PDF 1.2 Mo NB633_3_experimentation animale

L’expérimentation animale
1° partie
Abeer El Wakil
IPMC-CNRS
660 rte des Lucioles
[email protected]
L’expérimentation animale
Le cadre de la loi
La règlementation
Les établissements d’hébergement et d’expérimentation
Les expérimentateurs
Les animaux
Les conditions d’hébergement
Les conditions d’expérimentation
Le cadre de la loi
Utilisation des animaux à des fins expérimentales
Un système vivant ne se comporte pas comme la somme de ses composantes
car des mécanismes complexes régulent les interactions entre cellules et
organes
impossible à reproduire dans des systèmes in vitro
L’expérimentation animale est nécessaire pour :
- comprendre le fonctionnement normal et pathologique du vivant
- élucider les mécanismes de vulnérabilité et de résistance aux infections
- produire des vaccins
Ces connaissances permettront de :
- prévenir ou limiter l’apparition de nombreuses pathologies
- trouver des traitements aux grandes pathologies :
maladies neurodégénératives, cancers, troubles du métabolisme, etc
- mettre au point de nouveaux médicaments,
de nouvelles techniques chirurgicales et exploratoires
Utilisation des animaux à des fins expérimentales
Les Prix Nobel de Médecine ou de Physiologie : quelques exemples
Année
Scientifique
Animal utilisé
Contribution
1905
Koch
vache, mouton
1919
1932
Bordet
Sherrington,
Adrian
Heymans
Fleming, Chain,
Florey
Block, Lynen
cobaye, cheval
chien, chat
origine et développement
de la tuberculose
mécanismes de l’immunité
fonction des neurones
mécanismes de régulation de la
respiration
découverte de la pénicilline et de
son effet thérapeutique
régulation du métabolisme du
cholestérol et des acides gras
organisation structurelle et
fonctionnelle de la cellule
découverte des prions, nouveau
principe biologique d’infection
régulation de la tension artérielle par
l’oxyde nitrique (NO)
fonctionnement du cerveau et
mécanisme de la maladie de Parkinson
génétique du développement des
organes
mécanisme de l’ARN interférance
1938
1945
1964
1974
1997
1998
2000
2002
2006
chien
souris
rat
de Duve, Palade,
Claude
Prusiner
poulet, cobaye,
rat
souris, hamster
Furchgott,
Ignarro, Murad
Carlsson, Kandel
Greengard
Brenner, Horvitz
Sulston
Fire, Mello
lapin
souris
ver
ver
Utilisation des animaux à des fins expérimentales
L’animal n’est pas un outil
L’animal est un être sensible :
- il subit stress et douleur
- il se souvient des souffrances vécues
Les conditions de détention et d’expérimentation doivent :
- se faire dans le respect de l’animal
- prendre en compte son aptitude à souffrir
- respecter ses besoins vitaux
La règle des 3 R
Remplacer :
- techniques de substitutions (expériences in vitro)
- remplacer les “animaux sensibles” (primates, chiens, chats)
par des animaux “moins sensibles” (souris, poissons, insectes)
Réduire :
- par une planification rigoureuse des expériences
- grâce à l’utilisation de lots homogènes
Raffiner :
- par l’amélioration des techniques opératoires
- grâce au développement de l’exploration fonctionnelle
Russel et Burch, 1952
La règlementation
L’utilisation d’animaux vertébrés à des fins expérimentales est
réglementée pour des raisons morales et éthiques
demande sociétale
Le respect des recommandations est aussi garant de bonnes
pratiques de laboratoire
impératifs techniques et scientifiques
Historique de la règlementation
en France
Juillet 1850, loi Gramont : 5 j de prison + amende pour mauvais traitement à
des animaux domestiques en public
protection de l’animal pour la
morale publique ;
Novembre 1963 : lourde peine pour actes de cruauté sur animaux
domestiques ou sauvages
protection de l’animal en tant que tel ;
Juillet 1976 : l’animal est défini comme un être sensible digne de respect ;
Décret du 6 juin 2001 : l’homme a l’obligation morale de respecter les
animaux et prendre en considération leur aptitude à souffrir et à se souvenir.
Les textes règlementaires
Loi du 10 Juillet 1976 : protection de la nature
Directive n° 86/609 du 24 Novembre 1986 : protection des animaux utilisés à
des fins expérimentales
Décret n° 87-848 du 19 Octobre 1987 : expériences pratiquées sur animaux
vertébrés.
Arrêté du 19 avril 1988 :
- conditions de fournitures d’animaux aux laboratoires
- attribution de l’autorisation de pratiquer des expériences sur animaux
- conditions d’agrément des établissements d’expérimentation
Décret du 29 mai 2001 modifiant le décret n° 87-848 du 19 Octobre 1987
Décret du 6 juin 2001 : publication de la convention européenne sur la protection des animaux vertébrés utilisés à des fins expérimentales
Les deux pôles de la règlementation
de connaissance
La société a une demande forte de santé
de sécurité
justification du recours au modèle animal
nécessité d’une démarche scientifique rigoureuse
L’homme perçoit l’animal comme un être sensible (animal de compagnie) et
réprouve les souffrances imposées aux animaux
demande du grand public de limiter ou interdire l’expérimentation
animale avec une sensibilité particulière pour certaines espèces (chien, chat,
primate).
L’aspect légal de la réglementation
Décret n°2001-131 du 6 février 2001
Les expériences sur les animaux sont licites à condition :
qu’elles revêtent un caractère de nécessité ;
qu’elles ne puissent être remplacées par d’autres techniques ;
qu’elles aient pour but un des motifs suivants :
- le diagnostic, la prévention ou le traitement des maladies chez l’homme,
les animaux vertébrés ou invertébrés ou les plantes;
- les essais d’activité, d’efficacité et de toxicité des médicaments,
substances ou produits ;
- le contrôle de la qualité des denrées alimentaires ;
- la recherche fondamentale et la recherche appliquée ;
- l’enseignement supérieur et technique ;
- la protection de l’environnement.
Directive européenne de 2003
sur la cosmétologie
Interdiction de l’expérimentation animale pour les produits cosmétiques
finis depuis le 11 septembre 2004.
Interdiction de l’expérimentation pour les ingrédients ou combinaisons
d’ingrédients appliquée au fur et à mesure de la validation et de
l’adoption de méthodes de substitution avec une date butoir maximale au
11 mars 2009 quelle que soit la disponibilité de méthodes de substitution
aux tests pratiqués sur les animaux.
Interdiction de mise sur le marché applicable par étapes au fur et à
mesure de la validation et de l’adoption de méthodes de substitution :
date butoir le 11 mars 2009, pour tous les effets sur la santé humaine à
l’exception de la toxicité par doses répétées, la toxicité reproductive et la
toxicocinétique.
Pour ces effets spécifiques date limite prévue le 11 mars 2013.
Les établissements
d’hébergement et d’expérimentation
Les établissements d’hébergement et d’expérimentation
1 - La demande d’agrément
Création de l’animalerie
- aménagement conformes aux
- équipement recommandations
- personnel qualifié
Demande d’agrément
auprès de la
Direction des Services Vétérinaires
du département
Instruction
du
dossier
Agrément
de l’établissement
Valable 5 ans
précisant
Domaine
d’activité
Protocoles
mis en œuvre
Espèces animales
utilisées
Aménagement d’un établissement d’hébergement et d’expérimentation :
Lignes directrices du décret n°2001-131 du 6 février 2001
2 - Les différentes pièces composant l’animalerie
L’hébergement
- pièces d’hébergement séparées pour chaque espèce animale
- pièces d’hébergement confinées pour les souris transgéniques afin d’éviter
toute évasion et contamination.
- un local isolé de quarantaine pour la réception de nouveaux animaux.
L’expérimentation
- pièces d’expérimentation et d’autopsie séparées des pièces de stabulation.
- une salle d’opération si des interventions chirurgicales sont prévues.
- une salle post-opératoire ou salle de réveil.
Locaux techniques
- locaux séparés pour l’entreposage et la conservation de la nourriture et des
litières.
- un local pour entreposer les cages propres et le matériel de l’animalerie.
- un local de nettoyage et de lavage
Pièce d’hébergement
Hotte de change
Portoir de cages
Murs, plafond et sol lisses et facilement lessivables
Pièce de stockage
du matériel propre :
cages et biberons
Pièce d’expérimentation
Matériel d’anesthésie gazeuse
Pièce d’expérimentation
Hotte pour vider
les cages souillées
Machine à laver les cages
Qu
ar
Stabulation
souris
Ex
pé
rim
en
tat
ion
Ex
pé
rim
en
tat
ion
an
ta
in
e
Aménagement d’un établissement d’hébergement et d’expérimentation :
Lignes directrices du décret n°2001-131 du 6 février 2001
2 - Les différentes pièces composant l’animalerie
Stabulation
souris
Expérimentation
Décontamination
Sas
WC
Sas
Sas
Douche
Sas
Stabulation
souris
Lavage
Autoclavage
Sas
Vestiaire
Douche
Sas
Vestiaire
Sas
WC
Stérilisation
Sas
Centre de contrôle - bureau
Sas
zone SPF (specific pathogen free)
ag
e
St
oc
k
me
zone A2
Stabulation
souris
autoclave double entrée
zone technique
Sortie déchets
Stockage
litières
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zone protégée
Stabulation
souris
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Stabulation
souris
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Sas
circulations
Stockage
aliments
passe plat
quai de livraison
Aménagement d’un établissement d’hébergement et d’expérimentation :
Lignes directrices du décret n°2001-131 du 6 février 2001
3 - Infrastructure des locaux
Surfaces :
plafonds, murs et sols en matériaux résistants, étanches et facilement
lessivables et désinfectables.
Ouvertures :
- portes, fenêtres, bouches d’aération et orifices d’évacuation des liquides
conçus pour éviter la pénétration d’animaux indésirables.
- portes et fenêtres protégées contre l’accès de personnes non autorisées.
Implantations :
zones d’hébergement assurant la séparation (vue, bruit, odeur) des espèces, en
particulier proies-prédateurs (ex. souris-rat)
Aménagement d’un établissement d’hébergement et d’expérimentation :
4 - Conditions d’ambiance
Traitement de l’air permettant de :
- fournir de l’air pur
- réduire les odeurs, les gaz toxiques (ammoniac), la poussière (copeaux de
sciure) et les agents d’infection de toutes sortes
Renouvellement fréquent (8 à 20 volumes/heure selon la densité d’animaux
hébergés)
Humidité : maintenue autour de 55 %.
Température : maintenue constante à un niveau compatible avec la biologie et la
physiologie de chaque espèce
Eclairage : intensité et durée définie. exemple, 12 heures/jour pour rats et souris
Isolation phonique pour éviter les troubles du comportement liés au bruit.
Aménagement d’un établissement d’hébergement et d’expérimentation :
5 - Mesures de sécurité
Dispositifs d’alarme sur les systèmes de ventilation et de climatisation.
Dispositifs de secours et procédures d’urgence en cas de panne des équipements.
Affichage des procédures d’urgence.
Procédures écrites précisant les modalités d’élimination des déchets et des
cadavres
Maintien absolu des locaux dans un état de propreté irréprochable.
Aménagement d’un établissement d’hébergement et d’expérimentation :
6 - Matériel d’hébergement
La nature des cages ou enclos et des dispositifs d’abreuvement et d’alimentation
sont propres à chaque espèce.
Ils doivent être construits en matériaux évitant à l’animal de se blesser et avoir
des dimensions suffisantes pour lui permettre de se mouvoir librement.
Dimensions minimum recomandées dans le décret 2001-131
publié au journal officiel du 6 février 2001
Espèce
Souris
Rats
Hamster
Cobaye
Lapin 1 kg
Lapin 3 kg
Lapin 5 kg
Surface au sol (cm2)
180
350
180
500
1400
2500
3600
Hauteur mini (cm)
12
14
12
18
30
35
40
Aménagement d’un établissement d’hébergement et d’expérimentation :
7 - Fonctionnement
Nettoyage : définir qui, quand, comment
plan de nettoyage
des consommables (aliments et litières)
Gestion des déchets
des cadavres
Conditions d’ambiance : contrôles réguliers
planification des tâches
enregistrements
Procédures de sécurité
information du personnel
affichages
Traçabilité des animaux
registres d’entrée et de sortie
Personnels abilités et compétents
formation adéquate obligatoire
Les expérimentateurs
Les expérimentateurs :
1 - Les différents types de personnel
Personnes affectées à l’hébergement et à l’entretien des animaux :
techniciens animaliers
Personnes participant directement aux expériences :
techniciens de laboratoire
Personnes assurant la responsabilité scientifique directe des expériences :
chercheurs et ingénieurs
Les expérimentateurs :
2 - Le responsable du protocole
A suivi une formation agréée de niveau I
A demandé et obtenu une “autorisation nominative d’expérimenter sur l’animal”
Est responsable des procédures, du transport et de l’utilisation des animaux
Décide de l’utilisation des animaux : choix de l’espèce
nombre d’individus
préparation
application des protocoles expérimentaux
décision du devenir des animaux
instructions pour les soins
S’assure de : l’origine des animaux
leur identification
leur état sanitaire
Les expérimentateurs :
2 - Le technicien
A suivi une formation de niveau II
Aide le chef de projet dans la réalisation du protocole :
- manipulation
- interventions sur les animaux
- préparation
- anesthésie
- euthanasie
Réalise des expériences sous la responsabilité et le contrôle du titulaire
de l’autorisation
Les expérimentateurs :
3 - L’animalier
A suivi une formation de niveau III
Surveille régulièrement les animaux :
- état de santé
- comportement
Assure le maintien et la reproduction des lignées :
- accouplements
- sevrages
Contrôle les conditions d’hébergement :
litières, mangeoires et cages propres
Tient à jour les registres :
- origine, identification, localisation, devenir, soins
- entrées/sorties
Les expérimentateurs :
4 - Programme de la formation de niveau I : arrêté de 19 Avril 1988 :
1 - Réglementation relative à l’expérimentation animale : notion
juridique d’animal comme être sensible
2 - Développement des méthodes de substitution
3 - Espèces, races et souches des animaux utilisés
4 - Anatomie des animaux utilisés
5 - Physiologie générale des animaux utilisés
6 - Ethologie des espèces et comportement des individus utilisés
7 - Pathologies spontanées, zoonoses
8 - Statuts sanitaires des animaux
9 - Administration et organisation d’une animalerie
10 - Entretien et logement des animaux
11 - Transport, réception, maniement et contention des animaux
12 - Hygiène et contrôle sanitaire
13 - Techniques et procédés en expérimentation animale
14 - Exploration fonctionnelle
15 - Intervention sur des animaux
16 - Anesthésie
17 - Euthanasie
18 - Autopsie
Les expérimentateurs :
4 - Programme de la formation de niveau II : arrêté de 19 Avril 1988 :
1 - Réglementation relative à l’expérimentation animale : notion
juridique d’animal comme être sensible
2 - Espèces, races et souches des animaux utilisés
3 - Anatomie des animaux utilisés
4 - Eléments de physiologie générale, comportement des animaux
utilisés
5 - Santé et pathologie animales : diagnostic et autopsie
6 - Entretien et logement des animaux
7 - Transport, réception, maniement et contention des animaux
8 - Hygiène et contrôle sanitaire
9 - Techniques et procédés en expérimentation animale
10 - Statuts sanitaires des animaux
11 - Intervention sur des animaux
12 - Anesthésie, euthanasie
Les expérimentateurs :
4 - Programme de la formation de niveau III : arrêté de 19 Avril 1988 :
1 - Réglementation relative à l’expérimentation animale : notion
juridique d’animal comme être sensible
2 - Equipements et matériel d’animalerie
3 - Transport, maniement et contention des animaux
4 - Alimentation des animaux
5 - Eléments de physiologie générale, comportement des animaux
6 - Hygiène et contrôle sanitaires
7 - Contrôle des conditions d’environnement.
Les expérimentateurs :
4 - L’autorisation d’expérimenter : arrêté de 19 Avril 1988 :
Toute personne assurant la responsabilité directe d’une expérimentation
animale doit être titulaire d’une autorisation délivrée par le préfet du lieu
principal d’exercice.
C’est elle qui assure la responsabilité des agents opérant sous son
autorité, qu’elle soit présente ou non durant le déroulement des
expérimentations.
Si les expériences nécessitent des interventions chirurgicales, la formation initiale de niveau I devra être complétée par une formation
particulière concernant les techniques chirurgicales, et les soins pré et
post opératoires.
Les expérimentateurs :
4 - L’autorisation d’expérimenter : arrêté de 19 Avril 1988 :
La demande est adressée au Préfet du département du lieu de travail
(c.à.d. du site d’hébergement des animaux)
La demande décrit :
- le domaine d’activité du demandeur
- les protocoles mis en œuvre
- les espèces animales utilisées
Le dossier de demande fournit les justifications de :
- expériences menées
- espèces choisies
= pas de techniques de substitution applicables
- protocoles expérimentaux
- formation suivie (formation de niveau I)
- curriculum vitae (au minimum quatre années d’études supérieures)
- extrait de casier judiciaire n°3 (= pas d’antécédents de mauvais
traitements aux animaux)
- déclaration sur l’honneur d’avoir pris connaissance de la règlementation
et de s’engager à la respecter.
Les expérimentateurs :
4 - L’autorisation d’expérimenter : arrêté de 19 Avril 1988 :
La demande est nominative
Elle est valable pour une durée de 5 ans
Elle est attribuée pour un travail réalisé dans un établissement bénéficiant
d’un agrément de spécialité équivalente
Elle devient caduque en cas de changement de :
- domaine d’activité
- espèce animale
- protocoles expérimentaux
- département