les regimes speciaux afstal 2015
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les regimes speciaux afstal 2015
Une alimentation sur mesure pour répondre aux exigences de votre protocole expérimental REGIMES SPECIAUX Fabriqués sur mesure Dominique Martel [email protected] AFSTAL Lille 2015 1 Améliorer les protocoles Réaliser que l'alimentation est un facteur environnemental qui affecte les résultats. AFSTAL Lille 2015 7 Le type de régime alimentaire peut impacter les conclusions de l’étude The laboratory rat p267 ; ELSEVIER, American College of Laboratory Animal Medicine, Second edition « Les interactions métabolisme - composés nutritionnels, la toxicité des médicaments, la réponse génétique, la survie, et divers paramètres pathologiques sont tous influencés par l'alimentation. Le choix d'un régime alimentaire approprié et la compréhension des caractéristiques de performance des rats qui mangent ce régime spécial, sont d'une importance primordiale au cours du développement du protocole. » AFSTAL Lille 2015 8 Le type de régime alimentaire peut impacter les conclusions de l’étude Les différences de biodisponibilité des ingrédients, entre le standard chow diet et purified diet, influencent les paramètres sanguins. Chow diet (ch-LFD) / semi synthetique (sy-LFD) / synthetique high fat (sy-HFD) / (P < .05) Benoit B, et al, High-fat diet action on adiposity, inflammation, and insulin sensitivity depends on AFSTAL Lille 2015 9 the control low-fat diet, Nutr Res (2013), http://dx.doi.org/10.1016/j.nutres.2013.07.017 Améliorer les protocoles Comprendre les avantages d’un aliment standard et des régimes spéciaux AFSTAL Lille 2015 10 Régimes Spéciaux – Chow diets Formule basée sur l’aliment standard (A03, A04, 112,…). céréales, proteines, mineraux et vitamines = ingrédients complexes Un ingrédient = de multiples nutriments ne permet pas des aliments fortement carencés (K, Na, Lipides, ...) les éléments non nutritifs sont une composante du phénotype naturel peut être enrichi en nutriments cible (fer, Na, K, cholestérol, ...). possible d’ajouter un principe actif Facilement comparable à un régime standard (A03, A04) Stables et répétables pour les recherches non spécifiques Stocker au frais AFSTAL Lille 2015 11 Régimes Spéciaux– Purified diets Les régimes purifiés sont utiles pour des changements extrêmes: Excès en nutriments (High Fat, …) Carences en nutriments Matières premières purifiés ou synthétisées saccharose, la cellulose, caséine, graisses saturées, saindoux, huile ... Un ingrédient = un nutriment Réduction des composants non nutritifs Attention sur le choix du contrôle : purified diet ou chow diet. Conserver au frais Remplacement hebdomadaire Améliore l'uniformité et la reproductibilité? AFSTAL Lille 2015 12 Origine des Matières Premières Mêmes origines = même variabilité et mêmes contaminants? ANIMAUX PLANTES MINERAUX Amidon Saccharose Cellulose Huile de maïs Protéine de soja Céréales AFSTAL Lille 2015 Beurre Saindoux Carbonate de calcium Levures Minéral mix PURIFIED Phosphate bicalcique Caséine Vitamine Mix CHOW 13 Risque Contaminants et régime Pesticides Composés Radioactifs Métaux Lourds Phytooestrogenes Mycotoxines Médicaments Bacteries, Mycètes, Virus Néoformés (acrylamide,..) Additifs AFSTAL Lille 2015 18 Phyto-oestrogènes: prévention Une tentative de prévention basée sur un raisonnement « matières premières » Exemple d’aliments pour poissons 4 formules 8 Matières premières Trout diet crumble for juvenile Son de riz déshuilé Farine de blé Carp diet floating pellet Ttx de soja Farine de poisson Gluten de maïs FD2 Caséine Prémix vitamines Prémix minéral FD5 20 40 60 80 100 % 0 AFSTAL Lille 2015 Kobayashi et al., 2006 21 Phyto-oestrogènes: prévention Réduction des concentrations en isoflavones mais… augmentation des concentrations en equol blé caséine FD2 Trout diet crumble for juvenile Carp diet floating pellet Trout diet crumble for juvenile FD2 Trout diet crumble for juvenile Genistein Daidzein Coumestrol Equol Carp diet floating Genistein pellet Daidzein FD5 Coumestrol FD2 Equol 0 50000 100000 Carp diet floating pellet FD2 150000 200000 250000 ng/g FD5 FD5 0 5000 10000 15000 µg/100g AFSTAL Lille 2015 Kobayashi et al., 2006 20000 25000 0 20 40 60 80 µg/100g Le risque = déplacer le problème… 22 100 120 Résumé régimes spéciaux Chow Diets Purified Diets • Peu d’ingrédients, mais complexes • Beaucoup d’ingrédients, mais simples • Les éléments non nutritifs affectent le phénotype et la flore intestinale • La forme chimique affecte le phénotype et la flore intestinale • Possible de réduire un nutriment • Possible de carencer un nutriment Les aliments 0 contaminant n’existent pas. N’oubliez pas que le choix du standard peut influer sur les résultats. AFSTAL Lille 2015 23 Utiliser un régime spécial comme une variable dans le protocole Contrôle par les nutriments Maladies induite par le régime Dosage de composés via l’aliment Utilisation en imagerie et ionisation AFSTAL Lille 2015 24 Carbohydrates From Wikimedia Commons Les glucides sont décomposés en glucose et monosaccharides. Augmente la glycémie (rapidement avec du glucose et du saccharose), apport d'énergie. Les glucides complexes augmentent la glycémie plus lentement mais pour une période plus longue (amidons et fibres). L’index glycémique a quelle vitesse consommation d'un glucide augmente glycémie. la la Les valeurs vont de 1 (la hausse la plus lente) à 100 (la plus forte croissance), 100 = glucose. La vitesse dépend aussi de comment et de quels nutriments sont consommés avec les sucres. Fructose Index glycémique 22 Glucose 100 Saccharose 65 Sucre raffiné 64 Sucres AFSTAL Lille 2015 Wolever, Thomas M. S. (2006). The Glycaemic Index: A Physiological Classification of Dietary Carbohydrate. CABI. p. 64. ISBN 9781845930523. 26 Lipides From Wikimedia Commons Les graisses sont décomposées en acides gras et en glycérol. Nécessaires pour la croissance des tissus et la production d'hormones. L'hydrogénation partielle des Acides Gras insaturés, produit des AG trans. (biscuits, craquelins, croustilles). Les AG trans peuvent élever le taux de cholestérol LDL et HDL inférieur; augmenter le risque de maladie de l'artère coronaire. La consommation de ω-3 peut diminuer le risque de maladie coronarienne Acides gras essentiels (EFAs) RAT RAT Maintenance Growth Acide linoleique, (un ω-6), L'huile de carthame, de tournesol, de maïs, de soja, d'onagre, de citrouille, et le blé Acide linolenique, (un ω-3). Les huiles de poissons et d'huiles à base de graines de lin, citrouille, soja et canola. Autres ω-6 (acide arachidonique,…) et d'autres ω-3 (acide eicosapentaénoïque, acide docosahexaénoïque) sont requis, mais peuvent être synthétisés à partir des EFAs. NRC 1995 Unit RAT Reproductio n (Female) Fat g 50 50 50 Linoleic acid (n-6) g 2 6 3 Linolenic acid (n-3) g Required Required Required Formation de divers eicosanoïdes (lipides biologiquement actifs), y compris les prostaglandines, thromboxanes, prostacyclines, et les leucotriènes. AFSTAL Lille 2015 29 Des médicaments à la nutrition Médicaments Effet Nutritionel L'alcool, antihistaminiques, corticostéroïdes, insuline, mirtazapine, hormone thyroïdienne ... Augmente l'appétit Antibiotiques, gomme de guar, cyclophosphamide, glucagon, indométacine, morphine ... Diminue l'appétit Orlistat Diminue l'absorption des graisses Octréotide, opioïdes, phénothiazines, diurétiques thiazidiques, corticostéroïdes, ... Augmente les niveaux de glycémie Inhibiteurs de l'ECA, aspirine, barbituriques, βbloquants, insuline, IMAO, phénylbutazone, … Diminue les taux de glycémie Aspirine, L-asparaginase, colchicine, dextranes, niacine, phénindione, statines,… Diminue les taux de lipides sanguins Corticostéroïdes, hormone de croissance, contraceptifs (œstrogène-progestatif), vit D, ... Augmente les taux de lipides sanguins AFSTAL Lille 2015 tétracycline Chloramphénicol, 37 protéines Diminue le métabolisme des Faire des Régimes Sur-Mesure Normoprotéique Vs Hypoprotéique 100% 90% Caséine 80% 70% Caséine Vit SAFE 200 60% 50% Mx SAFE 205B Glucose Glucose Cellulose Caséine Glucose Amidon de maïs 40% Huile de maïs 30% Huile de colza 20% Amidon Amidon Saindoux 10% 0% 210 AFSTAL Lille 2015 Low protein 40 Présentations possible des Régimes Granulé Poudre Pâte AFSTAL Lille 2015 Liquide Gel 42 Modèle NASH Montre réduction de taille des adipocytes du tissu adipeux gonadique blanc (WAT) et du tissu adipeux brun (BAT) des souris ob / ob nourries avec un régime déficient en méthionine-choline (MCD) Role of adipose tissue in methionine–choline-deficient model of non-alcoholic steatohepatitis (NASH) AFSTAL Lille 2015 Pooja Jha, Astrid Knopf, Harald Koefeler, Michaela Mueller, Carolin Lackner, Gerald Hoefler, Thierry Claudel,44 Michael Trauner BBA - Molecular Basis of Disease Volume 1842, Issue 7, July 2014, Pages 959–970, doi:10.1016/j.bbadis.2014.02.012 Modèle Thiamine-déficient Thiamine Déficient (TD) modèle pour étudier la neurodégénérescence MDA immunohistochimie (vert) sur les coupes sagittales de type sauvage (WT) et le thalamus TD. Localisation du pPKRThr446 (vert) et peIF2α (rouge) dans le cervelet TD. PKR downregulation prevents neurodegeneration and β-amyloid production in a thiamine-deficient model AFSTAL Lille 2015 45T Rooney and J Hugon F Mouton-Liger, A-S Rebillat, S Gourmaud, C Paquet, A Leguen, J Dumurgier, P Bernadelli, V Taupin, L Pradier, Cell Death and Disease (2015) 6, e1594; doi:10.1038/cddis.2014.552 Athérosclérose Vos choix de modèle et d’aliment impactent vos conclusions. Modèle Régime spécial Athérosclérose DOI Ldlr-/-and Ldlr-/Plin1-/-mice U8958 version 52 ++ 10.1186/1476-511X-10-169 apoE2-KI U8958 version 35 ++ 10.1161/01.ATV.0000248101.93488.84 ApoE -/- A03 + 0,2% chol. +++ 10.1161/ATVBAHA.110.222497 LDL -/- A03 + 0,2% chol. ++ 10.1161/ATVBAHA.110.222497 C57BL6 and SR-BI-deficient A04 +1.25% chol. + 16% cocoa butter ++ 10.1074/jbc.M111.220483 Hypercholestérolémiants U8220 version 151 A04 + 16% beurre cacao + 1.25% cholesterol U8951 Version 1 214 B + 4.5% de cholestérol U8953 Version 1 214 H + 0.5% de cholestérol U8952 Version 1 214 S + 2.0% de cholestérol U8958 Version 66 Athéromateux : 0.5% cholestérol, 15% saindoux U8958 Version 52 Western 0.15% de cholestérol, 20% beurre laitier U8958AFSTAL Version 352015 Lille Western 0.20% de cholestérol, 21% beurre laitier 49 Obésité Body weight (g) 45 40 35 260 30 233 25 Male C57BL/6N 20 8 9 10 11 12 13 Age (week) 14 15 16 260HF 233HF U8978 version 19 U8954 version 130 Kcal/Kg 5280 4975 Fat Butter Lard 35,9% 35% 15,8% 8,5% Références Fat / Kg AFSTAL Lille/ Kg 2015 Sugar 17 50 Stéatose Hépatique Standard chow A04 ob/ob High Calorie Diet U8954v28 (Occidental diet + NaCl) db/db ob/ob db/db 1 month 3 months 1 month 3 months 1 month 3 months 1 month 3 months Steatosis Percentage 82 ± 1 80 ± 3 58 ± 8† 69 ± 3† 92 ± 2§ 89 ± 2§ Apoptosis Percentage 3±1 0 ± 0* 13 ± 2† 15 ± 1† 10 ± 1§ 7 ± 1§ male C57BL/KsJ-db/db mice male C57BL/6J-ob/ob mice 86 ± 2†§ 76 ± 2†§* 15 ± 2 11 ± 1 * Different from 1 month (P<0.05). † Different from ob/ob mice of the same age (P<0.05). § Different from standard chow (P<0.05) Pathology of the liver in obese and diabetic ob/ob and db/db mice fed a standard or high-calorie diet 10.1111/j.1365-2613.2011.00793.x AFSTAL Lille 2015 Int J Exp Pathol. Dec 2011; 92(6): 413–421. doi: 52 Modèles induits par le régime Modèles Maladies / Outils Lieber/DeCarli 82, Ethanol Alcoolisme Oils, cholesterol, and/or cholic acid, cholate Athérosclérose Western Diets, D.I.O. Maladies cardio-vasculaires Methinone Choline Deficient (MCD) Stéatose hépatique Surwit Diet, VanHeek, HighFat Sucrose combinated Diabète et résistance à l'insuline Surwit Diet Obésité High NaCl and Fructose Hypertension High fat and low carbohydrate and low protein Cétose dans l'épilepsie Lithium carbonate or lithium chloride Neurologie (troubles bipolaires) Cuprizone Démyélinisation (sclérose en plaques) Calcium, phosphorus, vitamin D, phytoestrogens Ostéoporoses Doxycycline Expression des gènes, transgènes Tamoxifen citrate(Inducible Cre-LoxP Systems) Knockouts et souches rapporteurs Induction de cellules souches 3,5-diethoxycarbonyl-1,4-dihydrocolidine (DDC) 0,1% (cellules ovales bipotentielles) AFSTAL Lille 2015 53 Valeur énergétique coefficients La valeur énergétique est calculée en utilisant les coefficients suivants : pour les lipides : 37 kJ/g (9 kcal/g) pour l'alcool (éthanol) : 29 kJ/g (7 kcal/g) pour les protéines : 17 kJ/g (4 kcal/g) pour les glucides (à l'exception des polyols) : 17 kJ/g (4 kcal/g) pour les acides organiques : 13 kJ/g (2,4 kcal/g) pour les polyols : 10 kJ/g (2,4 kcal/g) sauf pour l'érythritol : 0 kJ/g (0 kcal/g) pour les fibres alimentaires : 8 kJ/g (2 kcal/g). Calculs: Règlement UE N° 1169/2011" prend en compte la teneur en "protéines brutes" c'est-à-dire la teneur en azote total multipliée par le facteur 6,25, quel que soit l'aliment. valeurs d'"Energie, N x facteur Jones, avec fibres" sont calculées en prenant en compte les teneurs en "protéines", calculées sur la base de la teneur en azote total et de facteurs spécifiques (dits facteurs de Jones), qui peuvent différer d'une famille d'aliments à une autre (par exemple 6,38 pour les produits laitiers). AFSTAL Lille 2015 54 Utiliser un régime spécial comme une variable dans le protocole Contrôle par les nutriments Maladies induite par le régime Dosage de composés via l’aliment Utilisation en imagerie et ionisation AFSTAL Lille 2015 57 Administration Orale de composés Pas de manipulation des animaux Perte de précision de la dose Interactions sociales, appétence Gain de temps Comportement / bien-être, 3R Pas de stress Assurance de couvrir les besoins en nutriments avec votre nutritionniste Moins de manipulation des composés = moins de risques AFSTAL Lille 2015 Manipulation des animaux Œsophagite (inflammation de l'œsophage) Perforation de l'œsophage ou de la trachée Dommages au sphincter cardiaque (sphincter haut de l'estomac) Insertion de l'aiguille et de la solution dans les poumons Perforation pulmonaire Dommages à la cavité buccale Aspiration de la solution régurgitée dans les poumons Blessures traumatiques liés à la contention inadéquate changements dans la consommation d'eau 59 Que puis-je ajouter à mon régime spécial? Mon composé est-il stable, dangereux ? Stabilité, pH, sensibilité à la lumière, oxydation, chaleur, toxicité pour l’homme… Mon animal y-est-il sensible ? Toxicité spécifique (théobromine /chiens), animaux affaiblis (post chirurgical), stress (modifications de l'environnement), appétence,... Quelle forme a mon composé ? Excipient, poudre, liquide, solide, granulométrie, point de fusion, miscible à l'eau > forme finale? Mon compose est-il disponible ? Durée de vie, délais d’approvisionnement, réglementation importation,… Quels outils mon protocole expérimental doit utiliser ? imagerie, couplage des apports via eau / aliment, mesures spécifiques Mon animalerie demande des régimes irradiés ? Pharmaceutiques Pro-biotiques / Pré-biotiques Mon composé est-il stable à l’autoclave ou l’ionisation? Mon composé résiste t-il au mélange et à la granulation ? Acides Gras Tamoxifène Enzymes AFSTAL Lille 2015 Molécule propriétaire OGM Sucres, amidon, fibres Toxiques 64 Aliment médicamenteux Pré-mélange médicamenteux Qu’est-ce qu’un aliment médicamenteux ? Il est destiné aux animaux On a incorporé un médicament vétérinaire sous forme de prémélange médicamenteux Autorisation de Mise sur le Marché (AMM) délivrée par l’ANSES Il est prescrit par un vétérinaire et délivré sur ordonnance Il est fabriqué par un professionnel agréé par la DDPP dans un établissement pharmaceutique vétérinaire autorisé par l‘ANSES avec un numéro d’autorisation Pour quels traitements? Antibiotiques, antiparasitaires, antiinflammatoires, … AFSTAL Lille 2015 65 Aliment médicamenteux Quels avantages ? L’aliment médicamenteux permet de remplacer l’administration quotidienne de comprimés, ou la réalisation d’injections régulières. Observance du traitement : Facile à administrer (ingestion de l'aliment habituel) Ration alimentaire = dosage précis Bonne observance des doses et de la durée du traitement. Bien-être de l’animal : Forme thérapeutique non traumatisante. AFSTAL Lille 2015 66 127 AMM prémélange médicamenteux en France, pour 40 substances actives Données en février 2015 Acide oxolinique Albendazole Amoxicilline (sous forme de trihydrate) Amprolium (sous forme de chlorhydrate) Apramycine (sous forme de sulfate) Chlortétracycline (sous forme de chlorhydrate) Chlorure d'ammonium Colistine (sous forme de sulfate) Colistine (sous forme de sulfate), Oxytétracycline (sous forme de chlorhydrate) Colistine (sous forme de sulfate), Sulfadiméthoxine Décoquinate Doxycycline (sous forme d'hyclate) Florfénicol Oxytétracycline Oxytétracycline (sous forme de chlorhydrate) Oxytétracycline (sous forme de dihydrate) Oxytétracycline (sous forme de dihydrate), Sulfadiméthoxine Oxytétracycline, Sulfadiméthoxine Oxytétracycline, Sulfadimidine Paracétamol Parconazole (sous forme de chlorhydrate) Pyriproxifène Spiramycine (sous forme d'embonate) Sulfadiazine (sous forme de sel de sodium), Triméthoprime Sulfadiazine, Triméthoprime Sulfadiméthoxine Sulfadiméthoxine (sous forme de sel de sodium), Flubendazole Triméthoprime Fluméquine Sulfadiméthoxine, Triméthoprime Ivermectine Tiamuline (sous forme d'hydrogénofumarate) Lincomycine (sous forme de chlorhydrate monohydraté) Tilmicosine Lincomycine (sous forme de chlorhydrate monohydraté), Spectinomycine (sous forme de sulfate tétrahydratée) Tylosine (sous forme de phosphate) Néomycine (sous forme de sulfate) Tylvalosine (sous forme de tartrate) AFSTAL Lille 2015 69 Oxibendazole Valnémuline (sous forme de chlorhydrate) Ivermectine • Lactone macrocyclique extraite de Streptomyces avermitilis • Efficace contre nématodes et arthropodes d’intérêt vétérinaire • Se fixe sur canaux chlorures sensible au GABA (nématodes et arthropodes) > Paralyse le vers • Ne passe pas la barrière hématoméningée chez les mammifères mais : From Wikimedia Commons • A éviter sur les sujets âgés • A éviter sur les sujets déficients (OGM) • A éviter en reproduction (embryotoxique) • 12 ppm dans A03 ou A04 AFSTAL Lille 2015 70 Utiliser un régime spécial comme une variable dans le protocole Contrôle par les nutriments Maladies induite par le régime Dosage de composés via l’aliment Utilisation en imagerie et ionisation AFSTAL Lille 2015 72 Techniques d’Imagerie Bioluminescence Lumière éteinte Lumière allumée AFSTAL Lille 2015 From Wikimedia Commons Fluorescence Omphalotus nidiformis Fluorescence chlorophylle Source : Centre National d’Études Spatiales 73 Imagerie Invivo Bioluminescence Fluorescence Expression du gène luciférase in vivo: Lumière émise par un fluorophore : régulation des gènes efficacité thérapie génique suivi cellules cancéreuses suivi de l'apparition des métastases caractérisation de modèles tumoraux évaluation de molécules anticancéreuses minimum detection 500 cells AFSTAL Lille 2015 Mouse tumor imaging using targeted particles BY KUEBI VIA WIKIMEDIA COMMONS Expression de protéines (GFP) Molécule organique greffées Suivi de la biodistribution de molécules Visualiser des processus biologiques en ciblant des récepteurs minimum detection 105 cells pH-sensitive near-infrared fluorescence probe 74 Régimes pour imagerie Molécule Excitation (nm) Fluorescence (nm) Organismes NAD(P)H Chlorophyll Collagen Retinol Riboflavin Cholecalciferol Folic acid Pyridoxine Tyrosine Dityrosine Excimer-like aggregate Glycation adduct Indolamine Lipofuscin Polyphenol Tryptophan Flavin Melanin 340 465, 665 270-370 270 325 270 370 450 673, 726 305-450 500 550 380-460 450 400 305 400 360 450 410-470 500-695 280 380-490 340–400 300-350 520-560 360–560 All Plants Animals Animals & bacteria All Animals All All All Animals Animals Animals Animals Eukaryotes Plants All All Animals AFSTAL Lille 2015 75 Animaux de laboratoire et Aliments Ionisés Recommandation en Vitamin A pour des adultes en maintenance Pas de limites NRC & autres… A utiliser avec prudence lors de l'alimentation unique à long terme des chats. Effects of Gamma Irradiation and Pasteurization on the Nutritive Composition of Commercially Available Animal Diets AFSTAL Lille 2015 Vol 47, No 6; Journal of the American Association for Laboratory Animal Science, November 2008 84 Palettes vs Cartons Description du processus d'irradiation: Sac par sac VS Palette complète Irradiation complete pallet Irradiation by bag Diet density = 0.6-.7 AFSTAL Lille 2015 87 Durée de vie Type de régime DLUO selon la formule et les ingrédients Régime spécial standard 8 à 12 mois Purified Diet 4 mois Purified Diet Sous vide 12 mois Ionisé Ne change pas la DLUO initiale Température de stockage Renouvellement Au moins 1 fois par semaine ≤ 4°C HFD, DIO, Western diet,... 4 mois 2 à 3 fois par semaine Molécules thermosensibles, facilement dégradable = DLUO de la molécule ou 4 mois Tous les jours Geldiet 12 mois Au moins 1 fois par semaine Il faut éviter la condensation sur les granulés lors des changements de température. Par exemple, lorsque vous congelez les produits, il faut décongeler les aliments entre 0 et 4°C avant de distribuer les rations. AFSTAL Lille 2015 89 Sélectionnez ou développer vos régimes Diététique, comportements alimentaires, santé, Modèles, méthode expérimentale, Economies, logistique AFSTAL Lille 2015 90 VOTRE régime personnalisé Définir les objectifs Recueillir des idées Vitamins Fats Proteins Définir les cibles du Protocole Comprendre les processus Minerals Carbohydrates Fibers Formuler les produits AFSTAL Lille 2015 Composer la juste quantité de chaque ingrédient. Atteindre le protocole exact que vous voulez. 91 SAFE à votre écoute … Aliments à façon Poudre, pâte, granulé, liquide ou en gel Engagements Qualité Sceaux (1 2 3 5 L ), Pot (100 g) Sacs (1-10 kg) Production assistée par ordinateur Personnel dédié Mise sous vide Support technique Equipe et Unité dédiées Irradiation à 10, 25 et 45 kGy sac par sac Conditionnement ISO 9001, ISO 14001 Agrément des services vétérinaires Agrément OGM Pastille témoin d’irradiation Qualité et Traçabilité AFSTAL Lille 2015 92 Merci Merci, à votre disposition AFSTAL Lille 2015 94