il faut chercher toujours le(s) contaminant(s). Le diagnostic bactériologique est divisé en trois parties : Culture : Peut être réalisé pendant les trois premières semaines sur une aspiration naso-pharyngée. La culture reste difficile vu la fragilité de la bactérie qui est à l’origine de nombreux faux négatifs. La culture peut être négative en cas de prise d’antibiotiques ou suite à un prélèvement mal fait. Des milieux spéciaux sont à disposition : Bordet-Gengou ou Regan-Lowe. Biologie moléculaire : Est plus sensible que la culture et reste positif pendant 04 semaines peut être réalisée en rétrospective. Sérologie : ose le diagnostic après l’infection ; d’interprétation difficile chez le nouveau-né et les personnes récemment vaccinées car la réaction ne fait pas la différence entre les anticorps naturels ou vaccinaux. La lecture nécessite deux sérums à un mois d’intervalle (phase aigue et phase de convalescence) afin de mettre en évidence une ascension des anticorps. La sérologie est un diagnostic de choix pour l’adulte qui consulte tard. Services et laboratoires de Diagnostic et Recherche 27 Rapport d’Activité 2008 Institut Pasteur d’Algérie La sérologie reste un diagnostic de certitude quand on ne peut réaliser les autres tests, une augmentation des titres de plus de deux voire quatre fois entre les deux échantillons signe, en général, une séroconversion, par l’immuno-enpreinte ou par technique immunoenzymatique. - Projet : Prévalence des Salmonelloses aviaires et étude de la résistance aux antibiotiques des souches isolées : S. KECHIH, F. ASSAOUS Les salmonelloses humaines non typique constituent l’un des problèmes important du monde contemporain et entraînent des pertes économiques considérables. L’étude épidémiologique des toxi-infections alimentaires dont l’agent causal est représentée par Salmonella sp. démontre dans de nombreux cas l’origine animale et surtout aviaire (viandes, œufs et ovo produits). Afin de maîtriser cette pathologie, les antibiotiques représentent la première classe thérapeutique utilisée aussi bien chez l’homme que chez la volaille. Notons que les volailles ainsi que tous les animaux de rente reçoivent les antibiotiques aussi bien comme médicaments anti-infectieux, qu’additifs alimentaires à effet promoteur de croissance, ce qui a favorisé l’émergence des résistances bactériennes à certains antibiotiques qui se développent et se transmettent à travers différentes modalités de pression de sélection. Toutes ces raisons ont motivé notre travail qui se résume à la caractérisation des souches de salmonelles aviaires isolées au niveau de cinq wilayas du centre du pays par : - Le sérotypage de ces souches. - La répartition des différents sérotypes par type de production. - La répartition des différents sérotypes par wilaya. - L’étude de leurs réponses vis-à-vis des antibiotiques par la méthode de diffusion sur gélose et la concentration minimale inhibitrice. - L’étude des supports de résistance. - Le groupage des plasmides par la technique de compatibilité. - L’utilisation de l’électrophorèse en gel d’agarose afin de visualiser ces plasmides. - Projet : Réseau antibiotiques : de surveillance de la résistance bactérienne aux Durant l’année 2008 un stage de formation a été organisé pour les 32 participants du réseau (médicaux et vétérinaires). En novembre 2008, une formation a été organisée pour les formateurs afin de préparer les participants à la biologie moléculaire. Les formations des participants auront lieu durant l’année 2009. 28 Services et laboratoires de Diagnostic et Recherche Rapport d’Activité 2008 Institut Pasteur d’Algérie III. FORMATION A l’Institut Pasteur Résidents en sciences médicales Nom et Prénom Période Abaziz Hassiba Décembre – Janvier 2008 Drouaz nadjoua Décembre – Janvier 2008 Hamidi Moufida Février – Mars 2008 Tlemçani Adel Février – Mars 2008 Mokhtari kamelia Février – Mars 2008 Souici Mériem Avril – mai 2008 Arib samia Avril – mai 2008 Belloufa Mohammed Amine Avril – mai 2008 Hamaili Linda Avril – Mai 2008 Ali Amel Mai – juin 2008 Nessab Abdelkader Octobre – Novembre 2008 Benmansour Hanaa Octobre – Novembre 2008 Mechhoud Abdel hamid Octobre – Novembre 2008 Ousser Ahmed Fateh Novembre – Décembre 2008 - Journée d’information sur la gestion des déchets à l’IPA - Amphithéâtre IPA Dely Ibrahim. 09 Mars 2008. - Atelier de formation des formateurs - Initiation à la technique de PCR. Service de bactériologie médicale. Novembre 2008. VI. SEMINAIRE Participation du Dr H. TALI-MAAMAR à l’atelier de révision du consensus des méningites purulentes. Mostaghanem, Mars 2008. Services et laboratoires de Diagnostic et Recherche 29 Institut Pasteur d’Algérie Rapport d’Activité 2008 V. COMMUNICATIONS - « La diphtérie en Algérie » N. BENAMROUCHE, S. BELHOCINE, H. TALI-MAAMAR, M. R. OURAGHI, H. SENOUCI, K. RAHAL 1ère journée nationale de Microbiologie Clinique, SAMIC, 29 mai 2008. LAZRI, - « Etude de la consommation des antibiotiques en milieu hospitalier en Algérie » H. TALI-MAAMAR, K. RAHAL, L. ABED, O. LADJADJ, NOUAR, TOUAMI, CHAMEKH, CHELLALI, BENACEUR 1ère journée Nationale d’hygiène Hospitalière de l’EHS Bologhine. VI. PUBLICATIONS - Standardisation de la technique de l’antibiogramme à l’échelon national à l’intention de la médecine humaine. ANDS – 2008 – 114 pages. - Standardisation de la technique de l’antibiogramme à l’échelon national à l’intention de la médecine vétérinaire. ANDS – 2008 – 100 pages. - 9ème rapport d’évaluation du réseau national de surveillance de la résistance aux antibiotiques. ANDS – 2008 – 170 pages. - M. LAZRI, V. CARO, D. BRUN, E. NJAMKEPO, R. OURAGHI, Dj. GUESSOUM, K. RAHAL and N. GUIZO La coqueluche en Algérie : diagnostic direct et indirect de l’infection, sensibilité aux antibiotiques des souches identifiées. Arch. De l’IPA. 2007/2008, 66, 29 – 37. - M.N. OUAR-KORICHI, F. ASSAOUS, F. MOUFFOK, K. RAHAL Molecular characterization of antibiotic resistant Salmonella enterica serovar typhi and paratyphi A and B causing enteric fever in Algeria. The J. of infection in develop countries. (En cours de publication). 30 Services et laboratoires de Diagnostic et Recherche Institut Pasteur d’Algérie Rapport d’Activité 2008 Service d’Immunologie Chef de Service: Mohamed-Cherif ABBADI (Pharmacien/ Professeur INESSM) I. INTRODUCTION Durant l’année 2008, s’est poursuivie la mise en place du laboratoire « Biochimie des antigènes et production d’anticorps monoclonaux » sous la responsabilité des Drs N. KACI et R. RAACHE), qui, nous l’espérons, sera totalement opérationnelle durant l’année 2009 : a) Unité anticorps monoclonaux : • Mise en culture, des cellules de myélomes Sp2/O En vue de leur utilisation pour la production d’hybridomes murins. • Préparation de splénocytes de souris Balb/c immunisées avec des globules rouges de phénotypes A et B par voie intra-péritonéale. • Fusion entre les splénocytes des souris immunisées et les cellules myélomateuses murines Sp2/O par agitation au Polyéthylène- glycol (PEG). • Préparation des macrophages péritonéaux de souris utilisés comme cellules nourricières pour la culture des hybridomes. • Détection des anticorps anti-A et anti-B pour le screening par réaction d’hémagglutination. b) Unité Biochimie : Il a été procédé à la mise en place des différentes techniques de Chromatographie (gel filtration, échangeuse d’ions, affinité) et d’électrophorèse (SDS PAGE,….), ce qui a permis de faire la purification d’IgG, IgM et IgA humaines. Par ailleurs, le Service s’est impliqué dans l’organisation des 3èmes Journées Nationales d’Immunologie couplées aux 1ères Journées Algéro-françaises d’Immunologie organisées par la Société Algérienne d’immunologie les 10 et 11 mai 2008 à Alger, Palais de la Culture Moufdi Zakaria avec pour thème « Des mécanismes de l’inflammation en auto-immunité : à l’exemple de la polyarthrite rhumatoïde ». Services et laboratoires de Diagnostic et Recherche 31 Institut Pasteur d’Algérie Rapport d’Activité 2008 II. ACTIVITES DE DIAGNOSTIC : 1- LABORATOIRE DU COMPLEXE HLA (H. AMROUN) a) Typage HLA par microlymphocytotoxicité : ♦ Recherche d’antigèneHLAB51 1450 ♦ Recherche d’antigène HLA B27 1402 ♦ Typage HLA classe I (HLA-A,HLA-B) 170 b) Typage HLA par PCR-SSP : ♦ Typage HLA classe I (HLA-A,HLA-B,HLA-C) 151 ♦ Typage HLA classe II (HLA-DR,DQ) 94 ♦ Typage HLA DQ2-DQ8 43 2- LABORATOIRE D’IMMUNOCHIMIE ET D’IMMUNOLOGIE CELLULAIRE (N. ATTAL et N. KECHOUT) a) Exploration de l’immunité cellulaire PAR IFI : ♦ Détermination du nombre de lymphocytes T CD3 107 ♦ Détermination du nombre de lymphocytes T CD4 107 ♦ Détermination du nombre de lymphocytes T CD8 107 ♦ Détermination du nombre de lymphocytes B CD19 107 ♦ Détermination du taux d’expression du HLA DR ♦ Test de réduction, au NitroBleu Tetrazolium 20 137 b) Exploration des protéiques sériques : ♦ Protidémies (Bleu de Coomassie) 1480 ♦ Electrophorèses sur gel d’agarose 1480 ♦ Tests d’immunofixation 234 ♦ Recherche de cryoglobulines par cryoprécipitation 226 ♦ Recherche de chaînes H α libres dans le sérum par immunosélection 63 ♦ Dosage des protéines sériques et recherche d’anticorps par laser- néphélémétrie : • Albumine • Alpha 1 anti-trypsine • Haptoglobine • Céruléoplasmine 139 2079 14 • C3 2979 • C4 864 • Transferrine 32 2073 11 • IgG 2513 • IgA 3401 • IgM 2513 • Chaines Légères κ 408 • Chaines Légères λ 408 • C Reactive Protein (CRP) 497 Services et laboratoires de Diagnostic et Recherche Rapport d’Activité 2008 Institut Pasteur d’Algérie c) Exploration des protéiques urinaires : ♦ Protiduries (Bleu de Coomassie) 215 ♦ Electrophorèses sur gel d’agarose 215 ♦ Recherche de protéine de Bence Jones par immunofixation 53 d) Profils rachidiens : d.1- L.C.R. : • Protidorachies (Bleu de Coomassie) 880 • Isoélectrofocalisations 360 • Dosage des protéines rachidiennes par laser-néphélométrie : - Albumine 880 - IgG 880 d.2- Sérums accompagnant les L.C.R. : • Protidémies (Bleu de Coomassie) 880 • Electrophorèses sur acétate de cellulose 880 • Isoélectrofocalisations 360 • Dosage des protéines sériques par laser-néphélométrie : - Albumine 880 - IgG 880 d.3- Divers : • Recherche d’anti-gangliosides GM1 IgG/IgM (Elisa) 32 • Recherche d’anti-gangliosides GD1b IgG/IgM (Elisa) 32 • Recherche d’anti-gangliosides asialo-GM1IgG/IgM (Elisa) 32 • Recherche d’anti-gangliosides GD1a IgG/IgM (Elisa) 32 • Recherche d’anti-gangliosides GM2 IgG/IgM (Elisa) 32 • Recherche d’anticorps anti-neuronaux 12 • Recherche d’anticorps anti-TNFβ (Elisa) 20 • Dosage du Phospho TAU (181p) (Elisa) 43 • Dosage du Phospho TAU (Elisa) 43 • Dosage du β amyloide (Elisa) 43 • Dosage du Neuron Specific Enolase (Elisa) 92 3- LABORATOIRE DU COMPLEMENT ET ALLERGIE, D’ONCOBIOLOGIE ET D’HORMONOCHIMIE (K. DJENOUHAT et K. BELANTEUR) a) Allergie : ♦ Dosage des IgE totales (par Elisa) 500 ♦ Dosage des IgE spécifiques : - Mélange d’aliments (FP5) 250 - Mélange d’aliments (FP2) 100 - Mélange d’aliments (FP50) 80 - Mélange d’aliments (FP51) 117 - Mélange graminées 214 Services et laboratoires de Diagnostic et Recherche 33 Institut Pasteur d’Algérie - Mélange d’animaux 34 Rapport d’Activité 2008 75 - Mélange de poussières 272 - Mélange de moisissures 117 - Dpt 270 - Dpf 250 - Blatte 100 - Œuf (blanc) 150 - Œuf (jaune) 145 - Lait de vache 460 - α-lactalbumine 40 - β-lactoglobine 40 - Caséine 40 - Arachide 75 - Tomate 45 - Fraise 30 - Gluten 25 - Blé 72 - Sésame 50 - Soja 40 - Pomme 40 - Amande 18 - Noix 17 - Cacao 26 - Levure de bière 20 - Latex 25 - Noyer 25 - Mimosa 25 - Olivier 50 - Pin 30 - Eucalyptus 30 - Chat (épithélium) 26 - Chien (épithélium) 10 - Chien (squames) 15 - Alternaria 50 - Candida albicans 10 - Cladosporium herbarum 15 - Penicillium notatum 10 - Pityrosporium obiculare 10 - Anti-CDD 20 Services et laboratoires de Diagnostic et Recherche Rapport d’Activité 2008 Institut Pasteur d’Algérie b) Pathologie du complément : ♦ Exploration du complément total sérique : - Dosage de CH50 par macrométhode 300 - Dosage du VAH50 par macrométhode 15 ♦ Exploration des différentes fractions du complément : - C3 185 - C4 180 - C1 Inh antigénique 120 - C1 Inh fonctionnel 20 - C1q 90 - Facteur B 95 - Auto-anticorps anti-C1q 125 c) Recherche et dosage de marqueurs tumoraux (par chimiluminescence) : ♦ Antigène carcino-embryonnaire 1307 ♦ Antigène de cancer CA 15-3 1218 ♦ Antigène spécifique de prostate PSA Total 2407 ♦ Antigène spécifique de prostate PSA Libre 1288 ♦ Alpha 1 Foetoprotéine 1441 ♦ Antigène de cancer CA 19-9 1097 ♦ Antigène de cancer CA 125 1100 ♦ Parathormone (PTH) 502 d) Bilans thyroïdiens (par chimiluminescence) : ♦ Thyrotropine (TSH 3G) 3494 ♦ Tri-iodothyronine Libre (FT3) 3261 ♦ Tyroxine Libre (FT4) 3292 ♦ Tyroglobuline (Tg) 318 ♦ Anti-thyroglobuline (anti-Tg) 1048 ♦ Anti-thyroperoxydase (anti-TPO) 1048 e) Bilan de fertilité (par chimiluminescence) : ♦ Hormone lutéotrope (LH) 1349 ♦ Hormone folliculostimulante (FSH) 1522 ♦ Testostérone (TTE) 1514 ♦ Prolactine (PRL) 1703 ♦ Estradiol (E2) 1001 ♦ Progestérone (PGN) 666 f) Autres hormones (par chimiluminescence) : ♦ Cortisol 501 ♦ Hormone choriogonadique (HCG) 479 ♦ βHCG 330 ♦ Hormone adénocorticotrope (ACTH) 223 Services et laboratoires de Diagnostic et Recherche 35 Institut Pasteur d’Algérie Rapport d’Activité 2008 ♦ Déhydroépiandrostérone (DHEA) 506 ♦ Somatotropine (HGH) 307 ♦ Insuline 287 ♦ C peptide 303 ♦ Δ4 andronestenedione 401 ♦ Calcitonine 241 4- LABORATOIRE D’AUTOIMMUNITE (S.S. SALAH) a) Recherche et titrage d’auto-anticorps sériques : ♦ Par IFI : - Anticorps anti-nucléaires (sur HEp2000) - ANCA - Anticorps anti-muscle lisse, mitochondries, cellules pariétales, LKM - Autres spécificités anti-tissus 4478 206 1332 330 ♦ Par Elisa : - Anticorps anti-cardiolipines (IgG, IgM ) 3177 - Anticorps anti-β2GP1 (IgG, IgM) 2762 - Anticorps anti-tTG/gliadine (IgA/IgG) 500 - Anticorps anti-CCP2 523 ♦ Par lasernéphélémétrie : - Facteurs rhumatoïdes 2214 ♦ Par Multiplex : - Anticorps anti-tTG/gliadine (IgA) - Anticorps IgG anti-MPO/PR3 2741 595 ♦ Par Immuno-DOT : - Anticorps anti-PR3/MPO/MBG 15 - Anticorps anti-M2/Ribo/Jo1/LKM 38 - Anticorps anti-tTG/gliadine-IgG 06 b) Détermination de la spécificité des facteurs anti-nucléaires : ♦ Anti-DNA natif (par ELISA) - par Multiplex 2574 - par IFI sur Crithidia luciliae 251 - par ELISA 180 ♦ Anti-Antigènes solubles nucléaires : - par Multiplex - par ELISA 36 Services et laboratoires de Diagnostic et Recherche 2574 280 Rapport d’Activité 2008 Institut Pasteur d’Algérie III. ACTIVITES DE RECHERCHE 1- PROJETS EN COURS : 1.1- Profil du polymorphisme génétique de cytokines pro- et anti-inflammatoires chez des patients Algériens atteints de sclérose en plaques (N. ATTAL) : La sclérose en plaques (SEP) est une maladie dysimmune dont la physiopathologie implique une profonde dysrégulation de la synthèse des cytokines pro et anti-inflammatoires.Le but de ce travail est de rechercher une éventuelle association entre le polymorphisme des gènes de cytokines pro et antiinflammatoires, et la susceptibilité à la SEP chez des patients algériens. En 2008, cette étude a porté sur 63 patients algériens atteints de SEP définie dont l’âge moyen était de 34 ans et 120 sujets sains dont l’âge moyen était de 29 ans. L’ADN a été extrait des leucocytes du sang périphérique par la méthode classique au phénol-chloroforme et la détermination du profil du polymorphisme des gènes des cytokines (TNF-α, TGF-β1, IFN-γ, IL-6 et IL-10) a été effectuée par la méthode PCR-SSP grâce à un kit commercial (cytokine genotyping tray de la firme One Lambda,Inc.). Des résultats significatifs ont été obtenus uniquement pour le TGF-β1. En effet, le génotype GG (codon25) était plus fréquent chez les témoins que chez les malades SEP (Pc = 0,005, OR = 0,3), le génotype GC était plus fréquent chez les malades SEP que chez les témoins (Pc = 0,011, OR = 3,06) et le phénotype High était plus fréquent chez les témoins, comparé aux malades (Pc = 0,017 ; OR = 0,41). Le TGFβ joue un rôle essentiel dans la différentiation des LT régulateurs (LTreg), mais dans un contexte inflammatoire, il oriente la différentiation des LT vers la voie Th17. De ce fait, la faible production de TGFβ chez nos malades favoriserait sans doute l’orientation de la réponse immunitaire vers les voies Th1 et Th17. A la lumière des résultats obtenus, nous pouvons suggérer que le polymorphisme du gène de cette cytokine est impliqué dans la susceptibilité à la SEP dans la population algérienne. 1.2- Apport du diagnostic biologique dans la maladie d’Alzheimer (N. ATTAL) : Durant l’année, nous nous sommes intéressés à l’étude de 3 marqueurs biologiques pouvant fournir une approche diagnostique de la maladie d’Alzheimer (ALZ) à savoir : • La protéine TAU. • La Tau phosphorylée (phospho Tau ; pTAU). • Le peptide β amyloide (1-42) : Aβ1-42. Cette recherche a été réalisée par technique ELISA (kits INNOTEST) au niveau du liquide céphalorachidien (LCR) de 18 patients présentant une suspicion de maladie d’ALZ (démence) et de 18 patients atteints de sclérose en plaques (SEP) et constituant le groupe témoin car nous ne pouvons disposer de LCR de sujets sains. Services et laboratoires de Diagnostic et Recherche 37 Institut Pasteur d’Algérie Rapport d’Activité 2008 Les résultats ont montré que : • La concentration moyenne de la protéine TAU est plus élevée chez les patients ALZ que le groupe SEP (195,07 pg/ml vs 143,079 pg/ml), car, dans la maladie d’ALZ, la TAU est libérée dans l’espace extra- cellulaire et traduit la mort neuronale. • La concentration moyenne de la protéine pTAU est plus élevée chez les patients ALZ que le groupe SEP (39,94 pg/ml vs 16,94 pg/ml) ce qui concorde avec les résultats trouvés par ailleurs car, dans la maladie d’ALZ, il y a une hyperphosphorylation de la TAU, responsable de la dégénérescence neuro-fibrillaire. • La concentration moyenne du peptide Aβ1-42 est diminuée chez les patients ALZ par rapport au groupe SEP 494,25pg/ml vs 666,291pg/ml ce qui rejoint la littérature car dans la maladie d’ALZ, la concentration du peptide β amyloïde diminue car piégé dans les agrégats. Ces résultats préliminaires, qui rejoignent d’ailleurs les données de la littérature, se révèlent être très intéressants dans la mesure où ils ont permis, chez certains malades, d’asseoir le diagnostic de maladie d’ALZ et d’adapter une thérapeutique adéquate, et au contraire, chez d’autres, de le reconsidérer. Il est ddonc prévu de poursuivrecette étude sur un plus grand nombre de patients pour une meilleure exploitation des résultats. 1.3- Etude des facteurs de prédisposition génétique aux spondylarthropathies dans le grand Alger (H. AMROUN, S.S. SALAH) : Plus de trois décennies après la découverte de HLA-B27 comme gène majeur de susceptibilité à la spondylarthrite ankylosante (SA), la physiopathologie de cette affection reste encore non élucidée. Celle-ci combine des facteurs génétiques, des facteurs d’environnement et une réponse immunitaire anormale. Si l’antigène HLA-B27 semble un composant génétique important dans la susceptibilité à cette maladie, il n’en demeure pas moins que d’authentiques SA ainsi que des Spondylarthropathies peuvent survenir chez des sujets HLA-B27 négatifs, ce qui suggère bien évidemment l’intervention d’autres facteurs génétiques. Parmi les régions chromosomiques en dehors du CMH retrouvées associées à la SA, on retrouve la région 2q14 qui s’étend sur 430kb et qui comporte la famille des gènes de l’IL-1 : l’IL-1A, l’IL-1B et l’IL-1RN antagoniste qui codent respectivement pour les cytokines pro-inflammatoires IL-1α, IL-1β et l’antagoniste du récepteur de l’IL-1 (IL-1ra), cytokines qui jouent un rôle important dans l’ostéolyse et le remodelage osseux. Durant l’année 2008 nous avons effectué l’analyse du polymorphisme des gènes du cluster de l’IL-1 chez 146 patients présentant une SA et 127 sujets sains non apparentés, tous originaires du grand Alger, à l’aide de la méthode PCR-RFLP pour deux polymorphismes de l’IL-1β , un situé au niveau du promoteur IL-1β-511 C/T(rs 16944), l’autre au niveau de l’exon 5 IL-1β +3953 (rs 1143634) et le polymorphisme de l’IL1-ra de type VNTR (variable number repeat) IL-1ra (86pb)n. L’analyse des trois polymorphismes, réalisée séparément chez les malades et les témoins, ne révèle pas de différences statistiquement significatives. Par contre, l’analyse multi-variée des patients et témoins porteurs de l’allèle IL-1β 3953T selon les différents allèles de l’IL-1ra, montre que la fréquence des patients porteurs simultanément l’allèle IL-1β3959T et l’allèle IL-1RN*2 : (86pb)2 est plus élevée que 38 Services et laboratoires de Diagnostic et Recherche Rapport d’Activité 2008 Institut Pasteur d’Algérie celle des témoins porteurs du même haplotype. Cette différence est statistiquement significative pour les fréquences alléliques (17,19% Vs 8,86%; pc=0,034 ; OR =2,13) et pour les fréquences phénotypiques (32,29% Vs 16,46% ; pc= 0,026 ; OR =2,42). Plus intéressant encore, l’analyse de l’association de ce même haplotype et de la SA dans le groupe des malades et témoins HLA-B27 négatif, révèle une fréquence élevée de l’haplotype IL-1RN*2 (86pb)2 et IL-1β+3953T chez les patients HLA-B27 négatifs par rapport aux témoins. Cette différence est statistiquement significative : 18,92% Vs 6,76% ; pc= 0,012 ; OR= 3,22. Durant l’année 2009, nous nous proposons : • De confirmer, dans un premier temps, l’association de ce polymorphisme sur un nombre de sujets atteints de SA plus important, • Et, dans un deuxième temps, de chercher une éventuelle relation de certains marqueurs sériques de la réaction inflammatoire (C réactive protéine, vitesse de sédimentation) avec l’activité de la maladie dans les deux groupes de patients HLA-B27 positifs et HLA-B27 négatifs. 1.4- Détermination de la fréquence des allèles HLA dans la population Algérienne par biologie moléculaire (H. AMROUN) : Durant l’année 2008, notre unité a effectué des bilans de pré-greffe chez 91 donneurs potentiels, faisant augmenter notre cohorte de donneurs à 240 sujets sains, pour lesquels le typage HLA-A, B et C a été réalisé par PCR-SSP. Ceci nous a permis d’établir la distribution des fréquences alléliques pour chaque locus : • Pour les allèles HLA-A : - A*02 : 20,29 %, - A*30 : 12,91%, - A*03 : 9,84 %, - A*01 : 9,63 %. • Pour le locus HLA-B : - B*51 : 9,13%, - B*07 : 8,92%, - B*44 : 8,71%, - B*18 : 7,26 % ; - B*50 : 6,64%. • Parmi les allèles HLA-cw détectés, nous retrouvons une prédominance des allèles HLA CW* 07 et HLA- CW* 06 avec des fréquences respectives de 22,42% et 15,87%. Pour ce qui est des loci HLA de classe II, le travail se poursuivra durant l’année 2009 par l’augmentation de l’effectif actuellement disponible et qui est insuffisant pour établir des fréquences aux allèles HLA-DR B1 et HLA-DQ B1. Ce travail servira de référence témoin pour les études maladies. d’association HLA et Services et laboratoires de Diagnostic et Recherche 39 Institut Pasteur d’Algérie Rapport d’Activité 2008 1.5- Etude immunogénétique de la tuberculose ostéo-articulaire (TOA) dans lapopulation algérienne (H. AMROUN, S.S. SALAH) : La tuberculose est une pathologie multifactorielle, impliquant plusieurs facteurs génétiques, prouvés par plusieurs faits épidémiologiques ainsi que par différentes études entreprises dans le monde. En ce qui concerne la tuberculose ostéoarticulaire, aucune étude immunogénétique n’a abordé, à ce jour, tant en Algérie que dans le reste du monde. Ce travail, entrepris à partir de l’année 2004, a consisté en l’étude de certains polymorphismes de gènes, dont les produits sont impliqués dans la défense antiM.tuberculosis, et qui pourraient être impliqués dans la susceptibilité ou la résistance à la tuberculose ostéo-articulaire. Durant l’année 2008, nous avons étudié 8 nouveaux polymorphismes touchant les gènes TLR1, TLR2, TLR4, TIRAP, CD14, MCP1, IL12, TNFα, IL1, IL1Ra, HLA classe II (DR et DQ), HLA-E, NOS2, NOS3 et VEGF chez les sujets suivants : • 114 malades atteints de TOA recrutés au niveau du service de rhumatologie, à l’EHS Douéra. • 104 sujets sains apparentés aux malades (ascendants et collatéraux). • 204 sujets sains non apparentés permettant une comparaison des malades par rapport à la population générale. L’analyse des résultats permet de dégager les éléments suivants : • L’analyse simple, montre l’absence d’association entre les polymorphismes étudiés et la susceptibilité ou la résistance à la TOA, à l’exception de l’IL1Ra, dont le polymorphisme de type VNTR (IL1Ra 86pb VNTR) a montré une association de l’allèle 2 répétitions avec la susceptibilité à la TOA. • L’étude de l’effet combiné de deux polymorphismes montre une association de la combinaison du polymorphisme touchant le gène IL1B (IL1B -511) et des polymorphismes touchant le gène de NOS2 (iNOS : inductible NO Synthase) (NOS2 -277, -1026, -1659) avec la résistance à la TOA.Par contre, les (polymorphismes de NOS2 sont associés en combinaison avec le polymorphisme du TNFα (TNF-1031) avec la susceptibilité à la TOA. • L’analyse stratifiée en fonction des formes cliniques de la TOA (forme axiale et formes périphériques), montre une association du polymorphisme touchant le gène de MCP1 (MCP1 A-2518G) avec la susceptibilité à la forme axiale. Enfin, les résultats des fréquences alléliques et génotypiques du polymorphisme de type VNTR qui touche le gène de NOS3 (NOS3 intron4 27pb VNTR) montrent une différence significative entre les deux sous-groupes cliniques de la maladie. Sur la base de ces résultats, nous nous proposons : • De poursuivre le recrutement et l’augmentation de l’échantillonnage axé surtout sur la cohorte de malades. • D’étudier d’autres polymorphismes de gènes. 40 Services et laboratoires de Diagnostic et Recherche Institut Pasteur d’Algérie Rapport d’Activité 2008 1.6- Etablissement des médianes de référence pour l’ α FP, la HCG, la PAPP-A et la βHCG sériques chez les femmes enceintes en vue de l’évaluation du risque de la Trisomie 21 (K. BELANTEUR) : Durant l’année 2008, nous avons effectué le dosage sérique des paramètres du 2ème trimestre chez 23 femmes et ceux du 1er trimestre chez 07 femmes. Toutefois, le nombre de sujets recrutés à ce jour s’avère toujours insuffisant pour établir les médianes de référence des paramètres de la trisomie 21 dans la population algérienne. 1.7- Etude des gènes de prédisposition à la maladie coeliaque de l’adulte (K. BELANTEUR) : Durant l’année 2008, nous avons réalisé le typage HLA classe II par PCR-SSP ainsi que le polymorphisme MICA 129 par PCR-RFLP chez 33 malades coeliaques adultes. Les résultats préliminaires sont les suivants : • Pour le typage HLA, une augmentation de la fréquence des 2 allèles DQB1*02 (DQ2) et DQB1*0302 (DQ8) chez les malades par rapport aux témoins : 91% vs 43,4% et 18% vs 13% rspectivement. Cette différence est statistiquement différente pour l’allèle DQ B1*02 (P=1,4 10-5). • Pour le polymorphisme MICA 129, une augmentation de la fréquence du génotype Met/Met chez les malades par rapport aux témoins : 18% vs 9% respectivement. Mais cette différence n’est pas statistiquement significative (P=0,2). Ceci est dû probablement au faible effectif. • Pour ce qui est du polymorphisme HLA E, l’étude n’a pas été réalisée par manque de réactifs. Ce travail se poursuivra l’année 2009 et qui tiendra compte des formes cliniques et de l’âge d’apparition de la maladie. 1.8- Etude de la fréquence des anticorps anti-CCP et de l’association des antigènes HLA de classe II avec la polyarthrite rhumatoïde (S.S. SALAH, H. AMROUN) : La polyarthrite rhumatoïde (PR) est le plus fréquent des rhumatismes inflammatoires chroniques. Il s’agit d’une affection auto-immune complexe, multifactorielle relevant principalement de facteurs hormonaux, environnementaux, neuropsychologiques, immunologiques et génétiques. Il est connu que cette affection est associée à certains allèles HLA-DR et ce, dans différentes populations. L’objectif de notre travail est d’étudier l’association entre les allèles HLA classe II et la PR chez des patients algériens en comparaison avec des témoins sains. Notre étude préliminaire concerne 159 patients non apparentés atteints de PR selon les critères de l’American College of Rhumatology (ACR). Les données obtenues sont comparées à ceux de 110 sujets sains, volontaires et non apparentés. Le typage HLA de classe II a été fait par méthode PCR-SSP. Services et laboratoires de Diagnostic et Recherche 41 Institut Pasteur d’Algérie Rapport d’Activité 2008 Notre cohorte comprend 136 femmes et 23 hommes (sex-ratio = 6) d’âge moyen de 50,15±13,25 ans. La durée moyenne de l’affection était de 12±9,5 ans. La moyenne du DAS 28 était de 4,11 et le HAQ moyen était de 0,990±0,707. La PR était érosive dans 73% des cas et séropositives dans 60%. Les anticorps anti-CCP2 étaient présents chez 80.5% des patients. Le typage « générique » de DRβ1 montre que la fréquence de l’allèle HLA- DRβ1*04 est significativement plus élevée chez les patients atteints de PR par rapport aux témoins (p<0,00001, OR= 2,78 ; IC95%= [1,74–4,53]). Cependant, l’allèle HLA-DRβ1*01 est présent chez 7,86% des patients et chez 5,45% des témoins, mais cette association est non significative (p=0,36). Les fréquences des allèles HLA-DRβ1*07 et DRβ1*08 sont significativement plus élevés chez nos témoins par rapport aux patients (p<0,01, OR= 0,48 ; IC95%= [0,262–0,871] ; p<0,02, OR= 0,17 ; IC95%= [0,017–0,854]). Quant à l’association au sexe, elle n’est pas significative (p=0,72). Durant l’année 2009, nous nous proposons, dans un premier temps, d’augmenter le nombre d’échantillons de sujets atteints de PR et, dans un deuxième temps, de rechercher plus précisément les différents allèles de susceptibilité à la PR qui constituent l’épitope partagé ou « shared epitope ». 1.9- Bases moléculaires et génétiques des déficits primitifs en composants du Complément (K. DJENOUHAT) : La caractérisation des anomalies moléculaires à l’origine de l’angio-œdème par déficit héréditaire en C1 Inhibiteur chez les familles diagnostiquées durant ces 15 dernières années fera l’objet, durant l’année 2009, d’une soutenance d’une thèse de doctorat en Sciences Médicales. Pour ce qui est du travail portant sur les déficits en fractions du complément associés aux maladies auto-immunes, et plus particulièrement à la maladie lupique, en poussée et en rémission, à manifestation cutanée ou systémique, avec ou sans complication rénale, il est en cours de réalisation, en collaboration avec les services de nephrologie, médecine interne et dermatologie de l’HCA. Il devra faire l’objet d’une soutenance d’un mémoire de fin d’étude en résidanat durant l’année en cours. 1.10- Les allergies alimentaires dans la région d’Alger (K. DJENOUHAT) : Durant l’année 2008, nous avons étudié, chez les sujets présentant une allergie alimentaire à la tomate, l’arachide ou la noisette, la fréquence des réactions croisées avec les allergènes du mélange de pollens de graminées. Nous avons opté, comme CCD, pour la bromélain, glycoprotéine extraite de l’ananas en raison, d’une part, de la grande similitude de structure entre le carbohydrate de la bromélian et les glycoprotéines végétales, et, d’autre part de l’absence d’allergie à la bromélain. Les résultats préliminaires portant sur un 30aine de patients montrent que 10% des sujets allergiques aux arachides et/ou aux amandes présentent une sensibilisation c aux mélanges de graminées sans faire le moindre symptôme, et la recherche des anti-CCD dans les sérums de ces patients s’est avérée positive. Paradoxalement, nous avons constaté l’absence de ce type de réaction croisée chez les sujets allergiques à la tomate. Durant l’année en cours, nous comptons poursuivre le recrutement de malades en vue d’aboutir à des résultats plus significatifs. 42 Services et laboratoires de Diagnostic et Recherche Institut Pasteur d’Algérie Rapport d’Activité 2008 1.11- Mise au point d’un test d’activation des basophiles pour l’exploration des allergies aux β lactamines. (K. DJENOUHAT, D. NACI). Les β lactamines, dont le chef de file est représenté par la pénicilline, constituent une famille d’antibiotiques très importante, tant sur le plan curatif que préventif. Toutefois, leur inconvénient majeur réside dans leur pouvoir allergisant. c’est pourquoi, il est crucial d’en faire le diagnostic et de différencier les vraies allergies des effets pharmacologiques indésirables. Ce diagnostic repose principalement sur les tests cutanés et les tests de provocation standardisés qui, malheureusement, présentent un risque de choc anaphylactique. Aussi, assiste t-on, actuellement, à l’émergence de plusieurs tests biologiques qui sont tous en cours d’évaluation. Parmi ces tests, le plus prometteur est le test d’activation des basophiles en cytométrie de flux (BAT). Durant l’année écoulée, nous avons réuni l’ensemble des conditions en vue de sa mise en place dans notre laboratoire, travail qui a fait l’objet d’une soutenance d’un mémoire de fin d’études de résidanat en Immunologie. Restent à déterminer sensibilité et sa spécificité afin d’évaluer son apport sur le plan diagnostique. 2- PROJETS NOUVEAUX G Association des antigènes HLA de classe II avec la sclérose en plaques chez des patients algériens (N. ATTAL) : La sclérose en plaques (SEP), est une maladie inflammatoire chronique du système nerveux central caractérisée par une destruction de la gaine de myéline nécessitant l’intervention de 2 composantes l’une génétique, et l’autre environnementale. Les études génétiques effectuées à ce jour révèlent que le système HLA, et plus particulièrement la région HLA II, est probablement l’un des facteurs majeurs déterminant la susceptibilité à cette maladie. Dans un travail précédent, nous avons réalisé le typage sérologique des molécules HLA de classe II (DR, DQ) chez 40 patients algériens atteints de SEP et 140 sujets normaux. Les résultats ont montré que dans la population algérienne, il existait une association significativement positive entre la SEP et les molécules DR15 et DQ6 avec des risques relatifs (RR) respectifs de 2,86 et 2,65 et qu’en outre, il existerait une association négative entre cette affection et le DR1. Nous nous proposons donc de continuer ce travail sur une cohorte plus importante de patients et d’inclure des familles pour effectuer, d’une part le typage HLA II générique par technique de PCR SSP, et d’autre effectuer un typage DR15 allélique, chez nos patients DR15+, afin identifier les allèles DR15 en cause chez les patients SEP algériens. Services et laboratoires de Diagnostic et Recherche 43 Institut Pasteur d’Algérie Rapport d’Activité 2008 VI. PUBLICATIONS ET COMMUNICATIONS 1- PUBLICATIONS : • R. DJIDJIK, M. GHAFFOR, M. BRUN, M. GHARNAOUT, S.S. SALAH, W. BOUKOUACI, H. DJIDJIK, A. BENYOUNES, K. KOUMARAVELOU, R. KKRISHNAMOORTHY, M.C. ABBADI, D. CHARRON, R. TAMOUZA (2008) Constitutive nitric oxide synthase gene polymorphisms and house dust mite respiratory allergy in an Algerian patients group. Tissue antigens, 71(2):160-164. • N. KACI-OUCHFOUN, F. HADJ-BEKKOUCHE, M.C. ABBADI, T. GERNIGONSPYCHALOWICZ (2008) Purification, preliminary characterization and immunohistochemical localization of POSVP21 in the sand rat (Psammomys obesus) seminal vesicles. Theriogenology, 69: 525-535. • R. DJIDJIK, N. ATTAL, M. BENIDIR, M. GHAFFOR, M.C. ABBADI (2008) Mécanismes immunopathologiques des allergies IgE dépendantes : données récentes. Rev.Alg.Immunol. Immunopath. 00: 08-17. • N. ATTAL, E. ATTAL, M.C. ABBADI (2008) Apport de l’isoelectro-focalisation avec immuno-révelation des IgG dans la mise évidence des bandes oligoclonales rachidiennes au cours de la sclérose en plaques. Rev.Alg.Immunol.Immunopath., 00:18-22. • N. ATTAL, E. ATTAL, N. HADJ BEKKOUCHE, M. SAADI BELOUIZ, M. AIT KACI AHMED, M.C. ABBADI (2008) Apport du diagramme de Reiber dans l’interprétation du profil protéique rachidien. Rev.Alg.Immunol.Immunopath., 00: 48-51. • K. BELANTEUR, R. RAACHE, S. DAHMANI, A. A ISSOU, M.C. ABBADI (2008) Détermination des valeurs normales des marqueurs tumoraux chez les sujets sains algériens. Rev.Alg.Immunol.Immunopath., 00::44-47. • S.S. SALAH, H. AMROUN, N. HADJ BEKKOUCHE, N. OUIS, S. NACER, M.C. ABBADI (2008) Analyse des profils en auto-anticorps et corrélations clinico-biologiques chez 86 patients présentant une connectivite avec auto-anticorps anti-Ro/SSA. Rev.Alg.Immunol.Immunopath., 00:28-33. 2- COMMUNICATIONS ORALES : • S.S. SALAH Exploration de la maladie cœliaque. Journée de formation médicale continue du CHU de Bab El Oued. 17 Mars 2008, Alger, Algérie. • S.S. SALAH, H. AMROUN, H. DJOUDI, M. BUSSON, R. ALLAT, A. TOUBERT, R. KRISHNAMOORTHY, M.C. ABBADI, D. CHARRON, R. TAMOUZA Association of Gender-specific association of the VEGF G-634C polymorphism with Ankylosing Spondylitis in an Algerian patient group. 22th European Conference of Immunogenetics and Histocompatibility, 2-5 Avril 2008, Toulouse (France). Abstract in Tissue antigens, 2008, 71/4: 342-343. 44 Services et laboratoires de Diagnostic et Recherche Rapport d’Activité 2008 Institut Pasteur d’Algérie • K. DJENOUHAT, H. MESSAOUDI, A. KETFI, M.C. ABBADI Angio-oedème héréditaire de type III : Etude de 4 familles Algériennes. 3ème Congrès Francophone d'Allergologie, 9-11 Avril 2008, Paris (France). • S.S. SALAH Apport du laboratoire d’immunologie dans le diagnostic de la maladie lupique. 2ème rencontre multidisciplinaire sur le lupus. 24 Avril 2008, Oran, Algérie. • H. AIT HAMOUDI, S.S. SALAH, A. HADJADJ, S.A. BEN KAALOUL, S. METATLA, S. ZOUAOUI, M.C. ABBADI Technologie multiplex : nouvelle méthode de dosage des anticorps anti-ADNn dans le diagnostic et le suivi thérapeutique du lupus érythémateux systémique. 11ème congrès maghrébin de médecine interne/ 14ème journée nationale de médecine interne. 3-4 Mai 2008, Alger, Algérie. • K. DJENOUHAT, H. MESSAOUDI, A. KETFI, M.C. ABBADI Problèmes de prise en charge de l’angio-œdème héréditaire en Algérie : à propos d’une 60aine de cas. 11ème congrès maghrébin de médecine interne/ 14ème journée nationale de médecine interne. 3-4 Mai 2008, Alger, Algérie. • N. ATTAL, M.C. ABBADI Immuno-intervention dans LA PR Service d’Immunologie, Institut Pasteur d’Alger. 1ères journées Algéro-françaises d’Immunologie/ d’Immunologie. 10-11 Mai 2008, Alger, Algérie. 3èmes Journées Nationales • H. AMROUN, S.S. SALAH, R. ALLAT, F. MECABIH, H. DJOUDI, S. AIT SAID, I. ALLAM, N. ZAABAT, A. TAHIAT, M. BUSSON, M.C. ABBADI, D. CHARRON, R. TAMOUZA Association des polymorphismes fonctionnels de l’IL-1β (-511C/T et +3953C/T) et de l’IL-1Ra (IL-1Ra 86pb VNTR) avec la spondylarthrite ankylosante dans la région du Grand Alger. 1ères journées Algéro-françaises d’Immunologie/ 3èmes Journées Nationales d’Immunologie. 10-11 Mai 2008, Alger, Algérie. • F. MECABIH, H. AMROUN, F. SADOUKI, S.S. SALAH, S. METATLA, H. DJOUDI, M.C. ABBADI, R. TAMOUZA Etude d’association des polymorphismes fonctionnels des gènes TIRAP et MCP-1 avec la susceptibilité ou la résistance à la tuberculose ostéo-articulaire en Algérie. 1ères journées Algéro-françaises d’Immunologie/ 3èmes Journées Nationales d’Immunologie. 10-11 Mai 2008, Alger, Algérie. • E. ATTAL, N. ATTAL, R. DEHBAOUI, S.S. SALAH, M. AIT KACI AHMED, M.C. ABBADI Syndrome hémichorée-hémiballisme révélateur d’un neuro-lupus. 1ères journées Algéro-françaises d’Immunologie/ 3èmes Journées Nationales d’Immunologie. 10-11 Mai 2008, Alger, Algérie. Services et laboratoires de Diagnostic et Recherche 45 Institut Pasteur d’Algérie Rapport d’Activité 2008 • S. CHAIB-MAMOUZI, Y. MEDDOUR, S. MAAMERI, N. BOUDIAF, R. DJIDJIK, S.S. SALAH Intérêt du dosage des anticorps anti-CCP dans la PR : Etude algérienne multicentrique rétrospective sur deux ans. 1ères journées Algéro-françaises d’Immunologie/ 3èmes Journées Nationales d’Immunologie. 10-11 Mai 2008, Alger, Algérie. • S.S. SALAH, H. AMROUN, D. ACHELI, S. METATLA, S. NACER, N. AZEM, N. HADJ BEKKOUCHE, N. ATTAL, H. DJOUDI, M.C. ABBADI Etude de l’association des allèles HLA de classe II chez des patients atteints de polyarthrite rhumatoïde en relation avec la production d’anticorps anti-CCP2 dans la PR : étude monocentrique algérienne. 1ères journées Algéro-françaises d’Immunologie/ 3èmes Journées Nationales d’Immunologie. 10-11 Mai 2008, Alger, Algérie. • D. ACHELI, S.S. SALAH, S. LEHTIHET, S. METATLA, F. KASSOURI, M.C. ABBADI, H. DJOUDI Apport des anticorps anti-CCP dans la polyarthrite rhumatoïde : Expérience du service de rhumatologie de Douéra. 1ères journées Algéro-françaises d’Immunologie/ 3èmes Journées Nationales d’Immunologie. 10-11 Mai 2008, Alger, Algérie. • S. NACER, S.S. SALAH, D. ACHELI, H. AMROUN, S. METATLA, S. ZOUAOUI, M. CHEMLAL, N. HADJ BEKKOUCHE, N. ATTAL, H. DJOUDI, M.C. ABBADI Comparaison des résultats du dosage du facteur rhumatoïde par néphélémétrie-laser et par la nouvelle méthode d’immunofluorométrie sur billes (Technologie Multiplex). 1ères journées Algéro-françaises d’Immunologie/ 3èmes Journées Nationales d’Immunologie. 10-11 Mai 2008, Alger, Algérie. • K. DJENOUHAT, M.C. ABBADI Prévalence et intérêt des anticorps anti-C1 q dans l’angio-œdème héréditaire par déficit en C1inhibiteur. 1ères journées Algéro-françaises d’Immunologie/ 3èmes Journées Nationales d’Immunologie. 10-11 Mai 2008, Alger, Algérie. • S.S. SALAH, H. AMROUN, H. DJOUDI, M. BUSSON, R. ALLAT, A. TOUBERT, M.C. ABBADI, D. CHARRON, R. KRISHNAMOORTHY, R. TAMOUZA Aspects pharmacogénétiques de la spondylarthrite ankylosante en Algérie. Journée scientifique du Département de Pharmacie, Faculté de médecine d’Alger 18 mai 2008, Alger, Algérie. • S.S. SALAH, M.C. ABBADI Performances des examens immunologiques dans la prise en charge de la maladie coeliaque. 7èmes Journées Nationales de Pathologie. 28-29 Mai 2008, Alger, Algérie. • S.S. SALAH, S. METATLA, S. ZOUAOUI, H. AIT HAMOUDI, M.C. ABBADI Apport de la nouvelle technologie multiplex dans le diagnostic de la maladie coeliaque : exemple de la gamme AtheNA-Coeliac, testés sur 178 sérums. 1er Congrès Euro-africain d’Allergologie et d’Immunologie Clinique. 18-20 Juin 2008, Alger, Algérie. 46 Services et laboratoires de Diagnostic et Recherche Institut Pasteur d’Algérie Rapport d’Activité 2008 • K. DJENOUHAT, H. MESSAOUDI, A. KETFI, M.C. ABBADI Etude clinico-épidémiologique de l’angio-œdème héréditaire en Algérie : A propos de 83 cas. 1er Congrès Euro-africain d’Allergologie et d’Immunologie Clinique. 18-20 Juin 2008, Alger, Algérie. • N. KACI-OUCHFOUN, F. HADJ-BEKKOUCHE, M.C. ABBADI, A. BOUDRISSA, T. GERNIGON-SPYCHALOWICZ Site synthesis determination and partial sequence analysis of a major androgendependent protein from send rat (Psammomys obesus) seminal vesicles. Conférence Internationale Rodens Spatium 24-28 Juillet 2008, Myshkin (Russie). • D. ACHELI, S.S. SALAH, F. SADOUKI, S. LEHTIHET, F. KASSOURI, R. ALLAT, M.C. ABBADI, H. DJOUDI La polyarthrite rhumatoïde chez les patients algériens. 8èmes Journées de l’Appareil Locomoteur de l’HCA. 8-9 Octobre 2008, Alger, Algérie. S. METATLA, • S. MAKRI, C. MAGHNOUCHE, D. OULBANI, N. ATTAL, S. SALHI, M. AIT KACI AHMED Etude clinique, paraclinique et évolutive de la SEP. IVème Congrès Maghrébin de Neurologie. 7-8 Novembre 2008, Alger, Algérie. • K. BELANTEUR, A. GUEDOIR, M. MESSATFA, R. RAACHE, H. AMROUN, S.S. SALAH, A. LABIED, R. TAMOUZA, D. CHARRON, M.C. ABBAD Gènes de susceptibilité HLA classe II et maladie coeliaque chez l’enfant algérien. 1eres journées de la Société Marocaine d’Immunologie. 14-15 Novembre 2008, Marrakech (Maroc). • R. RAACHE, A. BENYAHIA, A. AMROUN, N. ATTAL, K. BELANTEUR, M. AZZOUZ, A. BOUDIBA, M.C. ABBADI Comparaison des antigènes HLA classe II entre les diabétiques dans la région d’Alger. 1eres journées de la Société Marocaine d’Immunologie. 14-15 Novembre 2008, Marrakech (Maroc). • H. AMROUN, S.S. SALAH, R. ALLAT, H. DJOUDI, M. BUSSON, M.C. ABBADI, D. CHARRON, R. TAMOUZA Association des polymorphismes fonctionnels de l’IL-1β (-511C/T et +3953C/T) et de l’IL-1Ra (IL-1Ra 86pb VNTR) avec la spondylarthrite ankylosante dans la région du Grand Alger. 21ème Congrès Français de Rhumatologie 14-17 Décembre 2008, Paris (France) Abstract in : Revue du Rhumatisme, 2008, 75: 996. • H. AMROUN, S.S. SALAH, R. ALLAT, H. DJOUDI, M. BUSSON, M.C. ABBADI, D. CHARRON, R. TAMOUZA Etude de l’association HLA classe II et la polyarthrite rhumatoïde chez des patients Algériens. 21ème Congrès Français de Rhumatologie 14-17 Décembre 2008, Paris (France) Abstract in : Revue du Rhumatisme, 2008, 75: 1056. Services et laboratoires de Diagnostic et Recherche 47 Institut Pasteur d’Algérie Rapport d’Activité 2008 3- COMMUNICATIONS AFFICHEES : • S.S. SALAH, H. AMROUN, H. DJOUDI, M. BUSSON, R. ALLAT, A. TOUBERT, R. KRISHNAMOORTHY, M.C. ABBADI, D. CHARRON, R. TAMOUZA Association of Gender-specific association of the VEGF G-634C polymorphism with Ankylosing Spondylitis in an Algerian patient group. 22th European Conference of Immunogenetics and Histocompatibility, 2-5 Avril 2008, Toulouse (France). • E. ATTAL, N. ATTAL, R. BELABED, S.S. SALAH, H. AMROUN, M. AIT KACI AHMED, M.C. ABBADI Uvéo-cochléo-dermatose unilatérale d’origine auto-immune probable. 1ères journées Algéro-françaises d’Immunologie/ 3èmes Journées Nationales d’Immunologie. 10-11 Mai 2008, Alger, Algérie. • E. ATTAL, N. ATTAL, R. DEHBAOUI, S. SALAH, M. AIT KACI AHMED, M.C. ABBADI Syndrome hémichorée-hémiballisme révélateur d’un neuro-lupus. 1ères journées Algéro-françaises d’Immunologie/ 3èmes Journées Nationales d’Immunologie. 10-11 Mai 2008, Alger, Algérie. • H. AMROUN, S.S. SALAH, R. ALLAT, H. DJOUDI, M. BUSSON, H. CONTOURIS, R. KRISHNAMOORTHY, M.C. ABBADI, D. CHARRON, R. TAMOUZA Tumor Necrosis Factor promoter polymorphism (TNF-α - 308) associated with ankylosing spondylitis in Algerian patients. 1ères journées Algéro-françaises d’Immunologie/ 3èmes Journées Nationales d’Immunologie. 10-11 Mai 2008, Alger, Algérie. • K. BELANTEUR, F. LOUNES, I. ALLAM, H. AMROUN, A. GUEDOIR, F. ASSELAH, A. LABIED, M.C. ABBADI Intérêt du typage HLA dans le diagnostic de la maladie coeliaque. 1ères journées Algéro-françaises d’Immunologie/ 3èmes Journées Nationales d’Immunologie. 10-11 Mai 2008, Alger, Algérie. 7èmes journées nationales de Pathologie. 28-29 Mai 2008, Alger, Algérie. • N. HADJ BEKKOUCHE, N. ATTAL, E. ATTAL, S. MARIR, M. SAADI BELOUIZ, M. AIT KACI AHMED, M.C. ABBADI Intérêt du dosage de la neuron specific enolase (NSE) dans le sérum et le liquide céphalorachidien dans les atteintes neurologiques. 1ères journées Algéro-françaises d’Immunologie/ 3èmes Journées Nationales d’Immunologie. 10-11 Mai 2008, Alger, Algérie. • A. LOUAIL, N. ATTAL, N. HADJ BEKKOUCHE, N. BOUDABA, M.C. ABBADI Les cryoglobulinémies : à propos de deux cas. 1ères journées Algéro-françaises d’Immunologie/ 3èmes Journées Nationales d’Immunologie. 10-11 Mai 2008, Alger, Algérie. 48 Services et laboratoires de Diagnostic et Recherche Institut Pasteur d’Algérie Rapport d’Activité 2008 • K. DJENOUHAT, S.S. SALAH, H. AIT HAMOUDI, M.C. ABBADI Lupus érythémateux disséminé et angio-oedème héréditaire : un autre modèle de maladie auto-immune associée au déficit en complément. 1ères journées Algéro-françaises d’Immunologie/ 3èmes Journées Nationales d’Immunologie. 10-11 Mai 2008, Alger, Algérie. • D. NACI, K. DJENOUHAT, K.D. BERRIMI, M.C. ABBADI Fréquence des pneumallergènes dans les affections respiratoires allergiques dans la région d’Alger : A propos de 3737 cas. 1ères journées Algéro-françaises d’Immunologie/ 3èmes Journées Nationales d’Immunologie. 10-11 Mai 2008, Alger, Algérie. • S.S. SALAH, A. LOUAIL, S. ZOUAOUI, S. METATLA, G. HAMMADI, M. CHEMLAL, N. HADJ-BEKKOUCHE, N. ATTAL, M.C. ABBADI Etude de la fréquence des anticorps anti-gliadine et anti-tTG chez des donneurs de sang sains dans la région d’Alger. 7èmes Journées Nationales de Pathologie. 28-29 Mai 2008, Alger, Algérie. • K. CHERGUELAINE, S.S. SALAH, H. AIT HAMOUDI, M.C. ABBADI Intérêt de l’utilisation du test IMMUNO-DOT (IgG anti-gliadine/ IgG anti-tTG) en cas de déficit en IgA sériques associé à une maladie coeliaque. 7èmes Journées Nationales de Pathologie. 28-29 Mai 2008, Alger, Algérie. • K. DJENOUHAT, A. KETFI, K.D. BERRIMI, M.C. ABBADI Reactivity to bromelain in patients with pollen and hazelnut cross-allergy XXVIIth Congress of the European Academy of Allergology and Clinic al Immunology. 7-11 Juin 2008, Barcelone (Espagne). • K. DJENOUHAT, M. GHARNAOU, K.D. BERRIMI, M.C. ABBADI Occurrence of anti-C1q antibodies in hereditary angioedema. XXIIth International Complement Workshop, 28 Septembre - 02 Octobre 2008, Bâle (Suisse). • D. ACHELI, S.S. SALAH, C. HAOUHICHET, S. NACER, S. LEHTIHET, M.C. ABBADI, H. DJOUDI Étude de l’association HLA classe II et la polyarthrite rhumatoïde chez des patients Algériens. 21ème Congrès Français de Rhumatologie. 14-17 Décembre 2008, Paris, France. Services et laboratoires de Diagnostic et Recherche 49 Institut Pasteur d’Algérie Rapport d’Activité 2008 V. ACTIVITES DE FORMATION 1- THESES EN COURS : • Etude des facteurs de prédisposition aux spondylarthropathies. AMROUN Habiba (Thèse de Doctorat d’Etat en Sciences Médicales) • Etude immunogénétique du diabète de type I dans la population infantile algérienne BENYAHIA Amel (Thèse de Doctorat d’Etat en Sciences Médicales) • Immunogénétique de la maladie de Crohn en Algérie : Marqueurs prédictifs et pronostiques. CHAIB Samia (Thèse de Doctorat d’Etat en Sciences Médicales) • L’angioedème héréditaire par déficit en C1 inh : Etude immunogénétique et immunopathologique. DJENOUHAT Kamel (Thèse de Doctorat d’Etat en Sciences Médicales) • La maladie coeliaque de l’enfant dans la région de Annaba : aspects épidémiologique, immunopathologique et immunogénétique. GADIRI-MERICHE Nassima Sabiha (Thèse de Doctorat d’Etat en Sciences Médicales) • Diabète insulino-dépendant : aspects immuno-pathologiques et immunogénétiques dans la population algérienne. RAACHE Rachida (Thèse d’Etat en Biochimie) • Facteurs immunogénétiques impliqués dans l’initiation et le maintien des processus inflammatoires chroniques. Application au modèle des spondylarthropathies en Algérie. SALAH Sofiane Samir (Thèse de Doctorat d’Etat en Sciences Médicales) 50 Services et laboratoires de Diagnostic et Recherche Rapport d’Activité 2008 Institut Pasteur d’Algérie 2- REALISATION DE MEMOIRES : a) Mémoires en cours : Nom et Prénom de l’étudiant Origine Intitulé du mémoire Promoteur ALLAM Inès Résidente Immunologie 4ème année (Faculté de Médecine d’Alger) Etude immunogénétique de la madie coeliaque de l’adulte en Algérie BELANTEUR Khjadidja BOUTARFA Nassima Résidente Immunologie ème année 4 (Faculté de Médecine d’Alger) Intérêt du test au nitro-Bleu Tétrazolium dans le diagnostic de la granulomatose chronique septique KECHOUT Nadia CHERGUELAIN Khaled Résidente Immunologie ème année 4 (Faculté de Médecine d’Alger) Identification des antigènes solubles nucléaires par WB dans le diagnostic immunologique des connectivites KACI Naima OUIS Nouara Résidente Immunologie ème année 4 (Faculté de Médecine d’Alger) Polymorphisme génétiques des cytokines et susceptibilité à la Sclérose en plaques. ATTAL Nabila NACER Saïda Résidente Immunologie ème année (Faculté de 4 Médecine d’Alger) Fréquence des anticorps antiCCP2 et étude de l’association HLA de classe II chez des patients atteints de polyarthrite rhumatoïde. SALAH Sofiane NACI Dalila Résidente Immunologie ème année 4 (Faculté de Médecine d’Alger) Diagnostic immunologique des allergies aux βlactamines : Mise au point d’un test d’activation des basophiles par cytométrie de flux DJENOUHAT Kamel Mémoire de fin d’Ingéniorat en génie biologique (USTHB) Etude comparative de la recherche de la cible antigénique des anticorps antinoyaux par la technique immuno-enzymatique type ELISA et la cytométrie en flux type Luminex lors de l’exploration des connectivites. SALAH Sofiane HADJADJ Amel et BENKAALOUL Samiha AMAROUCHE Kenza et HAMDI Imène Mémoire de fin Etude du polymorphisme MICA d’Ingéniorat en génétique 129 met/val et diabète type 1 (USTHB) RAACHE Rachida Services et laboratoires de Diagnostic et Recherche 51 Rapport d’Activité 2008 Institut Pasteur d’Algérie b) Mémoires réalisés : Nom et Prénom de l’étudiant Origine Intitulé du mémoire AIT HAMOUDI Hiba Résidente Immunologie 4ème année (Faculté de Médecine d’Alger) Exploration du complément dans la maladie lupique BELAIFA Samira Résidente Immunologie 4ème année (Faculté de Médecine d’Alger) Gènes de susceptibilité HLA classe II et SEP chez des patients algériens BENIDIR Mounira Résidente Immunologie ème année 4 (Faculté de Médecine d’Alger) Place de l’épitope partagé dans la sus- ceptibilité et l’expression clinico-biologique de la PR chez des patients algériens LOUZAI Yamina Résidente Immunologie ème année 4 (Faculté de Médecine d’Alger) Distribution des sous-types HLA B27 chez des patients avec SPA Promoteur DJENOUHAT Kamel ATTAL Nabila SALAH Sofiane AMROUN Habiba 3- ACCUEIL DE RESIDENTS EN IMMUNOLOGIE (Faculté de Médecine d’Alger) : Année de résidanat ère 1 année 2ème année Stages pratiques 50 heures 20h/semaine durant 26 semaines 06 13 planchages 13 analyses d’articles 36 semaines/résident année 07 ème année 07 4 Formation théorique 08 ème 3 52 Nombre Services et laboratoires de Diagnostic et Recherche 36 semaines/résident 04 mémoires Rapport d’Activité 2008 Institut Pasteur d’Algérie 4- FORMATION HORS ENCEINTE DE L’IPA Nom de l’enseignant Lieu de l’enseignement ABBADI Mohamed Chérif Faculté de Médecine d’Alger AMROUN Habiba Faculté de Médecine d’Alger ATTAL Nabila Faculté de Médecine d’Alger DJENOUHAT Kamel Faculté de Médecine d’Alger Destinataires de l’enseignement Niveau graduation Pharmacie ♦ Immunologie Générale (3ème année) ♦ Immunologie Appliquée (4ème année) Niveau graduation 3ème année de Médecine ♦ Immunologie Générale et Immunopathologie Niveau Post-graduation ♦ Résidanat d’Immunologie ème Niveau graduation 3 année de Médecine Niveau graduation 3ème année de Médecine ♦ Immunologie Générale et Immunopathologie ♦ Immunologie Générale et Immunopathologie Niveau Post-graduation ♦ Résidanat d’Immunologie Niveau graduation Pharmacie ♦ Immunologie Générale ème année) (3 ♦ Immunologie Appliquée ème année) (4 Niveau graduation 3ème année de Médecine ♦ Immunologie Générale et Immunopathologie Niveau Post-graduation ♦ Résidanat d’Immunologie Niveau graduation Pharmacie Faculté de Médecine d’Alger Faculté de Médecine d’Alger ♦Immunologie Appliquée (4ème année) ♦ Immunologie Générale et Immunopathologie Niveau Post-graduation ♦ Résidanat d’Immunologie ♦ Immunologie Générale ème année) (3 ♦ Immunologie Appliquée ème année) (4 Niveau graduation 3ème année de Médecine ♦ Immunologie Générale et Immunopathologie Niveau Post-graduation ♦ Résidanat d’Immunologie Niveau graduation Pharmacie SALAH Sofiane Samir ♦ Immunologie Générale ème année) (3 Niveau graduation 3ème année de Médecine Niveau graduation Pharmacie KECHOUT Nadia Type d’enseignement Niveau graduation 3ème année de Médecine Niveau Post-graduation ♦ Immunologie Générale (3ème année) ♦ Immunologie Appliquée (4ème année) ♦ Immunologie Générale et Immunopathologie ♦ Résidanat d’Immunologie ♦ Résidanat de Biologie Clinique Services et laboratoires de Diagnostic et Recherche 53 Rapport d’Activité 2008 Institut Pasteur d’Algérie IV. FORMATION REÇUE PAR LE PERSONNEL DU SERVICE Nom Prénom NATURE DU STAGE • AMROUN Habiba • SALAH Sofiane Samir Séminaire-atelier de bioinformatique : Méthodes pour l’étude des polymorphismes génétiques. 54 Services et laboratoires de Diagnostic et Recherche Lieu Durée Centre de biotechnologie • Du 14/11/2008 au 15/11/2008 de Sfax – Tunisie. Rapport d’Activité 2008 Institut Pasteur d’Algérie Service de la tuberculose et des Mycobactéries Chef de Service : Fadéla Boulahbal (Docteur en Médecine/Professeur INESSM) I- ACTIVITE DE DIAGNOSTIC L’activité de diagnostic de la tuberculose par l’examen microscopique et la culture est assurée par le laboratoire de l’annexe du service sis Rue de Oued Kniss. Les prélèvements sont envoyés par les Unités de Contrôle de la Tuberculose et des Maladies Respiratoires (UCTMR) essentiellement de la Wilaya d’Alger mais aussi d’autres wilayas, des services hospitaliers ou des structures de santé privées. Pour toute culture positive la souche mycobactérienne est identifiée, et un test de sensibilité aux antituberculeux est fait. Diagnostic de la tuberculose pulmonaire pour les patients des UCTMR UCTMR Mois Nombre de malades Culture positive Culture négative Culture contaminée Janvier 111 8 93 10 Février 48 9 34 05 Mars 119 12 100 7 Avril 135 8 125 2 Mai 111 9 92 10 Juin 61 17 41 3 Juillet 45 6 35 4 Août 25 7 13 5 Septembre 53 10 38 5 Octobre 22 5 17 -- Novembre 30 4 26 -- Décembre 37 5 30 2 Total 797 100 644 53 Pour chaque malade, 3 prélèvements pour les patients jamais traités et 2 prélèvements pour les patients en cours de traitement ou en fin de traitement sont mis en culture, les examens microscopiques sont faits par les laboratoires de microscopie du centre de santé. Pour les prélèvements d'expectoration provenant d’une structure hospitalière, d’une structure de santé privée non dotée d’un laboratoire de microscopie, un examen microscopique est pratiqué avant la mise en culture du prélèvement. Le tableau suivant donne les résultats de cette activitémise en culture de tout prélèvement. Le tableau suivant donne les résultats de cette activité. Services et laboratoires de Diagnostic et Recherche 55 Rapport d’Activité 2008 Institut Pasteur d’Algérie Mois Nombre de malades M+C+ M-C+ M-C- M+C- Cultures contaminées 172 12 17 123 1 19 Janvier Février 146 07 08 112 3 16 Mars 192 14 26 143 1 08 Avril 197 19 22 150 1 05 Mai 170 24 27 112 0 07 Juin 166 18 24 112 2 10 Juillet 131 07 24 097 1 02 Août 165 11 27 115 4 08 Septembre 142 13 07 113 5 04 Octobre 190 16 21 145 2 06 Novembre 158 09 16 124 5 04 Décembre 167 10 27 119 1 10 1996 160 246 1465 26 99 Total M = Microscopie C = Culture Au total, le laboratoire a pratiqué au cours de l’année 2007, 11 490 cultures sur prélèvements d’expectoration provenant des structures publiques ou privées. Diagnostic des tuberculoses extra-pulmonaires se fait par la mise en culture d’un ou plusieurs prélèvements de nature variable selon la localisation de la maladie. Le tableau suivant donne les résultats suivants. Résultats des cultures des prélèvements de localisation extra-pulmonaires Nature du prélèvement Résultats de la culture Positif Négatif Contaminée Total Urines 14 1203 64 1281 Pus d’adénopathie 10 60 02 72 Ascites 004 42 04 48 L.Pleural 008 93 01 102 L.Synovial 002 23 00 25 Pus Divers 020 79 04 103 LCR 00 13 01 14 Autres 00 21 08 29 Biopsie 00 15 00 15 Le nombre de prélèvements positifs est de 58 soit 3,48%, et 82 prélèvements contaminés soit 4,85%. 56 Services et laboratoires de Diagnostic et Recherche Rapport d’Activité 2008 Institut Pasteur d’Algérie Tests de sensibilités aux anti-tuberculeux : Les antibiogrammes des souches isolées au laboratoire de diagnostic dans le cadre de l’activité de routine ne sont pas effectués systématiquement sur toutes les souches. L'antibiogramme n'étant pas indispensable à la prescription du régime thérapeutique et pour des raisons pratiques, des critères de sélection ont été mis en place : - L’antibiogramme est pratiqué dans le cadre de la surveillance permanente de la résistance chez nouveaux cas, sur un échantillon aléatoire à raison d’une souche testée sur 5 souches isolées de malades jamais traités. - Par contre, l’antibiogramme est effectué systématiquement sur toute souche isolée de patient déjà traité (dont le traitement doit être repris pour une rechute, un échec ou après une reprise évolutive après interruption précoce du primo traitement). - Pour les souches isolées de localisation extra-pulmonaire et les souches isolées de tuberculose de l’enfant. Le laboratoire reçoit des cultures des souches de M.tuberculosis des laboratoires de CHU pour antibiogramme (CHU Mustapha Alger, CHU Ibn Badis Constantine, Laboratoire d’Hygiène de Wilaya d’Oran…). Au cours de l’année 2008 le laboratoire a effectué 629 antibiogrammes sur les souches de M.tuberculosis selon la méthode des proportions sur milieu solide de LowensteinJensen fabriqué localement. Les souches isolées de malades nouveaux cas sont testées aux 4 antituberculeux majeurs (INH, Rifampicine, Ethambutol et Streptomycine), celles isolées chez des tuberculeux déjà traités sont testées à tous les antituberculeux utilisés pour le traitement de ces cas récidivants (Ethionamide, Cyclosérine, Kanamycine et l'Ofloxacine). Pour les cas particuliers (urgence signalée, mauvais état du malade, forte probabilité de souches multirésistantes), une étude moléculaire pour la recherche rapide par PCR de la résistance à l'isoniazide et la rifampicine est entreprise. Nombre de test de sensibilité effectués en 2008 : 533 Avec : 480 antibiogrammes interprétés 53 antibiogrammes non analysables (négatifs, contaminés ou M.atypique) Services et laboratoires de Diagnostic et Recherche 57 Rapport d’Activité 2008 Institut Pasteur d’Algérie Profils de résistance des souches isolées en 2008 (toutes catégories de malades confondues) Souches résistantes à Nombre de souches % de souches Streptomycine (SM) 5 1,0 Isoniazide (INH) 9 1,8 Rifampicine (R) 1 0,2 Ethambutol ( E ) 0 / 12 2,5 INH/SM INH/R 7 INH/SMRIF 28 INH/SM/RIF/E 12 INH/RIF/E 2 Total MDR 49 10,2 Total 76 15,3 404 84,1 480 100,0 souches sensibles : Total Diagnostic rapide de la résistance de M.tuberculosis à la rifampicine associée à l’Isoniazide par la technique MTB-DR Plus. La recherche des gènes de résistance à la rifampicine associée ou non à l'isoniazide est effectuée par une technique de génotypage (MTBDR plus Hain Lifescience) et le résultat est disponible au bout de 24 à 48 heures. Ainsi au cours de l’année 2008, 59 tests ont été effectués chez des sujets présentant une tuberculose chronique, ou chez des sujets présentant une microscopie positive et vivante en contact avec un tuberculeux ayant une souche MDR connue. Antibiogrammes effectués dans le cadre du contrôle externe de la qualité des tests de sensibilité. Dans le cadre du programme de l'assurance qualité des tests de sensibilité organisé par l'OMS comptant pour le « round 2008 », notre laboratoire participe au contrôle organisé par l'OMS. Dans cet exercice, nous avons reçu 30 souches de M.tuberculosis du laboratoire chargé du contrôle (laboratoire de mycobactériologie de l'Institut de Médecine Tropicale d'Anvers, Belgique,) pour faire les tests de sensibilité aux drogues majeures. Par ailleurs, notre laboratoire fait partie du réseau OMS des laboratoires supra nationaux et reçoit dans le cadre de l'activité assurance qualité, des souches de plusieurs pays pour contrôle des résultats de leurs tests. Ainsi au cours de 2008, nous avons pratiqué des tests de sensibilité sur 30 souches envoyées par le laboratoire national de référence pour la tuberculose de Nouakchott (Mauritanie). Activité de supervision et de contrôle du réseau national de laboratoires - Réseau de microscopie Le contrôle de l’activité du réseau de laboratoires de microscopie pour le diagnostic de la tuberculose est institué depuis de nombreuses années et concerne chaque année plus de 50% des microscopistes exerçant dans les structures de santé publique. Au cours de l’année 2008, les activités de supervision, de contrôle de qualité et de formation ont été effectuées sur la base d’un programme pré-établi et inscrit dans le biennum 2007-2008 de l'OMS. 58 Services et laboratoires de Diagnostic et Recherche Rapport d’Activité 2008 Institut Pasteur d’Algérie Les visites de supervision ont été assurées particulièrement pour 12 sur les 17 UCTMR de la wilaya d’Alger : Centre de microscopie Commentaire général Rais Hamidou Défaillant, à revoir en urgence Sidi Moussa RAS, à suivre Lazerge Bab El-Oued RAS, à suivre Rouiba Défaillant, à revoir en urgence Les Sources RAS, à suivre Château Neuf Défaillant, à revoir en urgence Bach Djarrah RAS à suivre El Harrach RAS, à suivre H-Dey RAS, à suivre Les Annasser RAS, à suivre Staoueli RAS, à suivre Douéra RAS, à suivre Au cours de l’année 2008, 56 secteurs sanitaires répartis sur 13 wilayas, ont été contactés pour le contrôle de qualité des microscopiste par la technique de « test panel », (c'est-à-dire par l’envoi d’un kit de frottis de crachats sur lame) constitué de 10 frottis de richesse connue. 50 secteurs sanitaires ont répondu, les résultats sont présentés sur le tableau suivant : Contrôle de qualité externe des centres de microscopie année 2008 UCTMR avec réponse est correcte UCTMR avec réponse incorrecte (microscopiste à recycler en urgence) PAS DE REPONSE Ghazaouat Akbou (Bejaia) Ain Ouassara (Djelfa) Hassi Bahbah Remchi Biskra Messaad (Djelfa) Djelfa Tlemcen Berrouagui Lakhdaria (Bouira) Médea Sig Gouraya Ain Bessam (Bouira) Bejaia Mohamadia Cherchell Ain Boucif (Médea) Mascara Si Okba Kherrata (Bejaia) Koléa Sour El Ghozlane Tolga (Biskra) Tizi Ouzou Ould Djellal Hadjout (Tipaza) Azzaga Aokas Tablat (Médea) Azzeffoun Ain El Hammam M’sila Méliana Bouira Ain El Melh (M’sila) Ain Salah Mechdellah Boussaada (M’sila) Saida El Eulma El Hassana Boghni Sidi Aich Khenchellah Mahdia Ain Defla Frenda Khemis Miliana Tiaret Bougaa Nedroma Sétif Chlef Ouled Fares Services et laboratoires de Diagnostic et Recherche 59 Institut Pasteur d’Algérie Rapport d’Activité 2008 - Formation des résidents : Le laboratoire a accueilli 13 résidents en microbiologie pour compléter leur formation technique dans le domaine du diagnostic et l’étude de la sensibilité des souches de M.tuberculosis aux antibiotiques. - Formation de personnels scientifiques : Le laboratoire a accueilli en stage de formation aux techniques de laboratoire pour une durée de 15 jours, une assistante de l’EHS d’El Kettar. 02 Vétérinaires ont été formés aux techniques d’isolement et d’identification de M.bovis chez les animaux. Formation de personnels étrangers : 06 techniciens de la République Arabe Sahraoui Démocratique (RASD) ont été formés aux techniques de diagnostic de la tuberculose pour une durée de 15 jours. Cours International de Mycobactériologie Médicale et de formation aux techniques de laboratoire pour le diagnostic de la tuberculose (CIMM 2007) Le Cours de Mycobactériologie Médicale (CIMM) s’est déroulé du 18 octobre au 13 novembre 2008 à l’Institut Pasteur d’Algérie Le cours avait comme objectif principal de donner aux participants les connaissances nécessaires pour diagnostiquer, traiter et prévenir les maladies à mycobactéries les plus prévalentes comme la tuberculose et la lèpre. L’enseignement a couvert en outre les aspects organisationnels et de gestion d’un réseau de laboratoire pour le dépistage des cas contagieux et leur contrôle pendant le traitement dans le cadre d’un programme national. Les séances de travaux pratiques ont permis l’acquisition des techniques bactériologiques. L’enseignement s’est déroulé sous forme de conférences et de séances de travaux pratiques à plein temps matin et après-midi. Des conférenciers algériens et étrangers ont été sollicités pour donner des cours. Les conférenciers algériens sont : D. Larbaoui, P. Chaulet, N. Zidouni, L. Baough, S.Ali Halassa, Ammar Khodja, M.Benabdelkader, D. Yala, M.Ifticene, M.Djouahra et F. Boulahbal. Deux conférencières étrangères ont apporté leur aide: Dr Martine Debacker de l’Institut de Médecine Tropicale d’Anvers Belgique, a été invitée pour traiter de M.ulcerans, agent de l’ulcère de Buruli et Dr Cristina Guttierrez-Perez a donné des conférences et soutenu techniquement les séances de travaux pratiques sur les outils moléculaires dans le diagnostic, la surveillance épidémiologique et la détection des résistances en tuberculose. Nom, prénom et origine des participants au CIMM 2008 Kimfumu LUSAMBU LEONIE RDC Marie Josée. KABEDI RDC KOUEGNIGAN Rerambiah Léonard Gabon MINIME LINGOUPOU Fanny RCA KEZUMUTIMA Peace Burundi RAZANAMPANAHY Rosine Madagascar RAVOLOLONANDRIANA Pascaline Madagascar LAHLOU Ouafae Maroc MATA-MINANA CHANTAL RDC KOUASSI KOUADIO Francis Côte d’Ivoire 60 Services et laboratoires de Diagnostic et Recherche Institut Pasteur d’Algérie Rapport d’Activité 2008 II. ACTIVITE DE RECHERCHE 1. Enquête « C » (F.B, D.Y) Essai clinique international multicentrique pour l’évaluation d’un régime de traitement combiné à dose fixe : 4 principes actifs associés dans la même combinaison à dose fixe, au cours de la phase intensive (8 semaines) de chimiothérapie, suivi d’une phase de continuation de 18 semaines avec l’association de deux principes actifs dans la même combinaison à dose fixe. Objectifs : L'objectif de l'étude est de comparer l'efficience, l'acceptabilité et la toxicité de deux régimes de chimiothérapie antituberculeuse chez des tuberculeux pulmonaires nouveaux cas à microscopie positive. Le régime à l'étude est un régime de 6 mois comportant l'administration quotidienne pendant huit semaines de l'association éthambutol, Isoniazide, rifampicine et pyrazinamide en présentation combinée fixe suivis de 18 semaines de l'association rifampicine et isoniazide en combinaison fixe trois fois par semaines. Ce régime est comparé au régime comportant les mêmes drogues mais en présentation séparée durant la première phase suivi de 18 semaines d'administration trois fois par semaines de RH en présentation combinée. Au cours de cette enquête, 50 patients répondant aux critères d'admission ont été inclus. Les examens microscopiques, les cultures et les tests de sensibilité ont été pratiqués pour les 50 souches isolées. Un échantillon de chaque souche a été envoyé au laboratoire de référence supranational (Institut de Médecine tropicale, Anvers, Belgique) pour antibiogramme. Dans le cadre de cette enquête nous avons reçu chaque année, la visite d'experts en laboratoire envoyés par le laboratoire de référence supra national pour évaluer les conditions de déroulement de l'enquête dans notre laboratoire. Le suivi bactériologique des malades recrutés dans cette enquête s’est terminé en décembre 2008. Les résultats de cette enquête feront l’objet d’un article international dans la revue de l’Union en 2009. 2- Apport de la biologie moléculaire dans l’épidémiologie de la tuberculose (M.I, FZ.G) Les tests de biologie moléculaire pratiqués depuis quelques années dans le service ont été appliqués à l’étude de la transmission de la tuberculose dans la population. Les tuberculoses à bacilles multirésistants (résistants à Isoniazide et Rifampicine au moins), les tuberculoses à mycobacterium bovis ainsi que les souches isolées de tuberculeux venant de zones géographiques déterminées, ont fait l’objet de tests moléculaires pour l’étude de leur profil particulier. Deux techniques sont couramment pratiquées dans le laboratoire ; le spoligotyping et la méthode RFLP Services et laboratoires de Diagnostic et Recherche 61 Institut Pasteur d’Algérie Rapport d’Activité 2008 Application de la méthode RFLP : Cette méthode a été appliquée à l’analyse épidémiologique des cas suspectés d’avoir un lien épidémiologique. Au cours de l’année 2008, 35 souches de M.tuberculosis isolées de malades ayant des liens épidémiologiques très probables ont été analysées par la méthode RFLP. Application de la méthode de Spoligotyping : La méthode du spoligotyping permet à la fois d’identifier et de comparer les profils moléculaires des souches de mycobactéries du complexe tuberculosis (M.tuberculosis, M. bovis, et M.bovis BCG en particulier). Au cours de l’année 2008, 58 souches ont été analysées par la technique de spoligotyping. Afin de comparer et analyser les différents profils moléculaires des souches transmises dans la population, identifiée par RFLP et/ou par spoligotyping, les profils génomiques sont introduits progressivement dans le logiciel Bionumerics. Mission et participation à des manifestation scientifiques et ateliers : Missions : Dr D. Yala a effectué une mission d’expertise du réseau de laboratoires du PNLT de la Mauritanie du 9 au 19 août 2008. Pr. F. Boulahbal A participé aux réunions préparatoires de la "conférence ministérielle d'Alger sur la recherche pour la santé dans la région africaine "et à la Conférence ministérielle qui s'est tenue au Palais des nations à Alger du 23 au 26 juin 2008 A participé au Comité technique d'évaluation des projets (TRC/GDF) à l'OMS Genève du 23 au 27 septembre 2008 A assuré une consultation au Maroc auprès du PNT- Fonds Mondial 23 au 29 Mars 2008 A participé aux travaux du Global Laboratory Initiative organisé conjointement par l'OMS et la Fondation Mérieux à Annecy- Verrier du Lac France les 8 et 9 mai 2008 A participé à l'Assemblée Générale de l'ONUSIDA au siège de l'ONU à New york, du 8 au 12 juin 2008. La mission était conduite par Monsieur Tou, Ministre de la santé, de la Population et de la Réforme hospitalière 62 Services et laboratoires de Diagnostic et Recherche Rapport d’Activité 2008 Institut Pasteur d’Algérie Manifestations scientifiques et ateliers : - F. BOULAHBAL ; D. YALA : Organisation de la Journée d’étude sur l’enseignement à distance en sciences médicales. Organisée par la Faculté de Médecine d’Alger. IPA 12 mars 2008. - D.YALA, K. KAID: Organisation d’un séminaire-atelier sur la formation aux techniques du e-learning sous l’égide de la Faculté de médecine d’Alger. Alger 13-15 juillet 2008. - F. BOULAHBAL : Présentation sur les acquis du projet euro-mediterranéen sur le elearning appliqué à l'enseignement à distance de la tuberculose aux médecins généralistes; IPA 12 mars 2008 - D. YALA. Démonstration de l’utilisation interactive d’un module sur la plate forme « Emphis.org ». Journée d’étude sur l’enseignement à distance en sciences médicales. Organisée par la Faculté de Médecine d’Alger. Alger IPA 12 mars 2008 - D. YALA, K. KAID. Présentation d’un dispositif e-learning (plat forme COSELEARN). Journée d’étude sur l’enseignement à distance en sciences médicales. Organisée par la Faculté de Médecine d’Alger. Alger IPA 12 mars 2008. - AM. DJOUAHRA, D.YALA, M.IFTICENE et F.BOULAHBAL. Le développement du diagnostic de la tuberculose pulmonaire au laboratoire. Journée mondiale de la tuberculose ; Ecole sportive de Draria. 24 mars 2008. - M. IFTICENE, FZ. GACEM, S. SLIMANI, Z. SEMRA, F. SMATI, D. YALA ; F.BOULAHBAL. L’apport du test MTB-DR dans le diagnostic de la résistance de M.tuberculosis à la rifampicine associée à l’Isoniazide. Journée Mondiale de la Tuberculose. Ecole Sportive de Draria. 24 mars 2008. - F. BOULAHBAL : JOURNEES d'Infectiologie de la Société d'Infectiologie de Sétif 29 et 30 avril 2008: Présentation d'une communication orale sur " La résistance de Mycobacterium tuberculosis aux antituberculeux. Situation en Algérie et mesures à prendre dans le cadre du PNT". - AM. DJOUAHRA, D.YALA, M.IFTICENE ET F.BOULAHBAL. Le risque de transmission de la tuberculose pulmonaire en milieu hospitalier. Poster 1ere journée Hygiène hospitalière et de lutte contre les infections nosocomiales. Palais de la culture. 21 mai 2008. - D. YALA. Membre du comité d’organisation de la 1ère Journée de Société Algérienne de Microbiologie Clinique (SAMIC): thème « Maladies infectieuses émergentes et réémergentes » Palais de la culture, Alger le 29 Mai 2008. - D. YALA, M.IFTICENE; FZ.GACEM, F. BOULAHBAL. Diagnostic rapide de la résistance de M.tuberculosis à la Rifampicine et à l’Isoniazide. 1er journée de la Société Algérienne de Microbiologie clinique « SAMIC ». au Palais de la Culture Alger. 29 mai 2008. - M. IFTICENE ; FZ. GACEM ; S. SLIMANI ; Z. SEMRA ; F. SMATI ; D. YALA ; F. BOULAHBAL. L’apport du test MTB-DR dans le diagnostic de la résistance de M.tuberculosis à la rifampicine associée à l’Isoniazide. 1er journée de la Société Algérienne de Microbiologie clinique « SAMIC ». au Palais de la Culture Alger. 29 mai 2008. - AM. DJOUAHRA, D.YALA, M.IFTICENE et F.BOULAHBAL. Le développement du diagnostic de la tuberculose pulmonaire au laboratoire. poster : 1er journée de la Société Algérienne de Microbiologie clinique « SAMIC ». Palais de la Culture Alger. 29 mai 2008. Services et laboratoires de Diagnostic et Recherche 63 Institut Pasteur d’Algérie Rapport d’Activité 2008 - D. YALA, F. BOULAHBAL. Impact of the environment factors on the transmission of tuberculosis in the community. Conférence scientifique internationale du réseau des Instituts Pasteur. 26-27 juin 2008 à Paris. - SAHRAOUI Naima, MULLER Borna, YALA Djamel, OUZROUT Rachid, ZINSSTAG Jakob, BOULAHBAL Fadila and GUETARNI Djamel. Diagnostic de la tuberculose bovine en Algérie. Les 4ème Journées Scientifiques de Microbiologie. Monastir du 07 au 09 Novembre 2008. Publication - SAHRAOUI Naima, MULLER Borna, YALA Djamel, OUZROUT Rachid, ZINSSTAG Jakob, BOULAHBAL Fadila and GUETARNI Djamel. Investigation about the bovine tuberculosis in two Algerian slaughterhouses. African Journal of Agricultural Research Vol. 3 (11), pp. 775-778, November, 2008. - SAHRAOUI Naima., YALA Djamel, OUZROUT Rachid, BOULAHBAL Fadila et GUETARNI Djamel. Enquête sur la tuberculose bovine dans deux abattoirs d’Algérie. Archives de l’Institut Pasteur d’Algérie. T.66 2007/2008. - Wright Abigail, F. BOULAHBAL et all (sous presse) The Lancet -D-08-04734. The antituberculosis drug resistance in the world, 2002-2007 64 Services et laboratoires de Diagnostic et Recherche Rapport d’Activité 2008 Institut Pasteur d’Algérie Laboratoire des Bactéries Anaérobies et du Botulisme Chef du laboratoire : Asmah Saïda MERAD (Ph. MAT. INESSM) I. ACTIVITE DE DIAGNOSTIC ET DE REFERENCE A. L’unité de diagnostic : • Les techniques de diagnostic sont constamment remises à jour pour être améliorées et le diagnostic est supervisé, toute l’année par Mme AS. MERAD. • La mise en évidence, l’identification et les tests de sensibilité aux antibiotiques des bactéries anaérobies à partir de prélèvements divers, reçus de tout le territoire national, sont effectués afin d’établir la place qu’occupent ces bactéries dans les différentes infections et l’antibiothérapie adéquate selon le type d’infection. • Les milieux pour bactéries anaérobies subissent un contrôle de qualité et certains d’entre eux sont préparés en chambre anaérobie par le personnel du service (milieux de transport, milieux TGYV…). B. L’unité de référence : • Identification ou confirmation de diagnostic des souches anaérobies isolées dans d’autres laboratoires. • Surveillance continue et diagnostic de tous les cas suspectés de botulisme humain et/ou animal. 1. PRELEVEMENTS EXAMINES Les prélèvements n’étaient plus reçus à partir de Novembre 2007 pour cause de déménagement à Dely Ibrahim. 1.1- Pus d’oreille 9 60 pus d’oreille provenant de patients souffrant d’otites moyennes chroniques ont été traités. 9 46,6% d’entre eux contient des bactéries anaérobies, le plus souvent associées aux bactéries aérobies et/ ou aux levures, avec en moyenne 03 bactéries différentes par prélèvement. Les bacilles à Gram négatif anaérobies prédominent (47,6%) avec par ordre de fréquence des Bacteroides du groupe fragilis suivi de Prevotella puis de Fusobacterium. Dans le pus d’oreille d’une patiente de 21 ans, il a été isolé Capnocytophaga ochracea associé à Pseudomonas maltophila, Fusobacterium nucleatum et Prevotella melaninogenica. Les bacilles à Gram positif anaérobies (42%) sont essentiellement constitués de Actinomyces sp et de Propionibacterium acnes. Les cocci à Gram positif (28%) sont des Peptostreptococcus sp. Services et laboratoires de Diagnostic et Recherche 65 Institut Pasteur d’Algérie Rapport d’Activité 2008 Les bactéries aérobies isolées et identifiées en parallèle sont, par ordre de fréquence, Pseudomonas aeruginosa (19), Streptococcus sp (14) dont 02 sont des Streptococcus pneumoniae isolés chez des enfants de quatre et six ans, des Enterobactéries(13), des champignons (13 Candida sp et Aspergillus), Staphylococcus aureus (07), enfin, Haemophilus influenzae type b (03) isolés chez trois enfants dont deux sont âgés de 02ans et un de 18 mois.. 1.2- Lésions du pied diabétique. • 14 pus provenant de lésions du pied diabétique ont été analysés, 04 prélèvements étaient négatifs. • 08 prélèvements sur 10 contenaient des bactéries anaérobies le plus souvent associées aux bactéries aérobies et deux fois associées aux bactéries aérobies et aux levures. Une moyenne de 3,4 germes est isolée par prélèvement. Bacteroides du groupe fragilis sont isolés 05 fois, Prevotella 04 fois, Porphyromonas 03 fois, Peptostreptococcus 02 fois et Propionibacterium 01 fois. Les bactéries aérobies associées sont, par ordre de fréquence, des streptocoques (06), des entérobactéries (05), de staphylocoques (03) etPseudomonas sp (01). 1.3- Infections sur matériel d’ostéosynthèse • 17 prélèvements ont été analysés, 05 sont négatifs. • 08 prélèvements sur 11 contenaient des bactéries anaérobies le plus souvent associées aux bactéries aérobies (06/08). Une moyenne de deux germes est isolée par prélèvement. Bacteroides du groupe fragilis sont isolés 04 fois, Prevotella sp ainsi que Propionibacterium 02 fois, Actinomyces odontolyticus ainsi que Peptostreptococcus sp 01 fois. Les bactéries aérobies associées sont, par ordre de fréquence,des staphylocoques(04), des streptocoques (03), des entérobactéries (02) ainsi que des bacilles à Gram négatif oxydatifs (02). 1.4- Abces du cerveau • 09 prélèvements ont été analysés, 05 sont négatifs. • Dans un abcès de l’angle fronto cérébelleux d’un enfant âgé de 09 ans,faisant probablement suite à une otite mal soignée, il a été isolé Enterobacter cloacae, Bacteroides thetaiotaomicron ,Prevotella sp et Peptostreptococcus sp. • Dans un empyème sous dural d’un patient âgé de 22 ans il a été isolé Actinomyces naeslundii et Prevotella sp. • Dans un abcès du cerveau d’un patient âgé de 18 ans et souffrant de céphalées depuis 15 jours, Capnocytophaga ochracea a été isolé. • Dans un pus d’abcès intra crânien ponctionné chez une petite fille âgée de cinq ans ayant une malformation de Dandy Walker,il a été isolé un Streptocoque alpha hémolytique ne poussant qu’en anaérobiose en primo culture. 66 Services et laboratoires de Diagnostic et Recherche Rapport d’Activité 2008 Institut Pasteur d’Algérie 1.5- Pus divers • 74 prélèvements divers ont été analysés, 27 d’entre eux étaient négatifs. • 11 contenaient des bactéries anaérobies (19%). • 06 bacilles à Gram positif (Propionibacterium acnes, Actinomyces odontolyticus), Actinomyces sp ont été isolés d’un liquide synovial du genou et d’une ulcération nasale. • 05 bacilles à Gram négatif (Bacteroides fragilis, Porphyromonas sp, Prevotella oralis). • 02 Peptostreptococcus asaccharolyticus. • Bacteroides fragilis a été isolé d’un abcès fessier, d’un patient diabétique. • Porphyromonas sp a été isolé d’un abcès rénal provenant d’un enfant de deux ans, et était associé à un Streptocoque et à un Proteus mirabilis. • Le deuxième Porphyromonas a été retrouvé, associé à un Streptocoque et à un Escherichia coli, dans un pus scrotal d’un patient diabétique. • Le troisième, dans un abcès mammaire, associé à Peptostreptococcus asaccharolyticus, Propionibacterium acnes et à un Streptocoque. • Prevotella oralis, associé à un Streptocoque a été isolé d’un abcès du foie. • 46 prélèvements ne contenaient que des bactéries aérobies soient seules soit associées entre elles ou avec des Candida sp. Staphylococcus aureus vient en premier suivi des Entérobactéries puis des Streptocoques et enfin, des levures ont été isolées de trois prélèvements. 1.6- Selles • 12 prélèvements de selles nous ont été adressés pour la recherche de Clostridium difficile. • Clostridium difficile a été isolé dans les selles diarrhéiques d’un enfant de 07 ans, hospitalisé dans le service de pédiatrie de l’hôpital de Bologhine, souffrant de déficit immunitaire profond en Ig A , d’une hépatite B évolutive post transfusionnelle et d’une anémie hémolytique auto immune. 1.7- Prélèvements d’organes • 19 prélèvements d’organes (rein, cœur, foie, caillette, rumen, rate, intestin) provenant de mouflons à manchettes et de mouflons corses du parc zoologique d’Alger nous ont été adressés pour la recherche de Clostridium perfringens et du toxinotype dans le cadre d’une suspicion d’entérotoxémie. • Clostridium perfringens a été isolé dans dix sept d’entre eux. Les souches ont été conservées en attendant de recevoir les réactifs pour toxinotypage. • 37 autres prélèvements d’organes provenant d’ovins (contenus d’intestin), provenant de plusieurs wilayates, nous ont été, également, adressés pour la recherche de Clostridium perfringens et pour toxinotypage. • Clostridium perfringens a été isolé dans douze prélèvements et cinq d’entre eux appartenaient au toxinotype D, par ELISA. Services et laboratoires de Diagnostic et Recherche 67 Institut Pasteur d’Algérie Rapport d’Activité 2008 1.8- Recherche de toxine botulique : Test de toxicité sur souris et séroneutralisation • Deux sérums, provenant respectivement d’un enfant de 04 ans qui, suite à l’ingestion de fromage, a présenté un coma avec détresse respiratoire et d’un adulte âgé de 26 ans présentant des troubles de la conscience et détresse respiratoire suite à un repas pris dans un restaurant, ont été analysés. • Dans les deux cas, le résultat était négatif. 1.9- Sérologie tétanos • 05 sérums ont été analysés. • Les taux d’anticorps antitétaniques retrouvés sont de : 9 2,20UI/ml ; 1,75UI/ml ; 1,24 UI/ml qui équivalent à une marge de protection à long terme, avec un contrôle conseillé au bout de 05-10 ans. 9 0,57UI/ml qui équivaut à une protection fiable avec un contrôle conseillé au bout de 02 ans. 9 0,044UI/ml qui correspond à un faible taux d’anticorps sans aucune protection pour le patient et une recommandation d’injection de rappel immédiate ainsi qu’un contrôle du taux d’anticorps 04-06 semaines plus tard. Ce patient, âgé de 60 ans et originaire de Tizi Ouzou, était hospitalisé pour trismus et paralysie pharyngée certainement dus au tétanos. 1.10- Souches à identifier • 53 souches nous ont été adressées soient dans des boites de Pétri soient dans des tubes gélosés. Les germes identifiés sont les suivants : 9 Bacteroides fragilis (03) 9 Bacteroides thetaiotaomicron 9 Bacteroides capillosus 9 Prevotella intermedia 9 Porphyromonas asaccharolytica (02) 9 Peptostreptococcus asaccharolyticus (02) 9 Propionibacterium acnes (02) 9 Clostridium perfringens : Isolé de deux flacons d’ hémoculture d’un patient opéré d’un adénocarcinome duodénal avec métastase hépatique depuis 15 jours et hospitalisé dans les urgences cardiaques pour endocardite infectieuse sur valve mitrale suspectée être d’origine fungique ou à Entérobactéries. 9 Clostridium perfringens (06) : Isolés à partir de lait de vache cru, de moules, de thon à l’huile et de levure de bière. 9 Clostridium perfringens (15) : Isolés des organes (foie, rate, intestin) de poussins de chair, âgés entre 20 et 44 jours, de dindes et de lapins. 9 Clostridium sporogenes (03) : Isolés à partir de fromage fondu conditionné dans des boites de conserve et de farine. 9 Clostridium cadaveris (01) : Isolés de levure de bière. 9 Clostridium septicum (01) : Isolé de lait de vache cru. 9 14 tubes gélosés ne contenaient pas de bactéries anaérobies. 68 Services et laboratoires de Diagnostic et Recherche Rapport d’Activité 2008 Institut Pasteur d’Algérie III. ACTIVITE DE RECHERCHE 1. UNITE DE SURVEILLANCE DE LA RESISTANCE AUX ANTIBIOTIQUES - Bacteroides du groupe fragilis est un bacille à Gram négatif isolé dans tous les types d’infection et résistant à de nombreux antibiotiques usuellement prescrits (péni G, aminopénicillines, carboxypénicillines, céphalosporines de première et troisième génération et même parfois à toutes les bêta lactamines par sécrétion d’une imipènémase ,macrolides et lincosamides, aminosides, fluoroquinolones et, depuis quelques années, les nitro imidazolés voient leur activité diminuée vis à vis de certaines souches),aussi une surveillance continue est nécessaire. La recherche d’une céphalosporinase est réalisée sur toutes les souches isolées et elle est présente à 100%. Les CMI de toutes les souches de Bacteroides fragilis sont effectuées. - Le pourcentage des résistances est le suivant : Antibiotique Bacteroides fragilis fragilis Bacteroides indologènes Ampicilline 90 84 Cefalexine 100 92 Ticarcilline 48 84 Piperacilline 32 34 Cefotaxime 100 100 Imipeneme 0 0 Amox- Ac clavulanique 0 0 Cefoxitine 5,5 42 Chloramphenicol 0 0 Clindamycine 27 25 Tetracycline 42,5 42 Metronidazole 0 0 - La recherche de souches à sensibilité réduite vis-à-vis du métronidazole et l’étude du gène codant l’imipénémase par PCR, seront effectives dès que les réactifs commandés seront disponibles. - La recherche des béta lactamases des souches de Prevotella sp et Porphyromonas sp est en cours de mise au point. La pigmentation des souches gène la lecture, aussi allons nous tenter une autre technique. - Surveillance de la résistance aux antibiotiques de Clostridium difficile. Services et laboratoires de Diagnostic et Recherche 69 Institut Pasteur d’Algérie Rapport d’Activité 2008 2. UNITE DE SURVEILLANCE DE CLOSTRIDIUM DIFFICILE Nous avons reçu 05 selles diarrhéiques d’enfants âgés entre 16 mois et 07 ans et hospitalisés dans le service de pédiatrie de l’hôpital de Bologhine. Une seule souche a été isolée et provenait des selles d’un enfant de 07 ans immunodéprimé et ayant une hépatite B active. La recherche des gènes codant les toxines A et B a été réalisée. La recherche des gènes codant la toxine binaire et le ribotypage seront étudiés ultérieurement dès que les réactifs commandés seront disponibles. 3. UNITE DE SURVEILLANCE DU BOTULISME Deux cas de suspicion de botulisme nous ont été adressés. Nous n’avons reçu que les sérums qui étaient négatifs. Les aliments suspects n’ont pas été envoyés. Une thèse de doctorat sur la purification et la caractérisation des anticorps neutralisant l’effet de la toxine botulique de type A est en cours par Melle L. AMROUCHE Cette étude est réalisée pour l’application au diagnostic de séroneutralisation de la toxine botulique de type A. 4. UNITE D’AUTRE DES TOXINES ELABOREES PAR LES AUTRES BACTERIES ANAEROBIES - Recherche des souches de Bacteroides fragilis entérotoxinogènes. Le gène codant l’entérotoxine est mis en évidence par PCR. 27% des souches isolées de prélèvements divers sécrète une entérotoxine - Recherche des gènes codant l’entérotoxine de Clostridium perfringens par PCR. - Toxinotypie de souches de Clostridium perfringens isolées à partir d’organes d’animaux par ELISA. - Mise en évidence par PCR des gènes codant les toxines alpha, béta, epsilon de Clostridium perfringens isolés à partir d’organes d’animaux 5. UNITE DE SURVEILLANCE DU TETANOS - 05 tests ELISA ont été réalisés pour la recherche des anticorps anti tétaniques. - Pour quatre d’entre eux, les examens ont été réalisés pour vérifier l’état immunitaire des patients. - Le cinquième examen a été réalisé pour confirmer un diagnostic clinique de tétanos et provenait de l’hôpital de Tizi Ouzou. 6. SOUCHOTHEQUE Toutes les souches anaérobies isolées sont conservées pour des études ultérieures. Cette année 2008, nous avons été privés de notre congélateur, qui est resté au niveau d’El Hamma en attendant que les problèmes d’électricité soient résolues à Delly Ibrahim (IPA), de sorte que plusieurs de nos souches ont été perdues, ce qui est fort regrettable. 70 Services et laboratoires de Diagnostic et Recherche Rapport d’Activité 2008 Institut Pasteur d’Algérie III. ACTIVITES DE FORMATION 1. FORMATION DISPENSEE A L’IPA. (A.S. MERAD). a - Post graduation : Résidanat de microbiologie. (12) résidents ont été reçus dans le service cette année 2008. Thèse de doctorat de Melle Amrouche en collaboration avec le Laboratoire recherche et développement sur les venins. b - Graduation 2- FORMATION DISPENSEE EN DEHORS DE L’IPA (AS. MERAD) Enseignement (cours, TP, planchages) aux étudiants de troisième et quatrième année de pharmacie et aux résidents de microbiologie et de biologie clinique. Services et laboratoires de Diagnostic et Recherche 71 Institut Pasteur d’Algérie 72 Services et laboratoires de Diagnostic et Recherche Rapport d’Activité 2008 Rapport d’Activité 2008 Institut Pasteur d’Algérie Laboratoire de Biologie Parasitaire Chef de laboratoire : Fatma BACHI (Professeur en Parasitologie – Mycologie). Le laboratoire de biologie parasitaire a pour mission le diagnostic, la recherche et la formation. Il se compose de 05 unités : Unité toxoplasmose : Centre National de Référence. Unité leishmaniose. Unité helminthiases. Unité coprologie parasitaire. Unité biologie moléculaire. I. ACTIVITE DE DIAGNOSTIC 6523 prélèvements, toutes analyses confondues ont été réalisées dans le laboratoire de biologie parasitaire. 1- Unité toxoplasmose : Centre National de Référence Toxoplasmose (CNR Toxoplasmose). Ses missions sont : ¾ Diagnostic biologique de la toxoplasmose et le suivi sérologique des gestantes afin de prévenir la toxoplasmose congénitale. ¾ Diagnostic biologique des choriorétinites toxoplasmiques. ¾ Diagnostic biologique des encéphalites toxoplasmiques chez les immunodéprimés. ¾ Collaboration avec les gynécologues et les pédiatres pour la prévention puis la prise en charge des toxoplasmoses congénitales. ¾ Contrôle de la qualité des Kits de réactifs Toxoplasmose. ¾ La formation Les prélèvements adressés pour le diagnostic de la toxoplasmose sont divers et peuvent être soit du sang (sérum), liquide amniotique, placenta, sang du cordon ombilical, liquide céphalo-rachidien (LCR) ou humeur aqueuse (HA). Le diagnostic de la toxoplasmose peut être direct ou indirect. Le diagnostic direct repose sur l’inoculation du produit pathologique, liquide amniotique, placenta, H.A ou L.C.R. par voie intra péritonéale à la souris Balb C et de faire par la suite une sérologie murine et 45 jours après l’inoculation, sacrifier la souris et rechercher les kystes de Toxoplasma gondii dans le cerveau. Le diagnostic indirect séro-immunologique est réalisé par plusieurs techniques, l’I.F.I, essentiellement pour la sérologie murine, l’ELISA BIORAD, Axsym M.E.I.A. Le diagnostic séro-immunologique concerne les 2 classes d’immunoglobulines pour une bonne interprétation du résultat et afin d’arriver à une conclusion avec une conduite à tenir. Services et laboratoires de Diagnostic et Recherche 73 Institut Pasteur d’Algérie Rapport d’Activité 2008 Pour dater la contamination maternelle au cours de la grossesse et évaluer le risque fœtal, l’Indice d’Avidité est calculé chez toutes les gestantes ayant un résultat suspect d’une toxoplasmose évolutive. Concernant les choriorétinites toxoplasmiques et les encéphalites, les sérums sont traités en parallèle avec l’humeur aqueuse et le LCR respectivement en Western Blot pour confirmer ou infirmer l’étiologie toxoplasmique. Ainsi le CNR Toxoplasmose a reçu : 9 Sérums : 4058 sérums, tous soumis à une recherche d’IgM et d’IgG, soit 4058 IgG et 4058 IgM. Parmi les sérums positifs, 190 nécessitaient un Indice d’Avidité qui a été fait. Puis à l’accouchement, 21 parmi les gestantes ayant fait une toxoplasmose évolutive ont bénéficié d’un Western Blot en parallèle à leurs nouveaux nés pour confirmer ou infirmer une toxoplasmose congénitale. 9 H.A : 04 en parallèle avec leurs sérums. 04 sérologies classiques reprises par Western Blot. 9 LCR : 02 en parallèle avec leurs sérums adressés pour suspicion d’encéphalite toxoplasmique chez des sujets VIH positifs. Le diagnostic sérologique classique suivi par le Western Blot a permis d’exclure cette étiologie. 9 LA : 01 prélèvement adressés dans le cadre d’un diagnostic anténatal pour une inoculation à la souris. 9 Placenta : 22 inoculations à la souris qui sont revenues toutes négatives. 9 Sang du cordon : 17 ont fait l’objet d’une inoculation à la souris. Les placentas et les sangs du cordon nous ont été adressés dans le cadre du diagnostic néonatal de la toxoplasmose congénitale. Le point positif du CNR Toxoplasmose pour l’année 2008 est le nombre de prélèvement de placenta et du sang de cordon reçus. En effet, cela témoigne d’une sensibilisation des gynécologues au problème de la toxoplasmose congénitale avec une meilleure prise en charge de ce diagnostic. Le deuxième point positif est la mise au point de la PCR dans le diagnostic de la toxoplasmose. Cette mise au point a fait l’objet d’un mémoire de fin d’étude de spécialité Parasitologie-Mycologie qui est en cours de rédaction et sera soutenu Mars 2009. 2- Unité de Leishmaniose Cette unité assure le diagnostic de la leishmaniose cutanée, la leishmaniose viscérale et la leishmaniose canine. Le diagnostic de la leishmaniose cutanée repose sur un examen direct d’un prélèvement (frottis colorés par le MGG) et une mise en culture sur le milieu usuel. Quant à la leishmaniose viscérale c’est essentiellement un diagnostic sérologique qui est fait par IFI et par Western Blot dans certaines situations. Dans certains cas les pédiatres nous contactent pour une ponction de moelle osseuse sur laquelle une recherche de leishmanies est effectuée. Le diagnostic de la leishmaniose canine est posé par une sérologie en IFI, une hémoculture et une leucocytoconcentration. 74 Services et laboratoires de Diagnostic et Recherche Rapport d’Activité 2008 Institut Pasteur d’Algérie Cette unité a effectué 811 analyses dont : 209 prélèvements pour L. cutanée 08 ponctions de moelle osseuse 151 sérologies pour L. viscérale 53 sérologies pour L cutanée 380 sérologies pour L. canine 10 hémocultures La Leishmaniose cutanée 209 prélèvements cutanés, frottis et culture sur milieux usuels avec : 33 examens directs positifs. 42 cultures positives. Les sérologies, 53, étaient toutes négatives. La Leishmaniose viscérales 151 sérums traités en IFI avec 09 positifs au delà du seuil de positivité alors que 23 ont montré une faible positivité, au 1/20 et au 1/40, qu’il fallait interpréter dans leurs contextes cliniques et épidémiologiques, 15 parmi ces sérums ont bénéficié d’un Western-Blot, ce qui a permis de corriger le diagnostic dans 11cas (WB positifs). Dans le cadre du diagnostic de la leishmaniose viscérale, nous avons reçus également 08 ponctions de moelle osseuse pour examen direct et mise en culture La Leishmaniose canine 380 sérums traités en immunofluorescence indirecte (IFI) avec 54 positifs. 10 hémocultures dont 02 positives. 3- Unité Helminthiases Cette unité s ‘occupe du diagnostic de 3 helminthiases essentiellement, l’hydatidose, la bilharziose uro-génitale et la distomatose hépatobiliaire. A côté du diagnostic de ces helminthiases, celui de l’amibiase et du paludisme est assuré. Elle a reçu un total de 653 prélèvements. a) Hydatidose 514 prélèvements sanguins ont été adressés au service pour une sérologie hydatique et ont été traités en hémagglutination passive (HAP), immunoélectrophorèse (IEP) et/ou en immunodiffusion (ID). Sur les 514 prélèvements, 125 étaient positifs. Parmi les négatifs, 74 ont été traités en Western Blot et 26 sont revenus positifs. 04 liquides biologiques ont été également adressés pour la recherche de crochets hydatiques par un examen direct dont un était positif. Services et laboratoires de Diagnostic et Recherche 75 Institut Pasteur d’Algérie Rapport d’Activité 2008 b) Bilharziose uro-génitale 29 urines : examen direct après centrifugation dont 28 négatives et une urine positives (Africain d’origine malienne). 13 sérologies en H.A.P (Kit Fumouze), toutes négatives c) Distomatose hépato-biliaire 04 sérologies par H.A.P et IEP, toutes négatives. d) Paludisme Au cours de l’année 2008, le service a reçu 46 sujets pour suspicion de paludisme et qui ont été prélevés pour un frottis et une goutte épaisse. Un seul prélèvement était positif, il avait montré Plasmodium falciparum. e) Amibiase 43 sérologies amibiennes par la technique d’hémagglutination passive ont été réalisées dont une s’est révélée positive. 4- Unité Coprologie parasitaire 955 prélèvements dont : 872 selles 26 scotchs test 57 prélèvements vaginaux Les prélèvements de selles ont étés soumis à un examen direct et des techniques de concentration, la technique de Ritchie modifiée, la technique de Willis, la technique de Kato et la coloration de Kohn pour le diagnostic d’espèce des amibes. Pour certaines selles et en fonction du contexte épidémiologique et clinique, la recherche de Cryptosporidium par la technique de Ziehl Neelsen modifiée a été réalisée. Les prélèvements provenaient des hôpitaux, personnel des restaurants et dans la majorité des cas de malades externes. Sur les 872 selles, 69 étaient positives. Les parasites retrouvés sont : ♦ Kyste d’Entamoeba histolytica ♦ Kyste de Giardia intestinalis. ♦ Trophozoite de Giardia intestinalis. ♦ Kyste d’Entamoeba coli. ♦ Kyste d’Endolimax nanus ♦ Kyste de Pseudolimax butschlii ♦ Blastocystis hominis ♦ Arthrospores de Geotrichum. ♦ Oocyste de Cryptosporidium 76 Services et laboratoires de Diagnostic et Recherche Rapport d’Activité 2008 Institut Pasteur d’Algérie Les prélèvements vaginaux ont étés traités par un examen direct. Sur les 57 prélèvements vaginaux, 01 était positif. Concernant les scotchs test de Graham, 26 examinés et 02 positifs avec œuf d’Enterobius vermicularis. II. ACTIVITE DE SANTE PUBLIQUE Durant l’année 2008, le service n’a assuré aucune activité de santé publique en dehors du diagnostic des malades. Aucune demande d’enquête n’a été formulée. III. ACTIVITE DE PRODUCTION A) Production de milieux de culture 4000 tubes de milieux N.N.N = gélose au sang de lapin. 1200 tubes de milieu sérum de lapin coagulé. 600 20 flacons de milieu C.C.S = cœur + cerveau + sang. litres de milieu RPMI 1640. 200 tubes citratés B) Les Antigènes parasitaires : 1200 Ag lames d’Ag figuré de Leishmania pour la réaction d’IFI. soluble de Leishmania pour le Western Blot. Sensibilisation des feuilles de nitrocellulose par l’Ag leishmanien pour Western Blot. Ag soluble de Toxoplasma pour la mise au point du Western Blot. Ag hydatique lyophilisé. Cette production est le fruit d’un travail de terrain. En effet, Monsieur L. Boudhane sortait durant tout le mois de ramadhan, comme chaque année, sur les abattoirs pour ramasser les viscères parasités qui ont été traités au niveau du laboratoire. Hématies de mouton sensibilisées par de l’Ag hydatique pour la technique H.A.P. IV. ACTIVITE DE REFERENCE Le L.N.R Toxoplasmose a eu à : • Confirmer ou infirmer le caractère évolutif de la toxoplasmose chez 190 gestantes adressées des CHU et du secteur privé et cela par l’Indice d’Avidité. • Confirmer ou infirmer une toxoplasmose congénitale chez 21 nouveaux nés par le Western Blot. • Confirmer ou infirmer l’étiologie toxoplasmique de 04 choriorétinites par Western Blot. • Confirmer ou Infirmer l’étiologie d’encéphalite toxoplasmique chez 02 personnes VIH positive par Western Blot Services et laboratoires de Diagnostic et Recherche 77 Institut Pasteur d’Algérie Rapport d’Activité 2008 V. ACTIVITE DE RECHERCHE Projet de développement : ¾ Mise au point du Western blot pour le diagnostic de la toxoplasmose. Mémoire de fin d’étude en Résidanat de Parasitologie-Mycologie. Mémoire en phase de rédaction pour une soutenance en Mars 2009. ¾ Mise au point de la PCR et son application au diagnostic de la Toxoplasmose, mémoire de fin d’étude en Résidanat de Parasitologie-Mycologie qui sera soutenu en Mars 2009. ¾ La LCC étant mise au point elle a fait l’objet d’un mémoire de fin d’étude en Résidanat de Parasitologie-Mycologie dont la soutenance est prévue pour Mars 2009. ¾ Essai de plantes médicinales in vitro sur les formes promastigotes de Leishmania, thème d’un mémoire de fin d’étude en Résidanat de Parasitologie-Mycologie dont la soutenance est prévue pour Mars 2009. Projet de Recherche : Projet PICS : Statut écologique, démographique, génétique et sanitaire du magot (Macaca sylvanus) en conditions limitantes en Algérie : intérêt pour une gestion durable de la biodiversité Résumé : Sous la pression humaine, les magots d’Afrique du Nord ont subi une réduction et une fragmentation de leur habitat avec formation d’isolats. Certains groupes commencent à coloniser l’habitat urbain, causant des nuisances potentiellement associées à des risques de transmission de maladies singe/homme. Notre étude sera menée dans le Parc National de Gouraya(Bejaia). Des observations ponctuelles seront faites dans le Parc National de Djurdjura à des fins de comparaison. Le but de notre projet est : 1- Préciser le statut démographique et génétique de la population de dans le contexte global de l’espèce. Gouraya 2- Tester le rôle éventuel d’une cohabitation homme-singe sur un transfert de parasite entre les deux espèces. 3- Etudier les facteurs environnementaux responsables du commensalisme observé. 4- Faire des recommandations dans le cadre d’une aide à la gestion des populations de magots. Le projet a été achevé le mois de Novembre 2008, un bilan de ce projet est en cours de rédaction par les différents partenaires 78 Services et laboratoires de Diagnostic et Recherche Rapport d’Activité 2008 Institut Pasteur d’Algérie Projet ANDRS jeune chercheur : Epidémiologie des leishmanioses à l’Est Algérien Résumé : Les leishmanioses à l’Est Algérien, à l’instar du reste du pays, connaissent un profond bouleversement épidémiologique. En effet, la leishmaniose cutanée se caractérise par son extension à partir des anciens foyers et devient de plus en plus fréquente au Nord coexistant dans la zone d’endémie de la leishmaniose viscérale ce qui soulève des questions d’ordre épidémiologique. Son diagnostic est facile, se fait par un examen direct et une mise en culture sur milieu usuel. Mais ce milieu de culture, à savoir le NNN, n’est pas disponible au niveau de ses zones d’endémies démunies. Quant à la leishmaniose viscérale, problème de santé publique de part son pronostic, son diagnostic n’est pas réalisé par manque de moyens. Les deux situations contribuent à l’absence de données épidémiologiques. C’est dans ce contexte que s’inscrit ce projet qui a comme objectifs : 1- Décentralisation du diagnostic des leishmanioses par la mise en place des cultures et du sérodiagnostic. 2- Isolement et caractérisation isoenzymatique des isolats de responsables des leishmanioses à Annaba. leishmanies Dans ce cadre, des souches de leishmanies ont été congelées pour un typage isoenzymatique. 3- Evaluer la prévalence de la maladie dans la région avec ces particularités épidémiologiques. Projet ANDRS jeune chercheur : Epidémiologie de la toxoplasmose à l’Est Algérien et prévention de la toxoplasmose congénitale. L’objectif du projet est de connaître la séroprévalence de la toxoplasmose à l’Est du pays ainsi que la prévalence des séroconversions et des toxoplasmoses congénitales. VI. ACTIVITE DE FORMATION (a) Formation dispensée dans le laboratoire : 1- Résidents en Parasitologie Mycologie : 04 résidents de 4ème année 9 Rezekallah Lila 9 Beldjehem Imene 9 Yebbous Bensaid Sid Ahmed 9 Benyahia Djamila. Les 04 résidents étaient affectés à l’IPA dans le cadre de la réalisation de leurs mémoires, sous la responsabilité du Pr. F. BACHI. Ces mémoires étaient insérés dans le cadre des projets de développement du service Services et laboratoires de Diagnostic et Recherche 79 Institut Pasteur d’Algérie Rapport d’Activité 2008 2- Passage de façon cyclique de deux stagiaires dans le cadre de la réalisation d’une thèse de doctorat d’état. Il s’agit de : ¾ Dr Rokia MANSOURI : Epidémiologie des leishmanioses à l’Est Algérien. (Projet ANDRS) : Directeur de thèse, Pr. F. BACHI Cette thése touche à sa fin, elle est en cours de rédaction. ¾ Dr Leyla MESSERER : Epidémiologie de la toxoplasmose à l’Est Algérien et prévention de la toxoplasmose congénitale (Projet ANDRS) : Directeur de thèse, Pr. F. BACHI 3- Une conférence, intitulée la réponse immunitaire aux infections parasitaires assurée par le Pr. F.BACHI aux résidents d’immunologie. (b) Formation dispensée hors du laboratoire : 9 Enseignement hors l’Institut Pasteur d’Algérie. Nom de l’enseignant : Pr. F. BACHI Parasitologie Mycologie. Lieu de l’enseignant : INESSM Alger. Destinataire : Graduation : 3e année de médecine et 4e année de pharmacie. Post graduation : CES Biologie clinique, Résidanat de Parasitologie - Mycologie Type d’enseignement : Cours, TD, TP et planchages 80 Services et laboratoires de Diagnostic et Recherche Institut Pasteur d’Algérie Rapport d’Activité 2008 VII. COMMUNICATION : 1. Evaluation in vitro de l’activité antileishmaniennede différentes espèces d’Artémisia & Matricaria pubescens. L. REZKALLAH(1) ; A. AÏT-AÏSSA (1) ; A. BENZETOUNI(1) ; M. BESSA(1) ; M. ZEMOURI(1) ; Z. TAHARBOUCHT(1) ; F.BACHI(1) ; BEN-MOKADE ET SON EQUIPE(2). (1) Service de biologie parasitaire;Unité de Leishmaniose ; IPA. (2) Laboratoire de gènitique; l’universitée de Khemis-Meliana. XIIème Journée Nationale de Parasitologie-Mycologie, Sétif, 04 Juin 2008 2. Toxoplasmose congénitale : bilan de 06 ans S. YEBBOUS BENSAID ; E. GOURBDJI ; L. TAOURIRT ; L. BOUDHANE ; L. LAZIZI & F. BACHI Centre National de Référence toxoplasmose, service biologie parasitaire XIIème Journée Nationale de Parasitologie-Mycologie, Sétif, 04 Juin 2008 3. Hydatidose : les cas particuliers D. BENYAHIA.D; ZENAIDI-MEZGHICHE.N;KHALEF.O & BACHI.F Unité Helminthologie, Service de Biologie Parasitaire, IPA XIIème Journée Nationale de Parasitologie- Mycologie, Sétif, le 04Juin 2008 4. Toxoplasmose oculaire : bilan de 6 années I. BELDJEHEM ; E. GOURBDJI ; L. TAOURIRT ; L. BOUDHANE ; L. LAZIZI & F. BACHI CENTRE NATIONAL DE Référence Toxoplasmose, service de biologie parasitaire Institut Pasteur d’Algérie XIIème Journée Nationale de Parasitologie- Mycologie Médicale Sétif, le 04Juin 2008 5. Prévention de la Toxoplasmose congénitale en Algérie: qu’en savonsnous? F. BACHI, E. GOURBDJI, S. YEBBOUS BENSAID, L. TAOURIRT, L. BOUDHANE & L. LAZIZI CNR Toxoplasmose, Service Biologie Parasitaire, Institut Pasteur d’Algérie XIIème Journée Nationale de Parasitologie-Mycologie, Sétif, 04 Juin 2008 6. Myiase Nasale F. BACHI, I. ACHIR & H. ADJMI XIIème Journée Nationale Parasitologie-Mycologie, Sétif, 04 Juin 2008 Services et laboratoires de Diagnostic et Recherche 81 Institut Pasteur d’Algérie 82 Services et laboratoires de Diagnostic et Recherche Rapport d’Activité 2008 Rapport d’Activité 2008 Institut Pasteur d’Algérie Laboratoire de Bio Pathologie Chef du laboratoire : Anissa BOUHADEF (Docteur en Médecine/ Pr./ INESSM) I. ACTIVITES DE DIAGNOSTIC Début des activités en mars 2008 seulement, car tributaires de l’arrivée en février 2008 d’un équipement de base. Seuls un microtome et un microscope achetés par le ministère, sont parvenues en février, ce qui a permis de démarrer les activités de diagnostic en mars, par des techniques exclusivement manuelles, les autres équipements n’étant pas disponible encore à ce jour. Malgré des moyens humains insuffisants, des moyens matériels très insuffisants, les unités suivantes sont fonctionnelles. 1- Unité d’histopathologie : Les prélèvements adressés se sont diversifiés au cours de l’année, bien qu’aucune information de l’existence de ce laboratoire n’ait été diffusée. 0272 Cas de biopsie soit 2175 examens microscopiques. 0146 Cas de pièces opératoires soit 272 examens macroscopiques. 2190 examens microscopiques. Ils se répartissent selon les processus pathologiques : Pathologie inflammatoire : 114 cas soit 980 examens microscopiques Non spécifique Spécifique dont : tuberculose, sarcoïdose, yersiniose, parasitose et viroses. Pathologie tumorale : Bénigne 200 cas soit 2400 examens microscopiques. Maligne : 104 dont 30 d’étiologie virale ou bactérienne (HPV ou Helicobacter pylori). Autres pathologies : Dystrophiques Dysmétaboliques Héréditaires Ils se répartissent selon les localisations multiples en particulier digestives, gynécologiques, mammaire, ganglionnaires. Ils se repartissent selon le sexe : autant de femmes que d’hommes. Ils se repartissent selon l’age : de deux mois à 75 ans. Le développement de cette unité dépendra de l’obtention des produits et consommables indispensables pour le fonctionnement, et aussi de l’obtention des automates d’inclusion et de coloration, les méthodes manuelles étant lourdes, fastidieuses et demandant beaucoup d’attention et de minutie. Services et laboratoires de Diagnostic et Recherche 83 Institut Pasteur d’Algérie Rapport d’Activité 2008 2- Unité de cytopathologie : - Cytoponctions ; consultation et cytopathologie générale : Sein Ganglion Thyroïde tumeurs solides Répartition selon les pathologies : inflammatoires et tumorales (20 cas) soit 198 examens microscopiques. Seules ces quelques consultations avec cytoponctions ont été pratiqués dans le laboratoire, avec les risques encourus, car sans les conditions requises pour cette activité qui nécessite une organisation rigoureuse : • Local de consultation décent. • Matériel de cytoponction. • Trousse d’urgence pour éventuel choc vagual. Car nous ne sommes pas situés à proximité d’un service de réanimation. Et surtout la nécessité d’un médecin anatomopathologiste. - Frottis : Cytopathologie gynécologique Cytodiagnostic de dépistage : A révélé un nombre important de lésions témoignant d’une infection à papillomavirus, agent étiologique principal des cancers du col utérin. 910 Cas soit 2730 examens. Répartition selon les pathologies : -lésions inflammatoires. - Lésions précancéreuse et cancéreuses du col utérin dont de nombreuses liées à l’infection à Papilloma virus (HPV). Cette activité est appelée à se développer, le laboratoire étant sollicité comme centre superviseur et expert, des unités de dépistage, à intégrer dans le programme national de dépistage. 3- Unité d’immunohistochimie et d’immunocytochimie : L’obtention de quelques anticorps a permis des études limitées, mais qui été d’un grand apport pour le diagnostic précis, pour le pronostic, pour la prédiction de réponses aux thérapeutiques ciblées. Cette unité nous donne grande satisfaction, grâce à la compétence, la rigueur, l’intelligence des techniciennes qui encore, procèdent manuellement. Son développement dépendra aussi de l’apport de réactifs diversités et du recrutement de personnel sérieux. (Pathologiste et biologiste), ce qui permettra de pérenniser cette unité. 84 Services et laboratoires de Diagnostic et Recherche Rapport d’Activité 2008 Institut Pasteur d’Algérie Répartition selon les anticorps utilisés : Anticorps utilisé : CK, Hp, plasmacell, CD20, Bcl2, CD3, Chromogranine, NSE , CD3, Ps100, CD45, AML, CD31, CD17, Her2 neu,BCRA1, EGFR, P53, CD10, HPV, Ki 67, αfp, CD34, CD5, ALK, Granzyme B, TdT,CD99 . Ont été traités 81 cas, soit 1215 lames examinées. 4- Unité de pathologie moléculaire : En collaboration avec le laboratoire d’oncogénétique. Mise en application des techniques d’hybridation in situ fluorescente (FISH) et/ou chromo génique (CISH). Les même techniciennes on débuté l’activité de pathologie moléculaire, permettant de mettre évidence : amplification, délétion, ou translocation de gènes, qui permettent le typage de certaines tumeurs et donc une prise en charge adéquate des patients - HPV DNA - Gen point pour papillomavirus - PNA-ISH pour EBV - TOP II a isomérase pour le sein (thérapie ciblée) - Géne MALT1 lymphome malin. - FISH Her-2 neu Les techniques sont actuellement maîtrisées. Le laboratoire de biopathologie de l’institut pasteur a été le premier laboratoire de pathologie a mettre en œuvre ces techniques, d’hybridation in situ avec succès (seul HPV FISH a été pratiqué au CHU Beni Messous). 5- Banque tissulaire et tumorothèque : Actuellement banque en paraffine. La banque en congélation dépend de la réception de cryoconservateurs non encore disponible et congélateur a - 80° Ces banques conditionnées de façon rigoureuse représentent actuellement une activité importante des laboratoires modernes de pathologie, car à partir de ces prélèvements peuvent être effectuées de nombreuses techniques de pathologies moléculaire (PCR, extraction d’ADN, extraction d’ARN, étude génétique, biopuces, microarrays….), techniques qu’ils seraient nécessaire d’effectuer au niveau d’un laboratoire de biopathologie. 6- Diapothèque : Photos numérisées par manipulation à la photo microscope de lames de pathologies rares et/ou intéressantes, disponibles dans l’ordinateur. Services et laboratoires de Diagnostic et Recherche 85 Institut Pasteur d’Algérie Rapport d’Activité 2008 II. ACTIVITES D’ENSEIGNEMENT 1. Formation : Théorique pour pathologiste affecté au laboratoire : Diverses mises au point sur les pathologies observées en particulier - Cancers du sein - Helicobacter pylori et pathologies gastriques. - Lésions précurseurs et cancers du col utérin, etc.…… Pratique : formation quotidienne au microscope sur des cas difficiles ou intéressants. 2. Formation des techniciennes du laboratoire au quotidien, pour Mme Samira Seffak Mme Naima Haddouche Les techniques usuelles et d’histochimie. Les techniques d’immunohistochimie. Les techniques d’hybridation in situ. Grâce à leur volonté, leur persévérance, leur efficacité, cette formation est actuellement rentabilisée par les bons résultats obtenus. Formation d’une biologiste stagiaire : Melle Karima TIMSILINE Pour toutes les techniques de base d’histo et de cytopathologie, et pour l’organisation optimale d’un laboratoire de pathologie. 3. Contrôle de qualité : Coobservation des lésions gastriques à Helicobacter pylori avec l’équipe du laboratoire du chu Beni Messous. Coobservation du col utérin précancéreuse et cancéreuse avec docteur Berremila et Dr Slimani, Mme Zitouni (INSP). 4. Formation hors IPA, au niveau de l’INSP : Registre des cancers d’Alger (Pr. A. Bouhadef en tant que pathologiste responsable du registre). Dépistage du cancer du col utérin : Cours, TD, et TP de cytopathologie pour la formation des gynécologues en colposcopie. Cours, TD, et TP de cytopathologie pour la formation complémentaire, recyclage des colposcopistes. 86 Services et laboratoires de Diagnostic et Recherche Rapport d’Activité 2008 Institut Pasteur d’Algérie III. ACTIVITES DE RECHERCHE 1- Direction du laboratoire de Recherche sur le Polymorphisme Génétique : hébergée à l’IPA (voir notification rectorat d’Alger) Directeur : Pr. BOUHADEF Directeur adjoint : Dr. TERKI Le laboratoire de biopathologie en association avec le laboratoire de génétique humaine (IPA) constitue la plateforme du laboratoire de recherche sur le polymorphisme génétique, qui regroupe plusieurs équipes de recherche pluridisciplinaires. Ces recherches sont orientées vers les applications en santé publique , en particulier pour les maladies héréditaires et les cancers , souhaitant valider et optimiser des méthodes de prévention , des tests de diagnostic, des tests de pronostic, et des tests de prédiction de réponse aux thérapeutiques ciblées ; ces études de pathologie moléculaire par génomique et protéomique intéressent certains gènes d’intérêt pour les cancers et permettent de développer des approches nouvelles cliniques, génétiques, et biopathologiques qui mettent en œuvre toutes les équipes du Laboratoire de Recherche du Polymorphisme Génétique qui comportent : cliniciens, gynécologues, chirurgiens, radiologues, radiothérapeutes, pathologistes, généticiens, epidemiologistes. Les thèmes de recherches proposés sont actuellement axés sur les cancers du sein et les cancers gynécologiques avec des projets de recherche. 2- Enquêtes de recherche : ¾ Col utérin : dépistage des lésions précancéreuses et cancéreuses et l’étude du facteur Papilloma Virus. En collaboration avec : Service d’épidémiologie ; Dr HAMMOUDA……………………….…INSP Service de cytopathologie ; Mme ZITOUNI………….……………….INSP Service de gynécologie ; Pr. AYACH…………………………...……S.S.ZERALDA ¾ Helicobacter pylori et implication sur la muqueuse gastrique, gastrite chronique, ulcère gastrique, carcinomes, lymphomes). En collaboration avec le laboratoire Algérien de recherche sur Helicobacter pylori (Pr. TOUCHENES). ¾ Cancer du sein : facteurs pronostiques et prédictifs de réponse aux thérapeutiques ciblées. Etude du projet immunohistochimique et génétique des cancers du sein de la femme jeune. En collaboration : CPMC : Service d’oncologie……….Pr. BOUZID Service de pathologie…………...…Pr. TERKI et Dr CHAHER. Ces travaux permettent : Une contribution à un diagnostic précis. Une contribution à la recherche fondamentale en santé. Une contribution à la recherche epidemiologique. Mise au point de tests pronostiques et prédictifs de réponse aux thérapeutiques ciblées. Services et laboratoires de Diagnostic et Recherche 87 Institut Pasteur d’Algérie Rapport d’Activité 2008 Ont une implication directe sur la prise en charge des patients et sur la recherche en santé des processus lésionnels aussi bien à l’échelle génomique que protéomique. 3- Recherche en pathologie expérimentale chez l’animal : Contribution histopathologique aux études des lésions chez la souris, provoquées par venin de scorpion et venin de serpent. En collaboration avec le service des venins (Pr LARABA). IV. COMMUNICATIONS ET PUBLICATIONS - Epidémiologie des cancers de la thyroïde : donnés du registre des tumeurs, Alger Dr. Hamouda, A. BOUHADEF, journées HCA. Dec 2008 - Classification de bethesda et lésions epidermoides. A. BOUHADEF, journées de l’INSP coloscopie et cytologie. Mai 2008 Les communications sur le programme Hp : - Infection à Helicobacter pylori : aspect épidémiologiques» Z. GUERCHI, S. NAIT KACI, F. MOUFFOK, N. MATOUGUI, H. BERRAH, K. BOUZID, A. BOUHADEF, B. TOUCHENE. - Profil hiostopathologique des gastrites chroniques à H. pylori : observations du LARH. A. BOUHADEF, S.A. BERMILA, N. NOUAR, F. ACHERAR, K. BOUZID, Z. MEZOUI, S. SEFFAK, N.HADOUCHE, N. MATOUGUI, M.A. BOUDELLA, R. LARRAS, M. MOUBRI, H. BERRAH, F. MOUFFOK, Z. GUECHI, B. TOUCHENE - Aspects anatomopathologiques des gastrites à H.Pylori chez l’adulte : notre expérience K. BOUZID, F. ACHERAR, N. NOUAR, A. BOUHADEF, N. MATOUGUI, M.A. BOUDJELLA, F. MOUFFOK, Z. GUECHI, H. BERRAH, B. TOUCHENE. - Diagnostic microbiologique de l’infection à H.pylori chez l’adulte avant et après traitement F. KIAS, F. TALEB, F.MOUFFOK, N. MATOUGUI, M.A BOUDJELLA, Z. GUECHI, H. BERRAH, A. BOUHADEF, K. BOUZID, B. TOUCHENE. - Infection à Helicobacter Pylori chez l’adulte : Diagnostic par le praticien. M.A. BOUDJELLA, N. MATOUGUI, A.TEBAIBIA, D. BOUTARENE, F. MOUFFOK, A. BOUHADEF, K. BOUZID, Z. GUECHI, H. BERRAH, B. TOUCHENE. - Infection à H.pylori chez l’enfant algérois : quel enseignement ? R. LARRAS, M. MOUBRI, H. BERRAH, F. MOUFFOK, A. BOUHADEF, N. NOUAR, K. BOUZID, Z. GUECHI, B. TOUCHENE - Helicobacter pylori est facteur de risque majeur de l’atrophie gastrique chez l’enfant. R. LARRAS, M. MOUBGHI, H. BERRAT, A. BOUHADEF, F. MOUFFOK, B. TOUCHENE. GASTRO.ENTERL.CLIN. BIOL, 2008, VOL32, N°1, 264. 88 Services et laboratoires de Diagnostic et Recherche Rapport d’Activité 2008 Institut Pasteur d’Algérie Participation aux congrès : - Carrefour pathologie Nov. 2008 Paris. - Colloque international sur Helicobacter pylori Ghardaïa. - Journées d’évaluation du programme national de dépistage du cancer du col de l’utérus Décembre 2005 - Journées d’endocrinologie de l’HCA (Thyroïde, Décembre 2008). V. PERSPECTIVES En fonction des moyens disponibles humains et matériels (laboratoire fonctionnant encore à ce jour sans équipements et avec un personnel insuffisant), des perspectives intéressantes se font jour : 1. Recherche de lésions gastrique liées au polymorphisme génétique de Helicobacter pylori d’autant que la collaboration avec les microbiologistes est étroite 2. Recherche sur les lésions précancéreuses et cancéreuses du col utérin Par la mise en évidence en immunohistochimie et hybridation in situ des HPV à haut risque. Par l’étude sur cytologie et sur biopsie de la protéine P16 INKa en immunohistochimie qui révèle les lésions de haut grade. 3. Recherche sur les cancers du sein de la femme jeune, de plus en plus fréquents dans notre pays, paraissant avoir un profil particulier souvent lié antigène BRCA1. Des études préliminaires au laboratoire montrent une grande proportion de ces cas avec une expression immunohistochimique de BRCA1 qui mérite d’être complété par des études génétiques. CONCLUSION : Le laboratoire de biopathologie, avec peu de moyens, maîtrise de nombreuses techniques. Des perspectives sont multiples tant pour la pathologie infectieuse que pour la pathologie tumorale, en particulier les pathologies cancéreuses liées directement aux facteurs bactériens (Hp), viraux (HPV) et aux facteurs génétiques (BRCA1). Services et laboratoires de Diagnostic et Recherche 89 Institut Pasteur d’Algérie 90 Services et laboratoires de Diagnostic et Recherche Rapport d’Activité 2008 Rapport d’Activité 2008 Institut Pasteur d’Algérie Laboratoire d’Eco-épidémiologie parasitaire et génétique des populations Chef du laboratoire : Zoubir HARRAT (Docteur en Médecine, Maître de recherche) I. ACTIVITES DE DIAGNOSTIC A. Les leishmanioses : Le Centre National de Référence des Leishmania a réalisé les activités suivantes : 1. Diagnostic sérologique des leishmanioses Durant l’année 2008, 235 prélèvements sanguins ont été reçus, les sérums testés par la technique d’Immunofluorescence indirecte (IFI), ont donné les résultats suivants : • 134 sérums canins : 07 Positifs, et 127 négatifs. • 101 sérums humains : enquête sérologique du foyer de leishmaniose viscérale d’ILLIZI : Tous négatifs 2. Les cultures 59 cultures de leishmanies effectuées à partir de différents organes chez différents hôtes ont été pratiquées : H Prélèvements cutanés : 48 cultures réalisées 27 prélèvements d’origine humaine (16 cultures positives et 11 négatives) 21 prélèvements d’origine animale (Psammomys obesus) tous négatifs. H Hémoculture (chiens suspects de leishmaniose) : 09 cultures effectuées, 04 positives. H Ponction ganglionnaire réalisée chez 02 chiens : toutes négatives 3. Diagnostic moléculaire des leishmanioses (PCR) 128 prélèvements ont subit des extractions d’ADN par deux procédés différents. Pour 75 d’entres eux l’extraction a été de type phénolique avec la méthode classique, et pour les 53 autres l’extraction a été faite par colonnes Qiagen donnant des ADN de meilleurs qualité. Pour la PCR deux couples d’amorces ont été utilisées, R221-R332 et K13A-K13B. Tab I : Résultats diagnostic par PCR des leishmanioses. Nb prélèvements Positifs Négatif Concordance entre Ex Direct et la PCR Leishmaniose cutanée 64 33 31 100% Leishmaniose canine 29 3 26 100% 35 * 31 100% Désignation Rongeurs * 4 Il s’agit de 04 souris balb/C infestées expérimentalement au laboratoire Services et laboratoires de Diagnostic et Recherche 91 Rapport d’Activité 2008 Institut Pasteur d’Algérie 4. Cryonservation des souches 20 nouvelles souches ont été congelées à -196°C, elles se répartissent comme suit : 16 souches cutanées humaines (11 de Tunisie et 05 d’Algérie) et 4 souches viscérales humaines (03 de Tunisie et 01 d’Algérie). 5. Typage des souches de Leishmania L’identification des souches de Leishmania est faite par électrophorèse des isoenzymes sur gel épais d'amidon et par isoélectrofocalisation sur gel de polyacrylamide. Nombre de souches typées : 22 Souches d’Algériee : 10 souches a. Leishmaniose cutanée humaine (LCH) : 03 souches • L.major zymodème MON-25 (03) b. Leishmaniose canine (LVC) : 05 souches • L. major zyodème MON-25 (01) • L. infantum zymodème MON-1 (03) • L. infantuml MON-34 (01) c. Leishmania isolée chez le Chacal : 02 souches • L.infantum MON-1 (02) Tab II : liste des souches identifiées et leur lieu d’isolement en Algérie. N° identification de la souche 92 Origine Localité Résultat du typage LIPA 72/08 chacal Tizi-ouzou L.infantum MON-1 LIPA 73/08 chacal Tizi-ouzou L.infantum MON-1 LIPA 76/08 Peau. homme M’hire (BBA) L.major MON-25 LIPA 79/08 Peau. homme M’hire (BBA) L.major MON-25 LIPA 1248 chien Blida L.infantum MON-1 LIPA 1249 chien Blida L.infantum MON-1 LIPA 2091 chien Tizi Ouzou L.infantum MON-34 LIPA 84/08 Peau. homme M’sila L.major MON-25 LIPA 2001 chien Alger L.infantum MON-1 LIPA 1228 chien Alger L.infantum MON-25 Services et laboratoires de Diagnostic et Recherche Rapport d’Activité 2008 Institut Pasteur d’Algérie Souches de Tunis : 12 souches • L.infantum zymodème MON-1 (03 souches) • L.infantum zymodème MON-24 (01 souches) • L.infantum zymodème MON-80 (03 souches) • L.major zymodème MON-25 (05 souches) Tab III : Liste des souches isolées en Tunisie et leur zymodème correspondant LIPA 61/07 (LV45) Origine (LCH, LV) LVH Kairouan TN L.infantum MON-80 LIPA 59/07 (LV43CL) LVH Kairouan TN L.infantum MON-1 LIPA 63/07(TAT07 N3) LCH Tataouine TN L.major MON-25 N° identification de la souche Localité Pays Résultat du typage LIPA 71/07 (LV 47) LVH Kairaouan TN L.infantum MON-24 LIPA 68/07 (LV55) LVH Kairaouan TN L.infantum MON-80 LIPA 66/07 (LC20/07) LCH Tataouin TN L.major MON-25 LIPA 74/08 (LC23/07) LCH Sidibouzid TN L.major MON-25 LIPA 75/08 (LC 02/08) LCH Sidibouzid TN L.major MON-25 LIPA 77/08 (LC12/08) LCH Béja TN L.major MON-25 LIPA78/08 (LV59/07) LVH Bizert TN L.infantum MON-1 LIPA 82/08 (LV 03) LVH Nabeul TN L.infantum MON-1 LIPA 83/08 (LV 04) LVH Nabeul TN L.infantum MON-80 LVH : Leishmaniose viscérale humaine LCH : leishmaniose cutanée humaine 6. Etude de la résistance des leishmania La sensibilité des leishmania au Glucantime® a été testée in vitro, en culture cellulaire sur cellules THP1, sur 10 souches (06 cutanées humaines, 03 souches canines et 01 souche viscérale). Le résultat a montré que toutes les souches à leishmania major et leishmania killicki sont résistantes au Glucantime®. DL50 >45µg/ml. Tab IV : Résultat du test de sensibilité des souches de leishmania au Glucantime Code Espèce Forme clinique DL50 Résultats in vitro LIPA 07/05 L. killicki MON 301 Leishmaniose cutanée humaine 54,5 Résistant LIPA 10/05 L. killicki MON 301 Leishmaniose cutanée humaine > 60 Résistant LIPA 29/06 L. major MON 25 Leishmaniose cutanée humaine > 60 Résistant LIPA 31/06 L. major MON 25 Leishmaniose cutanée humaine > 60 Résistant LIPA 32/06 L.major MON 25 Leishmaniose cutanée (Rongeur) > 60 Résistant LIPA 35/06 L. major MON 25 Leishmaniose cutanée humaine > 60 Résistant LIPA 36/06 L. major MON 25 Leishmaniose cutanée humaine > 60 Résistant LIPA 18/05 L. infantum MON 1 Leishmaniose canine 22,6 Sensible LIPA 21/05 L. infantum MON 1 Leishmaniose canine 17,8 Sensible LIPA 23/05 L. infantum MON 80 Leishmaniose canine 36,5 Sensible Services et laboratoires de Diagnostic et Recherche 93 Rapport d’Activité 2008 Institut Pasteur d’Algérie B. Maladie de Lyme et Rickettsioses : 1. Activités du diagnostic a) La maladie de Lyme (Test Elisa) 149 prélèvements provenant de patients suspects de la maladie de Lyme ont été analysés par la technique ELISA. Le résultat des tests figure sur le tableau V : Nbre de prélèvements 149 Nature du prélèvement Positifs Total Positif Sang LCR IgG IgM IgG+IgM 142 7 22 23 3 45 Tab V : Résultat d’analyse de la sérologie de Lyme effectuée sur 149 patients et leur origine géographique : Total positif : 45 (30.2%) : IgG (+): 22 patients; IgM(+) :23 patients ; (IgG + IgM +) = 03 patient Les prélèvements du LCR ont été tous négatifs. b) Les rickettsioses (test IFI) Le diagnostic sérologique des rickettsioses réalisé chez 20 patients a été effectué sur 05 antigènes différents : Rickettsia conorii ; R. felis ; R. typhi ; R. aeschlimannii et, Coxiella burnetii ; Sur les 20 prélèvements reçus 18 se sont révélés positifs soit en IgG ou en IgM (tableau VI) Antigène Positifs (IgG) Positifs (IgM) R conorii 7 R felis 1 3 R typhi 1 6 R aeschlimannii - - C burnetii - - 9 9 TOTAL Positifs (IgG+ IgM) Tab VI : Résultat du test de diagnostic des rickettsioses selon les espèces éprouvées. 94 Services et laboratoires de Diagnostic et Recherche Rapport d’Activité 2008 Institut Pasteur d’Algérie II. ACTIVITES DE RECHERCHE Projet ACIP (Actions Concertées Inter Pasteuriennes) Code : A-04-2007 Intitulé « Exploration éco-épidémiologique des foyers de leishmaniose cutanée à Leishmania killicki » Coordinateur du Projet : Pr. BOURATBINE A. (Institut Pasteur Tunis) Partenaires: Institut Pasteur d’Algérie (Dr Z. HARRAT) ; Institut Pasteur de Paris (Pr. P. BUFFET) Objectif global : L’objectif de ce projet est d’établir la prévalence de la LC à L. killicki en Tunisie et en Algérie, de délimiter son aire de distribution géographique et d’en identifier les vecteurs et les réservoirs afin d’optimiser les moyens de lutte et la prise en charge des malades Les travaux préliminaires ont débuté en octobre 2007. Activités réalisées en 2008 : une première réunion de travail pour le lancement du projet a été faite le 13 et 14 avril 2008 à l’Institut Pasteur d’Algérie en présence du coordonnateur du projet : Pr. BOURATBINE, du Pr. K. AOUN et de l’équipe algérienne. Une mission entomologique a été effectuée a été effectuée dans le foyer de Ghardaïa du 03 au 12 mai 2008, et une mission à Tataouine (Tunisie) du 7 au 17 octobre 2008. Deux biologistes de l’IPA ont bénéficié dans le cadre de ce projet, d’une formation d’une semaine, à l’IP Tunis sur le diagnostic par PCR des leishmanioses. Un stagiaire tunisien a été formé sur les principes du Système d’Information Géographique à l’IPA pendant 10 jours. Paludisme et environnement Intitulé du projet : « Emerging Diseases in a changing European Environnement », Contrat GOCE n°010284-2 Eden est un nouveau projet intégré du 6ème PCRDT de la commission européenne, il regroupe 48 partenaires issus de 24 pays. Il a démarré en Novembre 2004, il se termine en Mars 2010. Site web: http://www.eden-fp6project.net/. Il est subdivisé en cinq sous projets, l’IPA participe au sous projet EDEN-Malaria Coordinateur principal : Didier Fontenille (IRD) ; Les partenaires du projet : Algérie (IPA). Institut Pasteur d’Algérie, coordinateur : Dr Zoubir Harrat. France (IRD). Institut de Rechercher pour le Développement. Didier Fontenille coordinateur ; (EID) (Entente interdépartementale pour la démoustication).coordinateur : Francis Schaffner ; Roumanie (NIRDMIC) Cantacuzino Institute. Coordinateur : Gabriela Nicolescu; Turquie (HUESRL) Hacettepe University : coordinateur : Nurdan Ozer, Italie (ISS) Instituto Superiore di Sanità, coordinateur Roberto Romi ; Espagne (UVEG) Universitat de València. Coordinateur : Maria Dolores Barges ; Portugal (IHMT) Instituto Higiene e Medicina Tropical.coordinateur : Virgilio do Rosario, Maroc (INH) Institut National d’Hygiène. Coordinateur : Radjaa El Aoued ; Pays Bas (UMCN) University of Nijmegen. Coordinateur : Jean Pierre Verhave. Services et laboratoires de Diagnostic et Recherche 95 Institut Pasteur d’Algérie Rapport d’Activité 2008 Les objectifs du projet EDEN sont d'identifier, évaluer et inventorier les écosystèmes européens et Maghrébins et les conditions environnementales liées au changement global, qui peuvent influencer la distribution et la dynamique spatiales et temporelles des agents pathogènes. Le projet développera un ensemble de méthodes génériques, d'outils et de qualifications telles que les modèles prédictifs d'apparition et de diffusion, de détection précoce, de surveillance, et les outils et les scénarios de contrôle, qui peuvent être employés par les décideurs pour l'évaluation des risques, pour l'aide à la décision au niveau national ou régional. Une partie d'innovation d'EDEN est de combiner les données spatiales (données d'observation de la terre, Système d’Information Géographique, télédétection etc..) avec des données épidémiologiques. Le projet EDEN a choisi pour l'étude, une gamme d'indicateurs des maladies infectieuses humaines qui sont particulièrement sensibles aux changements environnementaux et seront étudiées dans un cadre scientifique commun (impliquant la bionomie du vecteur et du parasite, son habitat, les différents sites et paysages les favorisant, la santé publique, et les réservoirs animaux). Certaines de ces maladies sont déjà présentes en Europe (maladies transmises par les tiques et par les rongeurs, leishmaniose, West Nil), d'autres étaient endémiques dans le passé (paludisme) mais qui peuvent réapparaître. EDEN intègre la recherche dans 47 principaux instituts de 24 pays avec l'expérience et les qualifications combinées pour atteindre les buts communs du projet. La diversité éco-géographique du projet couvre tous les écosystèmes européens appropriés du cercle polaire au nord, au bassin méditerranéen et de son lien géographique avec l'Afrique occidentale au sud, et, du Portugal à l'ouest au delta de Danube à l'est. EDEN est organisé en série de Sous-Projects verticaux menés et contrôlés par les experts internationalement identifiés, et sont liés ensemble par une série d'activités intégrant la biodiversité, la détection d'un changement environnemental, la modélisation de la maladie, l’interprétation des images de télédétection, l'information et la communication. La structure de gestion proposée, comprend un comité de coordination et un groupe consultatif, Elle tient compte de la diversité des partenaires et de la taille du projet. Au cours de la quatrième année du projet, les activités suivantes ont été réalisées: Description du paysage et du biotope de la région de Tinzaouatine (troisième région modèle) pour l’étude des effets environnementaux sur l’émergence du paludisme dans cette zone frontalière avec le Mali. Les effets de l’eutrophisation du lac Tonga (2eme région modèle) sur la dynamique et la densité du vecteur Anopheles labranchiae ont été analysés. La capacité vectorielle et les préférences trophiques de ce vecteur ont été également évaluées. Dr HARRAT Zoubir et Mr BOUBIDI Said-Chawki, ont participé à l’atelier de formation sur la taxonomie moléculaire des moustiques au Museum d’Histoire Naturelle de Londres en juin 2008. Durant leur formation, ils ont procédé à l’identification moléculaire des anophèles vecteurs du paludisme collectés en Algérie. Recherche sur la Peste : Collaborateur algérien (BITAM Idir) Actions de Recherche en Réseau. Action n°P2.2092RR714 «Renforcement du réseau peste francophone sud dans le cadre d’un projet de détermination des indicateurs de risque pesteux dans les modèles de foyers de peste Algérien, vietnamien et malgache » Projet de recherche financé par l’Agence Universitaire de la Francophonie (AUF) Année de démarrage du projet : 2007. Durée du projet ; 2 ANS Liste des personnes impliquées : BITAM Idir, BELHABRI Leila, Mohammed CHAKI, Mahboub BENYATTOU. 96 Services et laboratoires de Diagnostic et Recherche Rapport d’Activité 2008 Institut Pasteur d’Algérie Objectif : évaluation de la spécificité et de la sensibilité de la bandelette de détection rapide des anticorps dirigés contre Y pestis chez les rongeurs et chez l’homme. Résumé du projet : Dans le cadre de la surveillance entomologique et mammalogiques de la peste, une nouvelle technique de détection d’AC rapide vis-à-vis de Yersinia pestis par bandelettes été mise en point par l’équipe de l’IP de Madagascar. Ces bandelettes devraient être testées sur le terrain par les équipes partenaires au projet. Activités réalisées en 2008 : les bandelettes ont été testées sur une cinquantaine de rongeurs (M shawi) capturés dans le foyer de peste déclarée dans la wilaya de Laghouat en juin 2008. Les résultats des analyses sont en cours d’évaluation. PROJET ANR (Agence Nationale de Recherche Française). Emerging phleboviruses around the Mediterranean. Projet accepté en 2008. Financement à partir de 2009. Durée 3 ans. Pays concernés : Algérie : Dr Idir BITAM, Unité d’Entomologie médicale, Service d’Eco-épidémiologie parasitaire et génétique des populations, Institut Pasteur d’Algérie. France (Marseille – Paris) : Pr Remi CHARREL, Unité des virus émergents faculté de médecine, Marseille. Pr Arezki IZRI, Laboratoire de Parasitologie Mycologie, Hôpital Avicenne, Paris. Tunisie : Elies ZHIOUA, Laboratoire d’Ecologie des systèmes vectoriels, Institut Pasteur de Tunis. Résumé : les Phlébovirus sont des virus émergents dans les pays du pourtour du bassin méditerranéen. Ils ont pour hôte vecteur les phlébotomes. Les résultats préliminaires des études effectuées au sud de France montrent la présence de plusieurs nouveaux génotypes de ces virus. Le but de ce projet est d’évaluer leur fréquence en Algérie et dans les pays partenaires du projet, de déterminer leur variabilité génétique et leur distribution géographique. III. ACTIVITES DE PRODUCTION Production de l’antigène figuré leishmanien (formes promastigotes de Leishmania infantum MON-1) pour le test d’immunofluorescence indirecte : 168 lames à 18 spots ont été produites. Les milieux de cultures : Milieux NNN : 1611 tubes à vis de 20 ml Milieux Sérum de Lapin Coagulé : 382 tubes. 2ml de milieu pour chaque tube. Milieux CCS : 1543 flacons de 50ml, et 134 boites de ROUX de 1 litre. Solutions : 9 Solution saline de tampon PBS pH 7,2 :7000ml. 9 Solution de conservation des souches : DMSO est de 2000ml. RPMI + SVF à 15% (15 litres) Services et laboratoires de Diagnostic et Recherche 97 Institut Pasteur d’Algérie Rapport d’Activité 2008 IV. AUTRES ACTIVITES DU SERVICE • Mr GARNI contribué à la mise en service et la mise à jour du site web de L’Institut Pasteur d’Algérie • Collaboration avec l’équipe de Pharmacologie cellulaire et signalisation. Département de biologie cellulaire et moléculaire (Pr Djerdjouri). USTHB, et avec l’équipe de physiologie animale (Pr. Gernigon) sur La physiopathologie du rongeurs désertique P. obesus (USTHB) V. PUBLICATIONS ET COMMUNICATIONS Publications Z. HARRAT, A. BOUDRISSA- Ecologie des rongeurs réservoirs de la leishmaniose cutanée zoonotique en Algérie. Rev Med Pharma.2008, 48, 22-26. P. PAROLA, C. SOCOLOVSCHI, L. JEANJEAN, I. BITAM, PE. FOURNIER, A. SOTTO, P. LABAUGE, D. RAOULT. Warmer weather linked to tick attack and emergence of severe rickettsioses. PLoS Negl Trop Dis. 2008;2(11):e338. PE. FOURNIER, L. BELGHAZI, C. ROBERT, K. ELKARKOURI, AL. RICHARDS, G. GREUB, F. COLLYN, M. OGAWA, A. PORTILLO, JA. OTEO, A. PSAROULAKI BITAM I, D. RAOULT. Variations of plasmid content in Rickettsia felis. PLoS ONE. 2008 May 28;3(5):e2289 L. DIB, I. BITAM, M. TAHRI, M. BENSOUILAH, T. DE MEEÛS. Competitive exclusion between piroplasmosis and anaplasmosis agents within cattle. PLoS Pathog. 2008 Jan;4(1):e7 Publication dans les ouvrages : Other tick-borne diseases in Europe, I. BITAM and D. RAOULT, chapitre de livre tickborne disease in Europe éditeur, Lispark D et Jaulhac B. Editon KARGER, Suisse Communications I. BITAM : Les maladies vectorielles et les changements climatiques dans le Maghreb. Journée mondiale de la santé OMS sur le thème Changements climatiques et Santé Organisé par la direction de la santé de Constantine, le 07 Avril 2008. I. BITAM, T. KERNIF, B. BAZIZ, Z. HARRAT, P. PAROLA & D. RAOULT. Les Puces et les maladies transmises en Algérie XIIème Journée Nationale ParasitologieMycologie, organisée à l’Université Ferhat ABBAS Sétif le 04 juin 2008 SC. BOUBIDI, A. MESSLEM, M. LAROUCI, S. CHAIB, P. CARNEVAL & Z. HARRAT BIOLOGIE D’Anopheles multicolor (CAMBOULIU, 1901) A OUARGLA (SUD ALGERIEN). XII Journée Nationale de Parasitologie-Mycologie, Sétif, 04 Juin 2008. SC. BOUBIDI, I. GASSEN, Y. KHECHACHE, K. LAMALI, B. TCHICHA, C. BRENGUE, D. FONTENILLE & Z. HARRAT. Anopheles gambiae sl, vecteur de paludisme en Algérie. XII Journée Nationale de Parasitologie-Mycologie, Sétif, 04 Juin 2008. 98 Services et laboratoires de Diagnostic et Recherche Institut Pasteur d’Algérie Rapport d’Activité 2008 SC. BOUBIDI, A. MESSLEM, M. LAROUCI, S. CHAIB, P. CARNEVAL & Z. HARRAT. Biology of Anophles multicolor (Cambouliu,1902) in Ouargla (South Algeria). Xth European Multicolloquium of Parasitology, Paris, 24-28 August.2008. SC. BOUBIDI, Z. HARRAT Les leishmanioses en Algérie: État actuel. Journée d’information sur l’hygiène du milieu, Constantine 4 Mars 2008 R. GARNI, I. KHERACHI, S. BENBETKA, Z. HARRAT : Apport de La PCR dans le Diagnostic des Leishmanioses d’origine humaine et animale. XIIe journée de la SAPMM. Sétif le 04/06/2008 Z. HARRAT, SC. BOUBIDI, A. BOUDRISSA, D. HAMMADI, D. FERRAZ, F. BENHAMOUDA : Studies on the biology of malaria vector ( Anopheles labranchiae) in the Tonga lake ( EL Kala /Algeria). Xth European Multicolloqium of Parasitology, Paris, 24-28 August.2008. Z. HARRAT, A. BOUDRISSA : Ecologie des rongeurs réservoirs de la leishmaniose cutanée en Algérie. 3eme Journée d’Infectiologie de l’HCA. Alger 11 juin 2008 HARRAT Z : Place de la recherche sur le paludisme en Algérie. A propos du Projet EDEN. Z. HARRAT : Impact des changements climatiques sur les maladies à transmission vectorielle en Algérie le cas des leishmanioses et du paludisme ; Journée sur les changements climatiques et Santé MSPRH. 07 Avril 2008. Z. HARRAT, R. HALIMI, Y. TARFANI, R. BOUAKKAZ- Dracunculose d’importation : quatre cas confirmés dans le sud algérien. XII journée de la SAPMM. Sétif le 04/06/2008 Posters : I. BITAM, P. PAROLA, D. RAOULT. Molecular detection of Rickettsia typhi and Rickettsia felis in fleas from Algeria. IIV International Congress of Rickettsia and Rickettsial diseases in Marseille, France Mai 2008 I. BITAM, T. KERNIF, B. BAZIZ, Z. HARRAT, P. PAROLA, D. RAOULT. First detection of Bartonella species in rodents and headgehogs in Algeria. IIV International Congress of Rickettsia and Rickettsial diseases in Marseille, France Mai 2008 I. BITAM, T. KERNIF, Z. HARRAT, P. PAROLA, D. RAOULT. First description of Rickettsia aeschlimannii in tortoise ticks Hyalomma aegyptium from Algeria. IIV International congress of Rickettsia and Rickettsial diseases in Marseille, France Mai 2008 SC. BOUBIDI, I. GASSEN, Y. KHECHACHE, K. LAMALI, B. TCHICHA, C. BRENGUE, D. FONTENILLE & Z. HARRAT. First report of Anopheles gambiae sl in south Algeria. Xth European Multicolloqium of Parasitology, Paris, 24-28 August.2008. SC. BOUBIDI, B. MASSONNET, N. CORRE CATELIN, R. LACROIX, Z. HARRAT ET P. REITER Etude de la compétitivité de souches transgéniques d’Aedes aegypti (L.) porteuse d’un nouveau système génétique létal (RIDL). XII Journée Nationale de ParasitologieMycologie, Sétif, 04 Juin 2008. Services et laboratoires de Diagnostic et Recherche 99 Rapport d’Activité 2008 Institut Pasteur d’Algérie S. BENBETKA, A. BESSAD, I. KHERRACHI, R. GARNI, R. BENIKHLEF, G. MEZAI, Z. HARRAT Détection de Leishmania infantum MON-1 chez le chacal par amplification génique XII Journée Nationale de Parasitologie-Mycologie, Sétif, 04 Juin 2008. VI. ACTIVITES DE FORMATION 1. Formation dispensée dans le service : (Tab VII) Nom prénom A. MOULOUA T. KERNIF Organisme Université de TiziOuzou INA Niveau d’étude Doctorant Doctorant Début Formation Sep 2004 Sept 2007 Fin Formation Nature de travaux réalisés Encadrement 2010 Enquêtes sur la leishmaniose canine. Echantillonnage de phlébotomes de la Kabylie Dr Harrat (Promoteur) Sept 2010 Contribution à l’étude des tiques dures et puces (Siphonaptères) et les germes transmis en Algérie Pr. S.E. Doumendji Dr Bitam I Pr. Kechemir Dr I. Bitam I A. DJERBOUH USTHB Doctorante Sept 2007 Sep 2010 Etude de la relation entre Rickettsia aesclimannii et Hyalomma dromaderii au sud Algérien LEMRANI.M IP Maroc Médecin parasitologue 24 /11 /08 03/12/08 Identification des phébotomes Mr Boubidi SC USTHB Ingéniorat génie biologique 23/03/2007 24/03/2008 Etude de la sensibilité des des souches de leishmania au N methyl glucamine Dr Z. Harrat S. Bencherifa Université de Blida DES En biologie 01/JUIN 30 JUILLET 2008 le test de sensibilité des leishmanies au Tanin. Dr Harrat IPTunis Doctorant 28/11/2008 04/12/2008 Initiation au SIG Mr R. GARNI ENPT El Harrach Doctorante 0101/2008 En cours Culture cellulaire Dr Z. Harrat H. ZAIDI & H. AOUADI M. BOURAHLA R. DERIOUCHE A. TEBBABI R. SALAH 100 Services et laboratoires de Diagnostic et Recherche Rapport d’Activité 2008 Institut Pasteur d’Algérie 2. Formation reçue • Mr BITAM Idir a obtenu avec mention très honorable le diplôme de docteur de l’Université de la Méditerranée (Aix –Marseille II) dans la discipline « Maladies Transmissibles et Pathologies Tropicales » soutenu le 21 février 2008 • Mr BENALLAL Kamel a obtenu une bourse de formation pour suivre le Master International Médical et Vétérinaire (MIE) qui se déroulera à l’Université d’AbomeyCalavi (Bénin) et à l’IPParis d’octobre 2008 à Juin 2009. • Dr HARRAT Zoubir et Mr BOUBIDI Said-Chawki, ont suivi une formation sur la taxonomie moléculaire et bio informatique “Taxonomy Molecular Systematics and Bioinformatics” au Museum d’Histoire Naturelle de Londres, département d’entomologie (Pr. Ralph Harbach) du 16 to 26 Juin 2008. le stage consistait en une introduction à la taxonomie des moustiques, à la systématique moléculaire et aux outils de bioinformatique nécessaires pour l’interprétation des résultats de la systématique moléculaire et classification phylogénétique. Cette formation rentre dans le cadre du projet EDEN. • Dans le cadre du projet ACIP A-04.2007, ayant pour thème « analyse épidémiologique des foyers de leishmaniose cutanée à Leishmania killicki », Mme KHERRACHI Ihcen et Melle BENBETKA Sihem ont effectué un stage de formation de 07 jours, du 30 juin au 05 juillet 2008 à l’Institut Pasteur de Tunis. Le sujet de leur stage était l’application de nouvelles méthodes de diagnostic moléculaire de la leishmaniose. VII. COURS MISSIONS, SEMINAIRES, REUNIONS 1. Cours : Cours de formation en entomologie du paludisme du 07/07/2008 au 17/07/2008 à l’annexe de Sidi Fredj en collaboration avec l’OMS Objectif : Général: 9 Renforcement du programme national de lutte contre le paludisme par le renforcement de la surveillance entomologique et de la lutte antivectorielle dans les wilayas méridionales du pays Coordonnateur du cours : Dr Z. HARRAT Collaborateurs : Dr D. Hammadi, Mr SC. BOUBIDI, Mr R. GARNI Nbre de participants au cours : 20 Cours sur la microscopie du paludisme Dr HARRAT Zoubir a participé au cours sur la microscopie du paludisme du 8 au 27 novembre 2008 organisé par l’INSP avec le concours de la Banque Africaine du développement au profit des cadres africains. Services et laboratoires de Diagnostic et Recherche 101 Rapport d’Activité 2008 Institut Pasteur d’Algérie 2. Séminaires : Seminaire sur le consensus thérapeutique du paludisme ; participation de Dr Z. HARRAT et SC. BOUBIDI Thème : « Thérapeutique du Paludisme » Lieu : Institut Pasteur d’Algérie Annexe de Sidi Fredj Organisateur : INSP /OMS Dates 12 Février 2008. Dr Z. HARRAT et A. BOUDRISSA ont participé au séminaire atelier de formation des biologistes sur le diagnostic biologique de la leishmaniose cutanée organisé par l’Etablissement Public de Santé de Proximité d’El Meghaier (El Oued) du 23 au 25 décembre 2008. 3. Missions Dans le cadre du projet ACIP A-04-2007, Dr HARRAT Zoubir, Mrs BOUDRISSA Abdelkrim et BOUBIDI Said Chawki, ont effectué une mission à Tataouine (Tunisie) du 04 au 15 octobre 2008 pour participer avec l’équipe tunisienne aux enquêtes entomologiques et recherche du réservoir dans le foyer de leishmaniose cutanée à L. killicki de Tatatouine. - Prospection entomologique de l’épidémie du paludisme à Tinzaouatine : Pour la deuxième année consécutive, Mr Boubidi Said Chawki (entomologiste), a participé à la mission de prospection du foyer épidémique du paludisme à Plasmodium falciparum de Tinzaouatine (Tamenrasset) survenu en novembre 2007. Cette mission de 15 jours (24/03 au 05/04/2008), a été conduite par la direction de la prévention de Ministère de la santé en collaboration avec l’INSP et l’IPA. Les spécimens de moustiques collectés figurent dans le tableau VIII : Espèces Male Femelle Total Anopheles gambiae. sl 12 43 55 Anopheles d’thali 04 06 10 Anopheles cinereus 09 16 25 Culex quinquefasciatus 18 35 53 43 100 143 Total général Tab VIII : inventaire des moustiques collectés à Tamanrasset en avril 2008 102 Services et laboratoires de Diagnostic et Recherche Rapport d’Activité 2008 Institut Pasteur d’Algérie 4. Réunions Dr Z. HARRAT a participé aux différentes réunions du Comité Technique National de Pilotage de la campagne de lutte contre la leishmaniose cutanée à la Direction de la prévention du MSPRH aux dates suivantes : 12/04/2008, 24 AVRIL 2008, et 15/09/2008. - La réunion du Comité National de lutte contre les zoonoses, le 17 juin 2008 au MSPRH Annexe 1 : Calendrier des missions (santé publique) (Tab IX) Dates Lieu personnel Objet 22 au 25/03/2008 Larba Nath Irathen (TiziOuzou) I. BITAM Enquête entomologique sur les phlébotomes (projet sur les phlébovirus) du 24/03 au 05/04/2008. Tinzaouatine (Tamanrasset) SC. BOUBIDI Enquête entomologique et sérologie du paludisme dans la wilaya de Tamanrasset. 03 au 12/05/2008 Ghardaia R. GARNI, SC. BOUBIDI A. BOUDRISSA Enquête entomologique. capture de rongeurs Projet ACIP 04/2007 09 au 15/05/2008 El Kala Z. HARRAT EDWARD ZOLTAN Mission entomologique. Projet EDEN -Mal 30/06 au 02/07/2008 Laghouat SC. BOUBIDI Prospection entomologique du foyer de peste de Laghouat 14/09 au 17/09/2008 Lac Réghaïa (Alger) SC. BOUBIDI Enquête entomologique sur les vecteurs du paludisme. 31/08 au 03/09/2008 Sétif I. BITAM Enquête sur les réservoirs potentiels (rongeurs) de l’épidémie de néphropathie aigue infectieuse survenue à Sétif en juillet 08 Annexe 2 : Calendrier des missions à l’étranger : (Tab X) Dates personnel destination objet Du 15 au 19/01/08 Z. HARRAT Brno (République Tchèque) Participation au troisième meeting du projet EDEN. Du 20 au 26/04/08 I. BITAM Paris Réunion pour la mise en place du réseau des entomologistes du RIIP Du 18 au 20/05/08 I. BITAM Marseille Congrès des Rickettsies Du 07au 17/10/2008 Z. HARRAT SC. BOUBIDI A. BOUDRISSA Tunisie (TunisTataouine) Participation à Prospection entomologique et mammalogique du foyer de leishmaniose cutanée à Leishmania killicki de Tatatouine dans le cadre du projet ACIP 04/2007 18/10 au 05/12/08 I. BITAM Marseille Finalisation et soutenance de sa thèse de doctorat d’état Services et laboratoires de Diagnostic et Recherche 103 Institut Pasteur d’Algérie Rapport d’Activité 2008 Participation à l’enseignement : Mr BITAM Idir a participé à l’enseignement aux cours suivants : Cours Pasteur de Paris : intitulé du cours « Insectes vecteurs et santé humaine : Les puces et maladies transmises. Du 12 au 14 /05/2008 Master Maladies transmissibles et pathologies tropicales, les puces siphonaptères, IMTSSA PHARO, Marseille, France du 04/05 AU 24/05 Résidanat en parasitologie à la faculté de médecine Alger. Cours sur l’entomologie médicale. Intitulé : Les tiques dures et les maladies transmises. 104 Services et laboratoires de Diagnostic et Recherche Rapport d’Activité 2008 Institut Pasteur d’Algérie Laboratoire des Entérobactéries et Vibrions Chef du Laboratoire : Fawzia MOUFFOK (Pharmacienne/M.A Faculté de médecine) I. INTRODUCTION L'activité au sein du laboratoire Entérobactéries Vibrions se divise en 3 volets : 1. L’activité de référence : Consiste à confirmer le diagnostic biochimique et antigénique des souches identifiées dans les laboratoires périphériques. Cette activité est relativement moins importante ; elle dépend de l'arrivée des souches au laboratoire. 2. L'activité de recherche : 2 thèmes sont actuellement étudiés dans le service, « Campylobacters themotolérants : Fréquence, épidémiologie, profil de résistance, et génétique bactérienne dans le cadre d’une thèse de doctorat d’état et Salmonella hadar : Fréquence, modes de transmission et profil de résistance. . 3. L'activité de diagnostic : Est l'activité principale du service, elle consiste d'une part à examiner les selles et à ce titre, nous recherchons toutes les bactéries impliquées dans les infections entériques à savoir • E.Coli GEI pour les enfants de 2 ans et moins • Salmonella • Shigella • Yersinia Enterocolitica • Campylobacter Jejuni De plus lorsqu'il y a indication nous recherchons - Staphylococcus aureus - Vibrions cholériques. Toute recherche positive est complétée par une identification du germe (biochimique et antigénique) et la recherche de son activité vis à vis des antibiotiques D'autre part pour le diagnostic des Fièvres typhoïdiques et paras typhoïdiques, nous effectuons un sérodiagnostic de Widal et Félix sur le sérum des malades. Services et laboratoires de Diagnostic et Recherche 105 Rapport d’Activité 2008 Institut Pasteur d’Algérie II. ACTIVITE DE REFERENCE 1. Identification des souches de Salmonella, Shigella et autres : Elle consiste à confirmer les souches identifiées comme Salmonella et Shigella par les laboratoires périphériques. Cette confirmation est réalisée par 2 batteries de sérums : • Les sérums préparés par l'I.P.A. • Les sérums importés Au cours de l'année 2008, nous avons reçu au laboratoire 335 souches pour confirmation de diagnostic 253 sont des salmonella. L'étude biochimique et antigénique de ces souches a donné les résultats rapportés dans le tableau 1. Tableau 1 : Répartition mensuelle des souches de salmonella et shigella confirmées en 2008 Salmonella non typhoidique Salmonella typhoidique Shigella Ssouches non réparties Autres germes Total Janvier 03 00 0 0 02 05 Février 06 01 0 0 01 08 Mars 28 01 0 0 02 31 Avril 45 00 0 09 54 Mai 19 00 0 0 16 35 Juin 47 00 0 0 08 55 Juillet 21 01 0 0 04 26 Aout 52 07 0 0 25 84 Septembre 01 01 0 0 06 08 Octobre 10 00 0 0 06 15 Novembre 10 00 0 0 05 14 242 11 0 0 82 335 Mois Total Le tableau 2 donne les résultats des Salmonella typhoïdiques des prélèvements par wilaya. Tableau 2 : Répartition des Salmonella typhoïdiques par prélèvement. Sérovars Nombre S. Typhi VW 10 S. Paratyphi B 01 PVT Eau 01 106 Services et laboratoires de Diagnostic et Recherche Copro Hémo 01 09 00 09 provenance Tipaza= 01 Djelfa =06 Tiaret =01 Alger =01 Sidi belabbes=01 Alger =01 Rapport d’Activité 2008 Institut Pasteur d’Algérie Le tableau 3 indique la répartition des salmonella non typhoïdiques isolées en 2008 Tableau 3 : Répartition des salmonella non typhoïdiques par prélèvements S.Braenderup S.Infantis 04 Copro Hémo 01 00 autre Eau de mer = 02 Alger Volaille = 01 21 06 00 Eau de mer = 01 Blida = 01 Aliment = 14 Alger = 20 Alger S. Mbandaka 27 01 00 Aliment = 26 S. Muenster 08 00 00 Aliment = 08 Alger 30 08 01 Aliment = 17 Eau de forage = 01 Eau de mer = 01 Incubateur = 01 Bâtiment = 01 Sidi belabbes = 01 Kherrata = 08 Alger = 21 S. Virchow 02 01 00 Volaille = 01 Alger S. Anatum 28 01 00 Aliment = 27 Alger S. Montevideo 03 00 00 Aliment = 03 Alger S. Albany 02 00 00 Aliment = 02 Alger 10 00 00 Eau de mer = 02 Alger S. Enteritidis S. Typhimurium Aliment = 08 S. Agona 04 00 00 Volaille = 04 Alger S. Ohio 12 01 00 Aliment = 11 Alger S.Arizonae 10 00 00 Volaille = 10 Alger S. Altona 15 01 00 Aliment = 14 Alger 03 00 00 Merguez = 02 Alger S. Newport S. Indiana S. Hadar S. Heidelberg Pus = 01 06 01 00 Aliment = 05 Alger 08 01 00 Aliment = 06 Eau de mer = 01 Alger 09 06 00 Aliment = 03 Alger Alger S. Corvalis 28 05 00 Eau de mer = 09 Aliment = 14 S. Manhattan 01 00 00 Liquide d’ascite = 1 Alger S. Liverpool 01 00 00 Volaille = 01 Alger S. Panama 01 00 00 Merguez = 01 Alger S. Kentucky 04 00 00 Aliment = 04 Alger 05 01 00 Aliment = 03 Alger S.spp Eau de forage = 01 Services et laboratoires de Diagnostic et Recherche 107 Rapport d’Activité 2008 Institut Pasteur d’Algérie Tableau 4 : Autres germes identifiés Autres germes Nombre E- coli 01 Citrobacter youngae 05 Hafnia alvei 03 Proteus mirabilis 07 Shewan. putrefaciens 13 Citrobacter braakii 09 Citrobacter freundii 02 Proteus morganii 01 Pleisiomonas 01 2. Activité de référence pour le Vibrion cholérique : Au cours de l’année 2008, nous avons reçu au laboratoire 169 souches de vibrions du laboratoire des eaux, pour confirmation, qui ont données en définitif les résultats suivants : Tableau 5 : Résultats de l’identification des souches de Vibrions Alger Aéromonas V. NAG Autres V. halophiles Total 67 02 15 85 169 III- ACTIVITE DE RECHERCHE 1- Projet de thèse de Mme Alamir Hanane : « Campylobacters Themotolérants en Algérie » a. Recherche de Campylobacter dans les selles Sur un total de 927 prélèvements, 15 souches ont été isolées appartenant toutes à Campylobacter jejuni réparties comme suit Tableau 6 : Résultats de la recherche de Campylobacter dans les selles en fonction du sexe et de l’âge Hommes Femmes 04 05 Enfants > 5 ans < 5 ans 02 04 b. Recherche de Campylobacter dans les aliments Sur un total de 100 prélèvements de volaille, 09 souches ont été isolées appartenant toutes à Campylobacter jejuni 108 Services et laboratoires de Diagnostic et Recherche Rapport d’Activité 2008 Institut Pasteur d’Algérie Tableau 7 : Résultats de la recherche des Campylobacter dans les aliments Nature des prélèvements total Nbr de cas positifs Volaille 100 09 Les 15 souches isolées et identifiées ont été testés du point de vue sensibilité aux antibiotiques : 2- Projet de recherche sur la résistance des salmonella hadar : Belkader et Mouffok 8 souches isolées des aliments ont été étudiés. L’étude de la sensibilité vis à vis des antibiotiques a montré l’apparition de nouveaux anti biotypes d’où l’intérêt de continuer à surveiller ce sérottype d’introduction récente en Afrique. IV. ACTIVITE DE DIAGNOSTIC 1. Diagnostic des infections entériques. Pour l’année 2008, nous avons effectué 821 examens de selles. Nous indiquons leur provenance étiologique dans le tableau 8. Tableau 8 : Provenance et résultats des examens de selles Provenance Quantité d’examens Positifs % Gastroentérites 199 07 3,51 Bilans allergiques 200 01 0,50 Enquêtes 522 16 3,06 821 24 2,90 Totaux Nous remarquons que 66% des souches isolées proviennent des enquêtes chez le personnel de la restauration. (Porteurs sains). Le tableau 9 indique la fréquence mensuelle des prélèvements des selles. Services et laboratoires de Diagnostic et Recherche 109 Rapport d’Activité 2008 Institut Pasteur d’Algérie Tableau 9 : Fréquence mensuelle des prélèvements Mois Quantités Positifs Janvier 137 00 Février 068 00 Mars 073 06 Avril 087 04 Mai 085 03 Juin 092 01 Juillet 034 01 Août 034 01 Septembre 018 00 Octobre 116 00 Novembre 064 06 Décembre 018 02 821 24 Total* L’identification des germes isoles a donné les résultats figurés au tableau 10. Tableau 10 : Résultats de l’identification des germes isolés Genres Serovars Quantité Salmonella Salmonella enteritidis Salmonella kedougou Salmonella heidelberg Salmonella infantis 04 03 02 01 Shigella Shigella sonnei 01 E. coli E. coli 086 B7 01 Campylobacter Campylobacter jejuni 12 Total 24 L’étude des souches a été complétée par un test de sensibilité aux antibiotiques. 2. Diagnostic indirect des salmonelloses par sérodiagnostic de widal et Félix 98 sérums ont été examinés qualitativement puis quantitativement, lorsque les résultats sonts positifs à l’aide des suspensions, TO, TH, AO, AH, BO, BH. Au total, nous avons 98 sérums dont 8 positifs. 110 Services et laboratoires de Diagnostic et Recherche Rapport d’Activité 2008 Institut Pasteur d’Algérie Tabeau 11 : Répartition mensuelle des serums pour Serodiagnostic selon leur provenance géographique Alger Blida Boumerdes Chlef Totaux 00 00 11 Janvier 09 02 Fevrier 00 02 00 00 04 Mars 02 02 03 00 08 Avril 06 03 00 00 09 Mai 02 02 00 00 02 Juin 02 06 00 Juillet 09 04 01* 00 00 13 Aout 12 00 01* 00 00 03 Septembre 03 02 00 00 06 Octobre 07 01 00 00 07 Novembre 08 00 00 00 04 Decembre 06 00 00 00 03 02 Totaux 68 01* 01* 02* 25 02* 04* 02 02*S 16 98 *dont positif COMMUNICATIONS F. MOUFFOK, C. BELKADER : « Salmonelloses, réservoirs et modes de transmission : résultats d’une étude menée de 2003 à 2007 ». 3ème journées de l’infectiologie de l’HCA 11 juin 2008. POSTERS 1- H. ALAMIR, F. TALEB, F. MOUFFOK « Recherche de Campylobacter dans les selles et étude de sa résistance aux antibiotiques entre 2005 & 2007 » premières journées de microbiologie clinique sur les maladies émergentes et ré-émergentes. 29 mai 2008 au palais de la culture Moufdi Zakaria. 2- H. ALAMIR, F. TALEB, F. MOUFFOK : « Campylobactériose et douleurs » lors des 7èmes journées médicochirurgicales de Touggourt du 23 au 25 décembre 2008. Services et laboratoires de Diagnostic et Recherche 111 Rapport d’Activité 2008 Institut Pasteur d’Algérie ACTIVITES DE FORMATION. - Formation dispensée dans le Laboratoire sous la direction de Mme MOUFFOK avec l’aide des techniciens du laboratoire Nom et prénom de l’eleve Organisme d’origine S. Boulahchiche USTHB R. Zehana CQ A. Rahmoune USTHB F. Seray DES S. Aouadj USTHB Boubekeur H DES A. Amrouche Université de Bejaia S. Daouadji Ingéniorat Date de début de la formation Date de la fin formation Mars 2008 Juillet 2008 Recherche des Salmonella ds produits aviaires Mouffok Mars 2008 Juuillet 2008 Resistance ATB aux salmonella Mouffok Mars 2008 Juillet 2008 Mars 2008 Juillet 2008 Ingeniorat 112 Services et laboratoires de Diagnostic et Recherche nature des Sujet Campylobacter selles Campylobacters ds aliments Promoteur N. Hafferssas Belkader Alamitr H Alamir H Rapport d’Activité 2008 Institut Pasteur d’Algérie Laboratoire des Entérovirus Chef de laboratoire : Mohamed SEGHIER (D.M./Docent Faculté de Médecine) I. INTRODUCTION Les activités du laboratoire des entérovirus s’inscrivent dans les domaines : • de diagnostic courant pour les maladies d’étiologie Entérovirale • de santé publique dans le cadre de la surveillance de la circulation des poliovirus, particulièrement sauvages, à l’échéance de l’éradication de la poliomyélite. • de formation et de recherche appliquée. II. ACTIVITE DE DIAGNOSTIC Nature des prélèvements et des paramètres recherchés Nombre de prélèvements traités Selles pour la recherche 201 d’entérovirus LCR pour la recherche d’entérovirus Sérum : recherche d’anticorps antipoliovirus 1, 2 et 3 Sérum : recherche d’anticorps anticosackie B1 à B6 Technique utilisée Nombre de positifs Isolement sur cellules 17 (84 Paralysies Identification par Flasques Séroneutralisation Aiguës) 110 80 30 Isolement sur cellules Identification par Séroneutralisation Germes isolés Entérovirus non polio 0 Poliovirus (vaccinal) 0 Séroneutralisation Anti P1+P2+P3 Anti P1+P2 Anti P1+P3 Anti P2+P3 Anti P1 Anti P2 Anti P3 Séroneutralisation Anti Cox B1 Anti Cox B2 Anti Cox B3 Anti Cox B4 Anti Cox B5 Anti Cox B6 = 67 = 14 = 00 = 01 = 00 = 02 = 00 = 10 = 12 = 09 = 10 = 09 = 05 Services et laboratoires de Diagnostic et Recherche 113 Institut Pasteur d’Algérie Rapport d’Activité 2008 III. ACTIVITES DE SANTE PUBLIQUE Le laboratoire des Entérovirus est érigé en un laboratoire de référence OMS pour la surveillance de la circulation des poliovirus dans le cadre de l’éradication de la poliomyélite. Participation à des réunions, séminaires et stages : - Dr. M. SEGHIER : Réunion annuelle de la commission nationale d’éradication de la Poliomyélite pour la classification des cas de Paralysie flasque aigue (PFA). - Mr A. CHOUCHANE a participé à l’atelier sur le recyclage des cultures cellulaires du réseau des Laboratoires Polio organisé par l’OMS AFRO à l’Institut National des Maladies Transmissibles (NICD) de Johannesburg, Afrique du Sud, du 10 au 18 avril 2008. Cela a permis d’introduire des améliorations dans la gestion des cultures cellulaires. - Dr. M. SEGHIER : Un atelier de formation s’est tenu du 02 au 15 novembre 2008 au laboratoire régional de référence de l’Afrique du Sud (NICD, Johannesbourg). Il avait pour objectifs de : • Mettre à jour et donner une orientation sur les tests de différenciation intratypique des poliovirus • Fournir une orientation pratique sur les techniques de PCR en temps réel pour le diagnostic des poliovirus • Permettre au participant d’effectuer au sein de son laboratoire le transfert de technologie. - Dr. M. SEGHIER et Mr A. CHOUCHANE : Dans le cadre de l’évaluation de la prise en charge du programme d’éradication de la poliomyélite, quatre séminaires régionaux ont été organisés les 15, 17, 21 et 25 décembre à Mostaganem, Alger, Constantine et Biskra respectivement. Notre laboratoire plateau technique du diagnostic virologique a été le co-organisateur. IV. SYSTEME D’ASSURANCE QUALITE L’accréditation annuelle du Laboratoire de la Poliomyélite, de l’Institut Pasteur d’Algérie, comme Laboratoire de Référence National agréé par l’Organisation Mondiale de la Santé (OMS) pour la surveillance de cette maladie a été renouvelée après la visite concluante du laboratoire, du 05 au 09 juillet 2008, par le Dr. Annick DOSSEH, experte OMS, basée au point focal laboratoire, IST BURKINA FASSO. Elle a porté sur : - Un test de performance - Un système d’assurance qualité fondé sur des procédures et des modes opératoires écrits concernant les différentes étapes de l’analyse et les conditions de son exécution, la sensibilité des cellules utilisées, les installations l’équipement et les réactifs et consommables. 114 Services et laboratoires de Diagnostic et Recherche Rapport d’Activité 2008 Institut Pasteur d’Algérie V. ACTIVITE DE RECHERCHE 1. Projet de développement L’entretien de la banque de cellules (11 lignées) par la constitution de lots primaires de cellules et de lots de travail, conservés dans de l’azote liquide, qui permettent le renouvellement régulier des cellules utilisées au quotidien (03 lignées) afin de préserver leur sensibilité, la plus efficace possible. Préparation des antigènes de poliovirus et des entérovirus non polio utilisés pour le diagnostic. Pour la préparation des antigènes, il est essentiel d’utiliser des passages les plus rapprochés possibles du passage de la souche prototype. En effet, les passages répétés en culture cellulaire peuvent induire des changements imprévisibles dans l’antigénicité. 2. Projet de recherche G Evolution génomique des poliovirus d’origine vaccinale (VPO). Directeur de projet : Dr M. SEGHIER Collaborateurs : Dr. BOULAHBAL Dahbia Leila, Mr A. CHOUCHANE et Mme S. BOURAOUDE. L’étude porte sur des souches de VPO isolées chez des enfants se présentant à la vaccination de rappel de 18 mois, au niveau du centre de vaccination de la commune de Staouéli. G Circulation des Entérovirus dans l’environnement. Directeur de projet : Dr M. SEGHIER Collaborateurs : Dr. BOULAHBAL Dahbia Leila, Mr A. CHOUCHANE et Mme S. BOURAOUDE. Cette étude va permettre de rechercher une éventuelle circulation silencieuse de poliovirus sauvages dans les eaux usées à défaut de leur absence chez les individus depuis l’année 1996. Elle va également permettre d’analyser les poliovirus vaccinaux isolés et voir si leurs génomes seraient le siège de dérives génétiques potentiellement menacentes pour le programme d’éradication de la poliomyélite. De plus, une recherche d’entérovirus non polio sur une période suffisamment longue va nous renseigner sur l’épidémiologie de ces virus, du moins dans la région ciblée. VI. PUBLICATIONS ET COMMUNICATIONS 1. Communications orales Mohamed SEGHIER. Les virus de la grippe : L’émergence des sous types A. 1ère Journée de la SAMIC Palais de la culture Alger, le 29 Mai 2008. Services et laboratoires de Diagnostic et Recherche 115 Rapport d’Activité 2008 Institut Pasteur d’Algérie 2- Communications affichées M. SEGHIER, S. BOUDJADJA, M.BESSAUD & A. CHOUCHANE, "Coxsackievirus A24 isolates causing an outbreak of Acute Hemorrhagic Conjunctivitis in Algeria". Communication affichée à la Conférence Scientifique Internationale organisée par l'Institut Pasteur. Paris 26 et 27 juin 2008. VII. ACTIVITE DE FORMATION 1. Formation dispensée dans le laboratoire et/ou l’enceinte de l’IPA : formation pratique aux techniques d’isolement sur cellules des Entérovirus et les méthodes d’identification par séroneutralisation. La durée du stage est d’environ 5 semaines pour chaque résident. Nom et prénom de la personne formée Organisme d’origine HAMAILI Linda ATBA BEN ATBA Amel DROUAZ Nadjoua ABAZIZ Hassiba BELLOUFA Amine ARIB Samia SOUISSI Mériem RAMOUL Hadia HAMIDI Moufida ARIBI Med Lamine TLEMSANI Med Adel ABDAOUI nadjoua Faculté de SID saliha Médecine MEZAGHCHA ouahiba BENAKCHA Naima BENDJEMAA Ali SERRAR Hinda DJEBABRA Souad CHOUITER Asma Insaf MALKI Ali Niveau d’étude Période de la formation Nature des travaux réalisés Obs. Encadrement Dr SEGHIER DEMS 2008 Résidanat Dr. D. BOULAHBAL Mr A.CHOUCHANE me M S. BOURAOUDE 2. Formation dispensée hors du laboratoire Nom de l’enseignant Dr SEGHIER Lieu de L’enseignement Faculté de médecine d’Alger Destinataires de l’enseignement Etudiants en médecine Résidents en Microbiologie 116 Services et laboratoires de Diagnostic et Recherche Volume horaire annuel 70 heures Type d’enseignement Virologie Rapport d’Activité 2008 Institut Pasteur d’Algérie Laboratoire de Génétique Chef de Service : Mlle SERIDI Nabila (Chargée de Recherche) (de janvier à avril 2008) Les activités du laboratoire de génétique concernent deux unités : Unité de Biologie Moléculaire et Unité de Cytogénétique. Unité de Biologie Moléculaire : L’objectif de cette unité est le développement progressif de la recherche sur la biologie et génétique du protozoaire du genre Leishmania pris comme un modèle d’étude. 1. Détection et identification moléculaire des parasites Les activités se résument comme suit : 1- Sur une collection de 42 différents prélèvements, les tests PCR réalisés au moyen de différents couples d’amorces, pour lesquelles les résultats étaient négatifs (entre 27 et 42 échantillons), ont été repris afin de confirmer la négativité ou de relever d’éventuel problème de condition de réaction. 2- L’évaluation de la sensibilité et la spécificité des applications en PCR ciblant le kDNA, et le rDNA, était en cours de réalisation. 3- En matière d’identification de l’espèce, l’outil ITS1 appliqué en PCR pour la détection et suivi d’une restriction enzymatique pour l’identification concomitante des parasites au niveau des lésions était envisagé. Unité de Cytogénétique : Dans le cadre de la mise en place du diagnostic génétique des anomalies héréditaires, l’établissement des caryotypes était poursuivi pour 9 autres patients. Certains caryotypes normaux nécessitent des précisions quant aux anomalies de structure (non de nombre) à savoir les translocations équilibrée, les inversions ou duplications. Ces précisions avaient fait l’objet d’essais de mise au point de marquage des chromosomes ou « Banding ». La poursuite de la mise au point de la technique était en cours. Services et laboratoires de Diagnostic et Recherche 117 Rapport d’Activité 2008 Institut Pasteur d’Algérie Encadrement de mémoire de fin d’étude (en cours de réalisation): Nom & Prénom des étudiants Organisme d’origine Date du début de la formation USTHB Date de la fin de la formation Diplôme Promoteur Mars 2008 D.E.S en Génétique N. SERIDI USTHB Mars 2008 D.E.S en Génétique N. SERIDI USTHB Mars 2008 D.E.S en Génétique N. SERIDI Université de Bejaia Mars 2008 D.E.S en Génétique N. SERIDI - ATIA Youcef - MEZIENE BENTAHER MEZIENE Hamza - CHAIB A. Wahab - CHEBBAH Souad - ZIAMNI Kahina - MALEK Fahima Formation dispensée hors du service : Nom de l’enseignant Lieu de l’enseignement Destinataire de l’enseignement Module N. SERIDI FSB. USTHB Etudiants en biologie Génétique N. SERIDI FSB. USTHB Licence Génétique Génotoxicologie N. SERIDI FSB. USTHB Licence Génétique Immunogénétique 118 Services et laboratoires de Diagnostic et Recherche Rapport d’Activité 2008 Institut Pasteur d’Algérie Laboratoire Hélicobacter Pylori Chef de laboratoire : Fawzia MOUFFOK (Pharmacienne/ M.A/ INESSM). INTRODUCTION L’infection à H.pylori est l’une des infections chroniques les plus répandues dans le monde : 20 à 90% des individus sont infectés selon les pays. Pour un pays donné, la prévalence varie en fonction du statut socio-économique des individus et du degré de promiscuité dans lequel ils vivent. La bactérie se transmet directement d’homme à homme par voie orale et l’infection est acquise dans la jeune enfance le plus souvent au cours d’une transmission intrafamiliale. Notre activité consiste à rechercher cette bactérie soit directement par culture de biopsies gastriques ou indirectement par recherche d’antigènes dans les selles ou d’anticorps dans le sang I- RECHERCHE 1- Activité « Etudes des infections à Helicobacter pylori associé aux pathologies gastro duodénales » : consiste essentiellement en une mise en culture des biopsies, une recherche in vitro des antigènes d'Helicobacter pylori dans les échantillons de selles et des sérologies H.P dans le sang. Cette activité est effectuée dans le cadre de projets de recherche "laboratoire de recherche d'HP "du ministère de l'enseignement supérieur et de la recherche scientifique sous la directions du professeur TOUCHENE et d’une ACIP durant l’année 2008, notre étude conçernant “ Les infections à Helicobacter pylori associées aux pathologies gastro-duodenales a porté sur : - En 2008, 471 biopties anthrales et fundiques prélevés chez les adultes et les enfants et reçus des hopitaux de Kouba, Parnet. Les résultats de cette étude figurent au tableau 1. Tableau 1 : Répartition mensuelle de la recherche de HP dans les biopsies Quantité de biopsies reçues Culture positives Antibiogramme Janvier 52 13 13 Février 46 18 17 Mars 40 16 16 Avril 64 24 19 Mai 45 16 16 Juin 69 26 24 Juillet 44 17 15 Août 00 00 00 Septembre 22 05 5 Octobre 40 12 11 Novembre 24 07 07 Décembre 25 04 04 471 158 147 Mois Total Services et laboratoires de Diagnostic et Recherche 119 Rapport d’Activité 2008 Institut Pasteur d’Algérie - 137 sérums prélevés chez les memes malades sont examinés pour rechercher les facteurs de virulence VacA et CagA par Western Bloot. Les résultats de ces tests sont donnés par le tableau 2. Tableau 2 : Facteurs de virulence des sérums examinés Quantité de sérums 221 HP( + ) 159 HP( - ) 62 - 264 selles : examens non invasifs donc plus interessants en particulier chez l’enfant. Les resultats de ce travail sont consignés dans le tableau 3. Tableau 3 : Résultats de la recherche de H pylori dans les selles Mois Quantité de selles reçus Positives Janvier 29 15 Février 52 25 Mars 26 8 Avril 56 31 Mai 59 28 Juin 50 20 Juillet 46 16 Août 0 0 Septembre 0 0 Octobre 0 0 Novembre 0 0 Décembre 0 0 318 143 Total 2- ACIP Helicobacter pylori : Cette étude a débuté fin de l’année 2006 Patients inclus et souches H.pylori isolées : De Juillet 2006 à Juillet 2007, nous avons collecté 111 biopsies de 111 patients inclus dans l’étude, soit 75 femmes et 36 hommes âgés entre 17 et 70 ans, en collaboration avec le service de médecine interne de l’Hôpital de Kouba. Au total nous avons isolé 45 cultures positives à H.pylori soit une prévalence de 41%. 120 Services et laboratoires de Diagnostic et Recherche Rapport d’Activité 2008 Institut Pasteur d’Algérie Tableau 1 : Résultats des prélevements étudiés dans le cadre de l’ACIP Patients inclus Nombre Echantillons de sérums 111 Biopsies Gastriques 111 Positifs • Antre 111 29 +16 • Fundus 111 00+16 29 • SAntre + Fundus 16 ADN (extraction par méthode classique : Phénol / chloroforme). • Antre 23 - Sensibilité aux antibiotiques des souches isolées : Un antibiogramme a été réalisé pour les 45 souches isolées, aucune n’était résistante à l’Amoxycilline ni à la cdlarithromycine. 8% de résistance à la Ccarithromycine. 42% de résistance au Métronidazole. 16% de doubles Résistance (Clarithromycine+Métronidazole). Encadrement : Mémoire de fin d’étude en vue de l’obtention du diplôme d’études universitaires appliquées, Option Analyses Biologiques Biochimiques. Sujet : Diagnostic indirect des infections à Helicobacter pylori. Présenté par : Mlle Chemissa Amel Kamelia et Benmesbah Fadéla Université : Houari Boumedien 3- PUBLICATIONS ET COMMUNICATIONS - Publications : 1. F. MOUFFOK, F. TALEB, F. KIAS et all « Tests diagnostiques de l’infection à Hélicobacter pylori chez l’enfant » Archives de l’Institut Pasteur d’Algérie T.66 2007/2008. 2. F. KIAS, F. MOUFFOK, F. TALEB, A. BOUHADEF, Z. GUECHI, N. MATOUGUI, B. TOUCHEN : « Helicobacter pylori : Séroprévalence des facteurs de virulence CagA et VacA et la diversité des souches en Algérie » Archives de l’Institut Pasteur d’Algérie T.66 2007/2008 - Posters : F. KIAS, F. TALEB, F. MOUFFOK, A. BOUHADEF, Z. GUECHI, B. TOUCHENE « Diagnostic de l’infection à Helicobacter pylori chez l’adulte en Algérie » communication affichée : 7èmes Journées médicochirurgicales de Touggourt, 21-26 Décembre 2008. Services et laboratoires de Diagnostic et Recherche 121 Institut Pasteur d’Algérie 122 Services et laboratoires de Diagnostic et Recherche Rapport d’Activité 2008 Rapport d’Activité 2008 Institut Pasteur d’Algérie Laboratoire des Listeria Chef du laboratoire : El-Hadj-Ahmed LEBRES (DVS-Maître de recherche) Parmi les principales activités du Laboratoire des Listeria, notons : • La surveillance bactériologique des denrées alimentaires importées en général de pays où la listériose (maladie à transmission alimentaire certaine) sévit à l’état endémique, • La surveillance bactériologique également des denrées alimentaires produites localement, • la participation à l’élaboration de textes réglementaires (méthodes d’analyses et spécifications microbiologiques) relatives aux denrées alimentaires en collaboration avec le Ministère du Commerce. • la maîtrise de la situation épidémiologique nationale, notamment dans la région d’Alger, pour le moment. • L’alerte à la direction de la prévention, Ministère de la santé, de la population et de la réforme hospitalière, en cas de situation inhabituelle. I. ACTIVITES DE RECHERCHE 1. Surveillance épidémiologique des listérioses par recherche, isolement, dénombrement et identification des Listeria et de Listeria monocytogenes particulièrement à partir du lait cru. 2. Surveillance épidémiologique des listérioses par recherche, isolement, dénombrement et identification des Listeria et de Listeria monocytogenes particulièrement à partir de denrées alimentaires diverses autres que le lait cru. II. ACTIVITES DE DIAGNOSTIC Au cours de l’année 2008, le laboratoire des listeria a effectué selon la méthode de référence ISO 11290 partie 2, basée essentiellement sur le dénombrement de listeria monocytogenes à partir des denrées alimentaires l’analyse de 834 prélèvements dont la nature, le nombre et le pourcentage, figurent dans le tableau n°1 ci-après. Tableau n°1 : Nature, nombre et pourcentage des produits analysés en 2007. Nature des prélèvements nombre pourcentage Viandes & produits carnes 235 28,17% fromage 210 25,17% Laits crus & P.D.L. 083 09,85% Poissons congèles 024 02,87% Poulets congèles 009 01,07% Produits carnés cuits 161 19,30% Fromages traditionnels 105 12,58% Lingette, calot 007 00,83% 834 100% Total Services et laboratoires de Diagnostic et Recherche 123 Rapport d’Activité 2008 Institut Pasteur d’Algérie Les résultats du dénombrement des Listeria en fonction de la nature des denrées analysées figurent dans le tableau n°2 ci-après. Tableau n°2 : Résultats des analyses en fonction de la nature des denrées alimentaires analysées. Nature Nombre de souches isolées Total prélèvements Viandes & produits carnes 05 035 fromage 06 210 Laits crus & P.D.L. 02 083 Poissons congèles 02 024 Poulets congèles 00 009 Produits carnes cuits 03 161 Fromages traditionnels 04 105 Lingette, calot 00 007 22 834 Total Les résultats de l’identification biochimique des souches isolées en fonction de la nature des denrées analysées figurent dans le tableau n°3 ci-après. Tableau n°3 : Résultats de l’identification biochimique des souches de Listeria en fonction de la nature des denrées alimentaires analysées. Nature des souches L. mono Lait cru L. innocua L. ivanovii 0 /02 / L.grayi L. welshimri L. ssp Total des souches identifiées 02 Viande et produits carnés 03 01 03 / 03 10 Fromage traditionnel / 03 01 / / 04 Fromage commercialisé / / 03 / 03 06 Total des souches 03 04 09 / 06 22 Sur les 834 prélèvements effectués, nous avons isolé et identifié 22 souches de listeria dont 03 monocytogenes, soit à un taux de 2,63%. Par ailleurs, bien que seule listeria monocytogenes est pathogène aussi bien pour l’homme que pour l’animal, le fait de la retrouver au taux de 2,63%, ceci reste non négligeable vu que la listériose est classée comme maladie à transmission alimentaire certaine rare mais grave de par les séquelles qu’elle peut engendrer tels que les avortements, méningites, méningo-encéphalites, septicémies, troubles psychiatriques allant jusqu’au décès. Ces résultats signifient donc qu’on n’est pas du tout à l’abri d’une éventuelle flambée épidémique, par conséquent, une étude relative à l’analyse du risque listeria monocytogenes, fondée sur l’évaluation du risque, la gestion du risque ainsi que la communication sur les risques mérite d’être entretenue dés à présent en collaboration avec les pouvoirs publics. 124 Services et laboratoires de Diagnostic et Recherche Rapport d’Activité 2008 Institut Pasteur d’Algérie Laboratoire de Microbiologie Vétérinaire et d’Epizootiologie Chef du laboratoire : Abdelhamid TARIL (DV Maître de recherche) jusqu’à juillet 2008 Nacéra TOUARIGT (D.V./Chargée de recherche) à partir d’août 2008 L’activité du Laboratoire de Microbiologie Vétérinaire et d’Epizootiologie est scindée en 02, volets bien distincts : - Le premier volet regroupe des activités de diagnostic, de recherche et de formation - Le deuxième volet réuni les activités de production, de contrôle et de développement du vaccin anticlaveleux. ACTIVITES DE DIAGNOSTIC ET DE RECHERCHE I. ACTIVITES DE DIAGNOSTIC 1. Unité rage : diagnostic et recherche L’unité rage assure le diagnostic de laboratoire de la rage, elle prend également en charge le titrage des anticorps antirabiques par la méthode ELISA. 1.1. Le diagnostic Le diagnostic de la rage au laboratoire (rage animale essentiellement) est un examen postmortem effectué par trois techniques : - L’examen microscopique de frottis de matière cérébrale par immunofluorescence directe (I.F.D.) pratiquée sur tous les prélèvements. - L'inoculation aux souris de laboratoire par voie intracérébrale, et leur mise en observation durant 28 jours, pour tous les prélèvements négatifs en I.F.D. - L’inoculation de cultures cellulaires (neuroblastomes murins ou cellules N2a) également pour les prélèvements négatifs à l’IFD. Pour cause de défaillances des équipements et de certains réaménagements des locaux qui n’ont pas été réalisés, l’inoculation des cultures cellulaires n’a pas été pratiquée au cours de cette année. 1.2. Les prélèvements : Les prélèvements pour le diagnostic de la rage sont effectués sur des encéphales. L’extraction des encéphales est réalisée au niveau du service à partir : • De cadavres entiers lorsqu’il s’agit d’animaux de petite taille, domestiques ou sauvages (chiens, chats, chacals…). • De tête uniquement pour ce qui concerne les grands animaux Nous recevons également des cerveaux humains (adressés par les hôpitaux) pour confirmation du diagnostic de la rage. Les prélèvements proviennent de toutes les wilayas du pays, mais principalement des wilayas du centre. Il s’agit, dans la majorité des cas, d’animaux suspects (signes cliniques évocateurs, mort suspecte, abattage pour cause d’agressivité), et susceptibles d’avoir transmis la rage. Services et laboratoires de Diagnostic et Recherche 125 Rapport d’Activité 2008 Institut Pasteur d’Algérie Les demandes d’examen sont exprimées par les propriétaires d’animaux suspects, par les personnes exposées, par des vétérinaires privés ou du secteur public et par les services de prévention des différents secteurs sanitaires du pays. Les prélèvements arrivés en mauvais état de conservation, voir même putréfiés, et impossibles à traiter, sont nécessairement considérés comme positifs. 1.3. Résultats des examens réalisés 1.3.1. Immunofluorescence directe (IFD) : Les résultats des examens microscopiques effectués sont rapportés dans le tableau 1. Cette année, 297 prélèvements, toutes espèces confondues, ont été traités. Sur les 297 prélèvements, 291 ont été examinés et ,137 se sont révélés positifs On remarque que les chiens demeurent le principal réservoir de la rage avec 61,31% des cas positifs. Contrairement aux années précédentes, la rage bovine occupe la 4ème place avec 7,30% des cas positifs. Nous avons aussi reçu un nombre important de cerveaux humains (8 sur les 9 se sont révélés positifs), ce qui présente toujours une préoccupation de santé publique. Tableau 1 : Résultats des examens de rage par espèces Reçus Examinés Positifs % positivité par rapport au total des examens positifs négatifs Impossibles Chien 163 160 84 61,31% 76 3 Chat 069 067 15 10,95% 52 2 Ovin 021 021 12 8,76% 09 0 Bovin 017 016 10 7,30% 06 1 Cerveaux humains 009 009 08 5,84% 01 0 Equidés 006 006 06 4,38% 00 0 Caprin 006 006 02 1,46% 04 0 Lapin 001 001 00 0,00% 01 0 Rat 001 001 00 0,00% 01 0 Hamster 0v1 001 00 0,00% 01 0 singe 001 001 00 0,00% 01 0 Gazelle 0v1 001 00 0,00% 01 0 tortue 0v1 001 00 0,00% 01 0 297 291 137 100,00% 154 6 Espèces TOTAL * 1.3.2. Inoculation aux souris : Les prélèvements négatifs à l’IFD, sont inoculés à des souris par voie intracérébrale. L’inoculum est constitué par le surnageant de broyat de fragments de cerveau. - Les souris inoculées sont gardées en observation pendant 28 jours, avant la confirmation du diagnostic définitif. Les 149 prélèvements négatifs à l’IFD ont tous été inoculés aux souris. * Prélèvements en état de putréfaction très avancé: examens impossibles. Ont été considérés comme Positifs. 126 Services et laboratoires de Diagnostic et Recherche Rapport d’Activité 2008 Institut Pasteur d’Algérie 1.3.3. Titrage des anticorps antirabiques : Le titrage des anticorps antiglycoprotéiniques humains est réalisé par une méthode immuno-enzymatique utilisant le kit "Platélia-Rage" (réactif BIORAD). Le titrage des anticorps permet d’apprécier le degré d’immunité chez les sujets en cours de traitement vaccinal antirabique ou vaccinés à titre préventif. Il concerne essentiellement les personnes professionnellement exposées : vétérinaires praticiens, étudiants vétérinaires, personnel des fourrières canines … 112 sérums ont ainsi été traités. 2. Unité de bactériologie et de sérologie vétérinaire L’activité du laboratoire porte essentiellement sur le traitement de prélèvements de volailles provenant : D’entreprises de la filière avicole De veterinaire praticiens Des aviculteurs Des laboratoires vétérinaires régionaux notamment pour l’identification ou le typage des souches. Outre le diagnostic bactériologique, l’unité prend également en charge le diagnostic sérologique de la Leptospirose humaine et animale et de certaines maladies aviaires (New-castell, mycoplasmoses). 2.1. Autopsies : La plupart des prélèvements destinés aux examens bactériologiques et parasitologiques sont réalisés au service même après autopsies d’animaux et examens nécropsiques. 5548 autopsies ont été ainsi pratiquées, à partir de 506 lots d’animaux. Le tableau 2 rapporte la répartition de ces autopsies. Tableau 2 : Nombre d’autopsies Nature Nombre d’autopsies Nombre de lots Pondeuses et poulettes démarrées 0180 036 Reproducteurs chair et ponte 0257 068 Poulets de chair 1506 259 Poussins ponte et chair 3555 307 Dindonneaux et dindes 050 013 5548 683 TOTAL Services et laboratoires de Diagnostic et Recherche 127 Rapport d’Activité 2008 Institut Pasteur d’Algérie 2.2. Examens bactériologiques Les examens bactériologiques concernent : • Les prélèvements réalisés au laboratoire après autopsie • Les œufs : œufs de consommation, oeufs fécondés, œufs embryonnés • Les organes d’animaux d’espèces et d’origines diverses : en général organes d’animaux exotiques provenant du parc zoologique d’Alger, ou prélèvements réalisés sur le terrain par des vétérinaires patriciens. • Les écouvillons (effectués par les praticiens sur animaux malades) • Les écouvillons réalisés dans le cadre du contrôle bactériologique des bâtiments et des équipements d’aviculture, et pratiqués sur les murs, les mangeoires, les surfaces des incubateurs et des éclosoirs, les cages, les bacs à eau, la litière, etc. 3480 examens bactériologiques ont ainsi été réalisés (tableau 3). * EURL = Entreprise Unipersonnelle à Responsabilité Limitée Tableau 3 : Nombre de prélèvements examinés Nature Volaille (Poussins ponte et chair, poulets de chair, poulettes démarrées pondeuses, reproducteurs ponte et chair) Œufs de volailles : (œufs de consommation, à couver et embryonnés) Organes d’animaux (buse, cerf de barbarie, zèbre, ours) Souches à identifier : laboratoire vétérinaire de Draa Ben khedda Nombre de lots Nombre d’examens 683 2732 76 76 06 01 24 01 614 614 01 22 10 01 22 10 1413 3480 Divers : • Ecouvillons de surface des locaux et des bâtiments et des équipements d’aviculture. • Pus de chien • Fécés d’animaux (chien, faucon, paon) • Aliments de volaille (finition, croissance et démarrage TOTAL Tableau 4 : Résultats des examens bactériologiques effectués Origine Examens positifs Examens négatifs Total Volaille (Poussins, poulets de chair, pondeuses, reproducteurs, dindonneaux) 156 527 0683 Œufs (de consommation, à couver et incubés) 003 073 0076 Organes d’animaux 469 179 0648 Divers : (Ecouvillons, pus, litières, aliments…) 469 179 648 Souches à identifier 01 00 01 638 794 1432 TOTAL 128 Services et laboratoires de Diagnostic et Recherche Rapport d’Activité 2008 Institut Pasteur d’Algérie Les résultats des examens bactériologiques positifs sont consignés dans le tableau 5. Tableau 5 : Résultats des examens bactériologiques positifs Origine Germes isolés Volaille • Pondeuses E.coli Salmonella gallinarum pullorum Salmonella infantis Salmonella Enteritidis E.coli Pseudomonas aeruginosa Salmonella gallinarum pullorum Salmonella corvalis y Reproducteurs (ponte et chair) Nombre 22 07 02 01 32 34 01 01 01 37 E.coli Streptococcus groupe D Salmonella hader Salmonella livingstone Salmonella infantis Salmonella Virchow Salmonella Enteritidis Salmonella gallinarum pullorum Salmonella typhi murium Klebsiella pneumoniae 16 01 01 04 30 01 03 01 01 02 • Poulets de chair Streptococcus groupe D Salmonella infantis Salmonella Enteritidis E.coli 01 07 01 17 Dindes E.coli Staphylococcus epidermidis Pseudomonas aeruginosa Streptococcus groupe D Salmonella livingstone 06 02 01 01 01 Œufs (œufs de consommation, à couver) E.coli Salmonella infantis 02 01 Organes d’animaux E.coli Klebsiella pneumoniae 02 01 Bacillus E. coli Proteus mirabilis Streptococcus D Pseudomonas aeruginosa Salmonella enteritidis Salmonella infantis Staphylococcus epidermidis Staphylococcus saprophyticus Staphylococcus auréus Citrobacter Freundi Citrobacter diversus 214 029 028 007 001 001 338 006 006 001 040 004 001 y Poussins ponte, chair et dindonneaux Divers (Ecouvillons litière) Aliments, Souches à identifier fientes, Salmonella enteritidis 61 26 11 03 03 01 Services et laboratoires de Diagnostic et Recherche 129 Institut Pasteur d’Algérie Rapport d’Activité 2008 2.3. Antibiogrammes Un antibiogramme est réalisé sur tous les germes isolés à l’unité, à l’exception des bacillus (gammes d’antibiotiques spécifiques de ce germe non disponibles) et des germes isolés à partir d’écouvillons de surfacesde ce germe non disponibles) et des germes isolés à partir d’écouvillons de surfaces. 174 antibiogrammes ont été effectués selon la méthode NCCLS (appliquée au laboratoire depuis mai 1999), en présence de souches de référence : 2.4. Contrôles de qualité internes Dans le cadre du réseau AARN pour la surveillance de la résistance des bactéries aux antibiotiques, des contrôles de qualité sont réalisés une fois par semaine 264 antibiogrammes ont ainsi été réalisés au cours de ces contrôles et ce en presence des souches de référence – E.coli ATCC25922, Staphylococcus aureus ATCC25923, Pseudomonas aeruginosa ATCC27853 –selon les normes NCCLS et les données obtenues sont saisies avec le logiciel "Whonet 5.4". Tous les antibiogrammes effectués sur les germes isolés dans l’unité sont réalisés avec la méthode NCCLS, en présence des souches de référence citées ci-dessus 2.5. Examens sérologiques 2.5.1. Sérodiagnostic des mycoplasmoses aviaires : La méthode de diagnostic sérologique des mycoplasmes aviaires est une réaction d’agglutination sur lame à l’aide d’un antigène coloré ; Les antigènes spécifiques utilisés sont : • Mycoplasma synoviae • Mycoplasma gallisepticum • Mycoplasma meléagridis 84 examens ont été effectués donnant les résultats suivants : • Réaction à l’antigène Mycoplasma synoviae - 18 positifs - 12 Négatifs • Réaction à l’antigène Mycoplasma gallisepticum - 01 positif - 28 Négatifs • Réaction à l’antigène Mycoplasma méléagridis - 25 Négatifs 130 Services et laboratoires de Diagnostic et Recherche Rapport d’Activité 2008 Institut Pasteur d’Algérie 2.5.2. Sérodiagnostic de la Leptospirose : a. Techniques utilisées : Les techniques utilisées pour le diagnostic sérologique de la leptospirose sont : • La technique de macro-agglutination à l’aide de l’antigène TR (antigène thermorésistant) • Le test d’Agglutination Microscopique ou MAT (Micro Agglutination Test). également dénommée réaction d’agglutination-lyse (RAL), ou encore réaction de Martin et Petit, est la technique de référence. Cette réaction donne des renseignements de 02 types sur l’infection à leptospires - Renseignements qualitatifs permettant la détermination du sérogroupe responsable de l’infection ; - Renseignements quantitatifs, donnés par le titrage des anticorps sériques permettant l’évaluation du degré d’agglutination. b. Résultats des examens effectués : 253 sérums ont été reçus dont 248 ont été examinés. Le non traitement des 05 sérums est motivé par une hémolyse (01sérum) ou une contamination (03 sérums) ou une quantité insuffisante ne permettant pas l’examen (01 sérum). Tableau 6 : Résultats des examens sérologiques de leptospirose Macro-agglutination à l’antigène TR Sérums reçus Sérums examinés * Positifs Négatifs 253 248 96 149 A noter que plusieurs sérogroupes peuvent être retrouvés dans un même prélèvement. C’est le titrage des anticorps qui permet de se prononcer sur le sérogroupe responsable de l’infection en cours. En effet, le Centre National de Référence des leptospires de l’Institut Pasteur de Paris indique que le seuil de positivité correspond à un titre ≥1/100. * 05 sérums n’ont pas été examinés Services et laboratoires de Diagnostic et Recherche 131 Rapport d’Activité 2008 Institut Pasteur d’Algérie Tableau 7 : Sérogroupes de leptospire identifiés par le Test de Micro-agglutination (MAT) Sérogroupe Nombre de sérums positifs (pour chaque sérogroupe) Titre (UI/ml) (pour chaque sérum positif) Ictero-haemorragiae 26 6 x 1/ 100; 9 x1/ 200 8 x 1/ 400; 2 x 1/800 1 x 1/1600 grippotyphosa 02 2 x 1/ 100 03 1 x1/200 :1x1/400 1x1/800 03 1 x1/100 :1x1/200 1x1/800 Tarrasovi 01 1 x 200 Sejröe (sejröe) 05 4x 1/ 100 1x 1/ 400 Bataviae 03 3 x 1/ 100 Panama 01 1 x 1/ 100 Canicola Sejröe hardjobovis TOTAL 44 2.5.3. Sérologie virale (Maladie de NewCastle) : Le diagnostic sérologique de la Maladie de Newcastle (également désignée sous le terme de Pseudo-Peste aviaire), par le test de l’Inhibition de l'Hémagglutination (H.I.TEST) est effectué, soit en parallèle avec le diagnostic nécropsique, et ceci pour confirmation de la maladie, soit pour la surveillance de la séroconversion, après vaccination. Les prélèvements (sang) sont en général réalisés au niveau du service, à partir d’animaux vivants, mais nous recevons également des prélèvements réalisés sur le terrain même. 87 prélèvements ont été examinés ; les résultats obtenus sont consignés dans le tableau 8. Tableau 8 : Résultats des H.I.Tests chez la volaille Taux post-vaccinaux 1/20 à 1/5120 Maladie de New-Castle > 1/5120 Négatifs <1/20 Total Poulets chair 01 0 02 03 Pondeuses 07 0 02 09 Repro-chair 15 0 0 15 Repro-ponte 21 0 0 21 Poussins chair 07 0 0 07 Poussins ponte 02 0 0 02 Sang 26 0 04 30 79 0 08 87 Nature TOTAL 132 Services et laboratoires de Diagnostic et Recherche Rapport d’Activité 2008 Institut Pasteur d’Algérie 2.6. Examens parasitologiques et mycologiques : 105 examens parasitologiques ont été réalisés au niveau du service dont 34 sont positifs. Les résultats des examens positifs sont rapportés dans le tableau 9 Tableau 9 : Résultats des examens parasitologiques et mycologiques Nature Nombre Négatifs Positifs 18 Volaille (poules pondeuses, poulets de chair…) 79 61 • Coccidioses (Eimeria mivati) : 09 • Mycoses : 09 (Aspergillus niger Aspergillusfumigatus Aspergillus flavus Aspergillus nidulans) 08 Coccidioses (Eimeria mivati) : 01 Mycoses : 07 (Aspergillus niger Aspergillusfumigatus Aspergillus flavus) Dindes 13 05 buses 02 02 00 Faucons 03 03 00 Paon 08 04 105 75 TOTAL 04 - Œufs de capillaria sp : 03 - Ookystes d’Eimeria Mitis : 01 34 II. ACTIVITES SCIENTIFIQUES : • Projets de recherche : 1. Projet RABMED Control. (Détails Cf. rapport 2007) Dr BELKAID E. (épouse ABDELATIF) : Coordinatrice pour l’Algérie. Dr A. TARIL Le projet RABMED Control intitulé « Identification écologique et épidémiologique des facteurs clé de la dynamique et du contrôle de la rage en Afrique du Nord et implications sur le statut de la rage dans le Sud-Ouest Européen » (Détails Cf. rapport 2007) - Les travaux réalisés au cours de l’année 2008. ¾ Réunion de coordination regroupant les partenaires Algériens et Tunisiens (Alger –IPA Kouba, (17au18 mars 2008) ¾ Dans le cadre de la mise en place du diagnostic de la Rage au laboratoire de l’université de Menoufia (Egypte) Dr Ahmed Essify Maître assistant s’est familiarisé avec les différentes techniques de diagnostic au sein de notre laboratoire (16 au 23 Mars 2008). Services et laboratoires de Diagnostic et Recherche 133 Institut Pasteur d’Algérie Rapport d’Activité 2008 ¾ 2ème congrès du projet (E.BELKAID, A.TARIL, N.BENHABYLES, C.HADJIDJ) : Université de Manoufia - EGYPTE, (19au22 avril 2008). ¾ Etude des chauves-souris en tant que réservoir potentiel du virus rabique en Algérie : Cette étude a été assurée par l’équipe de l’Institut Pasteur (Belkaid E., Taghlit M. et Soufi A.) en collaboration des équipes de la direction des forets (Ministère de l’agriculture) et avec l’assistance de l’expert espagnol Dr. SERRA COBO. J Première mission (4 au 8 avril 2008) : prospection au niveau des gites naturels des chiroptères : Site de Chréa, Site de Bejaia. ¾ Suite à cette première mission d’exploration et aux résultats satisfaisants que nous avons obtenues et que nous avons exposées au cours de la réunion du Rabmedcontrol en Egypte et avec accord de la Communauté Européenne, il a été décidé que l’étude soit poursuivie. Deuxième mission (5 au 9 mai 2008) : exploration des sites de chiroptères Sites de Kala et Annaba ¾ Etude épidémio-moléculaire des lyssavirus circulant en Algérie (accompli en collaboration avec le service de biologie moléculaire de l’IPA) : sur une centaine de souches ont été réalisé des extractions d’ARN, synthèse de DNAc ¾ Organisation de la formation d’enquêteurs (E. BELKAID) Des vétérinaires du terrain, des inspecteurs vétérinaires des wilayates (Ministère de l’Agriculture, et développement rurale) ont reçu une formation relative à l’enquête CAP de la perception socioculturelle de la rage par la population en Algérie, assurée par le Dr Benhabyles N, épidémiologiste, INSP, et Dr HADJIDJ consultant du CREAD. (Sidi Ferruch, novembre 2008). 2. Projet ACIP RAGESTANBIO : (Détails Cf. rapport 2007) Essai inter-laboratoire (technique d’immunofluorescence directe, technique d’ELISA): Nous avons reçu dix (10) prélèvements de cerveaux de souris anonymisés et cinq (05) sérums humains anonymisés du centre de référence de la rage de l’Institut Pasteur de Paris) qui ont été traités au sein de l’unité. Les résultats ont été envoyés et nous sommes en attende des conclusions. (décembre-2008) ¾ Dr. E. Belkaid Participation au 25émé congrès Maghrébin vétérinaire Alger (Mai 2008) en qualité de membre du comité d’organisation ¾ Journées de formation et d’information sur la rage INSP, animée par : Dr BENHABYLES (INSP), Dr OUADAHI(MA), Dr ABED (EHSFLICI), Dr A. SOUFI (IPA), Dr ISSAD M (IPA), Dr SLIMI D(MSPRH), Dr BELKAID E(IPA). • Publications : - ABOUN A., RAHAL, K. et coll. "Surveillance de la résistance des bactéries aux antibiotiques" 9ème rapport d’évaluatioNBn – Edition 2008 - ANDS. 134 Services et laboratoires de Diagnostic et Recherche Rapport d’Activité 2008 Institut Pasteur d’Algérie Laboratoire de Mycologie Chef de laboratoire : Dahbia KELLOU (Pharmacienne Maître assistance INESM) INTRODUCTION Les activités du laboratoire sont réparties entre deux entités rappelées ci-dessous : - Diagnostic mycologique - Diagnostic sérologique Le bilan de l’activité comportera trois parties : I. ACTIVITE DE DIAGNOSTIC Le laboratoire effectue le diagnostic mycologique et sérologique des mycoses superficielles et profondes. Par ailleurs, il est sollicité pour l’identification des souches au profit des structures de l’I.P.A ainsi que pour d’autres organismes qui en font la demande. 1. Analyses Mycologiques Tableau n°1 : Types Total Positifs Origine externe Hôpital Ongles 450 244 450 00 Cheveux 103 034 103 00 Selles 057 016 57 00 Squames 262 016 262 00 P. Buccaux 045 017 45 00 P. Vaginaux 019 004 19 00 Recherche de Demodex 010 005 10 00 Sarcoptes scabiei 016 001 16 00 Scotch test 006 003 06 00 Liquide D’ascite 001 000 00 01 P.Auriculaire 002 000 02 00 Liquide Dialyses 005 000 00 05 Pus 007 000 07 00 Urines 004 001 04 00 Crachat 001 000 01 00 P. Nasal 002 000 02 00 P .Conjonctival 001 000 01 00 P. Vulvaire 003 000 03 00 L.C.R. 001 000 00 01 L.B.A. 01 00 00 01 996 341 988 08 Total Services et laboratoires de Diagnostic et Recherche 135 Rapport d’Activité 2008 Institut Pasteur d’Algérie Commentaires : Caractéristiques 996 Examens au total ont été réalisés : • Ongles 450 prélèvements soit 45,40% • Squames 262 prélèvements soit 26,43% • Cheveux 103 prélèvements soit 10,39% • Selles 057 prélèvements soit 5,75% Les prélèvements • P.Buccaux 045 les prélèvements soit 4,54% les plus pratiqués • P. vaginaux 019 les prélèvements soit01,91% • Sarcoptes 016 prélèvements soit 01,61% • Demodex 010 prélèvements soit 1 % 988 demandes sont d’origine externe 08 demandes sont des hôpitaux. 2. Identification des souches Tableau n°2 : Provenance Bactériologie Médical (A.T.B) 53 Bactériologie des Aliments 12 Anaérobie 18 Biologie Moléculaire 03 Laboratoire de contrôle 04 C.H.U. Setif 01 C.R.N.A. 18 PEPSI 07 Total Commentaires : Souches ont été identifiées comme suit : Nombre de souches Cladosporium sp Fusarium sp Aspergillus flavus Penicillium sp Trichoderma sp 136 Services et laboratoires de Diagnostic et Recherche 116 Institut Pasteur d’Algérie Rapport d’Activité 2008 Paecilomyces sp Emericella nidulans Aspergillus versicolor Fusarium solani Aureobasidium sp Alternaria sp Asperillus fumigatus Scopulariopsis sp Ulocladium sp Aspergillus nidulans Aspergillus niger 3. Diagnostic sérologique Il comporte deux volets, à savoir : La recherche des anticorps circulants La recherche des antigènes circulants 3.1. Anticorps circulants : Notre laboratoire effectue la recherche d’anticorps circulants pour les affections. Profondes à savoir Aspergilloses et Candidoses profondes. Cette sérologie se fait par les techniques de précipitation (Immuno électrophorèse) qui permettent de faire le diagnostic et le suivi sérologique du patient. 3.2. Antigènes circulants : La recherche d’Antigènes circulants à concerner les antigènes Aspergillaires, Candidosiques et Cryptococciques. L’intérêt de cette recherche est de poser un diagnostic précoce pour les Aspergilloses et les Candidoses profondes. En ce qui concerne la Cryptococcose, la recherche d’antigènes circulants permet de poser le diagnostic d’une part et d’autre part de permettre la mise en route du traitement le plutôt possible vu que le processus vital du patient est mis en jeu. Services et laboratoires de Diagnostic et Recherche 137 Rapport d’Activité 2008 Institut Pasteur d’Algérie Le tableau suivant résume les examens réalisés et en donne la répartition par affection Tableau n°3 : Diagnostic sérologique Total Positifs Négatifs Recherche d’Ac circulants : - Aspergilloses - Candidoses 145 sérums 003 sérums 25 00 120 03 Recherche d’Ag circulants : - Aspergilloses - Candidoses 04 sérums 00 sérums 01 00 03 00 22 00 174 26 Sérologie cryptococcique Total 02 LCR 00 Urine 20 sérums 148 II. ACTIVITE DE FORMATION 1. Formation des résidents de spécialité Dans le cursus des résidents de spécialité Parasitologie –Mycologie, nous avons reçu quatre résidents, d’octobre 2007 à octobre 2008. Il s’agit des résidents suivants : Mr ABIDAT Fayçal (3ème année) Mr CHOUIKH Cheikh (2ème année) Mr MOURI Oussama (2ème année) Melle DELMA Fatima zohra (2ème année) Par ailleurs, nous avons reçu 04 résidents à partir d’octobre 2008 à octobre 2009. Mme CHERIF HOSMI Messaouda (3ème année) Mme BENZAID Samira (3ème année) Melle DORBANI Soror (3ème année) Mr (3ème année) LAOUEDJ Mohamed Ces résidents consolident leur formation en mycologie tout en participant à toutes les activités du laboratoire. Mme BENZAID Samira a suspendu ses études depuis janvier 2009. 138 Services et laboratoires de Diagnostic et Recherche Rapport d’Activité 2008 Institut Pasteur d’Algérie 2. Formation des stagiaire externe à l’IPA : Melle MAMACHE Aissa (Ingénieur en Biologie) a effectué un stage d’un mois du 17 février 2008 au 04 mars 2008. 2.1. Formation Universitaire (INESSM D’ALGER) : Durant l’année 2008, Mme KELLOU Dahbia et Melle HAMROUNE Zohra, Maitre assistantes, ont dispensé en enseignement Universitaire qui se répartit comme suit : • Cours magistraux et TP pour les étudiants de 4ème de Pharmacie. • Cours et TP aux résidents de biologie clinique. • Planchages aux résidents de 1ère, 2ème, 3ème et 4ème de spécialité de Parasitologie Mycologie. • Enseignement théorique de Parasitologie- Mycologie destinée aux étudiants de 3eme année de médecine. III. DIVERS Entretien de la mycothéque : Les souches de champignons sont entretenues régulièrement par le personnel du Laboratoire, ces souches servent à la formation et à la préparation de nos antigènes. Participation de Mme Kellou Dahbia et Melle Hamroune Zohra à la réunion de la Société française de Mycologie Médicale qui a eu lieu à Tours en Mai 2008. IV. COMMUNICATION Participation à la journée de formation, continue organisée par le CHU Mustapha le 25 Décembre 2008. Conduite à tenir devant les candidoses et Malassezioses. Z. HAMROUNE Participation à la journée de Parasitologie Mycologie Médicales qui s’est tenue à Setif (Université Ferhat Abbas) le 04 juin 2008. V. POSTERS : 1) Mycoses superficielles et Diabète : bilan de 03 années F. ABIDAT, Z. HAMROUNE, A.B. BENELMOUFFOK, D. KELLOU 2) Place du Cryptococcus neoformans dans la mycoflore isolée à partir de fientes de pigeons. O. MOURI, C. CHOUIKH, FZ. DELMA, A.B. BENELMOUFFOK, Z. HAMROUNE, F. ABIDAT, D. KELLOU Soumission d’article aux archives de l’Institut Pasteur d’Alger. Titre : Onychomycoses diagnostiquées au Laboratoire de Mycologie de L’IPA de 2005 à 2007. Z. HAMROUNE, D. KELLOU, A.B. BENELMOUFFOK Services et laboratoires de Diagnostic et Recherche 139 Institut Pasteur d’Algérie 140 Services et laboratoires de Diagnostic et Recherche Rapport d’Activité 2008 Rapport d’Activité 2008 Institut Pasteur d’Algérie Laboratoire de Recherche et Développement sur les Venins Chef du laboratoire: Fatima LARABA-DJEBARI (Professeur et Directeur de Recherche) INTRODUCTION Les envenimations scorpioniques et ophidiennes induisent dans la plupart des cas, des perturbations au niveau des systèmes nerveux, cardiovasculaire et respiratoire. L’œdème pulmonaire (envenimation scorpionique) et la nécrose tissulaire (envenimations ophidiennes) sont souvent les altérations observées, les plus communes à tous les sujets gravement envenimés. Ces altérations représentent les principales causes d’amputation ou de décès lors d’une envenimation accidentelle. L’immunothérapie reste le seul traitement spécifique de ce type d’envenimation. Cette thérapie n’est efficace que si elle est entreprise dans les délais rapides et une posologie adéquate d’un immun-sérum hautement neutralisant. Au vu de certains effets et signes cliniques observés après envenimation, cette thérapie doit obligatoirement être associée à un traitement symptomatique. Démarche et les résultats actuels de nos travaux sont les suivants : Dans le cadre de ce problème de santé publique, nos travaux s’insèrent dans la continuité de d’une Recherche-Développement sur les envenimations. Plusieurs axes sont ouverts à notre équipe. En effet, celle-ci œuvre en utilisant plusieurs approches : - Une étude physiopathologie de plus en plus approfondie. - Une étude sur les mécanismes moléculaires et cellulaires impliqués lors des envenimations et ce afin de pouvoir proposer des traitements symptomatiques qui seraient associés au traitement spécifique. - Une étude sur l’optimisation et la standardisation de l’immunothérapie - Une étude sur la mise en place et la validation d’un test Immunodiagnostic le plus rapide possible. - Une recherche qui s’intéresse à la purification et caractérisation de molécules bioactives d’intérêt extraites à partir des venins étudiés. Etude physiopathologique Cette étude est abordée sur des modèles animaux pour: 1 Visualiser la distribution des constituants compartiments vasculaire et tissulaires 2 Analyser les perturbations induites toxiques dans les différents Services et laboratoires de Diagnostic et Recherche 141 Institut Pasteur d’Algérie Rapport d’Activité 2008 Pour cela nous utilisons plusieurs méthodes - Un test ELISA Sandwich spécifique à nos espèces avec préparation au laboratoire d’un conjugué non commercialisé. - L’imagerie pour suivre les constituants du venin - Le marquage radioactif pour suivre la biodistribution des constituants du venin chez l’animal. - La détection tissulaire du venin par immunofluorescence ou immunohistologie - L’étude des lésions tissulaires est abordée par histologie mais aussi par l’étude des marqueurs métaboliques. Etude des mécanismes impliqués dans les envenimations Cette étude est entreprise par la mise en évidence des effets observés lors d’une envenimation expérimentale en présence et en absence d’inhibiteurs de certaines voies de signalisation. Elle est également abordée en utilisant les biomolécules purifiées à partir de ces mêmes venins. D’autre part, nous essayons d’expliquer et de détecter les principales cibles des constituants des venins.par l’utilisation de bio-marqueurs et de techniques d’immunodétection. Nos études se sont focalisées sur : - La mise en culture de lignées cellulaires lymphoïdes (lymphocytes T et B) et myéloïdes (macrophages et mastocytes) afin de montrer les effets du venin in vivo et in vitro. Le dosage de médiateurs inflammatoires (cytokines, Sélectines, enzyme et bioamines) et l’utilisation d’inhibiteurs des voies d’activation de la réponse immunitaire pour mettre en exergue les voies d’induction du processus inflammatoire. Par ailleurs, le degré d’implication des macrophages dans la présentation du venin et de ces toxines permettrait probablement de confirmer les différences d’immunogénicité des toxines de venin (Aah I et Aah II) déjà mises en évidence. - Une analyse de la cinétique de prolifération des cellules notamment, spléniques, en présence du venin d’Aah et de ses composants toxiques (Ftox G-50) in vivo et in vitro a été également réalisée. - L’étude de la contribution de radicaux libres à la toxicité des venins, libérés par l’action excitatrice des toxines neuronales a été également envisagée. Les radicaux libres sont dosés dans les tissus d’animaux envenimés. Les résultats obtenus montrent que le venin d’Aah augmente l’activité cytotoxique du macrophage. En effet, l’étude in vitro révèle une production de cytokines proinflammatoires (IL-1β, IL-6, TNFα, IL-12 et IFNγ) et anti-inflammatoires (IL-10) d’une manière temps dépendant. Le maximum de concentration du TNFα et d’IFNγ est observé après 48 heures d’incubation cellulaire. La libération importante de L’IL-6, IL-12 et l’IL-1β n’est observée qu’après 96 heures, alors que celle de l’IL-10 est maximale après 72 heures de mise en culture. Le venin d’Aah induit aussi un métabolisme oxydatif (peroxyde d’hydrogène) et non-oxydatif (phosphate acide) du macrophage d’une manière dose dépendante. En effet, à de faible dose de venin, le macrophage libère d’importante quantité de H2O2 et de phosphate acide, alors qu’en présence de fortes concentrations, le métabolisme du macrophage est essentiellement oxydatif. 142 Services et laboratoires de Diagnostic et Recherche Rapport d’Activité 2008 Institut Pasteur d’Algérie La deuxième démarche expérimentale a consisté à analyser les variations fonctionnelles des reins après envenimation des rats en présence et en absence d’immunothérapie. En effet, Le rein joue un rôle majeur dans le processus de filtration et d’élimination des éléments toxiques et de leurs métabolites, il est par conséquent un organe cible de plusieurs toxines. De ce fait, il est le siège de nombreuses modifications physiologiques et histologiques après une envenimation. Les prélèvements d’urine et de sang sont récupérés respectivement 4 heures et 24 heures après une envenimation des animaux avec une dose sublétale et une dose létale de venin. L’analyse des urines a permis de déterminer un taux élevé d’hématies et leucocytes comparativement aux animaux témoins. Cette infiltration cellulaire peut être probablement expliquée par une altération du cortex rénale. Dans le but de confirmer cette atteinte rénale, des paramètres, marqueurs d’altérations tissulaires, ont été analysés dans les deux échantillons biologiques : la lactate déshydrogénase (LDH), la créatinine, l’urée, les protéines, les électrolytes et la glycémie. La mesure de l’activité LDH et des paramètres biologiques dans le sérum après envenimation montre une augmentation de son taux sérique. Cette augmentation est dose dépendante. Cette augmentation de l’activité de la LDH dans le sang est probablement due aux altérations tissulaires y compris le rein vers le sang induites par le venin D’autre part, l’étude des modifications métaboliques par le dosage des taux de la créatinine, l’urée, les protéines, les électrolytes et la concentration de glucose dans le sang et les urines des rats envenimés a montré une augmentation anormal du taux du glucose, des protéines et du K+ dans le sang. L’augmentation de l’urée et de la créatinine dans le sang accompagnée par leurs diminutions dans les urines est due probablement à une altération de la filtration rénale. L’administration de l’immun-sérum par voie i.p. 30 minutes après envenimation semble neutraliser certains effets induits par le venin Aah. En effet, les anticorps constitués de fragments F(ab’)2 dirigés contre la fraction toxique Ftox G-50 d’Aah, semble atténuer certaines variations métaboliques induites par le venin Aah où une restauration significative des variations métaboliques est observé 24h après envenimation. Résultats sur la recherche de biomolécules d’intérêt : L’étude des constituants des venins de Viperidae a permis de mettre en évidence des molécules ayant des activités hémorragiques et myotoxiques. Deux de ces molécules ont été purifiées et caractérisées. Leur structure est en cours par le biais de collaborations internationales. Chacune de ces approches a fait l’objet de publications et de communications. PUBLICATIONS INTERNATIONALES 1- Oussedik-Oumehdi Habiba and Laraba-Djebari Fatima (2008) Irradiated Cerastes cerastes Venom as a Novel Tool for Immunotherapy. Immunopharmacology and Immunotoxicology, 30:37–52, 2008 2- Sonia Adi-Bessalema, Djelila Hammoudi-Trikia, Fatima Laraba-Djebari. (2008) Pathophysiological effects of Androctonus australis hector scorpion venom: Tissue damages and inflammatory response. Exp Toxicol Pathol (2008), Experimental and Toxicologic Pathology 60 (2008) 373–380 Services et laboratoires de Diagnostic et Recherche 143 Institut Pasteur d’Algérie Rapport d’Activité 2008 3- Fatah Cherifi et Fatima Laraba-Djebari Caractérisation d’une fraction coagulante isolée du venin de Cerastes cerastes Toxines et fonctions cholinergiques neuronales et non neuronales 1 Editions de la SFET (2008) ; 153-154. 4- S. Sami -Merah, D. Hammoudi-Triki, D. Aroune, M-F Martin-Eauclaire et F. LarabaDjebari Incidence de la fraction toxique du venin d’Androctonus australis hector dans la leucocytose pulmonaire Toxines et fonctions cholinergiques neuronales et non neuronales 1 Editions de la SFET (2008) ; 129-130 . 5- Sami-Merah Sassia, Hammoudi-Triki Djelila, Martin-Eauclaire Marie-France and Laraba-Djebari Fatima (2008) Combination of two antibody fragments F(ab´)2/Fab: an alternative for scorpion envenoming treatment International Immunopharmacology 2008 Oct;8(10):1386-94. PUBLICATIONS NATIONALES - L. ABIB, H. BOUKHALFA-ABIB, N. BENNACEF-HEFFAR ET F. LARABA-DJEBARI Evauation de la toxicité des venins de Viperidae et de Buthidae irradiés au 60Co : approaches biochimique et histologique. Archives de l’Institut Pasteur d’Algérie ISSN 0020-2460. pp7- 18 - DJ. HAMMOUDI-TRIKI, S. ADI-BESSALEM ET F. LARABA-DJEBARI. Action du venin de scorpion sur la fonction rénale. Archives de l’Institut Pasteur d’Algérie ISSN 00202460. pp19-28 COMMUNICATIONS INTERNATIONALES - F. CHERIFI, N. BENNACEF-CHAOU, F. SEBIA-AMRANE, L. HAMZA, H. BOUKHALFA-ABIB, N. BENNACEF-HEFFAR, H. OUSSEDIK-OUMEHDI ET F. LARABA-DJEBARI. (2008) Envenimation Ophidienne : Effets pathophysiologiques et Immunothérapie. Conférence Scientifique Internationale des Instituts Pasteur. Paris, 2627 Juin 2008. - S. ADI-BESSALEM, S. SAMI-MERAH, A. MENDIL, Dj. AROUNE, D. HAMMOUDI-TRIKI ET F. LARABA-DJEBARI (2008). Immunothérapie antiscorpionique : Evaluation de l´efficacité de différentes formes d´anticorps. Conférence Scientifique Internationale des Instituts Pasteur. Paris, 26-27 Juin 2008. - D. HAMMOUDI-TRIKI, S. ADI-BESSALEM, A. MENDIL, S. SAMI-MERAH AND F. LARABA-DJEBARI (2008). Cardio-respiratory injury: correlation between circulating scorpion venom and hemodynamic variations. 16TH European section meeting of the international society on toxinology 7-10 September. - L. ABIB ET F. LARABA-DJEBARI (2008). Immune response and immunoprotection against scorpion venom. 16th European Section Meeting of the International Society on Toxinology, 7-10 September 2008, Leuven-Belgium. - F. CHÉRIFI, N. BENNACEF-CHAOU, F. SEBIA-AMRANE, L. HAMZA, H. BOUKHALFA-ABIB., BENNACEF-HEFFAR. N, OUSSEDIK-OUMEHDI. H ET LARABA-DJEBARI. F (2008). Envenimation Ophidienne : Effets pathophysiologiques et Immunothérapie. 16th European Section Meeting of the International Society on Toxinology, 7-10 September 2008, Leuven-Belgium. - A. MEKSEM, F. LARABA-DJEBARI (2008) Purification, cristallisation et études structurales préliminaires de CHA1169, récepteur membranaire TonB-dépendant de Pseudomonas fluorescens Colloque de l’Association Française de Cristallographie (7-10 Juillet 2008 Rennes ; France 144 Services et laboratoires de Diagnostic et Recherche Institut Pasteur d’Algérie Rapport d’Activité 2008 - F. CHERIFI, N. BENNACEF-CHAOU, L. HAMZA, F. AMRANE-SEBIA, A. SACI AND F. LARABA-DJEBARI. Correlation between Body Distribution and pathophysiological effects induced by Viperidae venoms before and after Immunotherapy. Global Issues in Clinical Toxinology (Australian venom Research Unit) The University of MelbourneAustralia; 23–28 November 2008 (Accepted) - H. OUSSEDIK-OUMEHDI, N. BENNACEF-HEFFAR, H. BOUKHALFA-ABIB AND F. LARABA-DJEBARI, Which antigens for the antivenom preparation: Contribution of gamma rays in venom detoxification and enhancement of neutralizing efficiency. Global Issues in Clinical Toxinology (Australian venom Research Unit) The University of Melbourne- Australia 23–28 November 2008 (Accepted) COMMUNICATIONS NATIONALES 1- L. ABIB, S. ADI-BESSALEM, A. MENDIL, S. SAMI-MERAH, D. HAMMOUDI-TRIKI ET F. LARABA-DJEBARI (2008). Vaccinothérapie : Effet Immunoprotecteur d’un Venin de scorpion Irradié. 34ème Anniversaire de l’USTHB 19-24 Avril. 2- S. ADI-BESSALEM, D. HAMMOUDI-TRIKI, S. SAMI-MERAH, A. MENDIL, L. ABIB, BILLIALD P., MARTIN-EAUCLAIRE, M-F ET LARABA-DJEBARI F. (2008). BioEngineering et Préparation Biotechnologique d’un Peptide de synthèse à visée Vaccinothérapie. 34ème Anniversaire de l’USTHB 19-24 Avril. 3 - F. CHERIFI ET F. LARABA-DJEBARI. (2008) : « Bioanalyse des paramètres hématologiques et métaboliques après administration d’une biomolécule anticoagulante à visée thérapeutique » Communication affichée présentée les 19-24 Avril 2008 dans le cadre des activités scientifiques organisées par la Faculté des Sciences Biologiques à l’occasion du 34 ème anniversaire de la création de l’USTHB. 4- F. CHERIFI ET F. LARABA-DJEBARI (2008) : « Biomolécule Anticoagulante de Cerastes cerastes: Purification et Caractérisation » Communication affichée présentée les 19-24 Avril 2008 dans le cadre des activités scientifiques organisées par la Faculté des Sciences Biologiques 34 ème anniversaire de la création de l’USTHB. 5- H. BOUKHALFA-ABIB, N. BENNACEF-HEFFAR, H. OUSSEDIK-OUMEHDI ET F. LARABA-DJEBARI. (2008) Utilisation de la radiopbiologie dans la détoxification des venins de Viperidae : Apport dans la thérapie antivenimeuse. 34ème anniversaire de l’USTHB. 19-24 Avril 2008. Alger. 6- H. OUSSEDIK-OUMEHDI, L. HAMZA, F. CHERIFI, F. AMRANE, H. BOUKHALFAABIB, N. BENNACEF-CHAOU, A. SACI, N. BENNACEF-HEFFAR ET F. LARABADJEBARI. (2008) Bidiversité des venins de Viperidae : Source de biomolécules pharmacologiquement actives. 34ème anniversaire de l’USTHB. 19-24 Avril 2008. Alger. 7- D. HAMMOUDI-TRIKI, S. ADI-BESSALEM, L. ABIB, S. SAMI-MERAH, A. MENDIL ET LARABA-DJEBARI F. (2008). Immunotoxinologie et Pharmacodynamie des venins des scorpions : Apport dans la thérapie anti-scorpionique. 34ème Anniversaire de l’USTHB 19-24 Avril. 8- L. HAMZA, F. CHERIFI, H. OUSSEDIK-OUMEHDI ET F. LARABA-DJEBARI. (2008) Neutralisation des activités biologiques des venins de Viperidae par différents types d’anticorps. 34ème anniversaire de l’USTHB. 19-24 Avril 2008. Alger. 9- A. MENDIL, S. SAMI-MERAH, S. ADI-BESSALEM, L. ABIB, D. HAMMOUDI-TRIKI, ET LARABA-DJEBARI F. (2008).Pharmacocinétique du venin d’Androctonus australis hector et de ses anticorps. 34ème Anniversaire de l’USTHB 19-24 Avril. Services et laboratoires de Diagnostic et Recherche 145 Rapport d’Activité 2008 Institut Pasteur d’Algérie 10- N. BENNACEF-HEFFAR, H. BOUKHALFA-ABIB, H. OUSSEDIK-OUMEHDI ET F. LARABA-DJEBARI. (2008) Effet de l’irradiation gamma sur les venins de Viperidae et leurs activités biologiques. 34ème anniversaire de l’USTHB. 19-24 Avril 2008. Alger. 11- S. SAMI-MERAH, A. MENDIL, S. ADI-BESSALEM, L. ABIB, D. HAMMOUDI-TRIKI, ET F. LARABA-DJEBARI (2008). Développement de Nouveaux Schémas Thérapeutiques dans l’Envenimation Scorpionique: Association de l’immunothérapie avec des Molécules Thérapeutiques Pharmacologiquement Actives. 34ème Anniversaire de l’USTHB 19-24 Avril. VI- ACTIVITE DE FORMATION 1- Formation dispensée dans le laboratoire Nom prénom de Organisme la personne d’origine formée Niveau d’étude Date de soutenance Nom de(s) encadreur(s) Nature des travaux réalisés Formation Diplôme d’Ingénieur Génie Biologique MERZOUK SIHEMCHAHINEZ ET MESLEM FAIZA 2008 Contribution à l’étude des variations physiologiques de la fonction rénale après envenimation scorpionique. A. BOUHENN MUSTAPHA , ABDOUN SELMA ET CHAYEB HAKIM 2008 Préparation des anticorps spécifiques au venin d’Androctonus australis hector et leurs utilisation dans l’immunothérapie expérimentale. 2008 D. HAMMOUDITRIKI et F. .LARABADJEBARI D. HAMMOUDITRIKI et F. LARABADJEBARI Contribution à l’étude des variations physiologiques induites par le venin D’Androctonus amoreuxi BAKHTI Fatima ET GHARBI Bahia D. HAMMOUDITRIKI et F. LARABADJEBARI Formation DES FORMATION de MAGISTER MENDIL Amina FSBUSTHB Biochimie Appliquée et biotechnolog ies Thèse soutenue 10 Mars 2008 . Mise au point d’un test immunodiagnostic rapide et effet de la thérapie lors d’une envenimation scorpionique exprimentale F. LARABADJEBARI THESE DOCTORAT ADI-BESSALEM Sonia FSBUSTHB BiochImmuno Novembre Décembre 2008 146 Services et laboratoires de Diagnostic et Recherche Développement de biomolécules thérapeutiques antiscorpioniques : Apport de l’Ingénierie Moléculaire F. LARABADJEBARI Rapport d’Activité 2008 Institut Pasteur d’Algérie Missions du personnel du laboratoire Recherche et Développement Personnel de soutien : SAADEDDINE Souad : Ingénieur d’Etat en Génie Biologique Personnel chercheur IPA : Pr. LARABA-DJEBARI Fatima : Directeur de Recherche (coordination des projets de recherche du laboratoire techniquement et scientifiquement) Dr. HAMMOUDI Djélila : Maître de Recherche et collaboratrice scientifique Personnel Chercheur hors IPA encadré pour une formation post-graduée dans le cadre du projet. Thèses d’Etat :8 Thèse de Magister : 1 Services et laboratoires de Diagnostic et Recherche 147 Institut Pasteur d’Algérie 148 Services et laboratoires de Diagnostic et Recherche Rapport d’Activité 2008 Rapport d’Activité 2008 Institut Pasteur d’Algérie Laboratoire VIH et Rétrovirus Chef du laboratoire : Salima BOUZEGHOUB (DM/ MA INESSM) Le laboratoire VIH et Rétrovirus, est le Laboratoire National de Référence de l'infection VIH/sida. Son rôle est d'assurer les activités suivantes : • Le diagnostic et le suivi biologique de l'infection VIH • La notification de tous les cas positifs à l'infection VIH et leur déclaration aux autorités nationales (Ministère de la Santé et l'INSP). • Le contrôle qualité des trousses de réactifs et de nouvelles méthodes de diagnostic. • La formation du personnel de laboratoire chargé du diagnostic de l'infection VIH et d'étudiants en graduation ou en post-graduation. • La recherche scientifique : Mise en place de la technique de typage des souches et de la technique d’étude des résistances aux antirétroviraux (génotypage). I. ACTIVITE DE DIAGNOSTIC - Le laboratoire a reçu pour l’année 2008 : 2044 prélèvements de sang pour le test de dépistage : parmi eux 09 sérums trouvés positifs. 958 prélèvements de sang pour le test de confirmation : parmi eux 636 trouvés positifs. Donc au total, sur 3002 sérums reçus durant l’année 2008, on a diagnostiqué 645 sérums positifs. Les différents tests sérologiques immunochromatographie, MEIA. utilisés : Elisa, Western-Blot, - Le laboratoire a reçu 243 prélèvements sanguins pour la mesure de la charge virale VIH. L’analyse s’est faite sur le Cobas Amplicor et aussi sur un nouvel appareil de PCR en temps réel qu’on a reçu cette année dans le service de virologie. 1. Activité de Notification : On a notifié pour l’année 2008 : du 01 janvier au 31 décembre 2008 : • 060 nouveaux cas de sida • 585 nouveaux cas de séropositifs Ainsi le total cumulatif de 1985 au 31 décembre 2008 : 897 cas de sida et 3495 cas de séropositifs. La déclaration de ces cas d’infection VIH se fait au prés du Ministère de la santé et de la réforme hospitalière, et à l’INSP. Il faut préciser que ces chiffres ne sont pas représentatifs de la situation réelle de l’infection VIH mais juste une estimation globale a cause de la sous-notification du nombre de cas lié à la défaillance du système de surveillance de l’infection VIH en Algérie. Services et laboratoires de Diagnostic et Recherche 149 Rapport d’Activité 2008 Institut Pasteur d’Algérie 2. Activité de contrôle qualité : Le laboratoire assure le contrôle des kits (trousses de réactifs) à usage diagnostic et qui sont distribués par l’IPA. Les différents kits reçus sont les suivants : Nom du Kit Nombre Murex HIV 1-2-1 Abbott Murex HIV 1-2-0 Abbott Integral II HIV 1/2 Dade Behring N° de lot 02 L124110, L211510 03 L144310, L195010, L211610 01 37372 II. ACTIVITE DE FORMATION a) Formation des résidents en microbiologie au sein du laboratoire Nous avons reçu 13 résidents en Microbiologie (Faculté de Médecine d’Alger), pour une formation pratique des techniques virologiques pour le diagnostic de l’infection VIH. Le stage a duré 01 mois. b) Ateliers de formation portant sur les techniques de dépistage de l’infection VIH. • Organisation d’un atelier de formation pratique de type recyclage sur les tests de dépistage de l’infection VIH (Test ELISA, Test rapide) destiné à 20 techniciens supérieurs de laboratoire provenant des secteurs sanitaires de 12 wilayas. Lieu : Institut pasteur .Annexe Sidi-Fredj du 24 au 28 Mai 2008. Cet atelier rentre dans le cadre du programme de formation des techniciens supérieurs travaillants dans les Centres de dépistages volontaires (CDV) et organisé par le Ministère de la Santé et de la réforme hospitalière. c) Réalisation de mémoire : Nom des étudiants Origine Intitulé du mémoire Promoteur encadreur DERMOUCHE F. Zohra DJERIDI houssein DJERROUD saida Faculté des sciences biologiques USTHB Apport des tests rapides dans le diagnostic de l’infection VIH BOUZEGHOUB salima CHEROUF abdelhak 150 Services et laboratoires de Diagnostic et Recherche Rapport d’Activité 2008 Institut Pasteur d’Algérie d) Enseignement : Nom de l'enseignant Lieu de l'enseignement Destinataires Type d'enseignement Dr. BOUZEGHOUB Faculté de Médecine Alger Résidents en Microbiologie Etudiants en Médecine Cours de Virologie Planchages e) Thèse de doctorat en sciences médicales (DESM) en cours : Dr S. BOUZEGHOUB est inscrite en thèse. Intitulé du sujet de thèse : Etude virologique des patients infectés par le VIH en Algérie. Directeur de thèse : Pr E. BELABBES III. AUTRES ACTIVITES SCIENTIFIQUES a) Participation du LNR, représenté par le Dr Bouzeghoub, à la 5éme réunion du réseau régional de laboratoire de santé publique VIH/Sida qui s’est déroulée à Dakar, Sénégal, du 23 au 25 Septembre 2008. L’objectif général de l’atelier est de renforcer les capacités du réseau régional VIH/Sida. Les objectifs spécifiques de la réunion sont : - Revoir le statut de la mise en œuvre des recommandations de la 4 éme réunion - Revoir le statut présent et la gestion des services de laboratoire VIH - Proposer des solutions pour maintenir la qualité et un support diagnostique fiable pour les programmes VIH. b) Participation aux réunions de travail pour la mise en œuvre de la stratégie nationale de la prévention de la transmission mère-enfant du VIH (PTME) organisé par la direction de la prévention au Ministère de la santé et de la réforme hospitalière en collaboration avec l’UNICEF. Le lancement du programme est prévu pour Avril 2009. IV. PUBLICATIONS ET COMMUNICATIONS a) Publication : Salima BOUZEGHOUB, Valerie JAUVIN, Patricia PINSON, Marie Helene SCHRIVE, Anne Cecile JEANNOT, Achour AMRANE, Bernard MASQUELIER, El Hadj Belabbes, and Hervé J.Fleury. First observation of HIV-1 drug resistance mutation in Algeria. AIDS Research and Human Retroviruses. Volume 24, Number 11, 2008. Services et laboratoires de Diagnostic et Recherche 151 Institut Pasteur d’Algérie Rapport d’Activité 2008 b) Communications : Salima BOUZEGHOUB Expérience de l’Algérie dans l’extension des services de laboratoires de dépistage et de suivi des patients en milieu à faible prévalence VIH. 5éme réunion du réseau régional de laboratoire de santé publique VIH/Sida. DAKAR, SENEGAL, 23-25 Septembre 2008. Salima BOUZEGHOUB Les bonnes pratiques et les difficultés à surmonter lors du diagnostic sérologique des porteurs de VIH. Journée scientifique VIH/Sida : Association Algérienne pour la Planification Familiale Institut Pasteur d’Algérie. Sidi-Fredj. 24 décembre 2008. 152 Services et laboratoires de Diagnostic et Recherche Rapport d’Activité 2008 Institut Pasteur d’Algérie Laboratoire de la grippe et autres virus respiratoires Chef de laboratoire : Fawzi Derrar (DM/Assistant en Microbiologie) INTRODUCTION Bien qu’habituellement considérée comme banale et bénigne, la grippe peut se révéler redoutable, à titre individuel chez les sujets affaiblis et à l'échelon communautaire,à l'occasion de l'émergence de nouveaux virus tels que le H5N1 ou le H9 ou comme actuellement lors d’épidémies aviaires massives qui s’accompagnent de cas humains, encore rares, mais souvent mortels. Ces caractéristiques épidémiologiques sont une originalité de la grippe, due au pouvoir de variation de ces virus, et justifie l’existence d'une surveillance mondiale, à laquelle participe l’Algérie à travers son Réseau Sentinelle GROG.. Cette activité a été officiellement reconnue par l’OMS en 2005, qui a inclus l’Institut Pasteur d’Algérie dans le réseau mondial des centres nationaux pour la grippe et récemment comme Laboratoire régional pour l’OMS/AFRO. Le laboratoire a comme objectifs principaux : - Diagnostic des infections respiratoires - Formation - Santé publique : investigation d’épidémies et surveillance de la circulation des virus grippaux - Recherche et assurance qualité. I. ACTIVITES DE DIAGNOSTIC 1. Grippe : Nombre de prélèvements (écouvillonnage naso-pharyngé) Nombre de positifs Sous-types A(H1N1) Type B 457 41 68 17 * Notons que 07 souches H1N1 sont résistantes à l’Oseltamivir 2. Virus respiratoire syncytial (VRS) : Nombre de prélèvements (aspirations nasopharyngées) Nombre de positifs Typage (par RTPCR) VRS type A Typage (par RTPCR) VRS type B Génotypage (Protéine G) 20 20 18 2 G2a * Le génotypage a été effectué par un laboratoire tiers. Services et laboratoires de Diagnostic et Recherche 153 Institut Pasteur d’Algérie Rapport d’Activité 2008 II. SANTE PUBLIQUE Le laboratoire a été érigé en laboratoire de référence OMS pour la surveillance de la circulation des virus grippaux. A travers le réseau GROG, le Laboratoire en collaboration avec l’institut national de santé publique sert d’appui et de conseil pour la tutelle afin de mettre en place un système de surveillance actif. Il permet aussi de donner un aperçu sur l’adéquation des souches virales circulantes comparativement aux souches vaccinales annuelles. Dans le cadre de la préparation à une pandémie de grippe d’origine aviaire, le laboratoire fait partie du comité national multisectoriel de veille et de lutte contre la grippe aviaire crée par arrêté ministériel et présidé par le Ministre de la Santé, de la population, et de la réforme hospitalière, Des réunions sont programmées pour débattre la situation internationale et discuter des problèmes d’opérationnalisme du plan national. Quatre réunions de réseau sentinelle ont eu lieu durant l’année 2008, deux à Alger, une à Constantine, et une à Oran ; l’objectif principal étant d’évaluer les activités des médecins et pédiatres du réseau et écouter les problèmes posés sur le terrain. III. ASSURANCE QUALITE Le Laboratoire de la grippe participe au projet WHO/EQAP (external quality assessment Project) pour la détection des virus grippaux de type A. Le projet porte sur la detection des sous-types H1,H3,H5 sur 10 échantillons constitués d’ARN du virus grippal à identifier et envoyés tous les 06 mois par le Laboratoire OMS de HONGKONG (Février et septembre) Le laboratoire s’active aussi à mettre en place des procédures standard écrites. IV. ACTIVITE DE RECHERCHE 1) Entretien de la banque cellulaire qui contient 06 lignées cellulaires et tester la sensibilité cellulaire des cellules MDCK en utilisant les souches de référence du virus grippal. 2) Recherche des virus grippaux dans l’environnement : en attente d’intégration dans le projet RIVER de l’union européenne. 3) Etude comparative de la technique fluorométrique et de Chimiluminescence pour la détection de la résistance des virus grippaux de sous type H1N1. IV. Publications et formations : 1. Publications - F. DERRAR, R. BOUGUEDOUR, A. BOUGUERMOUH Grippe : aspects virologiques. Revue Medico-Pharmaceutique - IIème Rapport du réseau de surveillance de la Grippe 2007-2008 154 Services et laboratoires de Diagnostic et Recherche Institut Pasteur d’Algérie Rapport d’Activité 2008 2. Communications : F. DERRAR Antiviraux utilisé contre la Grippe Journée de clôture du réseau GROG. El AURASSI 03 juillet 2008 V. FORMATION - Le Dr DERRAR a participé au Cours de virologie systématique de l’Institut Pasteur de Paris durant la période du 07 avril au 25 juin 2008 - Melle AIT-AISSA a effectué un stage sur « la sensibilté des virus grippaux aux Inhibiteurs de la Neuraminidase par technique fluorométrique » au Centre Mondial de la Grippe à Londres (Angleterre) durant la période allant du 20 novembre au 05 décembre 2008. Services et laboratoires de Diagnostic et Recherche 155 Institut Pasteur d’Algérie 156 Services et laboratoires de Diagnostic et Recherche Rapport d’Activité 2008 Rapport d’Activité 2008 Institut Pasteur d’Algérie Laboratoire des Hépatites Virales Chef de laboratoire : Aicha BENSALEM (DM/ M.A./ INESSM) Le laboratoire des hépatites virales assure le diagnostic des hépatites virales A, B et C ; les prélèvements sont envoyés par les 48 wilayas de l’Algérie pour les confirmations, le sérotypage, le génotypage, la PCR qualitative et/ou quantitative dans le cadre des bilans pré thérapeutiques et du suivi des patients infectés par le VHB et le VHC et les patients traités par les antiviraux. I. ACTIVITE DE DIAGNOSTIC C’est l’activité principale du laboratoire. Les prélèvements nous proviennent des CHU, EPH, EPSP, SEMEP, centres de dialyse publique et privé et les laboratoires d’analyses médicales privés pour confirmation. Pour l’année 2008 nous avons reçu 14 476 prélèvements. 1. UNITE DE SEROLOGIE : Sérologie de l’hépatite virale B Résultats négatifs Résultas positifis Nombre de tests réalisés AgHbs 2556 8517 11073 AgHbe 1895 298 2193 Ac anti Hbc 5891 2994 8885 Ac anti Hbe 651 2336 6987 Ac anti Hbs 4594 1218 5812 Ac anti Hbc IgM 442 34 476 Marqueurs Sérologie de L’hépatite Virale C Test efféctué Résultats négatifs Résultas positifis Nombre de tests réalisés 3710 3290 7000 Ac anti VHC Test efféctué Résultats négatifs Résultas positifis Résultats indétérminés Nombre de tests réalisés Immuno blot 633 311 316 1300 Services et laboratoires de Diagnostic et Recherche 157 Rapport d’Activité 2008 Institut Pasteur d’Algérie Test efféctué Typables Non typables Nombre de tests réalisés SEROTYPAGE VHC 638 322 960 Sérologie de L’hépatite virale A marqueur Résultats négatifs Résultats positifs Nombre de tests réalisés IgM VHA 465 161 626 Techniques utilisées : EIA et MEIA 2. UNITE DE BIOLOGIE MOLECULAIRE : Test demande Résultats positifs Résultats négatifs Zone grise nombre de tests réalisés 478 399 93 970 PCR QUALITATIVE ARN-VHC QUANTIFICATION DE LA CHARGE VIRALE : TEST DEMANDE CHARGE VIRALE DNA-VHB CHARGE VIRALE RNA-VHC PCR quantitative classique par Cobas Ampli cor 1095 920 PCR en temps réel CAP/CTM 200 192 Total tests réalisés 1295 1112 NOMBRE DE TESTS DE GENOTYPAGE VHC EFFECTUES : 180 TESTS II. ASSURANCE QUALITE Contrôle de qualité externe Le Système Régional d’Evaluation Externe de la Qualité (S.R.E.E.Q) : selon les directives de l’OMS (HQ et AFRO), un panel de 10 échantillons de plasma, numérotés de 1 à 10, tous provenant de donneurs de sang nous a été adressé pour contrôle sérologique de l’hépatite virale B. Ils sont caractérisés et pré testés selon le protocole recommandé par l’OMS et ils ont été distribué à 18 laboratoires francophones. Nos résultats étaient à 100% concordants. 158 Services et laboratoires de Diagnostic et Recherche Rapport d’Activité 2008 Institut Pasteur d’Algérie Contrôle de trousses de réactifs Nous réalisons le contrôle des trousses de réactifs (kits) de la sérologie de chaque nouveau lot avant sa commercialisation par l’IPA. Trousses contrôlées durant l’année 2008 : NOM DES KITS NOMBRE MUREX Ag Hbs (ABBOTT)480 tests 08 Enzygnost Ag Hbs 96 tests 02 (DAD BEHRING) MUREX Ac anti VHC 480 tests (ABBOTT) 05 MUREX Ac anti VHC 96 tests (ABBOTT) 01 INNOTEST Ac anti VHC 96 tests(Innogenetics) 04 TOTAL 20 Expertise de dérivés sanguins stables Conformément à la décision n°5 du 29 juillet 2008. Nous avons repris l’expertise des dérivés sanguins stables qui nous sont adressés par l’Agence Nationale du Sang avant leurs commercialisations. NOMBRE DE PRODUITS CONTROLES DESIGNATION Vaccin anti D 05 ERYTHROPOIETINE HUMAINE RECOMBINANTE 07 FACTEUR IX 04 ALBUMINE HUMAINE 20% 18 FACTEUR VIII 03 INTERFERON 1 a 05 IMMUNOGLOBULINE HUMAINE NORMALE 04 TOTAL 46 III. ACTIVITE DE SANTE PUBLIQUE Dans le cadre du programme nationale de lutte contre les hépatites virales B et C trois enquêtes sérologiques ont été réalisées au sein de notre laboratoire. • Enquête nationale chez les hémodialysés de juin 2007 à mai 2008, Le nombre de prélèvements reçus 7502 sérums. • Une deuxième enquête a été réalisé en mai : le nombre de prélèvements 3000 sérums. • La troisième enquête en juin 2008 : nombre de prélèvements 285 sérums. Services et laboratoires de Diagnostic et Recherche 159 Institut Pasteur d’Algérie Rapport d’Activité 2008 IV. ACTIVITE DE FORMATION Au sein de l’IPA • Etant intérimaire du Dr BOUZEGHOUB, nous avons organisé du 24 au 28 mai 2008 la formation d’une trentaine de techniciens supérieurs et de biologistes des différents centres de dépistage volontaire (CDV) du VIH sur demande du Ministère de la santé, de la population et de la réforme hospitalière. La formation était assurée par Dr BENSALEM (IPA laboratoire des Hépatites virales) et Dr MOHAMMEDI (EHS ELHEDI FLICI laboratoire central) Mr CHERROUF et Mr TAMOURT OMAR (IPA LNR/VIH). • Du 7 au 9 septembre 2008, nous avons reçu au sein du laboratoire des hépatites virales Mr KOENRAAD EYEKEN (ABBOTT Molecular) pour la formation du personnel sur la PCR en temps réel m2000 (Abbott), a bénéficié de cette formation : Du laboratoire des hépatites virales : Dr BENSALEM, Melle IGUER, Melle MOSTEFAOUI, Melle TARFANI, Mme HAMMA et Mr KERIOUI. Du LNR/VIH: Dr BOUZEGHOUB, Mr CHERROUF, Mr TAMOURT. Du laboratoire Virus et cancers: Mr BANDOUI. • DU 27 au 29 octobre 2008, nous avons organisé un workshop avec le laboratoire Roche Diagnostics intitulé : PCR en temps réel et typage moléculaire ; avaient participé à cette manifestation soixante dix personnes des différentes régions du pays entre Chef de service, médecins spécialistes, biologistes et techniciens de laboratoire … • Les conférences ont eux lieu les matinées à la salle de cours de l’annexe de Sidi Fredj et les ateliers pratiques les après-midi entre la salle de TP et le laboratoire des hépatites virales. • Sur demande du MSPRH, dans le cadre du programme de lutte contre les hépatites virales B et C et dans le but d’installer des PCR en temps réel au niveau des CDR dans les différentes régions du pays ; des médecins spécialistes en biologie et des biologistes de l’IPA Constantine, l’IPA M’sila, l’IPA Oran et l’EPH Tamanrasset ont suivi la formation de biologie moléculaire durant la période du 27 au 29 octobre 2008. • Formation des résidents de microbiologie : Durant cette année nous avons reçu 14 résidents de la Faculté d’Alger, Batna et Annaba. La durée du stage pratique au niveau du laboratoire des hépatites virales est de quatre semaines. Personnel encadreur : Dr BENSALEM, Melle IGUER, Melle MOSTEFAOUI, Melle TARFANI, Mme HAMMA et Mr KERIOUI. • Recyclage : nous avons reçu quatre stagiaires du Centre de Transfusion Sanguine de Constantine (CTS) et une stagiaire de Djelfa pour une durée d’une semaine. Encadrement : Dr BENSALEM, Melle MOSTEFAOUI. 160 Services et laboratoires de Diagnostic et Recherche Rapport d’Activité 2008 Institut Pasteur d’Algérie Hors IPA : ENSEIGNEMENT Nom de l’enseignant Dr A.BENSALEM Lieu de l’enseignement Faculté de médecine d’Alger Destinataires Etudiants en médecine Résidents en microbiologie Type d’enseignement Cours de virologie Cours de bactériologie Planchâges de virologie Services et laboratoires de Diagnostic et Recherche 161 Institut Pasteur d’Algérie 162 Services et laboratoires de Diagnostic et Recherche Rapport d’Activité 2008 Rapport d’Activité 2008 Institut Pasteur d’Algérie Laboratoire des virus et cancers Chef de laboratoire : Abdelmadjid Bouguermouh (Professeur) Le laboratoire comprend trois unités : Herpetovirudae Papillomaviridae et Polyomaviridae Maladies émergentes et réemergentes INTRODUCTION Le diagnostic a pu être assuré normalement cette année. Les activités de recherche ont connu un ralentissement. Les projets financés dans le cadre de la coopération inter universitaire Algéro- Française et par l’ANDRS arrivent à leur terme. Le laboratoire n’a pas en outre été en mesure d’accueillir des doctorants qui apportent une aide appréciable à ces activités. Des bilans ont été rédigés à la demande du ministère de la santé, de l’enseignement supérieur et de l’ANDRS. Des projets nouveaux ont été élaborés. Dans ce rapport seront présentés : 1. Les activités de diagnostic : Des Herpesvirus : Herpes simple 1 et 2 (HSV1 et HSV2) - Varicelle – zona (VZ) - Cytomégalovirus (CMV) - Epstein – Barr Virus (EBV) Des Papillomavirus : HPV - Des Polyomavirus Des Arbovirus : - West Nile (WN) - Dengue - Fièvre vallée du Rift (RVF) Des Hantavirus De la Syphilis Services et laboratoires de Diagnostic et Recherche 163 Rapport d’Activité 2008 Institut Pasteur d’Algérie 2. Les Activités de recherche : L’EBV et pathologies associées (Principalement le cancer du nasopharynx (NPC) Le papillomavirus et pathologies associées - Cancer et lésions précancéreuses du col de l’utérus - Cancer du sein La mise en place d’un réseau West Nile 3. Une enquête effectuée sur une épidémie de glomérulonéphrite aiguë survenue à Sétif au mois de septembre-octobre 2008. 4. Le contrôle des réactifs syphilis 5. Les activités de formation et d’enseignement Les thèses en cours de réalisation I. ACTIVITES DE DIAGNOSTIC ¾ SEROLOGIE : Herpes virus : Herpes simple (HSV), Varicelle-Zona (VZV), Cytomégalovirus CMV). - Recherche des IgM par Test ELISA (herpés simple (HSV) Virus Nombre de sérums Nombre de Positifs CMV 1502 86 HSV 0637 16 VZV 0090 04 - Recherche des IgG par le test ELISA pour les greffés (Hémodialysé) Virus Nombre de sérums Nombre de Positifs CMV 304 291 HSV 188 181 VZV 007 003 164 Services et laboratoires de Diagnostic et Recherche Rapport d’Activité 2008 Institut Pasteur d’Algérie - Test d’avidité Nombre de prélèvements Test d’avidité Forte avidité Faible avidité IgG (CMV) 200 160 40 IgG (VZV) 10 07 03 Diagnostic de l’EBV et des pathologies associées : - Nombre de prélèvements effectués par la technique EIA Marqueurs recherchés Nombre d’analyses effectuées IgM anti VCA 818 IgG anti VCA 399 IgG anti EBNA 953 Avidité 114 - Nombre de prélèvements effectués par la technique Immunofluorescence indirect (IFI) Marqueurs recherchés Nombre d’analyses effectuées IgM anti VCA 726 IgG anti VCA 23 IgG anti EA 210 Diagnostic de la syphilis : Antigènes Nombre de sérums Nombre de Positifs TPHA 1859 178 VDRL 1859 060 - Sérologie quantitative du TPHA pour le suivi du traitement : 82 sérums. Services et laboratoires de Diagnostic et Recherche 165 Rapport d’Activité 2008 Institut Pasteur d’Algérie ¾ DIAGNOSTIC MOLECULAIRE : Diagnostic du papillomavirus humain: Nombre d’analyses effectuées Nombre de positifs Hybridation Capture II 268 13 Amplification génique (PCR) Amplicor -Roche- 176 7 Techniques utilisées Diagnostic d’une méningite à liquide clair Herpetoviriridae par PCR LCR : herpes simple, varicelle –zona, cytomégalovirus, EBV : négat II. ACTIVITES DE RECHERCHE ¾ Trois projets arrivent à leur terme : - Un projet interuniversitaire algéro-français CMEP Tassili (A. BOUGUERMOUH (IPA) T. OOKA (Lyon) - Deux projets ANDRS : responsable respectivement H. MELOULI (IPA), A. KHENCHOUCHE (Université de Sétif). ¾ Un projet algéro-français INSERM se poursuit. Responsables : A. BOUGUERMOUH, H MELOULI (IPA) B. MARIAME (Toulouse) ¾ Deux projets acceptés mais non encore financés : - Projet « West-Nile » ANDRS : mise en place d’un réseau portant sur l’étude des arbovirus - projet dépistage HPV piloté par la direction de la population du ministère de la Santé ¾ Deux projets doivent être soumis à l’ANDRS en 2009 (H. MELOULI et N. SADOUKI (IPA)) Projets arrivés à terme 1er projet Projet CMEP Tassili interuniversitaire Algéro-Français : portant sur le virus Epstein Barr et cancers associés chez l’enfant et le jeune adulte. Un bilan des résultats a été dressé lors d’un colloque d’évaluation et de prospection du programme organisé à Alger pour les 25 ans de coopération interuniversitaire algéro-française. La partie scientifique de ce bilan fera l’objet d’une publication à soumettre aux archives de l’IPA. Le laboratoire virus et cancers a bénéficié de trois projets CMEP-Tassili au cours des 20 dernières années : 91 MDU 181, 95 MDU 319 et 05 MDU 663. Les principaux résultats ont été signalés dans les différents rapports annuels de l’IPA. 166 Services et laboratoires de Diagnostic et Recherche Rapport d’Activité 2008 Institut Pasteur d’Algérie Résumé très succinct de ce bilan : L’incidence du cancer du nasopharynx (NPC) est intermédiaire au Maghreb (3,5 à 10 pour 100.000 habitants) avec une atteinte de deux tranches d’âge 10-24 ans et 40-60 ans. Le virus d’Epstein-Barr est retrouvé dans 100% des cas associés à cette tumeur. Il est également mis en évidence à un taux moins élevé dans les lymphomes Hodgkiniens (LHD) et non Hodgkiniens (LNHD) à des âges inférieurs à 10 ans. Cette collaboration s’est traduite par des résultats portant sur: - Un transfert technologique Nord-Sud - L’étude : Du virus EBV, de ses gènes et des proto-oncogènes De la réponse de l’hôte selon l’âge des patients. 1. Transfert technologique : Des techniques de biologie moléculaire ont été transférées au laboratoire de virologie de l’Institut Pasteur d’Algérie (IPA). Elles ont servi principalement à l’étude de l’EBV et du HPV. De nombreux laboratoires algériens ont par ailleurs bénéficié de ces technologies dans le cadre de stages au niveau de l’annexe de Sidi Fredj. 2. Etude du Virus Des résultats obtenus dans le cadre des différents projets de coopération ont permis de mettre en évidence : ¾ Le polymorphisme du virus avec : - Une co-infection par deux types de virus portant les gènes EBNA 2A et EBNA 2B chez les enfants et jeunes adultes atteints de lymphomes : LHD et LNHD. Seul le virus portant le gène EBNA 2A est retrouvé, comme en Chine, dans les biopsies du NPC. - Des différences au niveau génomique entre les souches virales identifiées à partir de NPC chinois et algériens. - Des différences génomiques entre les souches virales présentes dans la tumeur et les lymphocytes d’un même patient. - Aucune différence notable n’a été observée dans le polymorphisme viral et dans les proto-oncogènes entre les deux tranches d’âge. ¾ L’expression intéressante de certains gènes viraux : - L’expression des gènes précoces BZLF1, BARF1, BGLF5, et d’un gène tardif BALF4. Les résultats ont mis en évidence pour la première fois dans des cellules tumorales provenant de biopsies fraîches et de tumeurs induites par les cellules transplantées l’expression d’une DNase-EBV fonctionnelle bien distincte d’une DNase cellulaire (Sbih-Lammali et al : Arch. IPA 2008) - Une expression transcriptionnelle BALF1 du activité transformante probable chez la souris. virus d’Epstein-Barr avec Services et laboratoires de Diagnostic et Recherche 167 Institut Pasteur d’Algérie Rapport d’Activité 2008 ¾ Les études dans le cadre de la collaboration franco-algérienne ont porté principalement sur l’expression des gènes BARF1 et LMP1. Des résultats originaux indiquent la présence de protéines LMP1 et BARF1 dans le sérum de patients en particulier chez les jeunes enfants et les jeunes adultes. Ces protéines pourraient jouer un rôle crucial dans l’activité cellulaire et l’immuno-modulation. Elles sont de bonnes candidates pour le diagnostic et le suivi du NPC. 3. Réponse de l’hôte : Nous avons mis en évidence pour la première fois une différence de la réponse de l’hôte en fonction de l’âge. Les IgA anti VCA et EA sont décelées chez très peu d’enfants atteints de NPC par rapport aux adultes atteints de la même maladie (31.2% contre 93.3%). Cette insuffisance d’IgA anti VCA et anti EA ne correspond pas à un déficit global des IgA chez les patients. Les IgA anti DNase sont présentes chez plus de 95% des enfants. Elles ne sont présentes que chez 3% des sujets sains. (Meister babiċ et all Arch. IPA 2008) Des anticorps anti BARF1 ont été retrouvés dans 100% des cas chez les patients atteints de NPC et de Cancer gastrique. Un test de diagnostic et de suivi de la tumeur par la recherche de ces anticorps absents chez le sujet sain. 2ème projet Projet ANDRS : Intitulé du projet : Association du papillomavirus humain avec le cancer du sein chez la femme Code du projet : 02/02/03/04/199 MELOULI Hamid (Responsable de projet), A. BOUGUERMOUH, F. ZIDOUNI TAIBI, S. DAHMANI, N. SADOUKI, D. BANDOUI, F. HARROUZ, M. AFIANE, K. BOUZID, M. ARDJOUN, N. TERKI, N. DEKKAR Parmi les objectifs fixés pour la troisième année du projet, nous avons effectué un travail portant sur l’expression de deux protéines (p21WAF1/Cip1 et p27KIP1) qui inhibe l’activité de plusieurs complexes cycline/cdks et bloque la progression du cycle cellulaire. L’évaluation de l’expression des protéines p21WAF1/Cip1 et p27KIP1 a été réalisée par immunohistochimie EnVision+ de Dako. Nous avons utilisé l’anticorps monoclonal anti p21WAF1/Cip1 /IgG2b isotype et l’anticorps monoclonal p27KIP1 (mouse IgG1 isotype). Nos résultats seront publiés et discuter dans les prochaines archives de l’IPA. 3ème projet Projet ANDRS : Etude de l’association HPV-EBV au niveau du cancer du col de l’utérus : Responsable du projet : Khenchouche Abdelhalim (Université de Sétif). Chercheurs associés : SADOUKI Nabila, MELOULI Hamid, BOUGUERMOUH Abdelmadjid IPA), GRABA Abdelaziz (CPMC), OOka Tadamasa La possible association du virus Epstein-Barr (EBV) et du papillomavius HPV) a déjà été signalée par quelques laboratoires dont le notre. La présence fréquente de l’EBV au niveau du col n’est pas admise par tous. 168 Services et laboratoires de Diagnostic et Recherche Rapport d’Activité 2008 Institut Pasteur d’Algérie Le rôle éventuel de cette association dans les mécanismes intervenant dans la transformation des cellules épithéliales en cellules malignes reste à préciser. 58 biopsies de tumeur maligne du col, 37 frottis au niveau de lésions précancéreuses du col, et 14 frottis chez des femmes ne présentant aucune lésion génitale ont été étudiées. Différents marqueurs EBV ont été recherchés par PCR ; RT-PCR, Immunoblot, Immunohistochimie. Le HPV a été détecté par PCR et par la technique d’hybridation-capture. Les marqueurs EBV ont été mis en évidence bien plus fréquemment chez les patientes porteuses de tumeur maligne que chez les femmes en bonne santé. Une publication des résultats a été soumise à une revue internationale. Projet en activité Projet en coopération internationale COOPERATION FRANCO - ALGÉRIENNE EN RECHERCHE MEDICALE, ACCORD Inserm / DPGRF projet 2007 – 2008 MARIAME Bernard Centre de Physiopathologie Toulouse Purpan U563 de INSERM BOUGUERMOUH A, H. MELOULI, F. ZIDOUNI TAIBI, S. DAHMANI, N. SADOUKI, D. BANDOUI, F. HARROUZ, D. DJENNAOUI, M. EL HADJENE Objectifs et résultats préliminaires du projet La quasi-totalité des sujets sont infectés par le virus Epstein-Barr (EBV), mais seule une minorité est susceptible de développer un cancer. Nous ne savons pas si cette situation reflète l’existence de sujets à risque ou bien de souches EBV particulièrement tumorigènes. Si cette dernière hypothèse semble la plus plausible, elle ne pourra être affirmée que dans les pathologies tumorales étroitement associées à l’EBV tel que le carcinome du nasopharynx (NPC) avec une souche EBV qui pourrait être différente des souches présentes dans d’autres sites non pathologiques du même patient. Pour vérifier cette hypothèse, nous avons comparé le gène BNLF1 de la souche EBV présente dans la tumeur et dans le lymphocyte réservoir de patients algériens porteurs d’un NPC. Nos résultats montrent que tous les patients sont infectés par plus d’une souche EBV. Lymphocytes et les cellules tumorales du même individu sont systématiquement infectés par des souches virales différentes. Une publication en préparation doit présenter des résultats préliminaires. Un atelier de biologie moléculaire à l’attention de 12 scientifiques de l’IPA, avec travaux de laboratoire, est prévu au mois de mai 2009 dans le cadre de ce projet.(organisateurs ; H. MELOULI-B. MARIAME). Projets acceptés avec promesse de financement : - 1er projet : mise en place d’un réseau pluridisciplinaire dit « West-Nile » avec comme objectif l’étude des différents facteurs susceptibles d’intervenir dans l’apparition d’une arbovirose en Algérie et des moyens de contrôle de l’infection. Ce projet réunit des infectiologues, des entomologistes, des ornitologues, des épidémiologistes, des vétérinaires, des virologues. L’étude est prévue dans des zones de l’Est algérien, à Djanet et à Timimoun. Services et laboratoires de Diagnostic et Recherche 169 Institut Pasteur d’Algérie Rapport d’Activité 2008 Une mise au point de la situation des arboviroses en Algérie est présentée dans le numéro 48 de la revue Médicopharmaceutique paru en 2008. - 2ème projet : Détection du papillomavirus à haut risque dans la prévention du cancer du col de l’utérus : Ce projet piloté par la direction de la population a pour objectif l’étude de la faisabilité du dépistage du HPV à haut risque à l’échelle nationale. La mise en place de trois laboratoires dans l’est, l’ouest et le sud algérien est prévue le laboratoire de l’IPA servirait de référence. Il mènera en outre, en collaboration avec dex services de gynécologie, une étude permettant d’évaluer l’intérêt et la possibilité d’instituer en Algérie la détection du HPV en dépistage primaire dans les lésions précancéreuses du col. (A. BOUGUERMOUH cherraga 2008) Le support financier d’une organisation internationale est attendu. Projets à soumettre à l’ANDRS Deux projets portant sur des gènes EBV et HPV pilotés respectivement par H. MELOULI et N. SADOUKI doivent être soumis à l’ANDRS Ces projets s’effectuent actuellement difficilement en raison de manque de réactifs. Une publication portant sur le génotypage du HPV a paru dans les archives de l’IPA en 2008 (N. SADOUKI et al). Des résultats portant sur les marqueurs de l’EBV ont été présentés aux journées nationales ORL d’Annaba (H. MELOULI 2008) III. ENQUETE EPIDEMIOLOGIQUE Epidémie de néphropathie aiguë à Sétif (Aout 2008) Réception de 45 sérums prélevés chez 22 patients atteints de glomérulonéphrite aiguë. La clinique, l’évolution de la maladie sont en faveur d’une étiologie à Hantavirus. Les résultats sérologiques en faveur de cette étiologie ne sont pas significatifs de même que ceux obtenus avec les leptospiroses. Des rongeurs ont été capturés. L’étude doit se poursuivre. Cette épidémie rappelle celle de Sidi-Bel-Abbes dont les résultats sont présentés dans la revue Medicopharmaceutique (Souleimane A et al 2008). IV. CONTRÔLE DE REACTIFS Contrôle de réactifs destinés au diagnostic de la syphilis Test TPHA (Lorne) lot N°303027 Test TPHA (Sorodia) lot N°VN 71110 Test VDRL (Immutrep) lot N°7013117 Test VDRL (Immutrep) lot N°7013116 170 Services et laboratoires de Diagnostic et Recherche Rapport d’Activité 2008 Institut Pasteur d’Algérie V. FORMATIONS ET ENSEIGNEMENTS Thèses d’Etat en préparation MELOULI Hamid (IPA) Le cancer du nasopharynx chez l’enfant et le jeune adulte : étude de la réponse immunitaire du virus Epstein Barr et des proto-oncogènes dans les biopsies tumorales. Directeur de thèse : A. Bouguermouh. Z. Elkhebir Soutenance prévue en 2009 KHENCHOUCHE Abdel halim (université de Sétif) Etude du HPV et de son association possible avec l’Epstein Barr dans les lésions précancéreuses et cancéreuses du col de l’utérus. Directeur de thèse : A. Bouguermouh, T. OOKA Publication soumise à une revue internationale. La soutenance sera réalisée dés parution de l’article. Thèse de DESM EL HADJANE mohamed (Faculté de médecine. Alger) Approche immunologique du NPC en Algérie : implications cliniques et immunologique. Directeur de thèse : Pr D. DJENNAOUI (ORL). Soutenance de mémoire de DES réalisée Promoteur H. MELOULI Encadreur technique : F ZIDOUNI-TAIBI et DAHMANI Salma GUESSAB Sarah et ZERGOUG Fella (DES en biologie). Contribution à la mise au point des conditions de détections de la protéine LMP1 du virus Epstein-Barr par immunohistochimie (Application au diagnostic du cancer du nasopharynx). USTHB, Faculté des sciences biologiques. Département de biologie des populations et des organismes. 6 octobre 2008. Ces résultats feront l’objet d’une publication internationale. Formation Accueil au Laboratoire des herpes virus de deux stagiaires Monsieur BOUZELAL Fethi et KERKOUBA Mohamed de l’Université de Blida pour effectuer leurs manipulations dans le cadre da la préparation de leur mémoire de fin d’études Séjours en France de doctorants algériens H. MELOULI : LABORATOIRE DE PHYSIOPATHOLOGIE DE TOULOUSE PURPAN (UNITE 563) (B. MARIAME) : 11/12/08 au 12/02/09 Projet INSERM DGPRF N. SADOUKI : Laboratoire CNRS de Lyon (T. OOKA) Projet 05 MDU 663 : janvier 2008 K. HOUALI : Laboratoire CNRS Lyon (T. OOKA) projet 05 MDU 663 novembre-décembre 2008 M. l HADJANE Laboratoire CNRS de Lyon (T. OOKA) Projet 05 MDU 663 : mai 2008 Services et laboratoires de Diagnostic et Recherche 171 Institut Pasteur d’Algérie Rapport d’Activité 2008 Séjours à Alger d’experts dans le cadre de la collaboration scientifique Dr. T. OOKA : février (3 jours), décembre (2 jours) ! projet 05 MDU 663 Dr B. MARIAME (Toulouse), avril (3 jours) projet INSERM Dr. O. PATHEY (Paris) : projet réseau West-Nile. VI. PUBLICATIONS A. BOUGUERMOUH, I. BITAM, N. SADOUKI, R. BOUGUEDOUR: Maladies émergentes et réémergentes: revue générale. La Revue Médicopharmaceutique, 2008 48. 19-25. A. BOUGUERMOUH, Z. BOUSLAMA, I. BITAM, N. SADOUKI, R. BOUGUEDOUR : Ces arbovirus qui menacent l’Algérie. La Revue Médicopharmaceutique 2008 48 4652. A. SOULIMANE, A. MERBOUH, B. BOUTERFAS, A. BOUGUERMOUH, I. BITAM, K. BOUZID : A propos d’un épisode de néphropathie aigue épidémique à Sidi Bel Abbes en été 2007, orientation causales. La Revue Médicopharmaceutique, 2008 48. 53-57. A DERRAR, R. BOUGUEDOUR, A. BOUGUERMOUH. La grippe humaine et animale. La Revue Médicopharmaceutique, 2008 49. 15-21. V. COMMUNICATIONS N. SADOUKI, A. KHENCHOUCHE, H. MELOULI, A. BOUDRICHE, D. BANDOUI, F. HARROUZ, M. TIDADINI, G. AYACHE, A. GRABA, A. BOUGUERMOUH. Dépistage du papillomavirus (HPV) dans les lésions cancéreuses et précancéreuses du col de l’utérus au cours des vingt dernières années en Algérie. 1er Symposium International pour un Dépistage Optimal du Cancer du Col de l’Utérus en Algérie. - 30 octobre 2008. –Hôtel El AURASSI- Alger N. SADOUKI, A. BOUGUERMOUH HPV et Cancers de la sphère ORL Journées Nationales d’ORL - Faculté de Médecine d’Annaba 04 au 06/07/2008. H. MELOULI, F. ZIDOUNI TAIBI, S. DAHMANI, M. ELHADJANE, D. DJENNAOUI, A. BOUGUERMOUH : Apport des marqueurs sérologiques et moléculaires du virus Epstein-Barr dans le diagnostic du cancer du naso-pharyn Journées Nationales d’ORL - Faculté de Médecine d’Annaba 04 au 06/07/2008. A. BOUGUERMOUH, D. BACHA Rongeur et risques infectieux : introduction et revue générale. 3ème journées d’infectiologie de l’HCA – Alger 11 juin 2008. A. SOULLIMAN, A. MERBAH, A. BOUTERFAS, A. BITAM, A. BOUGUERMOUH, K. BENDISARI A propos de la néphropathie épidémique de 2007 de Sidi Bel Abbes : orientation causales. 3ème journée d’infectiologie de l’HCA - Alger 11 juin 2008 - 172 Services et laboratoires de Diagnostic et Recherche Institut Pasteur d’Algérie Rapport d’Activité 2008 A. BOUGUERMOUH, H. MELOULI, N. SADOUKI, F. TAIBI, K. HOUALI, H. KHENCHOUCHE, DJ. BANDOUI, F. HARROUZ (IPA), D. DJENNAOUI, M. EL HADJANE (ORL), K. BOUZID, M. AFIANE, T. OOKA Virus Epstein Barr et cancers associés : bilan d’une coopération interuniversitaire Algéro-Française (CMEP-Tassili). Alger 16/12/2008. A. BOUGUERMOUH, H. MELOULI, F. TAIBI, N. SADOUKI, M. EL HADJANE, D. DJENNAOUI (ORL), K. BOUZID, M. AFIANE, T. OOKA ET AL. Virus Epstein Barr et cancer du nasopharynx – Etude en Algérie. XXth congress international academy of pathology Arab division. Alger 24-26 Novembre 2008 A. BOUGUERMOUH, N. SADOUKI, A. BOUDRICHE, A. KHENCHOUCHE, R. SAADI, F. KEDDAD Apport de la détection du HPV à haut risque dans le dépistage du cancer du col. 4eme journées d’évaluation du programme international de dépistage du cancer du col de l’utérus. Direction de la population. Ministère de la santé. Cherraga 27-28 décembre 2008. Services et laboratoires de Diagnostic et Recherche 173 Institut Pasteur d’Algérie 174 Services et laboratoires de Diagnostic et Recherche Rapport d’Activité 2008 Activités des laboratoires de contrôle de qualité Institut Pasteur d’Algérie 176 Laboratoires de Contrôle de Qualité Rapport d’Activité 2008 Rapport d’Activité 2008 Institut Pasteur d’Algérie Laboratoire de Bactériologie des Aliments Chef de laboratoire : Fawzia MOUFFOK (Pharmacienne/ M.A. / INESSM). INTRODUCTION : L’activité au sein du laboratoire de Bactériologie des aliments est très diverse. Il s’agit de contrôler les aliments produits au sein des unités de production, donc les produits finis. L’objectif est de vérifier la conformité du produit à des critères microbiologiques. L’analyse consiste, en général, en la recherche des micro-organismes responsables d’altération qui regroupent les germes capables d’altérer la qualité marchande de l’aliment et les germes témoins de contamination fécale. Dans ce cas, une première opération très importante consiste à échantillonner le produit. Les produits importés subissent généralement le même type de contrôle mais leur échantillonnage s’effectue au port par les services vétérinaires officiels. Le deuxième type d’analyse consiste à mettre en évidence les germes suspects d’être à l’origine de toxi-infections alimentaires. L’analyse se limite à prendre en charge le plateau témoin et à rechercher les germes qui sont potentiellement pathogènes pour le consommateur. Le troisième type de contrôle touche les produits en cours de fabrication ou de préparation (cuisines) ou bien la vérification de l’état hygiénique des lieux de fabrication, de stockage. Pour ces produits des examens en cours de fabrication ou du produit fini sont intéressants et utiles dans un cadre préventif. En cas de problèmes, l’enquête a pour but de situer les contaminations quand elles existent et à envisager les moyens de les enrayer. Pour cela, une recherche de l’activité bactéricide des produits utilisés comme détergents ou désinfectants est effectuée. I. ACTIVITES DE DIAGNOSTIC Au cours de l’année 2008, le laboratoire de bactériologie des aliments a procédé à l’analyse bactériologique de produits divers dont la nature figure dans le tableau 1. L’examen de ces produits consiste en la recherche, le dénombrement et l’identification d’un certain nombre de paramètres (germes) spécifiques pour chaque type de prélèvements. Laboratoires de Contrôle de Qualité 177 Rapport d’Activité 2008 Institut Pasteur d’Algérie Tableau n°1 : Nature des denrées analysées 2008 Nature des produits Nombre Pourcentage Aliments de bétail 55 0,53 Bases désinfectantes 20 0.20 Conserves 427 4.16 Divers 701 6.82 Laits et Produits laitiers 7268 70,75 Plats cuisinés 267 2,60 Viande et Produits carnés 1534 15.0 10 272 100.00 TOTAL Sur les 10 272 produits, nous avons effectué la recherche des paramètres dont la répartition figure dans le tableau 2. Les recherches de Listera sont confiées au laboratoire des Listeria chargé de cette recherche. Tableau n°2 : Résultats selon les paramètres recherchés Paramètres recherchés Positifs Négatifs Total Anaérobies sulfito-réducteurs 0004 10248 10 252 Coliformes totaux 0188 9637 9825 Coliformes fécaux 0173 9652 9825 Germes aérobies mésophiles totaux 2081 8171 10 252 129 9696 9825 82 9743 9825 185 0015 200 Salmonella 01 9824 9825 Staphylocoques aureus 07 9818 9825 2850 76 804 79 654 Levures Moisissures Pseudomonas aéruginosa Totaux 178 Laboratoires de Contrôle de Qualité Rapport d’Activité 2008 Institut Pasteur d’Algérie Le tableau 3 ci-après, indique la répartition mensuelle des analyses effectuées par produit : Tableau n°3 : Répartition mensuelle des analyses effectuées au cours de l’année 2008 Nature Denrées Mois Bases Aliments désinfe Totaux Animaux ctantes Laits Divers Con serves Viandes Plats cuisinés Janvier 587 43 40 073 20 05 00 0768 Février 504 49 21 103 33 06 06 0722 Mars 743 68 27 128 25 05 13 1009 Avril 686 55 42 098 38 03 01 0923 Mai 724 44 25 125 20 01 00 0939 Juin 848 50 33 134 27 05 00 1097 Juillet 536 92 44 117 20 03 00 812 Août 662 67 36 185 18 04 00 0972 Septembre 497 33 51 171 00 04 00 0756 Octobre 578 72 44 124 26 03 00 0847 Novembre 386 68 50 186 19 07 00 0716 Décembre 517 60 14 090 21 09 00 0711 Totaux 7268 701 427 1534 267 55 20 10272 Le tableau 4 indique la qualité bactériologique des produits analysés. Tableau n°4 : Qualité bactériologique des produits contrôlés. Nature des produits BQB MQB Totaux Aliments de bétail 055 00 0055 Bases désinfectantes 020 00 0020 Conserves 0426 01 0427 Divers 0625 76 0701 Laits et Produits laitiers 7239 29 7268 Viandes et Produits carnés 1530 04 1534 Plats cuisinés 0169 98 0267 10 064 208 10272 Totaux Légende : - B Q B : Bonne qualité bactériologique M Q B : Mauvaise qualité bactériologique. Laboratoires de Contrôle de Qualité 179 Rapport d’Activité 2008 Institut Pasteur d’Algérie III. ACTIVITE DE FORMATION 1. Formation dispensée dans le laboratoire. (Mémoires de fin d’études et thèses de doctorat.) Nom Prénom de l’étudiant Organisme d’origine Niveau d’études Début formation Date de fin de formation Nature des travaux réalisés L. ASSOUS MS. ATROUZ ASSAM USTHB DES microbiologie Février 2008 Juillet 2008 Etude des ASR dans plats cuisinés en restauration collective F. MOUFFOK B. BOUDJELLAB F. CHENTLI L. LALLOUCHE USTHB DEUA Février 2008 Juillet 2008 Qualité bactériologique des plats cuisinés F. MOUFFOK H. BOUAZIZ A. BOUMENIKHRA USTHB DES microbiologie Mars 2008 Juillet 2008 Recherche et dénombrement des des F. MOUFFOK listéria dans les denrées B. BOUDJELLAB alimentaires.. Juillet 2008 Recherche et dénombrement des F. MOUFFOK Staphylococcus auréus B. BOUDJELLAB dans les denrées alimentaires L. MAHDID W. ZAKNOUNE USTHB DES Microbiologie Mars 2008 Nom de encadreur 2. Stages dans le laboratoire dans le cadre du résidanat en microbiologie Nom prénom Qualité Durée Travaux Encadreur HOUHOUNE El batoul Résident 1 mois Stage MOUFFOK KADDARI fatima Résident 1 mois Stage MOUFFOK AZZOUG Saloua Résident 1 mois Stage MOUFFOK NOUAR Selma Résident 1 mois Stage MOUFFOK KHELLOUFI Achwak Résident 1 Mois Stage MOUFFOK MECHRARA Nezly Résident 1 mois Stage MOUFFOK KESSIRA Nawel Résident 1 mois Stage MOUFFOK ABIDI Med Lamine Résident 1mois Stage MOUFFOK BOUNEFFISSA Med Achraf Résident 1 mois Stage MOUFFOK 3. Formation dispensée hors laboratoire - Séminaires de formation et de recyclage en bactériologie des eaux et des aliments au profit des techniciens des laboratoires de wilaya avec la collaboration de la direction de l prévention, Ministère de la santé, de la population et de la réforme hospitalière : Mme MOUFFOK, Mr AZIZI, Mr BOUDJELLAB, Melle GHAOUI. - Pour les wilayas de l’est : Skikda du 30 mai au 5 juin 2008 - Pour les wilayas de l’ouest : Tlemcen du 28 juin au 3 juillet 2008. 180 Laboratoires de Contrôle de Qualité Rapport d’Activité 2008 Institut Pasteur d’Algérie Laboratoire de Bactériologie des Eaux Chef de service : Fawzia MOUFFOK (Pharmacienne/ M.A/ INESSM) INTRODUCTION Le laboratoire d’analyse des eaux étudie les eaux de canalisations urbaines traitées pour lesquelles la recherche des germes témoins de contamination fécale est suffisante. Pour les eaux de puits non traitées, il faut compléter l’analyse par une recherche de germes pathogènes. Pour les eaux minérales, il est indispensable de tester la qualité marchande du produit par une évaluation de la flore aérobie mésophile totale. Cette activité entre dans le domaine de l’expertise puisque nous participons dans le cadre du comité national désigné et présidé par le ministère des ressources en eaux à l’agrément des eaux à embouteiller. Pour les eaux de mer et de piscine, on devra rechercher, outre les germes de contamination fécale, les germes pathogènes, les staphylocoques pathogènes et les pseudomonas. Depuis 6 ans, la surveillance de la qualité des eaux de baignade de la wilaya d’Alger est confiée à nos soins. 3002 eaux ont été traitées cette année. I- ACTIVITE DIAGNOSTIC - Analyse des eaux de boisson : Au cours de l’année 2008, le laboratoire des eaux a analysé 1022 eaux d’origine diverse dont la répartition est consignée dans le tableau 1. Tableau 1 : Répartition mensuelle et leur nature des analyses d’eaux Robinet Citerne Eaux Profondes Bâches Puits/Sondes Eaux Minérales Piscines Autres Janvier 32 02 14 00 01 09 Février 60 01 12 01 04 15 Mars 96 02 22 00 01 06 Avril 75 06 34 00 05 03 Mai 55 06 25 00 00 02 Juin 60 04 45 00 10 07 Juillet 57 02 37 05 12 04 Août 37 00 32 00 02 04 Septembre 28 00 18 00 00 04 Octobre 47 08 23 00 01 03 Novembre 31 00 33 01 00 01 Décembre 42 03 18 03 00 06 Total 589 34 289 10 36 64 Mois Laboratoires de Contrôle de Qualité 181 Rapport d’Activité 2008 Institut Pasteur d’Algérie La qualité bactériologique des eaux analysées est rapportée dans le tableau 2 : Tableau 2 : qualité bactériologique des eaux analysées Qualité Quantité % Bonne qualité 0405 040 Qualité suspecte 0316 030 Mauvaise qualité 0301 030 1022 100 Total - Analyse des eaux de baignade : Dans le cadre de la surveillance des eaux de baignade, nous avons reçu de Mai à Août 1980 prélèvements effectués sur les cotes est et ouest d’Alger. Leur analyse a donné les résultats suivants : - 42% sont de bonne qualité bactériologique. - 16% sont de mauvaise qualité bactériologique. - 42% sont de qualité bactériologique acceptable. 18 souches de salmonella ont été isoles elles figurent au tableau 3. Tableau 3 : Sérovars de Salmonella isolés des eaux de mer Sérovars Nombre de souches Salmonella kentuckey 01 infantis 01 Paratyphi B 01 braenderup 01 hadar 01 entéritidis 01 typhimurium 02 indiana 01 corvalis 09 II. ACTIVITE RECHERCHE 1- Projet ACIP S2 Vibrio : « Impact des modifications environnementales sur le développement des vibrions cholériques et non cholériques dans le bassin méditerranéen ». Dans le cadre de ce projet 145 échantillons d’eaux de mer ont été prélevés et étudies du point de vue Vibrionaceae, qualitativement et quantitativement. Les souches de vibrions cholériques et non cholériques isolées ont été adressées à l’IPP pour étude moléculaire. 182 Laboratoires de Contrôle de Qualité Rapport d’Activité 2008 Institut Pasteur d’Algérie 2- Recherche de Legionella pneumophila dans les circuits de distribution d’eau chaude et les tours aérorefrigérantes (TAR) : introduite depuis le 10 mars. Les résultats sont rapportés au tableau 4. Tableau 4 : Recherche de Legionella pneumophila dans les circuits de distribution d’eau chaude et les tours aérorefrigérantes (TAR) : Quantité enquêtes Nombre de prélèvements Nombre de prélèvements positifs Sheraton Oran 04 48 02 Sheraton Alger 04 58 03 Mercure 04 48 03 Sofitel 04 48 08 Thalasso Sidi Ferruch 02 24 03 Hôpital Beni messousµ 01 12 00 19 238 19 Lieu de L’enquête Total III. COMMUNICATIONS - F. MOUFFOK, A. BENABBOU, Y. HAFFERSSAS : « Qualité bactériologique des eaux naturelles » 2ème Journées internationales de toxicologie ; 3 & 4 décembre 2008 » Poster A. BENABBOU, S. SAADI, F. MOUFFOK : « Recherche et dénombrement de Légionella Spp dans les eaux » 1ère journée de la SAMIC / 29 mai 2008 Palais de la culture ; ALGER. IV. MISSIONS Autres missions pour prélèvements eaux : Dans le cadre des déplacements effectués pour étudier la qualité des eaux forées à embouteiller, 36 déplacements ont été effectués sur l’ensemble du territoire national par les chargés de mission suivants : - GASMI Mohamed : 14 - HAFFERSSAS Yacine : 12 - GAOUI Chafika : 02 - BOUARABA Hocine : 02 Missions d’inspection effectuées avec la participation de membres de la commission du ministère des ressources en eaux ; Mme MOUFFOK Fawzia : 03. Laboratoires de Contrôle de Qualité 183 Rapport d’Activité 2008 Institut Pasteur d’Algérie V. FORMATION 1 COURS / Qualité bactériologique des eaux de boisson : pour le compte de l’ADE 2 Cessions de 2 semaines : Cours et travaux pratiques à l’IPA de Sidi Ferruch Organisation et coordination : Mme MOUFFOK et Mr LEBRES Avec la participation de Mrs AZIZI, Melle GHAOUI, Mr M. BOUDJELLAB 1ère Cession du 06 au 17 mai 2008 2ème Cession du 02 au 14 juin 2008 2 Stages de formation de 2 groupes de 3 paramédicaux Sahraouis au laboratoire pour la prise en charge de la colimétrie des eaux : 1 Groupe en mai ; 2ème groupe en juin : VI. Encadrement de mémoire Nom et prénom de l’élève Organisme d’origine F. BELKOUS R. BOUSSAYOUD USTHB Ingéniorat CQ et analyses Date de début de la formation 184 Laboratoires de Contrôle de Qualité Mars 2008 Date de la fin formation nature des Sujet Promoteur Juillet 2008 Surveillance des eaux de mer et prévention du Cholera F. MOUFFOK Rapport d’Activité 2008 Institut Pasteur d’Algérie Laboratoire de Contrôle de Qualité Chef de laboratoire : Nadia TOUABTI (Docteur en Pharmacie – Docteur en Chimie) - Année de création 199O - Laboratoire autonome des services de production de l’IPA PRESENTATION DU LABORATOIRE A. ORIENTATION DU LABORATOIRE : 1. Le laboratoire a pour but le contrôle de qualité des produits finis : - fabriqués par l’INSTITUT PASTEUR D’ALGERIE - Importés par l’IPA sous forme de produits finis 2. Les produits concernés par le contrôle de qualité sont : - Les vaccins à usage humains et vétérinaires. - Les Extraits Allergéniques. - Les sérums thérapeutiques. - Les réactifs de diagnostic. à usage humains et vétérinaires - Les antiseptiques et désinfectants. - Les produits consommables (seringues, tubulures, gants,.....). - Autres produits pour des contrôles microbiologiques, Pharmacotoxicologiques, physico-chimiques (Eau purifiée à usage pharmaceutiques...). B. ORGANISATION DU LABORATOIRE LES UNITES DE CONTROLES 1. DEPARTEMENT TECHNICO ADMINISTRATIF : Organisation et rôle : - Échantillonnage. - Gestion de l’échantillothéque. - Gestion des références. - Réception des lots à contrôler. - Identification des lots et contrôle du conditionnement. - Enregistrement des lots. - Distribution des échantillons. - Gestion des documents et des dossiers techniques Laboratoires de Contrôle de Qualité 185 Institut Pasteur d’Algérie Rapport d’Activité 2008 - Gestion de la réglementation inhérente au fonctionnement du laboratoire de contrôle. - Assurance qualité interne au laboratoire. - Appliquer le système de qualité requis. - Veiller à la bonne application des BPF-BPL. - Rassembler les résultats de contrôle des différentes unités et veiller à leur cohérence. - Validation des résultats. Liste des producteurs dont les produits biologiques (Vaccins, immunosérums et produits thérapeutiques) nous sont parvenus en 2008 (Locaux et étrangers). Produits biologiques : IPA (Algérie), Sanofi Pasteur (France), Stallergénes (France), BB-NCIPD (Bulgarie) Biofarma (Indonésie), Institut Butantan (Brésil), Shantha biotech (Inde), Baharat biotech (Inde), Sérum institut of India (Inde), Institut of immunology (Croatie), Medion diagnostic (suisse), GSK Glaxo-Smithkline (Belgique), Heberbiotec (Cuba), Vacsera (Egypte), Wyeth (USA). Produits réceptionnés par système de lots* : * Nécessitent un échantillonnage Produits IPA Origine : IPA ¾ Vaccins à usage humain. ¾ Vaccins à usage vétérinaire. ¾ Immunosérums thérapeutiques à usage humain. ¾ Produits de diagnostic in vitro. Produits importés : Origine : Voir la liste des producteurs ci-dessus. ¾ Vaccins du PEV (Programme élargi de vaccination). ¾ Vaccins indiqués pour les voyageurs et utilisés pour la prophylaxie de certaines maladies. ¾ Immunosérums thérapeutiques (antitoxiques et antivenins). ¾ Produits de diagnostic in vivo et in vitro. ¾ Produits thérapeutiques. Produits biologiques réceptionnés utilisés comme référence* : * Ne nécessitent pas d’échantillonnage ¾ Références (Vaccins et sérums). 186 Laboratoires de Contrôle de Qualité Rapport d’Activité 2008 Institut Pasteur d’Algérie Produits contrôlés en vue d’un enregistrement : Origine : Producteurs étrangers et locaux ¾ Vaccins à usage humain (Obtention d’une AMM en Algérie auprès du ministère de la santé). ¾ Vaccins à usage vétérinaire (Obtention d’une AMM en Algérie auprès du ministère de l’agriculture). Produits expertisés pour cause de rupture de la chaîne du froid : Origine : SEMEP et EPSP ¾ Vaccins. ¾ Immunosérums. ¾ Produits de diagnostic in vivo. SEMEP = Service d’épidemiologie et de médecine préventive EPSP = Établissement public de santé de proximité Assurance qualité interne au laboratoire : Les méthodes d’analyse effectuées et les normes appliquées à notre laboratoire de contrôle qualité sont des normes internationales. Voici quelques références sur lesquelles nous nous basons pour établir nos méthodes de contrôle, nos normes de contrôle, les activités du laboratoire. - BPF appliquées aux produits biologiques selon l’OMS. - BPF appliquées aux produits pharmaceutiques. - Bonnes pratiques de laboratoire. - Pharmacopée Européenne 5ème Edition. - Pharmacopée Américaine USP. - Normes Afnor pour la détermination de l’activité des antiseptiques et désinfectants. Assurance qualité des produits biologiques selon l’OMS : Appliquée par le biais : De la mise en place d’une procédure d’échantillonnage des produits biologiques. De la gestion des documents relatifs aux produits biologiques : - Documents techniques. - Documents réglementaires. De l’élaboration des normes de contrôle. De l’élaboration de procédures opératoires standardisées (POS) pour chaque contrôle. Certaines procédures sont réalisées d’autres en cours. Laboratoires de Contrôle de Qualité 187 Institut Pasteur d’Algérie Rapport d’Activité 2008 Gestion du dossier de contrôle des lots des produits biologiques - La fiche de prélèvement des échantillons - La fiche de contrôle de la chaîne du froid - La fiche navette du conditionnement pour les produits internes - La fiche d’identification des produits - La fiche de contrôle du conditionnement (produit fini) - La fiche de distribution des échantillons aux unités de contrôle - La fiche des résultats des unités concernées par le contrôle - Le certificat d’analyse du laboratoire de contrôle - Le certificat d’analyse du producteur Mise à jour des procédures de contrôle, produits déjà contrôlés et nouveaux produits. Mise à jour des normes de contrôle. 2. UNITE DE CONTROLE PHYSICO-CHIMIQUE : pH, Temps de dissolution, Volume extraclible, Humidité résiduelle, Identification du rouge de phénol, NaCl, Protéine totale, Azote protéique, Phénol, Aluminium, Thiomersal, DO concentration bactérienne, Conductivité à 25°c, Nitrates, Métaux lourds ,Substances oxydables, Chlorures pour les Vaccins, Sérums thérapeutiques, Produits thérapeutiques, Produits de diagnostic et solvants. - Préparation, stérilisation et contrôle des milieux de culture : Pour les différentes unités du service. Gestion des produits chimiques, bases déshydratés et réactifs. 3. UNITE DE CONTROLE VIROLOGIQUE : - Contrôle d’identification des principes actifs par sérologie. - Contrôle d’activité des vaccins viraux rougeole, polio oral sur cultures cellulaires. 4. UNITE IMMUNOLOGIE : - Contrôle d’activité du vaccin Hépatite B adultes et pédiatrique par méthode Elisa. - Contrôle d’activité du vaccin Grippal par méthode d’immunodiffusion SRID (en projet). 5. UNITE DE CONTROLE PHARMACO-TOXICOLOGIE : Contrôle in vivo des produits biologiques : - Contrôle de toxicité anormale sur souris et cobayes. - Contrôle de toxicité spécifique sur souris (Valence coqueluche) - Contrôle des pyrogènes sur lapins. - Contrôle d’activité : vaccin rabique souriceaux sur souris (en cours). 188 Laboratoires de Contrôle de Qualité Institut Pasteur d’Algérie Rapport d’Activité 2008 6. UNITE MICROBIOLOGIE I : - Stérilité fongique et bactérienne. - Contrôle des vaccins bactériens ; vaccin Typhoïdique Para TyphoïdiqueA et B, vaccin cholérique, vaccin BCG. - Contrôle des endotoxines. - Diagnostic bactériologique. - Souchothéque bactérienne. 7. UNITE MICROBILOGIE II : Activité de l’unité : Contrôle des produits Pharmaceutiques et matières premières : - Contrôle de l’eau purifiée à usage pharmaceutique. - Contrôle de pureté des produits non obligatoirement stériles. - Contrôle d’activité des antibiotiques et des antiseptiques. 8. ACTIVITES DE L’UNITE POUR CONTROLE DES SERUMS DE GROUPAGE - Entretien de l’animalerie et production de souris pour le contrôle. - Gestion de l’échantillothèque et de la souchothèque du service. - Secrétariat pour la gestion des dossiers de contrôle, établissement des certificats de contrôle, intervention dans la rédaction des procédures de contrôle. - Réparation, stérilisation et contrôle des milieux de culture du service. - Laverie, décontamination. ACTIVITES DE SOUTIEN : - Entretien de l’animalerie et production de souris pour le contrôle. - Gestion de l’échantillothèque et de la souchothèque du service. - Secrétariat pour la gestion des dossiers de contrôle, établissement des certificats de contrôle, intervention dans la rédaction des procédures de contrôle. - Préparation, stérilisation et contrôle des milieux de culture du service. - Laverie, décontamination. Laboratoires de Contrôle de Qualité 189 Rapport d’Activité 2008 Institut Pasteur d’Algérie Contrôle effectuée par système de lots en 2008 I. Produits biologiques 1. Vaccins IPA et importés 1.1- Vaccins IPA : 1.1.1. Vaccins IPA à usage humain Désignation Producteur Nbre C NC IPA 44 38 06 Sanofi-Pasteur-IPA 01 01 0 Total 2008 45 39 06 Total 2007 28 Vaccin rabique souriceaux inactivé lyophilisé monodose Vaccin grippal vaxigrip à virion fragmenté multidoses* Statistiques / 2007 * Conditionné par l’IPA Lot Nbre : Nombre +37.8% C : Conforme NC : Non conforme 1.1.2. Vaccins IPA à usage vétérinaire Désignation Producteur Lot Nbre C NC Vaccin rabique vétérinaire inactivé lyophilisé Vet-Era IPA 04 04 0 Vaccin claveleux cultures cellulaires à virus atténué lyophilisé IPA 01 01 0 Total 2008 05 05 0 Total 2007 28 Statistiques / 2007 -89.2% 1.1.3. Solvants IPA eau ppi, solution isotonique de NaCl, solution eau phénolée Désignation Solvant eau ppi (1) (1) Producteur Lot Nbre C NC IPA 45 45 0 Solvant solution isotonique de NaCl pour vaccins claveleux IPA 12 12 0 Solvant eau phénolée IPA 01 01 0 Total 2008 58 Total 2007 68 Statistiques/2007 -14.7% Utilisé pour la reconstitution du vaccin rabique souriceaux et vaccin rabique Vet-Era 190 Laboratoires de Contrôle de Qualité 58 0 Rapport d’Activité 2008 Institut Pasteur d’Algérie 1.1- Vaccins importés Désignation Lots Producteur Nbre C NC 01 Vaccin meningococcique ACWY135 (Mencevax) Multidoses GSK 02 02 0 02 Vaccin hépatite B adultes recombinant (Engerix-B) Multidoses GSK 01 01 0 03 Vaccin pneumococcique (Pneumo23) Monodose Sanofi Pasteur 03 03 0 04 Vaccin polio oral vivant attenue (OPV) Multidoses Sanofi Pasteur 02 02 0 05 Vaccin fièvre jaune vivant attenué (Amaril) Multidoses Sanofi Pasteur 02 02 0 06 Vaccin grippal à virion fragmenté (vaxigrip) Monodose Sanofi Pasteur 07 07 0 07 Vaccin rabique cultures cellulaires inactivé (verorab) Monodose Sanofi Pasteur 07 07 0 08 Vaccin DTCOQ-Hib (TetrAct-Hib) Multidoses Sanofi Pasteur 08 08 0 09 Vaccin DTCOQ Multidoses Sanofi Pasteur 01 01 0 10 Vaccin haemophilus type b conjugué (Act-Hib) Monodose Sanofi Pasteur 02 02 0 11 Vaccin BCG lyophilisé Multidoses SII 04 04 0 12 Vaccin Td adultes Multidoses SII 06 06 0 13 Vaccin DT pédiatrique Multidoses SII 06 06 0 14 Vaccin DTCOQ Multidoses SII 04 04 0 15 Vaccin hépatite B adultes recombinant Monodose SII 03 03 0 16 Vaccin rougeoleux vivant atténue Multidoses SII 05 05 0 17 Vaccin rabique cultures cellulaires inactivé (Indirab) Monodose Baharat biotec 11 11 0 18 Vaccin hépatite B pédiatrique recombinant Monodose Shantha biotec 04 04 0 19 Vaccin polio oral vivant atténue Multidoses Biofarma 07 07 0 20 Vaccin hépatite B pédiatrique recombinant Monodose (Heberbiovac) Heberbiotec 19 19 0 Total 2008 104 104 0 Total 2007 84 Statistiques/2007 +20% Laboratoires de Contrôle de Qualité 191 Rapport d’Activité 2008 Institut Pasteur d’Algérie 2. Immunosérums IPA et importés 2.1- Immunosérums IPA à usage humain Désignation Lot Producteur Nbre C NC 01 Sérum antiscorpionique IPA 25 25 0 02 Sérum antirabique IPA 05 05 0 03 Sérum antivipérin IPA 03 03 0 Total 2008 33 33 0 Total 2007 32 Statistiques 2007 +3.1% 2.2- Immunosérums importés à usage humain Désignation Producteur Lot Nbre C NC 01 Sérum antiscorpionique d’origine équine Vacsera 03 03 0 02 Sérum antirabique d’origine équine Institut Butantan 04 04 0 03 Sérum antidiphtérique d’origine équine Institut of immunology 01 01 0 04 Sérum antitétanique d’origine équine SII 05 05 0 Total 2008 13 13 0 Total 2007 04 Statistiques/2007 192 Laboratoires de Contrôle de Qualité +69.3% Rapport d’Activité 2008 Institut Pasteur d’Algérie 3. Produits thérapeutiques importés Lot Désignation 01 Producteur Nbre C NC Extraits allergéniques DPt (1) Dermatophagoides pteronyssinus Stallergénes 05 05 0 Extraits allergéniques DPt Dermatophagoides pteronyssinus(2) Stallergénes 06 06 0 03 Extraits allergéniques pollens de 5 graminées(1) Stallergénes 01 01 0 04 Extraits allergéniques pollens de (2) 5 graminées Stallergénes 03 03 0 Total 2008 15 15 0 Total 2007 17 02 Statistiques/2007 -11.7% 4. Produits de diagnostic in vivo et in vitro 4.1. Produits de diagnostic in vivo importés Désignation 01 Producteur Tuberculine purifiée d’origine bovine Lot Nbre C NC BB-NCIPD 02 02 0 Total 2008 02 02 0 Total 2007 02 Statistiques/2007 Stable 4.2- Produits de diagnostic in vitro IPA-Importés Désignation 01 Sérum de groupage ABO-Rh Nbre C NC Medion dc –IPA 10 09 01 Total 2008 10 09 01 Total 2007 11 Statistiques/2007 (1) 0,1 IR, 1 IR, 10 IR coffret traitement Lot Producteur (2) -10% 10 IR coffret entretien Laboratoires de Contrôle de Qualité 193 Rapport d’Activité 2008 Institut Pasteur d’Algérie 4.2. Produits de diagnostic in vitro IPA Désignation Lot Producteur Nbre C NC 01 Sérum agglutinant anti-salmonella polyvalent OMA IPA 01 0 01 02 Sérum agglutinant anti-salmonella polyvalent OMB IPA 01 0 01 03 Sérum agglutinants anti-Salmonella polyvalent H :1 IPA 01 01 0 04 Sérum agglutinants anti-Salmonella monovalent H : a IPA 01 01 0 05 Sérum agglutinants anti-Salmonella monovalent H : b IPA 01 01 0 06 Sérum agglutinants anti-Salmonella monovalent H : m, t IPA 01 01 0 07 Sérum agglutinants anti-Salmonella monovalent O : 6 ; 8 IPA 01 0 01 08 Suspension antigénique Widal TO Bulk1 IPA 01 01 0 09 Suspension antigénique Widal TO Bulk2 IPA 01 01 0 10 Suspension antigénique Widal TH Bulk1 IPA 01 01 0 11 Suspension antigénique Widal TH Bulk2 IPA 01 01 0 12 Suspension antigénique Widal AH Bulk1 IPA 02 02 0 13 Suspension antigénique Widal AH Bulk2 IPA 02 02 0 14 Suspension antigénique Widal AO Bulk1 IPA 01 01 0 15 Suspension antigénique Widal AO Bulk2 IPA 01 01 0 16 Suspension antigénique Widal BH Bulk1 IPA 01 0 01 17 Suspension antigénique Widal BH Bulk2 IPA 01 01 0 18 Suspension antigénique Widal BO Bulk1 IPA 02 01 01 19 Suspension antigénique Widal BO Bulk2 IPA 02 02 0 Total 2008 23 18 05 Total 2007 10 Statistiques 2007 194 Laboratoires de Contrôle de Qualité +56% Rapport d’Activité 2008 Institut Pasteur d’Algérie 5. Produits contrôlés en vue d’un enregistrement (Obtention d’une AMM) Désignation Producteur Lots Nbre 01 Vaccin pneumococcique conjugué adsorbé à 7 valences (Prevnar) Wyeth 01 02 Vaccin DTCOQ-Hib 1 dose SII 01 03 Vaccin hépatite B DNAr pédiatrique 1 dose sans thiomersal SII 01 04 Vaccin hépatite B DNAr pédiatrique 1 dose sans thiomersal (Revac) Baharat biotech 01 05 Sérum antitétanique 1500UI SII 01 06 Vaccin DTCOQ 1 dose SII 01 07 Vaccin DT pédiatrique 1 dose SII 01 08 Vaccin Td adultes 1 dose SII 01 09 Vaccin Rougeole-Rubéole RR 10 doses SII 01 10 Vaccin Rougeole-Oreillons-Rubéole ROR 1 dose SII 01 11 Vaccin Rougeole-Oreillons-Rubéole ROR 10 doses SII 01 12 Vaccin rabique Rabivax 1 dose SII 01 13 Vaccin DTCOQ-HIB 1 dose SII 01 Total 2008 13 Total 2007 00 Statistiques/2007 - 6. Produits expertisés pour cause de rupture de la chaine du froid SEMEP = Service d’épidemiologie et de médecine préventive. EPSP = Établissement public de santé de proximité. Échantillons envoyés par les structures susmentionnés pour expertise en cas de rupture de la chaine du froid. Laboratoires de Contrôle de Qualité 195 Rapport d’Activité 2008 Institut Pasteur d’Algérie Désignation Produits Demandeur Nbre 01 02 vaccins EPSP-SEMEP de Souk-Ahras 02 02 02 vaccins EPSP-SEMEP de Draa-Ben-Khedda 02 03 02 vaccins EPSP-SEMEP de Boucha ouï /Cheraga 02 04 03 sérums EPSP-SEMEP de Bousaada 02 05 03 vaccins EPSP-SEMEP de Ouled Yaich /Blida 1ère fois 03 06 04 vaccins EPSP-SEMEP de Ouled Yaich /Blida 2ère fois 04 07 08 vaccins et 1 sérum EPSP-SEMEP de Bejaia 09 08 02 vaccins EPSP-SEMEP de Baraki 02 09 10 vaccins et 3 sérums EPSP-SEMEP de Tamlouka/Guelma 13 Total 2008 39 Total 2007 31 Statistiques/2007 +20.6% II. Produits Pharmaceutiques Désignation Lot Producteur Nbre C NC 01 Eau Purifiée (Pureté) Somedial 173 0 02 Alcool Iodé (Activité) Saidal-el-harrach 01 01 0 Total 2008 174 01 0 196 Laboratoires de Contrôle de Qualité Rapport d’Activité 2008 Institut Pasteur d’Algérie III. Milieux de culture déshydraté : Désignation Analyse demande Produits Demandeur Nbre 01 Gelose Hektoen Test microbiologique Test Physico-chimie Laboratoire DIMED Azazga 01 02 Gelose Nutritive Test microbiologique Physico-chimie Laboratoire DIMED Azazga 01 03 Gelose Cled Test microbiologique Test Physico-chimie Laboratoire DIMED Azazga 01 04 Gelose Muller Hinton Test microbiologique Test Physico-chimie Laboratoire DIMED Azazga 01 05 Gelose Chapman Test microbiologique Test Physico-chimie Laboratoire DIMED Azazga 01 06 Gelose TSI entube incline Test microbiologique Test Physico-chimie Laboratoire DIMED Azazga 01 07 Gelose Citrate de simmons Test microbiologique Test Physico-chimie Laboratoire DIMED Azazga 01 08 Gelose Sabouraud Test microbiologique Test Physico-chimie Laboratoire DIMED Azazga 01 09 L’eau Physilogique Test microbiologique Test Physico-chimie Laboratoire DIMED Azazga 01 10 Milieu de Loweinten jensen Test microbiologique Test Physico-chimie Laboratoire DIMED Azazga 01 Total 2008 10 Produits expertises : Contrôle microbiologique des Produits Pharmaceutique Désignation Lot Demandeur Nbre C NC Pureté 01 Inverter (4mg) Saidal-el-harrach 01 0 01 02 Zanitra plus (gélules) Saidal-Biotic Gué de Constatine 06 0 06 03 Doliprane (200mg) Biopharm 10 10 0 04 Sedacor solution buvable Biopharm 01 01 0 Activité 05 Divosan plus 01 01 0 06 Divosan QC 01 01 0 07 Divodes FG 08 Gel Purell 01 01 0 01 01 0 Sarl Surgi-Tech Equipement Physico-chimie 09 Gel Purell Sarl Surgi-Tech Equipement Total 2008 22 Laboratoires de Contrôle de Qualité 197 Rapport d’Activité 2008 Institut Pasteur d’Algérie 7. Vaccins et sérums de référence utilisés dans les contrôles Désignation Producteur Nbre Lot Titre 01 / 140UI/Amp SIIL-1/96 270UI/FL Vaccins de référence ère 01 Anatoxine diphtérique adsorbée 1 02 Anatoxine diphtérique adsorbée lyo SII 09 03 Anatoxine diphtérique (Verocell) Biofarma 02 04 Anatoxine diphtérique (Verocell) Biofarma 01 ADS-86F 50UI/ml 05 Anatoxine diphtérique (Floculation) SII 01 / 900LF/FL 01 / 250UI/Amp ère réf Europ 220UI/ml 06 Anatoxine tétanique adsorbée 1 07 Anatoxine tétanique Biofarma 01 / 220UI/ml 08 Anatoxine tétanique adsorbée lyo SII 11 T-1/96-A 210UI/FL 09 Vaccin Bordetella pertussis lyo SII 04 01/04(1) 130UI/FL 10 Vaccin Bordetella pertussis lyo SII 01 01/04(2) 115UI/FL 11 Vaccin Bordetella pertussis lyo SII 01 01/04(3) 110UI/FL 12 Vaccin hépatite B (Test in vitro) SII 05 SE50519-A 37μg/ml 13 Vaccin BCG SII 16 PS002 2.0mg* 14 Vaccin rougeole lyo SII 14 ME1/2004 3.580DICC50/0.5ml 04 ADS1/2004 1200UI/ml lyo réf Europ Sérums de références 01 Antitoxines diphtériques (Floculation) SII 02 Antitoxines diphtériques Biofarma 01 86F 50UI/ml 03 Antitoxines tétaniques (in vivo) SII 01 1/06 10UI/ml 04 Antitoxines tétaniques Biofarma 01 ATS-8417 40UI/ml 05 Antitoxines tétaniques (Floculation) SII 04 ATS -1/04F 500UI/ml 06 Antitoxines tétaniques Std national Inde État de l’Inde 01 TAT-1/06 900UI/FL Toxines de référence 01 Toxine tétanique Biofarma 02 0384 50LF/ml 02 Toxine tétanique (Cobayes) Biocine 03 1762 DMM=150000/ml 03 Toxine diphtérique (Verocell) Biofarma 02 0584 150LF/ml 04 Toxine diphtérique (Cobayes) Biocine 06 08 DMM=4000/ml 198 Laboratoires de Contrôle de Qualité Rapport d’Activité 2008 Institut Pasteur d’Algérie 8. État de l’échantillothéque (+4°C) Désignation Producteur Nbre de lots SII Sanofi Pasteur Sanofi Pasteur SII Sanofi Pasteur GSK SII BB-NCIPD Sanofi Pasteur Baharat biotech Sanofi Pasteur Heberbiotec Shantha biotech SII Biofarma , Sanofi Pasteur Sanofi Pasteur 14 08 02 10 , 11 02 02 10 02 11 11 00 19 04 11 09 , 03 02 Vaccins importés 01 02 03 04 06 07 08 09 10 11 12 13 14 15 16 17 Vaccin DTCOQ Vaccin DTCOQ-Hib (TETRACT-Hib) Vaccin Hib (Act-Hib) Vaccin DT, Td Vaccin Meningo A+C Vaccin Meningo ACWY Vaccin BCG Vaccin BCG Vaccin rabique culture cellulaire (Verorab) Vaccin rabique culture cellulaire (Indirab) Vaccin grippal vaxigrip Vaccin hépatite B pédiatriques Vaccin hépatite B pédiatriques Vaccin rougeoleux Vaccin polio oral Vaccin fiévre jaune Amaril Sérums importés 01 02 03 04 Sérum antitétanique Sérum antirabique Sérum antiscorpionique Sérum antidiphtérique SII Institut Butantan Vacsera Institut of immunology 11 07 04 01 Vaccins IPA 01 02 03 04 05 Vaccin rabique souriceaux á usage humain Vaccin rabique á usage vétérinaire Solvant eau ppi Vaccin claveleux á usage vétérinaire Solvant claveleux IPA IPA IPA IPA IPA 74 04 86 13 35 IPA IPA IPA 11 28 04 BB-NCIPD IPA-Medion-DC 04 20 Sérums IPA 01 02 03 01 02 Sérum antirabique Sérum antiscorpionique Sérum antivipérin Produit de diagnostic Tuberculine Sérums de groupage ABO-Rh Produits thérapeutiques 01 Extraits allergéniques Stallergénes 05 IPA IPA IPA 25 03 07 Produits finis 01 02 03 Vaccin rabique souriceaux á usage humain Vaccin rabique á usage vétérinaire Sérums de groupage ABO-Rh Laboratoires de Contrôle de Qualité 199 Rapport d’Activité 2008 Institut Pasteur d’Algérie Bilan total de l’activité du laboratoire de contrôle qualité En ce qui concerne le contrôle qualité des produits biologiques Nombre de lots Produits biologiques 2007 284 2008 308 Statistiques 2008 +7.8% par rapport à 2007 Contrôle d’un nouveau vaccin inclus dans le PEV Algérien en 2008 Réception d’un nouveau vaccin utilisé contre l’haemophilus influenzae type B responsable de méningites purulentes et d’autres infections graves souvent mortelles chez les enfants de moins de 5 ans. La valence Hib, polyoside de l’haemophilus influenzae type B a été inclus dans le programme élargi de vaccination (PEV) en Algérie en Août 2008 sous forme d’une association avec le DTCOQ pour donner le vaccin associé DTCOQ-Hib. Il est à noter que si la valence coqueluche pose problème et que par conséquent le vaccin DTCOQ-Hib ne peut pas être utilisé, un vaccin monovalent Act-Hib lui est substitué en ajoutant les valences D (Diphtérie) et T (Tétanos) dans le schéma vaccinal. Donc le vaccin est disponible sous 02 formes. 1- Une forme associée 2- Une forme monovalente 1- Vaccin DTCOQ-Hib. Exemple (TETR-ActHib), vaccin associé, le vaccin DTCOQ existait déjà seul dans le PEV. 2- Vaccin Hib. Exemple (Act-Hib), vaccin polyosidique monovalent haemophilus inflenzae type B, vaccin Act-Hib activé à l’aide d’une protéine anatoxine tétanique et conjugué à cette dernière pour augmenter son efficacité. Grilles de contrôle internes au laboratoire Mise en place de grilles de contrôle comportant tous les paramètres nécessaires pour un contrôle en adéquation avec les normes de la pharmacopée Européenne et de l’OMS du Vaccin Hib sous ces 2 formes précédemment citées. POS (Procédure opératoire standardisés) Procédure de contrôle Les procédures suivantes ont été préparées. - Toxicité spécifique de la valence coqueluche (Contrôle du vaccin DTCOQ). - Détermination qualitative du thiomersal (conservateur antibactérien) dans les vaccins. - Recherche de l’activité du sérum antirabique équin par MNT (Test de neutralisation sur souris). - Recherche de l’activité du sérum antirabique équin par RFFIT (Test d’inhibition rapide des foyers fluorescents). - Métrologie des fioles. 200 Laboratoires de Contrôle de Qualité Rapport d’Activité 2008 Institut Pasteur d’Algérie Procédure annexe au contrôle d’activité des vaccins, sérums et produits de diagnostic : Vaccins et sérums de référence internationaux nécessaires au contrôle d’activité des vaccins, sérums, produit thérapeutiques et produits de diagnostic. Échantillonnage : Mise à jour du tableau d’échantillonnage des produits biologiques qui s’explique par l’ajout de 02 vaccins Gestion des dossiers de contrôle : Application de procédures permettant de mieux gérer la remise des résultats de contrôle Bilans de contrôle périodiques : Établissement de bilans périodiques des contrôles de lots des produits biologiques Réceptions, libérations, non-conformités éventuelles et instances. 3- Production d’animaux de laboratoire : But : Autonomie en animaux de laboratoire pour nos différents contrôles - Production de souris blanches (NMRI) : 6975 - Lapins : 0045 - Cobayes : 0220 - Souris OF1 : 4664 - Souris Balbc : 1063 III. PRODUCTION DES MILIEUX DE CULTURE : La majorité des milieux de culture, des tampons ainsi que l’eau distillée sont produits au sein du laboratoire pour les besoins du laboratoire, afin de contrôler la stérilité et la fertilité des milieux. Laboratoires de Contrôle de Qualité 201 Rapport d’Activité 2008 Institut Pasteur d’Algérie Milieux Qualité (litre) Gelose Neomycine 08 Gelose Nystatine 15 Milieu B.T 63 Milieu T.G 57 Gélose Chapman Tampon Nystatine 20 Tampon Néomycine 29 Milieu PPLT 18 Milieu Pseudomonas 10 Milieu T.S.A 27 Milieu Mac conkey 10 Milieu B.C.P 11 Milieu S.S 14 Eau physiologique 25 Eau Distillée 52 Milieu Lugol 08 Thiosulfate sodium 16 Alcool Iodé 10 Milieux T.S.E 22 TOTAL 202 Laboratoires de Contrôle de Qualité 415L Rapport d’Activité 2008 Institut Pasteur d’Algérie IV. SOUCHOTHEQUE Souches bactériennes et fongiques de référence disponibles: SOUCHOTHEQUE : Souches bactériennes et fongiques de référence disponibles: - Mycoplasma pneumonia CIP 103766T - Bordetella bronchisepticum CIP 53-157 - Salmonella enterica CIP 60-62T - Bacillus stearothermophilus CIP 52-81 - Klebsiella pneumoniae CIP 53-153 - Absidia corymibifera CIP 1129 - 75 - Penicillium cyclopium CIP1231 - 80 - Cladosporium cladosporidides CIP 1232-80 - Clostridium sporogenes CIP 79-3 - Micrococcus luteus CIP 53-160 - Staphylococcus épidermidis CIP 68-21 - Staphylococcus aureus ATCC 25923 - Staphylococcus aureus ATCC 29373 - Staphylococcus aureus ATCC 209 P - E. Coli ATCC 10536 - E. Coli ATCC 10531 - E.Coli ATCC 25922 - Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853 - Streptococcus pyogenes ATCC 19615 - Streptococcus pneumoniae ATCC 6303 - Bacillus subtilis ATCC 6633 - Bacillus cereus ATCC 10876 - Proteus mirabilis ATCC 35659 - Saccharomyces cerevisiae ATCC 2601 - Candida albicans ATCC 24433 - Aspergillus niger ATCC 16404 Remarques : CIP : Collection de l'Institut Pasteur ATCC : American type culture collection - Souches de référence d'E.coli pour les sérums agglutinants : (Référence : vaccins bactériens) - E.coli 0127 B8 - E.coli 0125 B15 - E.coli 0114 K90 - E.coli 0124 B17 - E.coli 0126 B2 Laboratoires de Contrôle de Qualité 203 Institut Pasteur d’Algérie - E.coli 0142 K86 - E.coli 055 B5 - E.coli 0111 B4 - E.coli 0119 B14 - E.coli 086 B7 - E.coli 026 B6 Rapport d’Activité 2008 - Souche de référence de Salmonella pour les sérums agglutinants : (Référence : vaccins bactériens) - Salmonella enteritidis - Salmonella typhimurium - Salmonella paratyphi A - Salmonella paratyphi B - Salmonella manhattan -Salmonella Newington - Salmonella London - Salmonella Oranienburg - Salmonelle aberdeen - Salmonelle kentucky - Salmonelle tennessee - Salmonelle newport - Salmonelle carran : Collection de l'Institut Pasteur Remarques : CIP ATCC : American type culture collection - Souche de référence de VIBRIO pour les sérums agglutinants (Référence : vaccins bactériens : - Vibrio OGAWA - Vibrio INABA. Plusieurs mémoires fin d’études ont été élaboré par des étudiants : • Encadrement des stagiaires : Melle MROUF Asma et Mr DAHAK Mohamed Sofiane ; en vie de la réalisation d’un mémoire de fin d’études pour l’obtention du diplôme d’Ingénieur d’état en Contrôle de qualité U.S.T.H.B portant sur le thème : « Contrôle microbiologique (Pureté, activité) de la Pommade Mycocide suivi du contrôle d’efficacités des milieux de culture utilisés ». • Encadrement des stagiaires : Mr MOKRANI Mehdi, Mr MEZIANE Riad et Mr ABDELLAHI Mohamed ; en vie de la préparation d’un mémoire de licence (Microbiologie fondamentale et appliquée), entrant application avec le système L.M.D U.S.T.U.B. portant sur le thème : « Contrôle microbiologique de l’eau purifiée destinée à la production pharmaceutique ». 204 Laboratoires de Contrôle de Qualité Institut Pasteur d’Algérie Rapport d’Activité 2008 • Encadrement de Melle BENKRID Said ; Ingénieur d’état en Génie Biologique pour un stage pratique en microbiologie. • Encadrement des stagiaires : Melle MROUF Hanane et Melle BENKHENNOUF Amel ; en vie de la réalisation d’un mémoire de fin d’études pour l’obtention du diplôme d’Ingénieur d’état en Contrôle de qualité U.S.T.H.B portant sur le thème : « Etude d’activité bactericide et fongicide des différents produits d’eau Javel avec validité + stabilité : Eau de Javel → Erad Eau de Javel → Bref Eau de Javel → La Croix • Encadrement de Melle BOUTELBA Imène pour un stage pratique afin de finaliser sa thèse de fin d’études en vue de la préparation du diplôme d’ingénieur d’état en Agronomie. • Encadrement des stagiaires : Melle Hammodi Fethia et Melle Oumaza Hadjer ; en vue de la réalisation d’un mémoire de fin d’études pour l’obtention du diplôme Technicien supérieurs en industrie Agro-Alimentaire option contrôle de qualité portant sur le thème : « Etude comparative de la qualité physico –chimique entre la Gelée Royale et la GeléeRoyale importée ». • Encadrement des stagiaires : Melle Issiiakhem Nawel et Melle Smaani Hayat ; en vue de la réalisation d’un mémoire de fin d’études pour l’obtention du diplôme d’Ingénieur d’état en Contrôle de qualité U.S.T.H.B • Portant sur le thème : « Contrôle de qualité des vaccin trivalent Anti poliomyelitique oral TOPV ». • Encadrement des stagiaires : Melle HANIFI Hassina, Mr BENYAHIA Nabil et GUEMMOUR Insaf ; en vue de la réalisation d’un mémoire de fin d’études pour L’obtention du diplôme d’Ingénieur d’état en Contrôle de qualité U.S.T.H.B portant sur le thème : « Contrôle d’activité des sérums de Groupage » Laboratoires de Contrôle de Qualité 205 Institut Pasteur d’Algérie 206 Laboratoires de Contrôle de Qualité Rapport d’Activité 2008 Activités des laboratoires de production Institut Pasteur d’Algérie 208 Laboratoire de Production Rapport d’Activité 2008 Institut Pasteur d’Algérie Rapport d’Activité 2008 Laboratoire de Production des Animaux de Laboratoire Chef de Laboratoire : Nacéra TOUARIGHT (Docteur Vétérinaire, chargée de recherche) Intérim depuis août : Mourad ISSAD (D.M.V.) Depuis août 2008, date de départ du Dr TOUARIGT appelée à une autre fonction. L’activité de production : ¾ Les souris : pour l’année 2008 nous avons enregistré une production de 4898 souris dont 2451 ont été vendu et 2394 ont été répartis dans les différents laboratoires comme suit : Service de parasitologie Laboratoire des vaccins bactériens 190 souris 1120 souris Laboratoire de recherche sur les venins 894 souris Laboratoire des sérums thérapeutiques 190 souris ¾ Les rats : pour l’année 2008, 2368 rats ont été produit, dont 1776 ont été destinés à la vente et 472 pour les différents laboratoires : Laboratoire de recherche sur les venins Service de parasitologie 416 rats 56 rats ¾ Les lapins : pour l’année 2008, la production de lapins s’élève à XXX unité, dont 244 destinés cette année, pour la consommation interne uniquement : Service de parasitologie 122 lapins Laboratoire de recherche sur les venins 28 lapins Laboratoire des vaccins bactériens 70 lapins Laboratoire rage production 1 10 lapins Laboratoire contrôle qualité 06 lapins Annexe de sidi fredj 04 lapins Service d’immunologie 04 lapins Laboratoire de Production 209 Institut Pasteur d’Algérie 210 Laboratoire de Production Rapport d’Activité 2008 Institut Pasteur d’Algérie Rapport d’Activité 2008 Laboratoire des Milieux de Culture Chef de Laboratoire par intérim : Mohamed BENABDELKADER (Ingénieur en Biotechnologies) Au cours de l’exercice 2008, des études de mise au point et de développement d’une gamme importante de milieux de culture destinées au laboratoire de contrôle qualité et de diagnostic médicale, des suppléments et des additifs ont fait l’objet de travaux d’évaluation et pour certains la production à l’échelle interne est assurée depuis plus d’une année en attendant la diffusion des moyens adéquats pour entamer l’étape industrielle. Plus de 390 produits différents sont fabriqués : milieux de culture hydratés, déshydratés, d’additifs, suppléments sélectifs, colorants et réactifs annexes, conditionnés en flacons, tubes, ampoules, flacons compte-gouttes, boites des déshydratés et disques imprégnés. Un contrôle de stérilité et de qualité est réalisé sur 2403 lots de produits qui sont distribués par la direction commerciale à l’échelle nationale à tous les secteurs sanitaires, CHU, laboratoires privés ainsi qu’aux laboratoires internes des différentes annexes de l’Institut Pasteur d’Algérie. Le Bilan de la production au cours du deuxième semestre de l’année 2008 a connu un très important redressement par rapport au premier semestre de la même année. Ce qui à permit d’enregistrer un totale de vente en milieux de culture par la comptabilité commercial équivalent a 179.756.539,21DA, Cette augmentation en production des milieux de culture est le résultat de la remise en marche et réparation de la répartisseuse sertisseuse des flacons sirops. La vétusté de cet équipement dont l’acquisition datte des années 80, était la cause principale de la baisse des bilans enregistrées à la fin de l’année 2007 et début 2008, accentuées par les perturbations d’approvisionnement en matière d’œuvres et produits chimiques enregistrés ces deux dernières années. I. ACTIVITES DE PRODUCTION 1. Unité de production a. Milieux hydratés prés a l’emploie, supplément sélectif , additifs , colorants et réactifs : Durant l’année 2008, le volume de production des milieux de culture et réactifs de diagnostic s’est élevé à 157 400 litres, tous milieux et réactifs confondus. La répartition par type de conditionnement est rapportée dans le tableau n°1. Laboratoire de Production 211 Rapport d’Activité 2008 Institut Pasteur d’Algérie Tableau 1 : production par type de conditionnement Type de conditionnement Volume en litres Quantité / unité Tubes à vis Tubes anaérobies Tubes de conservation 42 215 24 55 2 446 000 8 000 17 800 Flacons perfusion 50 ml Flacons perfusion 250 ml Flacons perfusion 500 ml Flacons sirops Flacons compte – goutte 480 27 324 16 200 70 100 320 14 200 140 000 41 100 316 500 17 000 26 410 265 12 000 80 000 25 000 Ampoules 2 ml Ampoules 5 ml Ampoules 10 ml Ce laboratoire assure aussi la préparation et pesé des solvants conditionnés par l’unité pharmaceutique, Solvant à usage humain, solvant anticlaveleux en assurant l’étape de la stérilisation. Production de L’additif d’émulsion de jaune d’œuf au tellurite de potassium : Les résultats très encourageants et même satisfaisants de mise au point et développement de ce type de supplément et additifs nous à permit à cours terme d’assurer localement (fabrication IPA) la production à l’échelle pilot de supplément du milieu Baird Parker qui à fait l’objet d’importation extérieure depuis plusieurs années afin de couvrir les besoins importants des différents laboratoires de diagnostic et contrôle qualité de L’IPA et au territoire national. Concernant l’étape industrielle, sa faisabilité est en cours d’étude vu l’investissement que sa demande, que se soit en équipements (la chaîne de production) ou bien en formation du personnel exécutant. Désignation du produit Quantité produite au cours de l’année 2008 à la demande. Présentation Additif du milieu Baird Parker 1600 Flacon perfusion de 20ml b- Milieux déshydratés et réactifs en disques : 1) Production des milieux de culture déshydratés : La production manuelle des milieux et bases déshydratés au cours de l’année 2008 a touché 83 produits différents, et elle est représentée dans le tableau n°2. 212 Laboratoire de Production Rapport d’Activité 2008 Institut Pasteur d’Algérie Tableau n°2 : Production des milieux déshydratés au cours de l’an 2008 : Désignation du produit Quantité Milieux de culture 4803 Bases déshydratés 427 Total Présentation Boite de 250 g 5230 2) Production des disques imprégnés : Elle est représentée dans le tableau n°3. Tableau n°3 : Production des réactifs conditionnés en étuis au cours de l’année 2008 : Désignation du produit Présentation Nombre d’Etuis (30 Disques) Disques ONPG Etuis de 30 disques 3286 Disques Sélénite de sodium Etuis de 50 disques 9372 Total 12658 2. L’unité de conditionnement assure L’étiquetage manuel et la mise en boîte des milieux en flacons ; en tubes à vis et des réactifs en ampoules et comptes gouttes ; Conditionnement des produits en fardeaux par la fardeleuse. L’exécution des commandes émanant des différents laboratoires d’analyse de l’Institut Pasteur d’Algérie et la livraison des produits conditionnés vers la Direction commerciale. Laboratoire de Production 213 Rapport d’Activité 2008 Institut Pasteur d’Algérie II. ACTIVITES DE CONTROLE Le laboratoire procède au contrôle de stérilité et de qualité des lots selon la répartition indiquée au tableau 4. Tableau n°4 : Bilan d’activité du laboratoire de contrôle des produits au cours de l’année 2008. Nombre de lots contrôlés Résultats et observations Mois Flacon Tube Amp FCG Totale Janvier 087 67 07 04 165 01 milieu non conforme Février 113 81 02 02 198 05 milieux non conformes Mars 120 96 19 06 241 01 milieu non conforme Avril 118 105 09 03 235 01 milieu non conforme Mai 133 112 14 07 266 00 milieux non conformes Juin 104 96 24 05 229 00 milieux non conformes Juillet 094 79 03 03 178 04 milieux non conformes Août 105 59 12 02 178 02 milieux non conformes Septembre 081 82 15 08 186 04 milieux non conformes Octobre 086 68 11 04 169 02milieux non conformes Novembre 107 73 06 03 189 02 milieux non conformes Décembre 079 81 04 04 168 00 milieux non conformes Nbre total de lots contrôles 2403 Nbre total de lots non conformes 22 (0.91%) Il ressort donc que, 0,91% des lots fabriqués sont de mauvaise qualité dont plus de 98% sont contaminés par le contact de l’air suite au mauvais sellage de la machine de répartition et sertissage des flacons sirops. Les germes retrouvés font apparaître une prédominance de Bacillus. III. ACTIVITES DE RECHERCHE - DEVELOPPEMENT Plusieurs sujets de recherche en production sont objets d’études au niveau du laboratoire de contrôle qualité et développement des milieux de culture, certains ont vu la lumière telle que la production de L’additif d’émulsion de jaune d’œuf au tellurite de potassium, supplément du milieu Baird Parker, d’autres restent dépendants de la disponibilité des réactifs spécifiques et des différents moyens en équipements nécessaires à leurs réalisations, ces projets touchent les domaines suivants : Mise au point d’un milieu chromogène pour l’identification présomptive des Salmonelles : Ce Milieu permet l’identification rapide des bactéries en se basant sur la pigmentation spécifique de chaque espèce. Le résultat obtenus sont très satisfaisants mais nécessitent encore une amélioration de la qualité du milieu et l’étude est toujours en cours. 214 Laboratoire de Production Rapport d’Activité 2008 Institut Pasteur d’Algérie Evaluation d’un nouveau milieu chromogène pour l’isolement et l’identification présomptive des Entérobactéries à partir des coprocultures : Le but de ce travail est d’évaluer un nouveau milieu chromogène prêt à l’emploi en le comparant à un milieu usuel utilisé au niveau des laboratoires d’analyses médicales. Suite aux différents tests de caractérisation morphologiques et biochimiques nous avons pu identifier 116 souches différentes à partir de 54 prélèvements de selles. Les résultats obtenus ont montré une bonne sensibilité et une fiabilité de notre milieu chromogène testé par rapport au milieu classique (GH) étant donné que nous avons pu isoler tous les germes pathogènes et non pathogènes existant dans les prélèvements et ces résultats ont concordés complètement avec ceux obtenus par les laboratoires de référence. Evaluation d’un milieu chromogène pour l’identification Entérobactéries à partir des Aliments : présomptive des Notre étude avait pour but d’évaluer un nouveau milieu chromogène prêt à l’emploi d’une part pour familiariser son utilisation par les biologistes des laboratoires de bactériologie alimentaire et d’autre part pour pallier aux inconvénients des milieux classiques. Nous avons pu identifier 165 souches isolées à partir de 92 prélèvements alimentaires isolés sur le milieu chromogène et sur milieu Hektoen. Les résultats obtenus étaient très satisfaisants puisque ce milieu a montré une bonne croissance, une bonne distinction des genres par apparition de couleurs spécifiques et un bon isolement qui facilite le dénombrement des colonies. De même que les résultats de l’identification présomptive nous ont permis une bonne orientation vers le genre à identifier, ce qui a été confirmé par la galerie classique ou la galerie API 20 E. En outre, l’isolement des bactéries pathogènes, notamment le genre Salmonella qui avait une couleur mauve bien spécifique. L’avantage qu’a montré notre milieu, notamment sa grande spécificité par rapport au milieu Hektoen nous permet de recommander son utilisation dans les différents laboratoires d’Analyses alimentaires afin de permettre un diagnostic rapide. Le projet des milieux Chromogènes à pour objectif la production à l’échelle industrielle de toute la gamme destinée au diagnostic courant, afin de diminuer leurs importations. Production et commercialisation de l’étalon SLO afin de réduire l’importation de ce réactif nécessaire pour le dosage des ASLO. Notre travail a consisté d’une part à la production de la Streptolysine O (SLO) à partir de Streptococcus pyogènes (souche de référence) sur un milieu de culture spécifique, il s’agit du milieu A 2, ce dernier a été choisie pour son bon rendement en SLO comparé à d’autre milieux testes le titrage de la SLO produite était de 25 UI ce dernier est très satisfaisant vu qu’il se rapproche de celui commercialisé (20 UI). Et d’autre part on a tenu à vérifier la qualité de la SLO produite par dosage de l’antistreptolysine O (ASLO) sur 340 sérums de malades par la technique d’hemagglutination (macrométhode) qui est une méthode sérologique la mieux normalisée et a été la première à être élaborée pour la mesure des anticorps dirigés contre le Streptococcus pyogènes. Laboratoire de Production 215 Institut Pasteur d’Algérie Rapport d’Activité 2008 Les titres obtenus ont été comparés avec les titres préétablis par la technique de nephélometrie sur BNA (automate) au niveau du service d’Immunologie IPA. D’après les résultats de comparaison entre les deux techniques nous constatons que sur les 340 prélèvements traités nous avons obtenus 97% de concordance ; ces résultats sont très satisfaisants vu qu’ils confirment le bon titre de notre ASLO ainsi que sa bonne qualité. Des sujets de mémoires fonts l’objet d’études afin de continuer la validation de l’étalon produit sur un échantillon beaucoup plus important et d’essayer de miniaturiser la technique d’hemagglutination afin de la rendre plus pratique pour l’utilisateur et éventuellement permettre sa future commercialisation. Développement des galeries miniaturisées d’identification des principales familles bactériennes responsables de pathologie humaine : Etude qui vise à mettre sur le marché des galeries d’identification à l’usage des laboratoires d’analyses médicales et de diagnostic alimentaire. Des résultats satisfaisants ont été obtenus avec les galeries ENTERO I et ENTERO II pour l’identification des Entérobactéries, ainsi que la galerie d’identification des BGN non Entérobactéries et des Staphylocoques et Streptocoques, a l’exception de quelques caractères qui sont en cours d’optimisation. L’étude de validation sur un nombre important de souches récupérées chez des laboratoires internes de L’IPA et d’autres externes est en cours de réalisation. Mise au point et validation d’une galerie en disques imprégnés pour l’identification des entérobactéries : Nous avons utilisé des disques de papier buvard imprégnés d’un milieu complet qu’on a préparé au préalable (milieu qui permet à la fois la croissance des germes et la révélation du caractère biochimique recherché et qui diffuse du disque vers la suspension bactérienne) Pour la validation, 421 souches appartenant à la famille des Enterobacteriaceae isolées à partir de différents prélèvements biologiques ont permis l’étude comparative de la galerie des disques imprégnés avec la galerie classique ce qui a donné des résultats satisfaisants pour l’ensemble des caractères (le pourcentage moyen de concordance est de 97.82%) avec un pourcentage de concordance de 100% pour l’ONPG, Urée, Glu, Man, Ino, Rha, Ara. Et un pourcentage de concordance qui varie entre 91.35% et 99.04% pour les caractères TDA, Mel, Cit, Ind, VP, H2S, Sac. D’après l’analyse de ces donnés , on remarque que le pourcentage de concordance est supérieur à 90% et donc on constate que l’étude de la performance de cette galerie de disques à l’égard de la galerie classique a donné une très bonne concordance ainsi qu’une excellente corrélation avec le tableau conventionnel, ce qui témoigne de la fiabilité de cette technique miniaturisée et la possibilité de son utilisation pour l’identification de tous les germes appartenant à la famille des entérobactéries. Mise au point et validation d’une galerie en disques imprégnés pour l’identification des Pseudomonadaceae : Le même principe est utilisé pour la validation de cette galerie et nous avons utilisé 324 souches appartenant à la famille des Pseudomonadaceae isolées à partir de différents prélèvements biologiques. 216 Laboratoire de Production Rapport d’Activité 2008 Institut Pasteur d’Algérie D’après l’étude comparative de la galerie des disques imprégnés avec la galerie classique nous avons déduit que les milieux ont donné des résultats satisfaisants pour l’ensemble de caractères avec un pourcentage de concordance de 100% Pour les caractères ONPG, Urée, ADH, Cit, NR, et un pourcentage qui varie entre 86.45% et 98.31% pour les caractères Esc et les sucres. Le pourcentage moyen de concordance de cette galerie est de 97.71%. L’intérêt de ce travail est la production dans le futur de ces deux galeries miniaturisées en disques imprégnés pour l’identification des entérobactéries et des Pseudomonadaceae, sous forme de kit de plaquettes avec cupules contenant chacune deux disques imprégnés de milieu révélateur du caractère recherché. Muni d’un catalogue analytique. Ces galeries permettent comme avantage par rapport à la galerie classique de minimiser le risque de contamination ; gagner du temps en manipulation et d’économiser en frais de production. Des travaux de recherche et d’application sont en cours de réalisation dans le cadre d’installation des BPF avec une assurance qualité des différents produits fabriqués par le laboratoire, des études de stabilité physico – chimique, de fertilité et de stérilité sont soumis aux échantillons prélevés des produits après stockage (absence de chambre froide a +8°C). Le but de cette étude vise à rattraper dans le cas du possible et selon les moyens diffusés, les anomalies enregistrées au cours de la production suite à la vétusté de la majorité des équipements du parc de machines actuellement en exploitation et de prévoir dans le future proche la conception des nouvelles installations attendues pour réalisation au cours de l’année 2009 avec les nouvelles machines de répartition et d’étiquetage qui nous permettra de combler les principaux inconvénients afin d’assurer une production suivants les normes actuelles de fabrication des milieux de culture prés à l’emploie : à savoir le souci de contamination des milieux répartis en flacon sirops et aussi l’étiquetage conforme des produits finies destinés au différents laboratoires de contrôle qualité bactériologique et de diagnostic médical à l’échelle nationale. IV. ACTIVITE DE FORMATION 1. Formation dispensée dans le laboratoire Nom et prénom de l’étudiant elle M SAIDI SOUMIA er M CHERIFI SAID Origine Université de Blida Niveau Sujet du mémoire Encadrement DES Validation de la galerie des disques imprégnés de substrats révélateurs pour l’identification des Pseudomonadaceae isolés à partir des prélèvements M me BELLACHE SOUAD 2. Formation assurée au sein de L’IPA. Participation de Mer M. BENABDELKADER au grand cours International de Mycobactériologie Médicale et de formation aux techniques de laboratoire pour le diagnostic de la tuberculose (CIMM 2008) qui s’est déroulé durant les mois octobre / novembre 2008 à L’Institut Pasteur d’Algérie. Laboratoire de Production 217 Institut Pasteur d’Algérie 218 Laboratoire de Production Rapport d’Activité 2008 Rapport d’Activité 2008 Institut Pasteur d’Algérie Laboratoire de Mise en Forme Pharmaceutique Chef de Laboratoire : Fatma-Zohra BEGHDADI née GHANASSI (Pr. INESSM) INTRODUCTION : Le Laboratoire pharmaceutique est un service intermédiaire entre tous les services de production et le service commercial. Ce Laboratoire comprend trois unités qui sont : * Une unité de lyophilisation ; * Une unité de répartition liquide ; * Une unité de conditionnement. Il assure : - La répartition des produits actuellement fabriqués par l’IPA ainsi que tous les produits acquis sous formes de vrac (bulks) ; - La répartition et la lyophilisation des vaccins antirabiques (à usage humain et vétérinaire) ainsi que le vaccin anticlaveleux ; - Préparation et répartition des solvants, phénolé et claveleux ainsi que le solvant à usage humain ; - La filtration stérilisante de certains réactifs ; - Le conditionnement de tous les produits répartis. I. ACTIVITES DE PRODUCTION 1. Descriptif général du processus de production utilisé : Les produits sont reçus dans des allonges, soit stériles (pour les produits finis stériles non autoclavables), soit non stériles ; dans ce cas, on effectue au sein du service une filtration stérilisante du produit avant de procéder à la répartition. Les produits stériles sont répartis selon le format voulu dans des ampoules à col fermé ou dans des flacons stérilisés A- Lyophilisation : Au cours de l’année 2008, il a été procédé à 46 séances de lyophilisation sur le lyophilisateur types SMIR (au niveau de l’annexe du Ruisseau) et 11 séances de lyophilisation de vaccin vétérinaire sur le lyophilisateur LYOMEGA ST 40(au niveau de l’annexe de Kouba). Laboratoire de Production 219 Rapport d’Activité 2008 Institut Pasteur d’Algérie Ont été lyophilisées les quantités de vaccins suivants : Nom du vaccin Nombre de lots Quantités Vaccin antirabique à usage humain 46 lots 831700 fl Vaccin antirabique à usage vétérinaire 04 lots 30949 fl Vaccin claveleux 09 lots 79573 fl de 100 doses 01 lot de vaccin antirabique à usage médical à été décongelé en cours de lyophilisation. B- Répartition liquide : Cette unité assure la répartition des vaccins, sérums, réactifs et solvants en ampoules et en flacons. La répartition par unité de conditionnement et par produit est donnée dans les tableaux suivants : Ampoules de 10ml Désignation des produits Volume en litre Nombre d’unité Sérum antiscorpionique 551 litres 55990 amp Sérum antirabique 115 litres 10595 amp Sérum de cheval 6 litres 560 amp Sérum antiviperin 72 litres 7388 amp Sang de mouton 54 litres 5000 amp Sang de cheval 180 litres 14400 amp Urée indole 215 litres 21000 amp Télurite de potassium 45 litres 4000 amp BLMT 10 litres 850 amp Ampoules de 2ml Désignation des produits Solvant à usage humain Alun de fer 220 Laboratoire de Production Volume en litre Nombre d’unités 1745 litres 872000 amp 28 litres 113500 amp Rapport d’Activité 2008 Institut Pasteur d’Algérie Ampoules de 5ml Désignation des produits Tergitol 7 AGAR Volume en litre Nombre d’unités 27 litres 5000 amp Hektoen 230 litres 45000 amp Sulfite de sodium 105 litres 21000 amp Témoin 20 litres 3600 amp Lysine 20 litres 3600 amp Ornithine 20 litres 3600 amp Arginine 20 litres 3600 amp Tween 80 26 litres 5000 amp Adomitol 2 litres 350 amp 40 litres 3700 amp Cellebiose 2 litres 350 amp Sorbitol 5 litres 900 amp 2 litres 1/2 450 amp Rhamnose 2 litres 350 amp Galactose 3 litres 550 amp Xylose 2 litres 350 amp T.T.C tergitol 30 litres 5500 amp T.T.C slanetz 35 litres 6500 amp Glycérol 3 litres 550 amp Salicine 5litres 900amp 2 litres 1/2 450amp 5 litres 950amp Giolite cutoni Millibiose Rhamnose Trehalose Flacons de 50ml Désignation des produits Solvant anticlaveleux Volume en litre Nombre d’unité 860 litres 172000 fl Suspension AO 40 litres 350 fl Suspension AH 80 litres 750 fl Suspension BH 40 litres 350 fl Suspension BO 80 litres 750 fl Suspension TO 40 litres 350 fl Suspension TH 40 litres 350 fl Enterovax 6 litres 130 fl symptivac 5 litres 90 fl Laboratoire de Production 221 Rapport d’Activité 2008 Institut Pasteur d’Algérie Flacons de 5ml Désignation des produits Volumes en litre Nombres d’unité Sérum de groupage Anti A 200 litres 38000 fl Sérum de groupage Anti B 200 litres 38000 fl Sérum de groupage Anti A+B 200 litres 38000 fl Sérum de groupage Anti D 200 litres 38000 fl O.M.A 600ml 300 fl O .M.B 600ml 300 fl O : 6,8 400ml 300 fl H:a 480ml 210 fl H:b 250ml 218 fl H:1 300ml 260 fl 250ml 250 fl Hmt Flacons de 20ml Désignation des produits Volumes en litre Nombres d’unité Jaune d’œuf 3 litres 200 fl Solvant phénolé 10 litres 9000 fl C- Conditionnement des produits finis : Au cours de l’année 2008, l’unité conditionnement du laboratoire pharmaceutique a procédé à la mise en boite des produits selon le tableau suivant : 222 Laboratoire de Production Rapport d’Activité 2008 Institut Pasteur d’Algérie Produit Contenant Vaccin antirabique à usage humain 48773 cof de 12 fl Vaccin anticlaveleux fl de 100 doses 1064 cof de 100fl Sérum antiscorpionique 3094 cof de 10 amp Sérum antivipiren 505 cof de 10 amp Sérums de groupage sanguin Suspensions antigéniques de Felix et Widal. 43295 cof de 4fl TO TH BO AO AH BH Sérum agglutinant anti- salmonelles polyvalent OMA 01/2007 OMA 01/2008 OMB 01/2005 OMB 01/2006 sérum agglutinant monovalent H:i H:b H:a H:1 VI H: g m H:mt H : gp H : z 29 O:9 O :1,2 O :3,10,15 O : 1 ,3,19 O : 6. 7 O : 6. 7. 8 O : 8. 20 O : 11 O : 6. 8 708 boites 342 boites 582 boites 705 boites 348 boites 350 boites 150 boites de 1 fl 100 boites de 1 fl 080 boites de 1 fl 62 boites de 1fl 40 boites de 1fl 40 boites de 1fl 45 boites de 1 fl 52 boites de 1fl 20 boites de 1fl 40 boites de 1 fl 25 boites de 1 fl 25 boites de1 fl 62 boites de 1fl 30 boites de 1fl 05 boites de 1fl 20 boites de 1fl 32 boites de 1 fl 32 boites de 1fl 02 boites de 1 fl 02 boites de 1 fl 42 boites de 1 fl Sérums agglutinants anti E coli Sérum agglutinant E.coli trivalent I Sérum agglutinant E.coli trivalent II Sérum agglutinant E.coli trivalent III Sérum agglutinant E.coli trivalent IV 38 boites de 1fl 41 boites de 1fl 36 boites de 1fl 36 boites de 1fl Sérums agglutinant E.coli monovalent O :127 B8 O :86 B7 09 boites de 1fl 08 boites de 1fl O : 55 B5 O :26 B6 O :126 B16 O :119 B14 O :111B4 O :128B12 O : 124 B17 O :114 K90 O :125B15 O :142 k 86 13 boites de 1fl 08 boites de 1fl 08 boites de 1fl 08 boites de 1fl 13 boites de 1fl 10 boites de 1fl 09 boites de 1fl 02 boites de 1fl 08 boites de 1fl 05 boites de 1fl SOLVANT ANTI-CLAVELEUX SOLVANT PHENOLE 1201 cof de 100 fl 10 cof de 100 fl Laboratoire de Production 223 Rapport d’Activité 2008 Institut Pasteur d’Algérie Vaccin antigrippal de 10 doses Vaccin antigrippal de 10 doses N° Lot Quantité D 5825-2 29930 doses Vaccin antigrippal de boite de 1 Vaccin antigrippal de 1 dose N° Lot Quantité D 0665-1 157832 doses D 0666-1 139000 doses D 5760-1 215890 doses D 5768 -1 67600 doses D 0668-1 149142 doses D 0743-1 50808 doses D 0766-1 13950 doses Total : 794222 doses II. ACTIVITE DE FORMATION Formation dispensée hors du laboratoire : Nom de l’enseignant Lieu de l’enseignement Destinataires de l’enseignement Type d’enseignement Faculté de Médecine Etudiants de 3ème année pharmacie Cours théoriques de pharmacie galénique Résidents de 1ère, 2ème et ème année + DEMS de 3 pharmacie galénique Conférences et planchages Mme BEGHDADI née F.Z. GHANASSI 224 Laboratoire de Production Institut Pasteur d’Algérie Rapport d’Activité 2008 Laboratoire des Sérums Thérapeutiques Chef de service : Ahmed Chérif BENGUEDDA (Docteur Vétérinaire Spécialiste) INTRODUCTION Au cours de l’année 2008, les mêmes contraintes de 2007 ont négativement influé sur les capacités de production du laboratoire tant du point de vue quantitatif que qualitatif. Ceci nous a obligé à revoir à la baisse les prévisions affichées en début de saison d’augmenter la production du laboratoire principalement en sérum antiscorpionique. Ces contraintes ont fait l’objet de nombreux rapports et courriers adressés aux services concernés et au plus haut niveau de l’autorité de tutelle. Les points soulevés ont portés principalement sur : La vétusté du matériel de production dont la majorité a été acquis au cours des années 70 qui de plus est dans un état de dégradation très avancée ; Le mauvais fonctionnement de la machine à répartir ce qui a entraîné des pertes dépassant les 30% de notre production annuelle ; L’état général du service tant du point de vue des locaux non conformes à des productions pharmaceutiques ; situation du personnel caractérisée par l’absence de recrutement dont l’un des corollaires est la difficulté de définition des tâches et des responsabilités de chacun. Malgré toutes ces contraintes, le service des Sérums Thérapeutiques a réussi, au prix de lourds sacrifices de la part du personnel, à produire au cours de l’année 2008, 64.000 ampoules de sérum antiscorpionique, 12.000 ampoules de sérum antirabique et enfin 6.800 ampoules de sérum antivipérin. Ces chiffres montrent clairement que les objectifs que nous ont fixé les membres du Comité de lutte contre les envenimations du Ministère de la Santé ont été réalisés. I. ACTIVITE DE PRODUCTION 1. Objectifs de production Le laboratoire des sérums thérapeutiques produit : • Le sérum antiscorpionique purifié (SAS) : produit à partir de venin d'Androctonus australis Hector. • Le sérum antivipérin purifié (SAV) : produit à partir des venins de la vipère à corne (Cerastes cerastes) et de la vipère Lébétine (Vipera lebetina). • Le sérum antirabique (SAR) dont le sérum brut est produit par le service des vaccins et des sérums antirabiques. 2. Descriptif général du process Les chevaux sélectionnés pour la production sont immunisés par injection de doses croissantes d'antigènes préparés à partir de venins spécifiques. Les chevaux sont ensuite ponctionnés et le sérum contenant les anticorps antitoxiques est séparé par coagulation du sang. Laboratoire de Production 225 Rapport d’Activité 2008 Institut Pasteur d’Algérie Le sérum subit alors une série de traitements physiques et chimiques (purification) basée sur : 1. Une double précipitation par des sels d'ammonium, 2. Un clivage des immunoglobulines par pepsination. Les objectifs recherchés à travers cette purification du sérum sont doubles : • Réduire les risques de sensibilisation induits par les immunoglobulines équines; • Augmenter l'activité neutralisante du sérum. Le produit obtenu en fin de purification est une solution de F(ab)'2 1 qui est répartie en ampoules de 10ml, puis conditionnées soit en étuis individuels soit en coffrets de 10 ampoules. 3. Programme et analyse de production 3.1- Objectifs définis en 2008 SAS SAV SAR Total année 60.000 10.000 20.000 90.000 3.2- Quantités produites a) Sérum antiscorpionique purifié Lots libérés en 2008 : Ampoules de SASp mises sur le marché : Volume de SASp envoyé en répartition : Pertes à la répartition : Stock de SAS sous différentes formes : 21 49.000 545 litres 13,5% 80 l b) Sérum antirabique purifié Lots libérés en 2008 : 3 Ampoules de SARp mises sur le marché : 5.500 Volume de SARp envoyé en répartition : 65 litres Pertes à la répartition : 15,5% Stock de SAR sous différentes formes : environ 6.000 ampoules c) Sérum antivipérin purifié 1 Lots libérés en 2008 : 4 Ampoules de SAVp mises sur le marché : 9.500 Volume de SAVp envoyé en répartition : 102 litres Pertes à la répartition : 7% Fragment de l'anticorps qui se lie à l'antigène 226 Laboratoire de Production Rapport d’Activité 2008 Institut Pasteur d’Algérie Récapitulation production 2008 SAS SAV SAR Total année (ampoules) 49.000 9.500 5.500 64.000 4. Contrôle qualité • Contrôles in process Tout au long de la production divers contrôles (pH, teneur en protéines, teneur en sulfates…) se font autant sur le sérum brut que sur le sérum en cours de purification. • Contrôles internes du sérum purifié: Activité neutralisante (séroneutralisation sur souris) Stérilité (contrôles bactériologiques) • Contrôles externe : ces contrôles sont réalisés par le laboratoire de contrôle de la qualité de Kouba sur le sérum purifié réparti : 1. Contrôle physico-chimique : Aspect Protides totaux, Teneur en NaCl, Test du pH. 2. Contrôle de stérilité 3. Contrôle de Toxicité 5. Unité des sérums bruts 5.1. Production de sérum brut : Effectif sas : 35 chevaux Nombre de saignées : Nombre d’immunisation : Volume de sang collecté approx : Volume de sérum brut : 23 25 2600 litres 1300 litres Effectif sav : 05 chevaux Nombre de saignée : Nombre d’immunisation approx : Volume collecté approx : Volume de sérum brut approx : 014 020 500 litres 250 litres 5.2. Production pour milieux de culture : Production sang de mouton approx : 0 Production sang de cheval approx : Production sérum de cheval approx : 0 90 litres 210 lites 10 litres Laboratoire de Production 227 Rapport d’Activité 2008 Institut Pasteur d’Algérie Production sang pour autre service : eco-epidemio parasitaire Immunologie Rage Kouba LRDV : : : : 05 litres sang cheval 05 litres sang mouton 04 litres sérum cheval 02.5 litres sang mouton 5.3. Animaux de production : Type de sérum SAS SAV SAR Chevaux en production 30 05 13 Chevaux en cours d’immunisation 4 0 0 Chevaux pour sang normal 04 Béliers 10 Brebis pour production embryons 30 Agneaux pour contrôle 25 En plus de l’entretien hygiénique et sanitaire (préventif et curatif) de l’effectif équin, l’unité sérums bruts a pris en charge également l’effectif ovin depuis 2005. 6. Animaux venimeux Pour les besoins de la production (collecte de venin), le service a reçu 15.900 scorpions de l’espèce Androctonus australis Hector responsable de la majorité des cas d’envenimation scorpionique observés en Algérie. C’est donc le venin de cette espèce qui est utilisé comme antigène pour la fabrication du sérum antiscorpionique purifié de l’Institut Pasteur d’Algérie. Le vivarium a été transféré à Dely Ibrahim qui a la charge de l’entretien des animaux venimeux et de la récolte du venin. Missions Lieu Participants Objet : NAAMA : Dr A-C. BENGUEDDA, membres du comité : Journée régionale sur l'envenimation scorpionique, Lieu Participants Objet : MOLSHEIM : Dr A-C. BENGUEDDA : Visite Usine Millipore et mise au point d’un protocole d’Ultrafiltration, Lieu Participants Objet : ANTONY : Dr A-C. BENGUEDDA, : Visite atelier d’Ultrafiltration. Lieu Participants Objet : TEHERAN : Dr A-C. BENGUEDDA, : Participation au 4ème Congrès du SRVP. 228 Laboratoire de Production Rapport d’Activité 2008 Institut Pasteur d’Algérie Laboratoire des Vaccins Bactériens Chef de laboratoire : Fatiha GACEM (Biologiste spécialiste) Le laboratoire Vaccins Bactériens est un laboratoire de production et de recherche. La production concerne 02 vaccins à usage humain, 02 vaccins à usage vétérinaire et 51 produits biologiques de diagnostic. Tous ces produits ont été mis au point au niveau du Laboratoire Vaccins Bactériens. La recherche quand à elle est active puisque nous comptons 08 projets dont 02 sont à l’arrêt en attendant les locaux conformes, et chaque projet est à chaque fois finalisé par la mise a point, la production et la commercialisation d’un ou de plusieurs produits (vaccins ou produits biologiques de diagnostic). Au laboratoire Vaccins Bactériens, l’année 2008, a été marquée par La mise au point et la production du plasma de lapins par Monsieur Madadi Mohamed Amine (projet initié en 2007 et finalisé en 2008). Initiation du projet N°8 : l’étude de l’optimisation de la production du sérum anti Closidium Chauvoei, bactérie anaérobie très stricte responsable de maladie du charbon symptomatique chez les ovins et bovins. la I. ACTIVITE DE PRODUCTION 1. VACCINS 1.1- VACCIN A USAGE HUMAIN a. Vaccin typho- paraTyphoïdique A et B : T.A.B Il s’agit d’un vaccin utilisé dans la lutte contre la maladie de la typhoïde. Il est constitué d’une suspension de Salmonella typhi (750 000 bactéries/ml), Salmonella paratyphi A (500 000 bactéries/ml) et de Salmonella paratyphi B (250 000 bactéries/ml) ; tuées par phénol et chauffage et diluées dans du soluté isotonique de chlorure de sodium. Ce vaccin est produit sur commande annuelle, conditionné dans des ampoules de 10ml et vendu par coffret de 10 ampoules. En 2007, la commande annuelle a été arrêtée par le MDN. Laboratoire de Production 229 Rapport d’Activité 2008 Institut Pasteur d’Algérie b. Vaccin anti cholérique OGAWA-INABA Il s’agit d’un vaccin utilisé dans la lutte contre la maladie du choléra. Il est constitué d’une suspension de souches OGAWA et INABA (8 milliards de germes/ml) diluées dans du soluté isotonique de chlorure de sodium. Depuis 2006, nous n’avons pas eu de demande pour la production de ce vaccin. 1.2- VACCIN A USAGE VETERINAIRE a. Vaccin anti charbon symptomatique : Symptivac Il s’agit d’un vaccin utilisé dans les campagnes de vaccination contre la maladie du charbon symptomatique des bovins et ovins. Il est constitué : d’anaculture et d’anatoxine de Clostridium chauvoei (quantité suffisante pour obtenir chez l’animal de contrôle 100% de protection après épreuve), d’aluminium sous forme d’hydroxyde et de formaldéhyde. La production a été arrêtée puisqu’on est en cours de la mise au point et la production d’un vaccin bivalent anti charbon bactéridien-symptomatique demandé sur terrain. En 2008, un lot a été produit comme échantillon demandé par les services de la Santé Animale du Ministère de l’Agriculture pour le renouvellement de l’AMM du vaccin Symptivac. Lot N° Quantité : Bulk (en Litres) Quantité de flacons de 50ml Nombres de doses pour bovins 01/ 2008 05 90 1125 b. Vaccin anti entérotoxémie : ENTEROVAX Il s‘agit d’un nouveau vaccin qui est utilisé pour la prévention contre l’entérotoxémie des bovins, ovins, caprins et lapins. Il est constitué d’anaculture et d’anatoxines de Clostridium perfringens type C et D, d’hydroxyde d’aluminium et de formaldéhyde. Ces vaccins n’ont pas été produits vue que la commande établie par le Ministère de l’Agriculture équivaux à 10 millions de doses et que ceci n’est possible qu’avec l’acquisition d’un fermenteur semi industriel qui sera aussi utilisé pour la production des autres vaccins du service. En 2008, un lot a été produit comme échantillon demandé par les services de la Santé Animale du Ministère de l’Agriculture pour le renouvellement de l’AMM du vaccin Entérovax. Lot N° Quantité : Bulk (en Litres) Quantité de flacons de 50ml Nombres de doses pour bovins 02/ 2008 06 110 2750 230 Laboratoire de Production Rapport d’Activité 2008 Institut Pasteur d’Algérie LE RENOUVELLEMENT DES AMM (AUTORISATION DE MISE SUR LE MARCHE) DES VACCINS SYMPTIVAC ET ENTEROVAX EST EN COURS. 2. PRODUITS BIOLOGIQUES DE DIAGNOSTIC Nous produisons 53 produits biologiques de diagnostic. 2.1- SUSPENSIONS ANTIGENIQUES Il s’agit de suspensions de Salmonella typhi et Salmonella para typhi A et B qui sont destinées au sérodiagnostic de WIDAL et FELIX. - Pour l’antigène somatique : suspension TO, AO, BO. - Pour l’antigène flagellaire : suspension TH, AH, BH. Lot N° Quantité Bulk Quantité de flacons de 50ml TO 2008/ 01 40 L 750 TH 2008/ 02 40 L 750 2008/ 03 40 L 750 2008/07 40 L 750 2008/ 04 40 L 750 2008/09 40 L 750 BO 2008/ 08 40 L 750 BH 2008/ 06 40 L 750 8 Lots 320 L 6000 Suspensions Widal AO AH Total 2.2- SERUMS AGGLUTINANTS : Il s’agit de 46 sérums produits jusqu’à l’heure actuelle. Ils sont produits sur lapins qui produisent des agglutinines de titre élevé. Après répartition, les flacons sont conservés à -20°C au niveau du Service Pharmaceutique et lorsqu’ils sont décongelés, une année de validation leur est donnée. La production des sérums est fonction des stocks existants au niveau du service Commercial et Pharmaceutique. Les sérums produits sont les suivants : - Sérums anti cholérique : 04 Monovalents : 02 : INABA et OGAWA 01 : O :139 (sur commande) Polyvalent : 01 : INABA-OGAWA - Sérums anti Escherichia coli : 16 Monovalents : 12 : O: 55 B5; O: 26 B6; O: 128 B12; O:125 B15; O: 86 B7; O: 119 B14; O:127 B8; O: 111 B4; O: 126 B16. O:114k90 O: 142 k86; O:142 B17 Trivalent : 04 : I (O111+O55+O) II (O86+O119+O127) III (O125+O126+O128) IV (O114+O124+O142) Laboratoire de Production 231 Rapport d’Activité 2008 Institut Pasteur d’Algérie - Sérums anti Salmonelles : 27 Monovalents : 20 H:a; H:b; H:d; H: i; H:Z29; H:g,p; H:f,g; H;g,s,t; H:m,t; H:g,m. O:4,5; O:1,2 O:9; O:1,3,19; O:3,10,15; O:6,7; O: 6,8. O:11; O: 6,14,24; O: 8,20 Polyvalents : 06 H:G (g,m,f,p,s,t); H: 1 (1,2,5,6,7) OMA; OMB. O: 6,7,8. Vi Les sérums qui ont été produits sont ceux qui sont arrivés à rupture du stock existant au niveau du service Pharmaceutique et Commercial, il s’agit du : 2.2.1. Sérums anti Salmonelles Polyvalent : a. Polyvalents : Sérums N° des Lots Quantité en ml H :m,t 04 – 2008 300ml H:1 01– 2008 250ml Nombre de flacons de 1,2ml b. Monovalents : Sérum N° du Lot Quantité en ml H :b 03 – 2008 150 Nombre de flacons de 1,2ml 2.2.2. Sérums anti Escherichia coli : Aucune production n’a été programmé puisqu’il aucun manque de sérums anti E.Coli n’a été signalé. D’autres sérums ont été répartis en Janvier 2009, à savoir : Sérums anti Salmonelles monovalents et polyvalents : nombres d’ampoules de 1,2ml. O: 1,2 : 230 amp O : 6,7 : 270 amp OMA: 260 amp H : d : 170 amp O: 1,3,19 : 180 amp O : 6,8 : 240 amp OMB: 260 amp H : g,m : 150 amp O: 6,14,24: 134 amp O : 6,7,8 : 220 amp O:3,10,15: 225 amp 2.3- PLASMA DE LAPIN Parmi les cocci Gram+, seules les souches de Staphylococcus aureus déterminent la coagulation des plasmas citraté humains ou de lapin dans un délai de 24 heures. Le solvant qui accompagne le plasma lyophilisé servira en même temps à la reconstitution de ce plasma et à sa dilution. 232 Laboratoire de Production Institut Pasteur d’Algérie Rapport d’Activité 2008 Au service Vaccins Bactériens, nous avons mis au point et produit le plasma de lapin lyophilisé pour épreuve de la staphylocoagulase de 2007 à2008. Deux méthodes de production ont été utilisées : - L’une au citrate trisidique - L’autre à l’oxalate d’ammonium Le plasma de lapin a été lyophilisé puis contrôlé au niveau de 04 Laboratoires: - Service Contrôle de qualité : certificat d’analyse N° 222/LCQ/NT/07 du 10/06/07. - Service de Bactériologie Médicale, Antibiothérapieet Hygiène Hospitalière : Courrier du rapport du contrôle du 18/12/2007. - Service Bactériologie Alimentaire, Entérobactéries Vibrillons : Rapport de conformité verbal. - Service Vaccins Bactériens : Service producteur L’étude de son prix de revient par le service Finance a retardé la commercialisation de ce produit jusqu’à l’heure actuelle. III. PRODUCTION DE L’EAU APYROGENE PPI Une quantité de prés de 40 litres d’eau apyrogène PPI à usage injectable, a été produite pour le service Pharmaceutique. A. Contrôle des produits Tous nos produits sont contrôlés au niveau de notre service Vaccins Bactériens durant la chaîne de production, lors de la préparation du bulk, avant répartition, et après répartition. Les contrôles effectués en fonction de chaque produit sont les suivant : contrôles microbiologiques, biochimiques et toxico pharmacologiques (test d’inocuité et d’activité sur animaux). Un contrôle officiel est effectué sur le produit fini par le service Contrôle de Qualité de l’IPA qui délivre les certificats de conformité. B. ACTIVITE DE RECHERCHE-DEVELLOPEMENT 1. Vaccin anti charbon symptomatique-bactéridien (Projet N°3) F. GACEM, M.A. MADADI Sur le terrain Algérien, la valence du charbon bactéridien est aussi importante que le charbon symptomatique. Ce projet a été initié puis arrêté à la demande des responsables de l’institution en attendant des locaux isolés pour la production de ce vaccin. 2. Sérums anti Clostridium perfringens. (Projet N°4) M.A. MADADI - F. GACEM - Sérum de toxinotypie de C.perfringens: A, B, C, D et E. - Sérums titrés et calibrés de référence. Laboratoire de Production 233 Institut Pasteur d’Algérie Rapport d’Activité 2008 Mise au point de sérums de diagnostic par la détermination du type de C.perfringens et de sérums de référence calibrés et titrés pour le contrôle de l’activité du vaccin produit. La mise au point ainsi que la fabrication de toxines purifiées, concentrées et calibrées ainsi que la production de l’anti toxines servant à la toxinotypie et au contrôle de l’activité par immunisation des lapins avec les toxines calibrées a été finalisée. 3. Vaccin à usage humain et vétérinaire anti tétanique : TOXINE ET SERUM (Projet N°5) M.A.MADADI - F. GACEM Un programme de développement de la toxine tétanique a été initié en septembre 1990 au niveau du Service Vaccins Bactériens par le Dr KADRA en collaboration avec le Pr. BIZZINI expert de l’OMS et chef de service à l’institut Pasteur Paris et avec le Dr Marshall de l’institut Pasteur du BRABANT, Belgique. Durant cette période le groupe de travail installé a abordé les différentes étapes de la production de la toxine tétanique brute. Le protocole de production de toxines antitétanique servant à la production de sérum et de vaccin antitétanique est maîtrisé au niveau de notre service. L’étude des souches a été réalisée et une optimisation du milieu de culture pour l’obtention du maximum de toxinogénèse a été finalisée et un lot expérimental a été utilisé pour charger des chevaux. Reprise du projet en 2003 : Suite à la demande de Monsieur le Directeur Général de l’IPA le 05/02/2003, nous avons repris le projet du vaccin et sérum anti tétani (arrêté pour non-conformité des locaux avec accord du responsable de l’IPA). Nous avons initié le travail par le contrôle de la toxine tétanique à savoir son titrage et contrôle de son activité puis sa purification pour la production d’un petit échantillon de vaccin servant à l’immunisation des chevaux. Par la suite, la production de sérum devait être initiée par le chargement des chevaux à l’IPA de Msila par Monsieur Madadi Mohamed Amine (suite à la demande du Directeur Général et que ce travail devait être confidentiel). Mais suite au tremblement de terre qui a secoué la wilaya de Boumerdes et d’Alger, nous avons été chargé de produire en urgence des lots supplémentaires de Vaccins anti typhoïdique et anti cholérique ainsi que tous les produits biologiques de diagnostic pour répondre à la demande si il y’a des cas d’épidémies. Travail restant à faire est : • Production de sérums standard. • Production semi industrielle ou industrielle de toxine, vaccin et sérum. Ce travail demande des mesures draconiennes de sécurité vu le danger que représente le germe à l’état végétatif et surtout à l’état sporulé. Des locaux ainsi que le matériel adéquat servant uniquement au germe tétanique s’impose de lui-même. Notre objectif est d’aboutir à la production industrielle de l’anatoxine tétanique et du sérum anti tétanique étant donné la grande quantité de ce vaccin et sérum importée chaque année par l’Algérie. 234 Laboratoire de Production Institut Pasteur d’Algérie Rapport d’Activité 2008 4- Etude de la virulence des souches productrices de vaccins (Projet N°6) F. GACEM La virulence des souches vaccinales est la base de l’efficacité d’un vaccin. L’origine de cette virulence est soit due aux antigènes somatiques, flagellaires ou bien aux toxines. La virulence des souches est facilement perdue lors de la production des vaccins ou des repiquages des bactéries. Cette virulence peut dans certains cas être récupérée par passage sur cobayes. L’étude de la virulence des souches vaccinales va nous aider à comprendre les mécanismes qui la gèrent et à préserver aux souches leurs capacités toxinogènes et immunogènes indispensables à la production de vaccins. 5- Vaccin multivalent à usage vétérinaire : (Projet N°7) M.A. MADADI - F. GACEM Un programme de développement d’un vaccin multivalent à usage vétérinaire avec des souches de terrain Algérien a été initié pour la mise au point et la production d’un vaccin des toxi infections à bactéries anaérobies (entérotoxémies). 6. Sérum anti Clostridium chauvoei : (Projet N°8) F. GACEM Un programme de développement de sérum anti Closidium Chauvoei, bactérie anaérobie très stricte responsable de la maladie du charbon symptomatique chez les ovins et bovins a été initié en 2008. Il s’agi d’un sérum agglutinant à usage de laboratoire pour le diagnostic de la maladie du charbon symptomatique (à usage vétérinaire) qui est non disponible chez les firmes étrangères spécialistes dans la production de sérum. Deux sortes de sérums sont en cours d’étude : - sérum anti corps bactérien. - Sérum anti – flagelles. Deux méthodes sont utilisées pour cette étude : - Poids de lapins différent. - Calendrier d’injection différent. - Méthodes de prise de sang différentes. Renouvellement des notices des produits : Les notices des produits biologiques de diagnostic sont en cours de renouvellent. S’agissant d’un nouveau produit, la notice du plasma de lapin a été nouvellement faite. 1. Les notices qui sont en cours de renouvellement sont les suivantes : - Sérums agglutinants de Salmonelles, absorbés pour agglutination sur lame porte objet - Sérums agglutinants pour le diagnostic des antigènes somatiques E.coli entéropathogènes pour le nourrisson (EPEC) - Identification sérologique des vibrio cholerae - Recherche d’anticorps par agglutination : Suspensions Antigéniques pour le sérodiagnostic de WIDAL et FELIX. Laboratoire de Production 235 Institut Pasteur d’Algérie Rapport d’Activité 2008 2. Nouvelle notice : Plasma de lapin lyophilisé pour épreuve de la coagulase Toutes ces notices sont envoyées à Monsieur le Directeur correction et avis. Technique pour Par la suite elles seront envoyées au service de conditionnement pour pouvoir faire un tirage et les commercialiser avec leurs propres produits. Exposition et valorisation du vaccin Entérovax : 1. INTERVIEW PAR UN JOURNALISTE DE LA CHAINE DE TELEVISION ALGERIENNE CANAL ALGERIE AU SIEGE DU MINISTERE DE L’ENSEIGNEMENT SUPERIEUR ET DE LA RECHERCHE SCIENTIFIQUE, AU SIEGE DE L’ANVREDET. Le 15/04/2008 nous avons été filmés et interviewé par un journaliste de la chaîne Canal Algérie sur projet innovant du vaccin Enterovax, anti entérotoxémie au siège du Ministère de l’Enseignement Supérieur et de la Recherche Scientifique où siège l’ANVREDET (Agence Nationale de Valorisation des Résultats de la Recherche et du Développement Technologique). Ce reportage a été diffusé le jeudi 17/04/08 à 8h 45mn dans la rubrique Bonjour d’Algérie, Journée de la Science pour faire connaître le vaccin Entérovax. 2. FORUM REGIONAL « PME /UNIVERSITE » (Blida) - F. Gacem, MA. Madadi. 2008 (30/11/2008) Mise au point et production d’un vaccin à usage vétérinaire anti entérotoxémie en Algérie. Forum régional « PME /Université »de Blida. Suite à une invitation émanant de l’ANVREDET, nous avons participé au Forum Régional « PME /Université » à l’hôtel Militaire de Blida comme porteurs de projet rentrant dans le cadre de la valorisation du vaccin Entérovax. 3. FORUM REGIONAL « PME /UNIVERSITE » (Constantine) (15/12/2008) Suite à une invitation émanant de l’ANVREDET pour participer au Forum Régional « PME /Université » à Constantine, nous n’avons pas pu nous déplacer à cause des problèmes de santé. Importance du projet du vaccin Entérovax. - Le projet du vaccin Entérovax mis au point et produit par Monsieur Madadi Mohamed Amine et moi-même, a été sélectionné pour sa valorisation. - Il est classé le premier de la liste des projets innovants dans le domaine de la santé. - Il a été retenu et présenté par l’Algérie sous la rubrique innovation (Santé) et exposé lors de la Réunion du N.E.P.A.D en présence de Monsieur le Président de la République et ses homologues Africains. 236 Laboratoire de Production Institut Pasteur d’Algérie Rapport d’Activité 2008 - Depuis l’an 2000, nous sommes les seuls et uniques représentants de l’Institut Pasteur d’Algérie au sein de l’ANVREDET. - La demande annuelle en ce vaccin par le Ministère de l’Agriculture équivaut à 10 millions de doses et que ceci n’est possible qu’avec l’acquisition d’un fermenteur semi industriel qui sera aussi utilisé pour la production des autres vaccins du service. Le détail de ce projet a été rédigé dans le rapport d’activité 2007. Brevet du vaccin Entérovax : Le dossier du brevet du Vaccin Entérovax nous a été demandé par plusieurs Ministres Algériens, pour sa protection à l’échelle Nationale et Internationale par l’INAPI (l’Institut National Algérien de la Propriété Industrielle). Les frais de l’enregistrement du brevet à l’échelle Nationale et Internationale seront pris en charge par l’Agence ANVREDET dont le siège se trouve au sein du Ministère de la recherche. Ce dossier sera préparé dés que nous aurons les moyens nécessaires pour l’établir. Laboratoire de Production 237 Institut Pasteur d’Algérie 238 Laboratoire de Production Rapport d’Activité 2008 Rapport d’Activité 2008 Institut Pasteur d’Algérie Laboratoire: Vaccins et Sérums Antirabiques Chef de laboratoire : Mahfoud BRAHIMI (docteur en médecine vétérinaire). I. ACTIVITE DE PRODUCTION 1. Objectifs de production : • Le vaccin antirabique à usage médical, inactivé et lyophilisé, répond aux besoins. Il est conditionné en flacon de 2ml. Les prévisions de production pour l’année 2008 sont de 46 lots soit 850.000 doses théoriques. • Le vaccin antirabique à usage vétérinaire produit sur culture cellulaire lyophilisé et conditionné en flacon. Ce vaccin sera produit à la demande. • Le sérum antirabique hétérologue est produit sur équidés hyperimmunisés. Les prévisions pour l’année 2008 sont évaluées à 350 litres. 2. Programme et analyse de production : 2.1. Vaccin antirabique à usage humain : Quantité produite (dose) 739.000 doses Nombres de lots (bulks) 46 lots Nombres de doses théoriques 851.000 doses Numéros de lots S.935 à S.980 Quantités perdues (doses) 112.000 doses Nombres de lots perdus 06 lots Les contrôles internes de qualité sont les suivant : Contrôle de virulence sur souris 132 Test d’activité de virulence 132 Contrôle de stérilité 138 Test d’innocuité sur souris 040 2.2. Vaccin antirabique produit pour l’immunisation des équidés producteurs de sérum antirabique et essai sur les nouveaux lyophilisateurs : Nombres de lots immunisation 02 lots Nombres de lots essai 05 lots Laboratoire de Production 239 Rapport d’Activité 2008 Institut Pasteur d’Algérie 2.3. Vaccin antirabique à usage vétérinaire : Quantité produite (doses) 28.820 doses Nombres de lots Nombres de doses délivrés 04 lots 28.520 doses Numéros de lots 375 à 378 Les contrôles internes de qualité : Test d’innocuité 004 Contrôles de stérilité 140 Contrôles d’activité 008 2.4. Sérum antirabique : Quantité de sérum brut produit Nombres de lots de 30 litres Nombres d’équidés en production 498 litres 16 lots 13 équidés Les contrôles internes de qualité : Contrôle de sérum brut 02 Contrôle de sérum purifié 05 Contrôle de sérum de cheval (titrage) 03 240 Laboratoire de Production Institut Pasteur d’Algérie Rapport d’Activité 2008 2.3. Consommation durant l’année 2008 : Acétone Amphotéricine Anticorps antinucléocapside rabique conjugué à la fluescéine Chambre labtek 06 litres 70mg 12 flacons 10 unités Chlorure de calcium 125mg Chlorure de sodium 07kg Embouts micropipette Ether 200 unités 10 litres Glutamine 18g Hydroxyde de sodium 1kg Iode 1kg Merthiolate 60g D.M.E.M Pénicilline Phosphate de sodium monosodique Potasse 150litres 200 unités 3.2kg 22.5kg Seringue jetable 1 ml 400 unités Seringue jetable 2.5 ml 100 unités Sérum de veau fœtal Streptomycine Kanamycine Trypsine Tube stérile 5ml 10 litres 30g 550g 50g 1200 unités II. PROJETS : 1. Récupération du virus à partir des culots de centrifugation résultant de la préparation du vaccin antirabique médical. Deux rinçages successifs sont faits, dans les deux cas le titre viral obtenu est élevé. Ce travail vise : - La récupération maximale de virus dans le culot (technique d’épuisement) - L’obtention d’un surnageant viral à faible taux de protéines d’origine cérébrales. Laboratoire de Production 241 Institut Pasteur d’Algérie Rapport d’Activité 2008 2. Culture en masse du virus rabique sur culture cellulaire. Ceci à pour objectif la préparation du personnel à un éventuel passage à la fabrication du vaccin antirabique médical sur culture cellulaire. Un staff de 5 personnes suit ce projet à l’échelle pilote. Cependant nous rencontrons des difficultés quant à la maintenance des appareils (système roller) destinés à l’amplification des cellules et par conséquent du virus rabique. 3. Etude de la réalisation d’un moule pour la fabrication des boites à jeter pour souris : Un des facteurs limitants de la production du vaccin antirabique médical sont les boites à jeter : Ces boites sont importées, les délais de livraison longs gênent une production continue et régulière des quantités de matières cérébrales à produire. Nous avons étudié l’opportunité de leur fabrication en Algérie. Une mission sur Oran a permis de pendre des contacts avec un fabriquant des boites plastiques. La réalisation d’un moule servira à fabriquer ces boites à la demande. III. ACTIVITES SCIENTIFIQUES : ¾ Journée « 2ème journée de prévention et de sensibilisation contre la rage » ; le 15 juin 2008 au centre culturel de bordj menaiel Animateur et Président de séance : Dr M. ISSAD ¾ Séminaire « Sensibilisation a la sécurité vaccinale » ; le 29 et 30 juin 2008 à l’I.N.S.P. Communication : « La chaîne de froid » présentée par le Dr ISSAD ¾ Journée d’information « Rage » ; le 19 octobre 2008 à Reghaia. Animateur et Président de séance : Dr M. ISSAD ¾ Journée d’information « Rage » ; le 22 octobre 2008 à la maison de jeune Saïd SENNANI Boumerdes Communication : « La chaîne de froid et vaccins antirabiques » présentée par le Dr M. ISSAD ¾ Séminaire « Rage » le 14 et 28 décembre 2008 à l’I.N.S.P Communication : « le vaccin antirabique et la chaîne de froid » par le Dr M. ISSAD 242 Laboratoire de Production Rapport d’Activité 2008 Institut Pasteur d’Algérie Laboratoire des Vaccins Viraux Vétérinaire Chef de laboratoire : Abdelhamid TARIL (DV Maître de recherche) jusqu’à juillet 2008 Nacéra TOUARIGT (D.V./Chargée de recherche) à partir d’août 2008 De par sa spécificité, le laboratoire de Microbiologie Vétérinaire et d’Epizootiologie assure, d’une part des activités de diagnostic, de recherche et de formation, et, d’autre part, des activités de production, de contrôle et de développement de vaccins viraux vétérinaires. ACTIVITES DE PRODUCTION 1. VACCIN ANTICLAVELEUX SUR CULTURES CELLULAIRES : Le vaccin anticlaveleux, auparavant produit sur moutons selon la technique traditionnelle dite de Bidret et Bocquet, est fabriqué, depuis l’année 2000, sur cultures cellulaires, après obtention de l’A.M.M. en mars 1999. Le descriptif général du process de fabrication de ce vaccin est rapporté dans les bilans annuels des années précédentes. Les contrôles de qualité du vaccin (contrôles in-process) sont réalisés au niveau du service. Le contrôle du produit fini est assuré par le Service Contrôle Qualité de l’IPA. . Souches entretenues au laboratoire : a. Souches vaccinales : - souche Casablanca (pour la production du vaccin sur mouton) - souche RM65 : souche atténuée, adaptée sur culture de reins de mouton (pour la production du vaccin sur culture cellulaire) b. Souches d’épreuve (virulentes) - souche Bertville (souche Sauvage) - souche Maalba - souche Moudjbara Production : La production du vaccin englobe un certain nombre d’activités qui portent sur : • Production de cellules : les reins d’agneau servant à la production de cellules sont obtenus à partir de fœtus qui proviennent des abattoirs d’Alger (abattoir de Rouiba principalement) ou, à défaut, de brebis gestantes de l’élevage de l’Institut. • Production de la culture virale : récoltes des suspensions virales obtenues après infection des cellules rénales. • Production de seed-lot (lots de semence) : ce sont des récoltes de suspensions virales titrées, alicotées puis congelées ; elles sont destinées à l’infection des cellules pour la production de la culture virale. Laboratoire de Production 243 Institut Pasteur d’Algérie Rapport d’Activité 2008 • Préparation de l’excipient de lyophilisation : milieu de Hanks additionné de saccharose et d’hydrolysat de lactalbumine. • Production des lots de vaccins. Volume de la production : La commande du vaccin anticlaveleux par le ministère de l’agriculture, pour la campagne de vaccination de l’année 2008 nous est parvenue en septembre 2007. Elle s’élève à 15.000.000 de doses, livrable avant décembre 2007. Afin de répondre à cette commande, nous avons engagé le programme de production 2008 en octobre 2007. − D’octobre à décembre 2007, nous avons ainsi produit 20 lots de vaccins, donnant 175 496 flacons de 100 doses, soit 17 549 600 doses. La quantité totale de vaccin produite pour la campagne 2008 s’élève donc à 17.549.600 doses. Production pour la campagne 2009 : En prévision de la campagne 2009 nous avons produit une réserve de 06 pools correspondant à 06 lots de vaccins durant le 1er semestre 2008 et une réserve de 36 pools correspondant à 36 lots de vaccin durant le 2éme semestre 2008.soit environ 33 000 000 de doses. ce qui pourrait couvrir largement la campagne 2009. 2. ELEVAGES : Elevage de moutons : Le service contrôle un élevage de moutons de race Lacaune et Blanc du Massif Central, importés à l’origine de France, pays indemne de clavelée : décembre 1994. Ces animaux sont actuellement hébergés sur le site de Dely Ibrahim. Ce sont des animaux « neufs », non vaccinés contre cette pathologie. Elevage de souris : Un élevage de souris Swiss est entretenu au service pour les besoins du diagnostic de la rage. 100 couples de souris assurent la production suffisante à ces besoins. 244 Laboratoire de Production Activités de l’Unité d’Epidémiologie et d es C en t r es d e P r él èv e men t s et de la Vaccination Institut Pasteur d’Algérie 246 Unité d’Epidémiologie et Centres de Prélèvements et de la Vaccination Rapport d’Activité 2008 Rapport d’Activité 2008 Institut Pasteur d’Algérie Unité d’Epidémiologie d’Intervention et Vaccino-Vigilance Chef d’Unité : Abderrezak SOUFI (Docteur en médecine, chargé de recherche). L’unité a été créée en janvier 2005.Elle est située au niveau de l’annexe de l’Institut Pasteur de Kouba. 1. Activité de contrôle et de surveillance épidémiologique En étroite collaboration avec la Direction de la Prévention du MSPRH et les différents services de l’Institut Pasteur d’Algérie, l’unité joue un rôle capital dans la prise en charge des cas éventuels d’épidémie au niveau national, aussi elle effectue un suivi des nombres de cas enregistrés. L’unité procède en permanence à une évaluation de tout facteur de risque environnemental qui peut fournir des explications ou des éclaircissements sur l’émergence ou la réémergence de certaines maladies infectieuses. En collaboration avec l’I.N.S.P, l’unité œuvre pour la mise en place d’un système d’information géographique pour l’évaluation progressive de certaines pathologies telles que les maladies du PEV, le scorpionisme et la rage. Elle évalue continuellement la consommation annuelle en vaccins du PEV à l’échelle nationale en se basant sur les consommations au niveau des EPSP, EPH , EHS et les établissements sanitaires privés ; et les livraisons effectuées par l’Institut Pasteur d’Algérie conformément au seuil du quota défini par la Direction de Prévention du Ministère de la Santé Publique et de la Réforme Hospitalière. L’unité fait partie du point focal chargé du règlement sanitaire international (RSI), en collaboration avec différents Ministères et régie par la Direction de la prévention du Ministère de la Santé, de la Population et de la Réforme Hospitalière. Membre du bureau de coordination chargé du suivi de la gestion des états des stocks des vaccins et sérums. Membre permanent de la commission d’évaluation des offres nationales et internationales (Bureau des marchés IPA). L’unité est chargée en collaboration avec l’I.N.S.P sur l’évaluation et l’évolution des cas des Manifestation post-vaccinal indésirables ceci dans le cadre de la vaccination du PEV, vaccination et sérovaccination anti rabique et sérothérapie anti scorpionique à l’échelle national. Unité d’Epidémiologie et Centres de Prélèvements et de la Vaccination 247 Institut Pasteur d’Algérie Rapport d’Activité 2008 2. Activités scientifiques ¾ Membre du comité national de lutte contre les zoonoses au MSP/RH. ¾ Membre du comité de pilotage du cours d’épidémiologie d’intervention, des pays riverains de la méditerranée occidentale. ¾ Investigateur principal du projet de recherche ACIP sur le système d’information géographique (SIG et télédétection en cours). ¾ Renforcement de la surveillance et contrôle de la leishmaniose et de l’envenimation scorpionique et mise en place d’un SIG Health Mapper à l’échelle des wilayas d’Algérie de 1980 à 2003 et étude plus grande échelle centrée sur M’SILA avec analyse des données climatiques et environnementales. ¾ Membre du bureau des experts de la rage en Afrique 1ère réunion qui s’est déroulée à Abidjan en côte d’ivoire du 10 au 13 mars 2008. ¾ Préparation de la 2ème réunion du bureau des experts de la rage en Afrique qui se déroulera à DAKAR (Sénégal) du 16 au 19 mars 2009. ¾ Réactualisation des notices pour les vaccins antirabiques vétérinaires et humains. • Formation : - Formateur des personnes chargées de la vaccination du PEV à l’échelle des 48 wilayas du pays (I.N.S.P). - Evaluation des cas MPVI dans le cadre de la vaccination du PEV à l’échelle national en collaboration avec le Dr KEDDACHI, chargé du suivi des MPVI (INSP). • Communications : ¾ Journées médicales à l’hôpital de kolea le 06/01/08. Thème : Prise en charge d’un cas de morsure et/ou griffure par animal. ¾ 1ère réunion du bureau des experts Africains de la rage à Abidjan côte d’ivoire du 10 au 13 Mars 2008. Thème : Situation épidémiologique de la rage en Algérie. ¾ 1ères journées médicales à Biskra le 09 et 10 avril 2008. Thème : Prise en charge d’un cas de post-exposition par morsure et/ou griffure occasionnée par un animal. ¾ 2ème journée de prévention et de la sensibilisation contre la rage qui a eu lieu au centre culturel de Bordj Menaiel le 15/06/2008. Thèmes : 9 Situation épidémiologique de la rage en Algérie. 9 Le Centre de Vaccination Anti-Rabique. 9 Prise en charge des personnes exposées au risque rabique. 248 Unité d’Epidémiologie et Centres de Prélèvements et de la Vaccination Rapport d’Activité 2008 Institut Pasteur d’Algérie ¾ Formateur au séminaire de sensibilisation à la sécurité vaccinale le 29 et 30 juin 2008 à l’INSP. ¾ Animateur à la journée d’étude sur le règlement sanitaire international les 13,14 et 15 octobre 2008 à Sidi Fredj. ¾ Animateur à la journée d’information sur la rage le 19/10/08 à Réghaia. ¾ Journée d’information sur la rage organisée à la maison de jeunes Said Sennani de Boumerdes le 22/10/08. Thèmes : 9 Situation de la rage en Algérie. 9 Le Centre de Vaccination Anti-Rabique. 9 Prise en charge des personnes exposées au risque rabique. 9 Chaîne du froid. ¾ Séminaire rage à l’I.N.S.P pour la wilaya d’Alger le 14/12/08 et le 28/12/08 pour les wilayates du centre : 9 Tipaza 9 Blida 9 Medea 9 Bejaia 9 Tizi ouzou. Thèmes : 9 Prise en charge des personnes exposées au risque rabique. 9 Présentation et fonctionnement d’un Centre de Vaccination Anti Rabique. 9 Chaine du froid et vaccins anti rabiques. • Enquête sur le terrain ¾ Rab-Med control : Prospection des sites de chiroptères à Bejaia du 05 au 07 avril 2008. ¾ Mission d’information et d’évaluation suite au décès des personnes victimes de piqures de scorpion : BOUSSAADA le 03/08/2008. • Publications : ¾ Fighting rabies in Africa (the official journal of the international society for vaccines. ¾ Situation épidémiologique de la rage en Algérie (fascicule de la Santé) en cours ¾ Prise en charge des personnes exposées au risque rabique .(Revue MedicoPharmaceutique) en cours. Unité d’Epidémiologie et Centres de Prélèvements et de la Vaccination 249 Institut Pasteur d’Algérie Rapport d’Activité 2008 • Projets en cours : ¾ Préparation de la réunion du bureau des experts de la rage qui se Dakar-SENEGAL. déroulera à ¾ Evaluation des infections à salmonelles en Algérie (Responsable du projet : Pr. RAHAL). ¾ Collaborateur- expert : projet de recherche RebMed contrôle (rage des chiroptères) 2007. 250 Unité d’Epidémiologie et Centres de Prélèvements et de la Vaccination Rapport d’Activité 2008 Institut Pasteur d’Algérie Centre des Prélèvements Chef du Centre : Asma BRIKA (Docteur en Médecine) I. L’ACTIVITE DU CENTRE DE PRELEVEMENT Le centre des prélèvements est chargé de l’accueil et l’orientation des malades qui viennent se renseigner et désirent effectuer leurs analyses spécialisées au niveau des laboratoires de l’Institut Pasteur d’Algérie. Il est chargé également : - De la codification des paramètres et l’orientation de malades vers la facturation. - Des inscriptions des malades sur les registres des rendez-vous. - La prise des renseignements cliniques des malades. - L’enregistrement de leurs analyses sur le registre qui correspond. - Assure la coordination avec les laboratoires de l’IPA pour le devenir et la remise des résultats. Le centre s‘occupe aussi de la réception des prélèvements qui parviennent des différents hôpitaux du territoire national. Par ailleurs le centre assure l’envoie des résultats par fax pour les malades qui habitent l’intérieur du pays. Le centre de prélèvement reçoit une moyenne de 350 malades par jour. Durant l’année 2008 : 28306 malades ont été enregistrés, leurs répartitions service est comme suit : par Unité d’Epidémiologie et Centres de Prélèvements et de la Vaccination 251 Rapport d’Activité 2008 Institut Pasteur d’Algérie 1- SERVICE D’IMMUNOLOGIE : L’unité Les paramètres AUTOIMMUNITE MARQUEURS TUMORAUX ET HORMONES ALLERGOLOGIE HLA FAN 5363 FR + ANTICCP 2007 ANCA 694 APL 2509 ANTI TISSU 2552 COELIAQUE 503 - Immuno électrophorèse des prot. - Electrophorèse des prot + prot de Bences J - C 3 - C4 - CRP, etc. …. - Sang+ LCR IMMUNOCHIMIE Le nombre de paramètre enregistre Total 13628 3176 4936 1760 1113 PSA – ACE . CA 19.9 – CA 15-3 – CA 125 α FP – β HCG 4178 HORMONES DE LA REPRODUCTION HORMONES THYROIDIENNE AUTRE : CORTISOL, ACTH, PTH …. 3065 IgE Total IgE SPECIFIQUE 413 696 1109 HLA B5 HLA B 27 HLA Greffe 1450 1402 458 3310 Le nombre de prélèvements réceptionné 27161 Le nombre de malades prélevés est de 17616 malades Le nombre de prélèvements réceptionnés pour le service d’immunologie est de : 27161 prélèvements. Il est à noter que l’anti corps anti CCP a été lancé la fin 2008. 2. SERVICE DE VIROLOGIE : Le nombre de malades enregistrés pour la virologie est de : 6617 malades. Hors que le nombre de paramètres réalisés est reparti comme suit : 252 Unité d’Epidémiologie et Centres de Prélèvements et de la Vaccination Rapport d’Activité 2008 Institut Pasteur d’Algérie Les paramètres Le nombre Rubéole 1542 Syphilis 877 Hépatite A.B.C. 3725 HIV 758 EBV 505 Néo du Cavum 337 MNI 242 CMV-Herpes-Rougeole… 1577 Lyme-Ricketsie-Coxsackie 142 Chlamydia 98 TOTAL 9803 3. LABORATOIRE DE BIOLOGIE PARSITAIRE : Le centre de prélèvement s’occupe de l’enregistrement et la réception de trois paramètres : Toxoplasmose, Hydatidose, Parasitologie des selles, en ce qui concerne la sérologie leishmaniose, amibienne etc.…, les malades sont orientés vers le service de parasitologie. Le nombre de malades reçu est : 2784 malades. Les paramètres sont repartis comme suit : Les paramètres Le nombre Toxoplasmose 2117 Hydatidose 236 Parasitologie des selles 188 Leishmaniose 211 Amibiase 27 Bilharziose 5 TOTAL 2784 Unité d’Epidémiologie et Centres de Prélèvements et de la Vaccination 253 Rapport d’Activité 2008 Institut Pasteur d’Algérie 4. LABORATOIRE DE MYCOLOGIE : Le centre de prélèvement reçoit les malades, codifie leurs paramètres et les oriente soit pour un prélèvement sanguin lorsqu’il s’agit d’une sérologie, ou bien vers le service de mycologie lorsqu’il s’agit d’un prélèvement dermatologique Les paramètres Le nombre Sérologie aspergillaire candidose 57 Prélèvement dermatologique 492 Total 549 Le nombre de malades est de : 549. 5. LABORATOIRE DES ENTEROBACTERIES : Le nombre de malades réceptionné est de : 367. Les paramètres Le nombre Coproculture 307 Sérologie de Widal et Félix 028 Helicobactére pylori 024 Yersiniose 008 Total 367 6. SERVICE DE BACTERIOLOGIE : Le nombre de malades prélevés est de : 247 Les paramètres Le nombre Sérologie de la brucellose 230 Sérologie de la coqueluche 017 Total 247 254 Unité d’Epidémiologie et Centres de Prélèvements et de la Vaccination Rapport d’Activité 2008 Institut Pasteur d’Algérie 7. LABORATOIRE D’ANA-PATHOLOGIE : Le centre de prélèvement a réceptionné 126 pièces pour le laboratoire d’Anatomie pathologique. AU RESUME : Service Le nombre de malades Immunologie 17616 Virologie 6617 Parasitologie 2784 Mycologie 549 Entérobactérie 367 Bactériologie 247 Anatomie Pathologique 126 Total 28306 Au total : plus de 28306 malades ont été prélevés au centre de prélèvement. Plus de 37851 prélèvements ont été enregistrés. Unité d’Epidémiologie et Centres de Prélèvements et de la Vaccination 255 Institut Pasteur d’Algérie 256 Unité d’Epidémiologie et Centres de Prélèvements et de la Vaccination Rapport d’Activité 2008 Rapport d’Activité 2008 Institut Pasteur d’Algérie Centre de Vaccinations Chef du centre : Samira HARCHI (Docteur en Médecine) I. INTRODUCTION 1. Activité de Référence Le centre a eu à prendre en charge et donner un avis définitif sur les différentes méthodes de traitement antirabique. Il a eu à corriger et à conseiller les différents secteurs sanitaires d’Algérie sur le traitement antirabique. . 2. Activité de Santé Publique Cette activité comporte trois volets : - Prévention antirabique - Vaccinations internationales et autres - Prévention anti-poison 3) Activité Scientifiques a) Membre du comité de lutte contre les zoonoses au MSP/RH b) Activités de formation et communications orales Le centre antirabique a contribué à organiser des journées nationales et séminaires sur la rage sur l’ensemble du territoire national en collaboration avec les M.S.P et l’INSP. II. ACTIVITES DE SANTE PUBLIQUE Le Service des vaccinations a enregistré durant l’année 2008 : 14956 patients dont : 01926 consultants pour la prévention antirabique 13013 consultants pour les vaccinations internationales et autres 00017 consultants pour la prévention anti-poison Unité d’Epidémiologie et Centres de Prélèvements et de la Vaccination 257 Rapport d’Activité 2008 Institut Pasteur d’Algérie III. ACTIVITES DE SANTE PUBLIQUE ET CONSULTATIONS Vaccination et Prévention Antirabique 1. Nombre de consultants : 1926 1.1- Répartition des consultants selon l’âge Tranche d’âge Moins (-) de 5 ans 6 à 15 ans 16 ans et plus 1926 143 331 1452 % 7,42 17,19 75,39 Nombre de Consultants 1.2- Répartition des consultants selon le sexe Sexe Féminins Masculins 1926 560 1366 % 29,08 70,92 Nombre de Consultants 1.3- Répartition saisonnière des consultants Mois Jan Fev Mar Avr Mai Jun Jul Août Sep Oct Nov Dec 1926 108 106 129 136 160 246 269 195 130 205 133 109 % 5,61 5,50 6,70 7,06 8,31 12,77 13,97 10,12 6,75 10,64 6,91 5,66 Nbre de Consultants 1.4- Répartition des consultants selon le siège de contact Siège de Contact Tête Mains Cou Organes Génitaux Tronc Memb. Sup. Memb. infer. Contact 1926 107 597 3 55 259 751 12 142 % 5,55 31 0.16 2.86 13.45 38.99 0.62 7.37 Nombre de consultants 1.5- Répartition des consultants selon la situation de l’animal mordeur Situation de l’animal Animal ayant un propriétaire connu Animal en fuiteou érrant 1926 709 1217 % 36,81 63,19 Nombre de Consultants 258 Unité d’Epidémiologie et Centres de Prélèvements et de la Vaccination Rapport d’Activité 2008 Institut Pasteur d’Algérie 1.6- Répartition des consultants selon que l’animal a un propriétaire, connu et vacciné ou non-vacciné Animaux Connus Vaccinés Non-vaccinés 709 315 394 % 44,43 55,57 Nombre de consultants 1.7- Répartition des consultants selon la nature de la lésion Nature de la lésion Contact Morsure Griffure 1926 142 1193 591 % 7,37 61,95 30,68 Nombre de consultants 1.8- Répartition des consultants selon le caractère de la lésion Caractère de La lésion Profonde Superficielle Contact 1926 366 1418 142 % 19 73,63 7,37 Nombre de Consultants 1.9- Répartition des consultants selon le nombre de jours écoulés entre la contamination et la consultation Nombre de jours de 0 à 5 J de 6 à 15 J 1926 1836 72 18 % 95,33 3,74 0,93 Nombre de consultants 16 jours et plus 1.10- Nombre de personnes traitées d’après le traitement appliqué Traitement Appliqué Vaccination continue Séro-vaccinaton continue Vacc.ou séro-vacc Intérrompu dès la remise du certificat du vétérinaire 1926 1186 168 572 % 61,58 8,72 29,70 Nombre de consultants Unité d’Epidémiologie et Centres de Prélèvements et de la Vaccination 259 Rapport d’Activité 2008 Institut Pasteur d’Algérie 2. ANIMAUX MORDEURS : 2.1- Répartition des consultants selon l’origine animale de la contamination Chien Chat Rat Souris Singe Veau Brebis Hamster 1926 937 570 273 61 18 14 11 11 % 48,65 29,60 14,17 3,17 0,94 0,73 0,57 0,57 Cheval 9 0,47 Lapin 7 0,36 Vache 5 0,26 Sanglier 3 0,16 Ane 2 0,10 Coq 1 0,05 Chèvre 1 0,05 Fennec 1 0,05 Mouton 1 0,05 Vaccin-Vétéra 1 0,05 260 Unité d’Epidémiologie et Centres de Prélèvements et de la Vaccination Rapport d’Activité 2008 Institut Pasteur d’Algérie 2.2- Répartition des consultants selon les différentes wilayas d’Algérie (sur 1926 consultants) WILAYAS Nombre de Consultants Alger 1542 Blida 194 Boumerdès 59 Medéa 15 Tizi-Ouzou 14 Bouira 9 Jijel 8 Ain-Defla 7 Mila 6 Sétif 6 Skikda 6 Tipaza 5 Batna 4 Béjaia 3 Chlef 3 M’sila 3 Ghelizane 2 Saida 2 Tebéssa 2 Tiaret 2 Ain-Témouchent 1 Biskra 1 Constantine 1 Djelfa 1 El-Bayadh 1 El-Taref 1 Mascara 1 Oran 1 SDF 1 Unité d’Epidémiologie et Centres de Prélèvements et de la Vaccination 261 Rapport d’Activité 2008 Institut Pasteur d’Algérie Pays étrangers (Résidants) PAYS Nombre de Consultants Chine 21 Congo 01 France 01 Irlande 01 Tchèque 01 3) Vaccinations Internationales et Autres Type de Vaccins Méningite DiphtérieTétanos FièvreJaune AntiGrippal Hépatite 13013 6785 3403 1659 1051 115 % 52,14 26,15 12,75 8,08 0,88 Nombre de consultants La Prévention Anti-Poison Origine de la piqure Serpent Scorpion Divers insèctes (Arraignée, Millepattes, Piqure d’oursins, Abeille) 17 9 6 2 % 52,94 35,29 11,77 Nombre de Consultants 262 Unité d’Epidémiologie et Centres de Prélèvements et de la Vaccination Activités des Antennes Institut Pasteur d’Algérie 264 Antennes de l’Institut Pasteur d’Algérie Rapport d’Activité2008 Rapport d’Activité 2008 Institut Pasteur d’Algérie Antenne de Constantine Responsable : Foudil KHELIFA (DM / MA en microbiologie / INESSM / Constantine) I. ACTIVITE DE DIAGNOSTIC Durant l’année 2008 ; nous avons traité 4315 échantillons, 4015 patients ont été prélevés sur place. Les analyses se repartissent comme suivent : 1. HORMONES (THYROIDIENNES, FERTILITE), MARQUEURS TUMORAUX : HORMONES THYROIDIENNES NOMBRES DE TESTS Technique TSH 1227 MEIA T3 Libre 0450 MEIA T4 Libre 0763 MEIA Ac anti TPO 0134 MEIA NOMBRES DE TESTS Technique FSH 216 MEIA LH 183 MEIA PROLACTINE 188 MEIA ESTRADIOL 114 MEIA PROGESTERONE 051 MEIA TESTOSTERONE 103 MEIA B HCG 104 MEIA NOMBRES DE TESTS Technique PSA TOTAL 1157 MEIA PSA LIBRE 0278 MEIA ACE 0079 MEIA CA.19.9 0024 MEIA CA125 0043 MEIA CA15.3 0047 MEIA AFP 0020 MEIA HORMONES DE FERTILITE MARQUERS TUMORAUX Antennes de l’Institut Pasteur d’Algérie 265 Rapport d’Activité2008 Institut Pasteur d’Algérie 2. CYTOMEGALOVIRUS (Recherche des : IgG, IgM) : TYPE DE VIRUS Nombre de Sérums Nombre de positifs Technique CMV IgG 200 200 MEIA CMV IgM 200 074 MEIA 3. SEROLOGIE DES HEPATITES VIRALES ET DU HIV 1-2 : Marqueurs Nombre de Sérums Nombre de positifs Technique Ag Hbs 418 113 MEIA Ac anti HBc 375 101 MEIA IgM anti HBc 98 014 MEIA Ag Hbe 113 013 MEIA Ac anti Hbe 104 084 MEIA Ac anti HBs 212 057 MEIA Ac anti HCV 235 026 MEIA IgM anti HAV 139 050 MEIA HIV 198 004 MEIA 4. TOXOPLASMOSE, RUBEOLE Désignation du test Nombre de tests Nombre de positifs Technique Toxoplasmose IgG 346 96 MEIA Toxoplasmose IgM 067 9 MEIA Rubeole IgG 310 299 MEIA Rubeole IgM 082 0 MEIA 5. AUTRES ANALYSES NOMBRES DE TESTS Technique TROPONINE CARDIAQUE 31 MEIA CORTISOL 24 FPIA FERRITINE 22 MEIA 266 Antennes de l’Institut Pasteur d’Algérie Institut Pasteur d’Algérie Rapport d’Activité 2008 II. ACTIVITE DE RECHERCHE Cette activité de recherche a porté sur la détection des mutants pré-core ainsi que sur les génotypes du virus de l’hépatite B qui circulent dans l’est Algérien, chez les porteurs chroniques de l’Ag HBS. Cette recherche s’est faite en collaboration avec le Dr THIBAULT du service de virologie de l’hôpital la Pitié – Salpêtrière (Paris). Il à été démontré que 93% des virus étaient de génotype D, les mutants pré – core sont eux largement majoritaires. La détermination des génotypes peut en effet avoir un impact sur la prise en charge thérapeutique. III. PUBLICATION ; COMMUNICATION ; THESE : 1. COMMUNICATIONS : - Journées médicales chirurgicales de Tamanrasset les 22 et 23 janvier 08. Les génotypes et la prévalence des hépatites virales B chroniques (A g Hbe négatif) en Algérie. (Dr F. KHELIFA ). - XIème congrès maghrébin, 14ème journées nationales les 3 et 4 mai 2008 – Alger Génotypes et relation génotypes / mutation des souches de virus de l’hépatite B circulants en Algérie). (Dr F. KHELIFA ET Dr V. THIBAULT). - 1ère journée de microbiologie clinique le 29 mai 2008 – Alger – Prévalence des génotypes et des mutants pré C du virus de l’hépatite B dans le nord – est algérien. (Dr F. KHELIFA ET Dr V. THIBAULT). 2. PUBLICATION : Auteurs : Dr F. KHELIFA ET Dr V. THIBAULT Titre : Caractéristiques des souches virales responsables d’hépatites B chroniques en Algérie du nord - est. Revue : Pathologie Biologie (02 Octobre 2008) 3. THESE : Soutenance de la thèse de DESM du Dr KHELIFA FOUDIL le 17 juin 2008 portant sur la place des mutants pré–core du virus de l’hépatite B chez les porteurs chroniques de l’Ag HBS dans l’est algérien. Antennes de l’Institut Pasteur d’Algérie 267 Institut Pasteur d’Algérie 268 Antennes de l’Institut Pasteur d’Algérie Rapport d’Activité2008 Rapport d’Activité 2008 Institut Pasteur d’Algérie Antenne de M’sila Responsable : Abdelkrim BOUDRISSA (Ingénieur d’Etat en Biologie) Le présent rapport est subdivisé en trois volets : - activités de diagnostic - activités de recherche - activités de formation I. ACTIVITE DE DIAGNOSTIC Laboratoire de biochimie Nature de prélèvement Sang Urine Paramètre de recherche Nombre HBA1c 0281 Urée 1812 Créatinine 2589 A. Urique 0506 cholestérol 1773 HDL-LDL 0147 Triglycéride 1752 Transaminases 0445 Phosphatase Alcaline 0177 Bilirubine total 0222 Bilirubine directe 0075 Gama GT 0003 Phosphorémie 0198 Calcémie 2018 Fer sérique 0293 Chimie des urines 1824 Techniques utilisées Laboratoire d’hématologie Nature de prélèvement Sang total Plasma (citrate) Paramètre de recherche Nombre de malade FNS / Groupage 2912 VS 1199 TP 0249 Antennes de l’Institut Pasteur d’Algérie 269 Rapport d’Activité2008 Institut Pasteur d’Algérie Laboratoire de sérologie Nature de prélèvement Sang Paramètre de recherche hTSH ANTI-TG T3 libre T4 libre Anti-TPO Testostérone β hCG FSH LH PRL E2 Progestérone PSA libre PSA totale ACE CA19-9 CA15-3 CA125 AFP Ag HBs Ag Hbe Ac anti Hbe Ac anti HBc Ac anti HBs HCV HIV HAV(IgM) CMV Toxo G Rub G Toxo M Rub M Férritine Syphilis W. Rose Brucellose ASLO CRP FR TIG 270 Antennes de l’Institut Pasteur d’Algérie Nombre Techniques utilisées 941 10 423 426 48 59 60 139 120 116 31 47 268 386 60 49 21 27 32 918 636 635 644 625 306 294 69 99 520 461 16 13 25 383 139 08 304 485 329 00 MEIA MEIA MEIA MEIA MEIA MEIA MEIA MEIA MEIA MEIA MEIA MEIA MEIA MEIA MEIA MEIA MEIA MEIA MEIA MEIA MEIA MEIA MEIA MEIA MEIA MEIA MEIA MEIA MEIA MEIA MEIA MEIA MEIA Hémagglutination Hémagglutination Agglutination Agglutination Agglutination Agglutination Agglutination Rapport d’Activité 2008 Institut Pasteur d’Algérie Les prélèvements pour analyses immunologiques : sont acheminés au laboratoire central d’immunologie de l’IPA Alger Paramètre de recherche Nombre de paramètres Bilan connectivite 92 Electrophorèse de protéines 38 Maladies cœliaques 58 Ac anti Gliadine 02 C3-C4 13 S de chlamydiae 01 IgG et IgM anti phospholipides 04 FAN 14 Profil protéique sérique 09 IgG, IgM anticardiolipide 27 IgG, IgM anti-B2GP1 30 Ac Anti Tissu 13 ANCA 32 1gE, Test monospécifique 01 Bilan SAPL 09 IgE spécifique total 01 Laboratoire de parasitologie Nature de prélèvements Selles - Coproculture Paramètre de recherche -salmonella -V. colériques -E. coli GEI - E.parasitologique - Scotch-test Nombre Techniques utilisées 261 Culture 103 E. direct Enrichissement : Ritchie- Willis 00 E. direct 07 E. direct + culture 1648 E. direct + culture Champignons - E. mycologique Leishmanies Frottis Antennes de l’Institut Pasteur d’Algérie 271 Rapport d’Activité2008 Institut Pasteur d’Algérie Laboratoire de bactériologie Nature de prélèvements Nombre Techniques utilisées 1319 E.D+ culture P. vaginale 30 E.D+ culture Pus 02 Culture Gorge 01 Culture urines Laboratoire de contrôle de qualité Nature de prélèvements Nombre de prélèvements Aliments 131 Eaux 00 Techniques utilisées II. ACTIVITE DE RECHERCHE Projet ANDRS : soumission d’un projet : « Application du système d’information géographique dans le contrôle et le suivi de la leishmaniose cutanée zoonotique dans le bassin du Hodna. Missions scientifiques Dans le cadre d’une Thèse de Doctorat poursuite de l’exploration du nouveau foyer de la leishmaniose cutanée zoonotique dans la région d’El Mhir wilaya de Bordj Bou Arreridj, par des enquêtes sur le parasite, sur le vecteur et sur le réservoir. Enquêtes entomologiques dans la région de Guerrara wilaya de Ghardaia, dans certaines localités de la vallée Oued Righ. Etudes sur le réservoir de la leishmaniose cutanée avec la capture de plusieurs spécimens appartenant à différentes espèces Psammomys Obesus, meriones Shawi, Meriones lybicus, Jaculus jaculs, Gundi etc… Dans le cadre du projet ACIP A-04-2007 fait partie de l’équipe du laboratoire du Dr HARRAT ayant effectuée une mission à Tataouine (Tunisie) du 04 au 15 octobre 2008 pour participer avec l’équipe tunisienne aux enquêtes entomologiques et recherche du réservoir dans le foyer de leishmaniose cutanée à L. KILLICKI de Tatatouine. Dans le cadre du projet ACIP A-04-2007 un première mission du 03 au 12 mai 2008 à Ghardaïa et une deuxième mission du 18 au 24 Juin 2008 effectuée à Ghardaïa et Ouargla Prélèvement de malades, enquêtes entomologiques et capture de rongeurs. Mission effectuée du 09 au 15 mai 2008 dans trois régions appartenant au Bassin du Hodna M’sila, BBA, Bistra avec EDWARD ZOLTAN WAD sur l’inventaire des reptiles les résultats de cette mission et des missions antérieures feront l’objet d’une publication (en cours). 272 Antennes de l’Institut Pasteur d’Algérie Rapport d’Activité 2008 Institut Pasteur d’Algérie III. ACTIVITE DE FORMATION L’annexe continue d’accueillir les étudiants de fin de cycle des départements de biologie et de chimie (génie des procédés pharmaceutiques) de l’université Mohammed Boudiaf de M’sila. L’annexe reçoit également les stagiaires de l’école de formation paramédicale. Participation en qualité de facilitateur au cours de formation en entomologie du paludisme du 07/07/2008 au 17/07/2008 à l’annexe de Sidi Fredj en collaboration avec l’OMS. PROGRAMME DE LUTTE CONTRE LA LEISHMANIOSE Responsable de formation destinée aux biologistes chargés du diagnostic parasitologique des leishmanioses organisé par L’EPSP d’El Mghaeir du 22 au 25 décembre 2008. Ce cours a regroupé une quinzaine de techniciens biologistes de la wilaya d’El Oued qui a pour objectif la maîtrise les techniques d’examen direct et culture. Participation aux différentes réunions du Comité Technique National de Pilotage de la campagne de lutte contre la leishmaniose cutanée à la Direction de la prévention du MSPRH aux dates suivantes : 12/04/2008, 24 AVRIL 2008, et 15/09/2008 PUBLICATION ET COMMUNICATION Publications : Z. HARRAT, A. BOUDRISSA (2008) - Ecologie des rongeurs réservoirs de la leishmaniose cutanée zoonotique en Algérie. Revue Médico Pharmaceutique N°48 p26-30 Communication orale : N. KACI-OUCHFOUN, F. HADJ BEKKOUCHE, M.C. ADDADI, A. BOUDRISSA, T. GERNIGON-SPICHALIWICZ. : Site synthesis determination and partial sequence analysis of a major androgen-dependent protein from sand rat (Psammomys obesus) seminal vesicles.11th INTERTERNATIONAL CONFERENCE ON RODENT BIOLOGY. Rodens et Spatium Myshkin, Russia 24 – 28 july, 2008. Antennes de l’Institut Pasteur d’Algérie 273 Institut Pasteur d’Algérie 274 Antennes de l’Institut Pasteur d’Algérie Rapport d’Activité2008 Rapport d’Activité 2008 Institut Pasteur d’Algérie Antenne d’Oran Responsable : Leila BELHABRI (Docteur en médecine) L’annexe Pasteur d’Oran est constituée de deux structures : - un laboratoire - un service commercial. Le laboratoire assure trois activités principales. I. ACTVITE DE DIAGNOCTIC 1. Bilans thyroïdiens Analyses Technique Nombre Thyrotropine (TSH) MEIA 9322 Tri-iodothyronine libre (FT3) MEIA 2628 Tyroxine libre (FT4) MEIA 4549 Anti-thyroglobuline (Anti-TG) MEIA 1283 Anti-thyroperoxydase (Anti-TPO) MEIA 607 Technique Nombre Homme lutéotrope (LH) MEIA 519 Hormone folliculostimulante (FSH) MEIA 511 Testostérone (TET) MEIA 181 Prolactine (PRL) MEIA 446 Estradiol (E2) MEIA 188 Progestérone (PGN) MEIA 75 2. Bilans de fertilité Analyses 3. Recherche et dosage de marqueurs tumoraux Analyses Technique Nombre Antigène carcino-embryonnaire MEIA 87 Antigène de cancer Ca15-3 MEIA 103 Antigène spécifique de prostate PSA total MEIA 1315 Antigène spécifique de prostate PSA libre MEIA 277 Alpha 1 Foetoprotéine MEIA 55 Antigène de cancer Ca19-9 MEIA 49 Antigène de cancer Ca 125 MEIA 26 Antennes de l’Institut Pasteur d’Algérie 275 Rapport d’Activité2008 Institut Pasteur d’Algérie 4. Autres hormones Analyses Technique Nombre Cortisol FPIA 00/Manque de réactifs BHCG MEIA 88 5. Diagnostic des maladies infectieuses 5.1- Sérologie des hépatites virales Analyses Technique Nombre IgG anti HAV MEIA 0149 IgM anti HAV MEIA 0132 Ag HBs MEIA 1425 Ac HBs MEIA 0383 Ag HBe MEIA 0349 Ac HBe MEIA 0308 IgG Ac HBc MEIA 0271 IgM anti HBc MEIA 0086 HCV MEIA 0713 Technique Nombre TOXO IgG MEIA 2489 TOXO IgM MEIA 1036 RUB IgG MEIA 2562 Rub IgM MEIA 459 CMV IgG MEIA 128 CMV IgM MEIA 67 HIV MEIA 682 Chlamydiae ELISA 05 5.2- Autres Analyses 1.6- Analyses mycologiques Nature du prélèvement Total Ongles 94 Cheveux 09 Squames 05 Selles 02 Total 276 Antennes de l’Institut Pasteur d’Algérie 110 Institut Pasteur d’Algérie Rapport d’Activité 2008 II. ACTIVITE DE REFERENCE Mission à Laghouat du 02-07-08 au 06-07-08 Déplacement du Dr BELHABRI et Melle Alla à Laghouat a propos de quatre cas humains suspect de peste bubonique. Mission terrain à Laghouat du 26-07-08 au 30-07-08 Dr BELHABRI et Melle ALLA en collaboration avec deux techniciens de prévention. Enquête entomomamalogique à 30km de Laghouat plus exactement à Ksar El Hirane et à Bouterkfine III. ACTIVITE DE RECHERCHE • Etude des vecteurs et des réservoirs de la peste dans l’Oranie.(code 02/05 01/04 /036) Méthodes : tous les deux mois, des captures de rongeurs sont effectuées dans les zones à risque par des techniciens de la santé Les indicateurs utilisés sont : la sérologie antif1 des rongeurs et l’analyse bactériologique des rates. • Données biologiques, épidémiologiques. cliniques et génétiques sur le syndrome d’insulinorésistance chez l’adulte oranais (code 02/07/01/01/076) Dr I. MEDJAOUI - laboratoire CNAS Melle H. BELARIBI biologiste Institut pasteur annexe d’Oran Le dosage de l’insulinémie à été réalisé chez 50 patients en plus des 421 de 2007 Un échantillon de 800 personnes a été prévu. 1- Stage de formation des biologistes : Melle ALLA Khadîdja : Stage à l’institut pasteur Madagascar du 21-05-08 au 11-06-08. Diagnostic bactériologique de la peste humaine et animale. Melle Mezaache Cherifa : Juin 2008 Stage au laboratoire de parasitologie de l’institut pasteur d’Alger. Dr L. BELHABRI Melle TOUA Ahlem Stage à l’institut pasteur de sidi Ferruch du 25-10-08 au 26-10-08. Thème : PCR hépatite. Antennes de l’Institut Pasteur d’Algérie 277 Rapport d’Activité2008 Institut Pasteur d’Algérie 2. Réalisation de mémoires : KALAIDJI Amel BOUCHENTOUF Imene Belbachir Asma Faculté de pharmacie Oran 04/11/2007 au28/02/2008 Faculté de pharmacie Oran 04/11/2007 au 28/02/2008 L’hypothyroïdie suivi et son Dr L. BELHABRI Intérêt du dosage de PSA dans l’exploration de la glande prostatique Dr L. BELHABRI 3. Stages pratiqués au laboratoire : Nom/Prénom YAMALLAH Khadidja REZOUG Radia provenance Date Thème du mémoire Encadrement Faculté de pharmacie Oran 01/03/08 au 30/06/08 Rapport de stage de l’activité du laboratoire Personnel du laboratoire de l’annexe 278 Antennes de l’Institut Pasteur d’Algérie Activités du Service de la Formation Institut Pasteur d’Algérie 280 Service de la Formation Rapport d’Activité2008 Rapport d’Activité2008 Institut Pasteur d’Algérie Service de la formation Responsable : Sonia NEDIR (Licenciée en Sociologie) PRESENTATION En 2008, l'organisation du bureau de la Formation est restée rigoureusement la même que durant les années précédentes, en dépit des multiples demandes d'amélioration formulées. Sans surprise, l'évolution de l'activité de gestion de la formation a présenté une tendance générale semblable à celle des années précédentes. I. LA FORMATION DES EMPLOYES DE L’IPA 1. FORMATION DES EMPLOYES EN EXTRA-MUROS (hors de l’IPA) Service Entérobactérie s Biologie Parasitaire Virologie (Entérovirus) Nom Lieu Période Motif de la formation Financement KIAS Farid (Biologiste) Institut Pasteur de Paris 3 mois ½ 7 janvier au 25 avril 2008 Cours d’Informatique en Biologie IPA : billet d’avion + 2 jfmc* IPP : bourse d’étude BENZITOUNI Amel (Biologiste) Institut Pasteur de Paris 1 mois ½ 14 janvier au 26 février 2008 Cours sur la Circulation des agents infectieux et maîtrise du risque IPA : billet d’avion + 2 jfmc* IPP : bourse d’étude ANESBOULAHBAL Dahbia (Dr. Vétérinaire – Chargée d’Etudes) Institut Pasteur de Paris 2 mois ½ 7 avril au 27 juin 2008 Cours de Virologie Systématique IPA : billet d’avion + 2 jfmc* IPP : bourse d’étude CHOUCHANE Abdelkader (Tech. Sup.) National Institute for Communicable Diseases (NICD – OMS) Afrique du Sud 8 jours 10 au 18 avril 2008 Cours de recyclage sur les cultures cellulaires du réseau des laboratoires polio. DERRAR Fawzi (MédecinChargé de recherche – Chef de service) Institut Pasteur de Paris 2 mois ½ 7 avril au 27 juin 2008 Cours de Virologie Systématique AIT-AISSA Assia (Biologiste) National Institute for Medical Research, Mill Hill, London 10 jours 18 nov. au 1er déc. 2008 Stage pratique: Détection de la résistance aux inhibiteurs de la neuraminidase (résistance des virus grippaux aux antiviraux) Virologie (Grippe) OMS : prise en charge du séjour et du billet IPA : 2 jfmc* IPA : billet d’avion + 2 jfmc* IPP : bourse d’étude NIMR : prise en charge séjour IPA : billet Service de la Formation 281 Rapport d’Activité2008 Institut Pasteur d’Algérie Service Biologie moléculaire Antenne d’Oran Nom Lieu DRALI Rezak (Biologiste) Hôpital de Marseille (labo. génétique mol. – Pr Levy) Motif de la formation 1 mois er 1 au 30 mai 08 Stage pratique de perfectionnement : Diagnostic génétique d’affections neuromusculaires communes en Algérie Stage pratique : Explorations moléculaires approfondies de familles présentant une affection neuromusculaire. Hôpital de Marseille (labo. génétique mol. – Pr Levy) 1 mois er 1 au 31 août 2008 KARA-SLIMANE Samira (Biologiste) Université de la Méditerranée Aix Marseille II 9 mois 20 sept. au 30 juin 2008 Master I : Conseil en Génétique et médecine prédictive ALLA Khadidja (Biologiste) Institut Pasteur de Madagascar (Unité Peste) 20 jours 20 mai au 10 juin 2008 Stage pratique : Le diagnostic biologique de la peste humaine et animale (bactério., séro.) HAMADOUCHE Tarik (Docteur en Biologie) BENALLAL Kamel-Eddine (Biologiste) Université d’AbomeyCalavi (Benin) : partie théorique Eco-Epidémio. Parasitaire EDDAIKRA Nawel (Biologiste) ANNECHE Ammar (Tech. Supé.) USTHB - Alger 3 mois et 1 semaine . 11 sept. Au 18 déc. 2008 2 ans (2 jours/semaine) Année univ. 2006-2007 2007-2008 Prolongation Pour soutenance 2008-2009 (jusqu’à février) Sérum Institute of India (Inde) 1 semaine er 1 au 6 déc. 08 AIT-SAID Lamia (Biologiste) Ecole Nationale Polytechnique - Alger 1 année (partie théorique) Janvier à déc. 2008 TAHARDJEBBAR Khadidja (Biologiste) USTHB (Alger) en collabo. Avec Agence Française de Francophonie (campus numérique) 7 mois (en alterné voir planning) 4 déc.08 au 30 juin 09 BOUMENDIL Soraya (Biologiste) Contrôle de Qualité Période 282 Service de la Formation Master International d’Entomologie Médicale et Vétérinaire Financement Budget alloué par l’Agence Française de Myopathies : bourse de séjour IPA : billet+2jfmc* Budget alloué par l’Agence Française de Myopathies : bourse de séjour IPA : billet+2jfmc* Financement personnel IPP Budget ACIP : billet + séjour IPA : 2jfmc* IPP : Bourse d’étude + billet (12000 euros) IPA : 2jfmc* Magister en Biologie et physiologie animale Spécialité : neurobiologie cellulaire et moléculaire Cours : Contrôle d’activité des vaccins bactériens et viraux par méthodes immunologiques. Préparation d’un Magister (Ecole Doctorale) : Biotechnologie et environnement Préparation d’un Master en Santé publique option : Expertise et ingénierie des systèmes d’information en santé. Financement personnel SII : prise en charge du séjour + billet IPA : 2jfmc* Financement personnel Financement personnel Rapport d’Activité2008 Institut Pasteur d’Algérie Service Virologie (Virus et Cancers) Microbio. Vétérinaire Bactériologie des Aliments Vaccins Bactériens Direction des Ressources Humaines Nom MELOULI Hamid (Biologiste spécialiste) AMARA-KORBA Anissa (Biologiste) ALAMIR Hanane (Magister Sciences Alimentaires) BEKRAR Lamia (Biologiste) Lieu Période CHU de Toulouse (INSERM U563) 2 mois 10 déc. 2008 au 10 fév. 2009 Ecole Nationale Polytechnique - Alger 2 ans (en alternance, 2 jours/semaine) Année univ. 2006/2007 2007/2008 Institut National Agronomique (INA) Alger Université d’Alger Faculté des lettres et langues 3 ans (janv.05 à juin 08) (1 jour/semaine) + prolongation Juin 08 à juin 09 8 mois (2 matins/semai) Motif de la formation Financement Stage pratique : Description de l’infection par EBV chez des patients porteurs d’un carcinome du nasopharynx Préparation d’un Magister en Génie de l’environnement option : biotechnologie Projet DPGRF/INSERM : bourse de séjour IPA : billet + 2jfmc* Financement personnel Financement personnel Préparation d’un Doctorat en Sciences sur les campylobactérioses alimentaires Préparation d’une Licence d’Interprétariat Arabe-Anglais Financement personnel 24 nov. 08 au 30 juin 09 NEDIR Sonia (Sociologue – Chargée de la Gestion de la Formation) Université d’Alger Faculté des Sciences humaines et sociales Alger 1 année (renouvelable) Février 2008 à Fév. 2009 (1jour / semaine) Préparation d’un Magister en Sociologie de la Santé Financement personnel AIT-MESBAH Sihem (Assistante Administrative Principale) Ecole ECO-FAM (Alger) 1 année (les jeudis) 6 nov. 08 au 27 nov.09 Préparation d’un Diplôme d’Etudes Supérieures en Management IPA Service de la Formation 283 Rapport d’Activité2008 Institut Pasteur d’Algérie Service Nom TEYAR Faîza (Cadre financier) Direction des Finances et Compta. AOUIGUER Kamel (Chef du Service Contrôle) GALLEZE Fatma-Zohra (Chef du service Comptabilité) IRKAKEN Ouahiba (DFC Adjointe) AIT-MESBAH Samir (Chef du service Patrimoine) MANA Samia (Chargée des créances) LAOUBI Abdelmalek (Comptable) Lieu Période Motif de la formation Chambre du Commerce et de l’Industrie Alger 1 année et 8 mois Mars 2008 à octobre 2009 (cours du soir + week-end) Préparation d’une Post-Graduation Spécialisée en Audit Financier et Comptable Financement 10 jours . 17 au 21 mai 08 . 31 mai au 04 juin 08 IPA Institut Supérieur de Gestion et de Planification (ISGP) - Alger DERAMCHIA ElHadi (Chef du Service Client) BELLILI Adada (Chef de service Finances) DEBBAGH Nacéra (Chargée des Créances) BENNOUR Dalil (Chargé de la Fiscalité) YAHIAOUI Yahia (Chargé du recouvrement) BRAHIMI Akila (Chargée du Contrôle des achats) Cours sur : Le nouveau système comptable et financier 10 jours . 24 au 28 mai 08 . 07 au 11 juin 08 Maintenance Electronique MEKKI Lyakout (Ingénieur) Ecole Dar El Itkan - Alger 7 mois Juin à déc. 08 (2 aprèsmidi/semaine) Formation théorique et pratique sur : Les Techniques Réseaux et Server Approvisionne ment SANDJAKDINE Fouzia (TS Chimie – Chargée des Commandes) “VEIL-TECH” Office Riad El Feth - Alger 3 jours 1er au 3 déc.08 Séminaire: Les procédures d’approvisionnements IPA Contentieux BERKANI Lilia (JuristeChargée des Inventaires) « ProspecoConseil » Hôtel Mercure (Alger) 2 jours 11 et 12 déc. 08 Séminaire : L’inventaire et l’assainissement annuel des stocks IPA 284 Service de la Formation IPA Institut Pasteur d’Algérie Rapport d’Activité2008 Au total, 38 employés ont été formés hors de l’IPA en 2008, pour 39** stages de formation réalisés. Ce chiffre accuse une tendance à la stagnation par rapport à l’année 2007 (40 employés formés hors de l’IPA) * : 2 jours de frais de mission complémentaires * *: certains employés ont bénéficiés de 2 stages durant l’année. Service de la Formation 285 Rapport d’Activité2008 Institut Pasteur d’Algérie Répartition par type de structure, des employés formés hors de l’IPA en 2008 • Structures scientifiques : 20 (53%) • Structures administratives : 18 (47%) Répartition par type de structure, des employés formés à l'extérieur de l'IPA Scientifiques 53% Administratifs 47% L’effort de formation des employés de l’administration entamé en 2007, s’est poursuivi en 2008. Les chiffres s’équilibrent désormais entre formation de l’administration et des laboratoires. Nature des formations reçues en extra-muros en 2008 • Cours (formations théoriques) • Stages pratiques : 33 : 06 (33%) (154%) Nature des formations réalisées hors IPA en 2008 Stages pratiques 15% Cours 85% Chûte des formations pratiques (en labo.) en 2008. La quasi-totalité des formations reçues sont théoriques (cours). 286 Service de la Formation Rapport d’Activité2008 Institut Pasteur d’Algérie Durée moyenne des formations reçues en extra-muros en 2008 • - de 1 mois : 20 (51%) • 1 à 6 mois : 07 (18%) • 7 mois et + : 12 (31%) Durée moyenne des formations reçues hors IPA en 2008 7 mois et (+) 31% (-) de 1 mois 51% 1 à 6 mois 18% Tout comme pour 2007, prédominance des formations de courte durée en 2008. En revanche, nette avancée des formations alternées de longue durée (Magister, Master, PGS) y compris dans l’administration. Répartition par pays d’accueil, des formations reçues en extra-muros en 2008 • Algérie : 25 • France : 08 • Inde : 02 (5%) • Bénin : 01 (3%) • Madagascar : 01 (3%) • Royaume-Uni : 01 (3%) • Afrique du Sud : 01 (3%) (63%) (dont 04 à l’Institut Pasteur de Paris) (20%) Service de la Formation 287 Rapport d’Activité2008 Institut Pasteur d’Algérie Répartition par pays, des employés formés extra-muros en 2008 Afrique Sud 3% Inde 5% France 20% Bénin 3% Madagascar 3% Royaume Uni 3% Algérie 53% En 2008, les formations extra-muros ont eu lieu pour la grande majorité en Algérie et dans une moindre mesure en France (notamment à l’Institut Pasteur de Paris). Notons que les formations réalisées en France ont chutées de moitié par rapport à 2007 Prise en charge financière des employés formés en extra-muros en 2008 Organisme financeur Institut Pasteur d’Algérie Institut Pasteur de Paris Nombre de formations prises en charge 30 06 Nature du financement La moitié sont des financements complémentaires (billet d’avion +2 jours de frais de mission) et la moitié sont des financements de frais d’inscription. Bourses d’étude, budget ACIP Agence Française de Myopathie (AFM) 02 Sérum Institute of India 02 Projet de coopération francoalgérienne DPGRF/INSERM 01 OMS 01 Prise en charge séjour + billet NIMR - Londres 01 Prise en charge séjour Financement personnel 08 Frais d’inscription universitaires, 288 Service de la Formation Budget alloué Prise en charge du séjour et billet Bourse d’étude Rapport d’Activité2008 Institut Pasteur d’Algérie Financement des formations hors IPA en 2008 NIMR Londres; 1 Coop. Franco-Alg.; 1 Personnel; 8 IPParis; 6 IPAlgérie; 30 Sérum Institute India; 2 OMS; 1 AFM; 2 L’Institut Pasteur d’Algérie en financements complémentaires et l’Institut Pasteur de Paris par les bourses d’études, restent les principaux organismes financeurs des formations réalisées par les employés en extra-muros. Le financement personnel des employés, bien que relativement fréquent, reste cependant négligeable du point de vue coût. Service de la Formation 289 Rapport d’Activité2008 Institut Pasteur d’Algérie 2. FORMATIONS DES EMPLOYES EN INTRA-MUROS (à l’IPA) Structure organisatrice Direction Générale Intitulé du cours Date Cours de Statistiques Session du appliquées à la Médecine 04 fév. au et à la biologie (CESAM) 30 juin 08 Lieu Organisme ou Enseignant collaborateur Nombre de stagiaires IPA Observations IPA SidiFredj Enseignante : Dr Abrouk Samira 02 (sur 41) Cours payant remboursé au personnel IPA reçu Les employés ayant reçu ces formations en internes sont: Cours Cours du CESAM (session du 04 fév. au 30 juin 08) Noms (Fonction – Service) Observations BENAMROUCHE Nabila (Médecin M.Assistante- Sce Antibiothérapie) Reçue à l’examen BENALLAL Kamel (Biologiste – Sce Génétique) Ajourné Au total, en 2008 seuls 2 employés ont été recensés par le bureau de la formation comme ayant reçu une formation en interne ( !) Notons qu’au fil des années le recensement du nombre d’employés formés en interne n’a cessé de baisser (77 en 2005, 48 en 2006, 15 en 2007). Cela peut être dû : G soit à un mauvais recensement dû à un défaut de communication d’information entre le Bureau de la Formation et les services/laboratoires. G soit à une diminution effective du nombre de cours et ateliers organisés en interne au profit des employés 290 Service de la Formation Rapport d’Activité2008 Institut Pasteur d’Algérie II. ACCUEIL ET FORMATION DE STAGIAIRES A L’IPA 1. ACCUEIL DE STAGIAIRES PAR LES LABORATOIRES ET SERVICES TECHNICOADMINISTRATIFS, POUR PROJETS DE FIN D’ETUDE/RESIDANAT (Gestion assurée par Melle Sabah MEBARKI – Direction des Ressources Humaines) Répartition des stagiaires par Cursus Etudiants Universitaires Etudiants Centres de Formation Professionnelle Résidents Magister/Doctorat DEUA/DES/Ingé. Médecine Pharmacie 20 87 10 12 107 10 22 138 Pas moins de 138 étudiants, résidents et autres stagiaires ont été accueillis dans les laboratoires et services de l’IPA en 2008, légèrement moins qu’en 2007. Ce sont essentiellement des étudiants de graduation universitaire, notamment des DES et Ingénieurs en Biologie préparant leur projet de fin d’étude. Dans une moindre mesure des Résidents en pharmacie et médecine USTHB Fac. Médecine et Pharmacie d’Alger Centres Formation Professionnelle (Alger) Univ. Blida Univ. Bejaia Univ. Guelma Univ. Tizi Univ. Const. Un. Boum E.N. Polyt IN Agr. Fac Med Blida Un. Lille TOTAL Répartition des stagiaires par organisme de provenance 83 21 10 06 05 03 02 02 02 01 01 01 01 138 La grande majorité des stagiaires accueillis dans nos laboratoires sont des étudiants en provenance de l’USTHB. Dans une moindre mesure, des résidents de la Faculté de Médecine et Pharmacie d’Alger. Service de la Formation 291 Rapport d’Activité2008 Institut Pasteur d’Algérie 2. ACCUEIL DE STAGIAIRES POUR COURS ET ATELIERS Structure organisatrice Direction Générale Labo. du H.I.V Service de la Tuberculose Service de Bactériologie médicale Intitulé du cours Cours de Statistiques appliquées à la Médecine et à la biologie (CESAM) Atelier de formation en tests de dépistage du H.I.V Cours International de Mycobactériologie médicale et formation aux techniques de mycobactériologie. Atelier de formation du réseau national de surveillance de la résistance des bactéries aux antibiotiques. Date Session du 04 fév. au 30 juin 08 Lieu Organisme ou enseignant collaborateur 41 IPA (SidiFredj) Enseignante : Dr Abrouk Samira Session du 15 sept.08 au 9 fév. 09 24 au 28 mai 2008 Nombre de stagiaires IPA SidiFredj Ministère de la Santé/ Global Fund (programme GFATM Algérie) . Dr. Mohamedi (El Kettar) 54 Cours payant 30 Participants : Techniciens supérieurs en biologie, provenant de différentes wilayas OMS 10 Participants : Biologistes Africains de labo. de tuberculose 22 au 26 nov. 2008 IPA Dely Brahi m OMS nc* Participants : 27 au 29 oct. 2008 IPA SF Laboratoires Roche Diagnostic 70 Participants : Médecins, biologistes, TS des CHU 18 oct. Au 30 nov. 2008 ème 2 Forum de PCR en temps réel et typage moléculaire des laboratoires Roche Participants : médecins, pharma, biolo, et autres scientifiques IPA Hamm a Thème : initiation aux techniques de biologie moléculaire appliquées à la bactériologie. Labo. des Hépatites (Virologie) Observations ère Service de Bactériologie des Eaux Formation théorique et pratique en bactériologie des eaux au profit de « L’Algérienne des Eaux » 1 session : 10 au 22 mai 2008 292 Service de la Formation ? ème 2 session : 02 au 14 juin 2008 * nc : chiffre non communiqué 37 IPA SidiFredj 46 Participants : Biologistes des unités d’analyse de « l’Algérienne des Eaux » Rapport d’Activité2008 Institut Pasteur d’Algérie Pas moins de 288 personnes appartenant au corps de la santé algérien ou étranger (médecins, biologistes, TS etc…), ont bénéficié d’un cours ou d’un atelier de formation de l’IPA, en 2008. Ce chiffre est en hausse par rapport à l’année précédente (225 personnes formées en 2007) Service de la Formation 293 Institut Pasteur d’Algérie Rapport d’Activité2008 RECAPITULATIF Formation des employés de l’IPA en 2008 Au total, 40 employés de l’IPA ont été formés durant l’année 2008 38 employés formés hors de l’IPA (en extra-muros) 02 (!) employés formés à l’intérieur de l’IPA (en intra-muros) Ce chiffre accuse une tendance générale à la baisse par rapport à l’année 2007 (51 employés formés) G Les formations des employés en extra-muros (hors de l’IPA) : • Ont eu lieu essentiellement en Algérie et dans une moindre mesure en France • Ont été financées essentiellement par l’IPA et par le partenaire français (le financement personnel, bien que fréquent, étant négligeable du point de vue coût) • Ont été beaucoup plus théoriques (cours) que pratiques • Ont été de courtes durées et de longues durées, très peu de moyennes durées • Ont bénéficiées tant pour les scientifiques que pour les cadres administratifs. G Les formations des employés à l’intérieur de l’IPA : • Leur inexistence est responsable de l’écart creusé par rapport à 2007 concernant le nombre total d’employés formés. Il convient de rechercher les raisons de cet état de fait : absence de formations internes offertes en 2008 ? Ou alors défaut au niveau de l’enregistrement et du recensement des employés formés en interne ? Formation d’étudiants et personnel de santé algériens ou étrangers à l’IPA en 2008 Au total, près de 426 personnes : étudiants, médecins, pharmaciens, biologistes, vétérinaires, techniciens de laboratoire et autre personnel de santé algérien ou étranger, ont été accueillis pour une formation à l’Institut Pasteur d’Algérie, durant l’année 2008. Les formations ont consistées en cours et ateliers ou en stages pratiques en laboratoire pour la préparation de mémoires ou thèses. Ce chiffre confirme la tendance générale à la hausse en ce qui concerne l’accueil des stagiaires dans notre Institut. 294 Service de la Formation Activités de la Bibliothèque Institut Pasteur d’Algérie 296 Bibliothèque Rapport d’Activité2008 Rapport d’Activité2008 Institut Pasteur d’Algérie Bibliothèque Responsable : Fatma Zohra AIT-OUAMAR (Documentaliste) La Bibliothèque a été crée le 31 décembre 1909 occupant un pavillon relié aux laboratoires par une passerelle par précaution d’incendie. Elle dispose d’un fonds documentaire spécialisé dans la microbiologie de : - 15303 ouvrages - 20972 tirés à part et brochures - 15262 thèses - Vidéo film : 04 - Cassettes : 06 - Diapositives. Elle est ouverte au personnel de l’IPA, aux étudiants de l’université d’Alger préparant un projet de recherche, aux chercheurs et aux personnels enseignants après autorisation. I- NOUVELLES ACQUISITIONS : Nous avons reçu en échange, et en don : - Ouvrages : 66 - Thèses et mémoires : 01 - Brochures : 25 La Bibliothèque reçoit régulièrement certains rapports et séries édités par l’OMS. Echanges : dans le cadre des échanges avec différentes bibliothèques étrangères nous avons reçu 51 titres périodiques. Abonnement : Réabonnement au J.O année 2008 (5 copies originales et leur traduction). II. DIFFUSION DE L’INFORMATION : Diffusion occasionnelle - Bibliographie : 2 bibliographies ont été établies - Bibliographies sélectives Bibliothèque 297 Rapport d’Activité2008 Institut Pasteur d’Algérie Diffusion active : La bibliothèque de l’IPA élabore une revue : - Revue des sommaires : mensuelle ; elle permet de tenir les utilisateurs informés des articles récemment permes dans les périodiques reçus. - La revue de presse n’apparaît plus car les abonnements aux quotidiens nationaux ont été suspendus. La bibliothèque a enregistré 46 nouveaux lecteurs. - Inscrits : 29 - Occasionnels : 17 IV. Prêts : • Nombres de prêts externes : - Ouvrages : 51 - Périodiques : 31 • Nombre de prêts internes : - Ouvrages : 75 - Périodiques : 98 NB : Le taux des prêts à nettement baissé ; du faite du déménagement des laboratoires au NIPA. Il est donc impératif d’informatiser la gestion de la Bibliothèque afin d’automatiser ses services permettant ainsi des consultations à distance. V. PRODUITS DOCUMENTAIRES ET COLLABORATION : Sous la direction du Cerist la bibliothèque de l’IPA participe avec d’autres bibliothèques à la mise à jour de deux catalogues nationaux déjà connus le CAT et le CAP. VII. LES ARCHIVES DE LA BIBLIOTHEQUE • Récupération : - Service ATB : 2 chronos des fiches Diphtérie année 2004 et 2006 • Consultation : - Service Parasitologie : 1 registre de Toxoplasmose année 2005 et 2006 298 Bibliothèque Abréviations Institut Pasteur d’Algérie 300 Abréviations Utilisées Rapport d’Activité2008 Institut Pasteur d’Algérie Rapport d’Activité2008 Abréviations Utilisées Pr Professeur DE Doctorat d’état M.A. Maître Assistant D.M. Docteur en Médecine Ing. Ingénieur T. S. Technicien Superieur INESSM Institut National d’Enseignement Supérieur en Science Médecine ISN Institut des Sciences de la Nature USTHB Université des Sciences et de la Technologie Houari Boumédiène MSPRH Ministère de la Santé, de la Population et de la Réforme Hospitalière CHU Centre Hospitalo-Universitaire EHS Etablissement Hospitalier Spécialisé INSP Institut Nationale de la Santé Publique CTS Centre de Transmission Sanguine CPMC Centre Pierre et Marie Curie HCA Hôpital Centre de l’Armée DEUA Diplôme d’Etudes Universitaire Approfondies DES Diplôme d’Etudes Spécialisées S.S. Secteur Sanitaire O.R.S. Observations Régionales de la Santé DSPS Direction de la Santé et de la Protection Sociale (au niveau des wilayas) IPA Institut Pasteur d’Algérie Abréviations Utilisées 301 Institut Pasteur d’Algérie 302 Abréviations Utilisées Rapport d’Activité2008 Institut Pasteur d’Algérie Rapport d’Activité2008 Edition et Publications – ANDS - 2009 Abréviations Utilisées 303