mast id™ corynebacterium diphtheriae identification system
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mast id™ corynebacterium diphtheriae identification system
MAST ID CORYNEBACTERIUM DIPHTHERIAE IDENTIFICATION SYSTEM CORYNE-ID. Système à 3 caractères biochimiques pour l’identification présomptive de Corynebacterium diphtheriae. une goutte de réactif de contrôle PYZ (solution d’acide pyrazine carboxylique à 1 mg/ml (Numero de CAS 98-97-5) dans l’eau) dans le tube pour vérifier que le réactif PYZ Developing Reagent fonctionne correctement. Interprétation des résultats USAGE IN VITRO UNIQUEMENT PYZ CYS URE Contenu 1. Pyrazinamidase Test (PYZ). 10 tubes avec bouchons jaunes contenant les réactifs lyophilisés. 2. Cystinase Test (CYS) 10 tubes avec bouchons bleus contenant les réactifs lyophilisés. 3. Urease Test (URE) 10 tubes avec bouchons rouges contenant les réactifs lyophilisés. 4. PYZ Developing Reagent. Un flacon contenant 10 comprimés de PYZ Developing Reagent. Conservation Conserver à 2-8°C dans les containers fournis jusqu’à la date de péremption indiquée sur l’étiquette de la boîte. Ramener à température ambiante avant ouverture. Précautions Usage In Vitro uniquement. Observer les règles de sécurité et d’hygiène en vigueur. Ne peut être utilisé que par du personnel de laboratoire qualifié. Stériliser les effluents biologiques dangereux avant de les éliminer. Se référer à la fiche de sécurité du produit (disponible sur demande ou via le site Internet MAST). Matériels nécessaires non fournis Réactifs et équipements microbiologiques standards (anses, suppléments sélectifs MAST, écouvillons, ensemenceurs, autoclaves et incubateurs, etc.) ainsi que des réactifs sérologiques et biochimiques et des additifs tels que le sang. Négatif Incolore / jaune pâle Incolore / jaune pâle Orange-jaune * avec la solution de contrôle également. Pour des isolements cliniques significatifs de corynébactéries, la table suivante peut être utilisée pour l’identification présomptive des souches. . Germe PYZ CYS C. diphtheriae var. gravis + C. diphtheriae var. mitis + C. diphtheriae var. intermedius + C. diphtheriae var. belfanti + C. ulcerans + C. pseudotuberculosis + C. amycolatum + C. imitans +/C. pseudodiphtheriticum + C. striatum + v = variable +/- = réaction faible URE + + v + - Contrôle de qualité Vérifier tous signes de détérioration. Le contrôle de qualité doit être effectué avec au moins une souche pour qu’il soit valide. Ne pas utiliser le produit si le résultat d’une souche de contrôle est incorrect. La liste ci-dessous montre la performance de souches de contrôle que l'utilisateur peut se procurer facilement. Procédure 1. Le nombre de colonies isolées et le temps nécessaire pour effectuer le test détermine la densité de l’inoculum nécessaire. Pour un test rapide en 4 heures, effectuer une suspension de 5 McFarland dans 400µl d’eau stérile. Pour un test d’une nuit (24 heures), effectuer une suspension de 1 McFarland dans 400µl d’eau stérile. 2. Enlever le bouchon et ajouter 100µl de suspension bactérienne dans les tubes PYZ et URE. Ajouter 200µl d’eau stérile dans le tube CYS suivi de 20µl de suspension bactérienne. 3. Boucher tous les tubes et tapoter doucement les tubes pour mélanger. Incuber en aérobiose à 3537°C pendant 4 heures ou 24 heures si l’inoculum n’est pas dense. 4. Après incubation ajouter un comprimé de PYZ Developing Reagent dans chaque tube PYZ. Prendre la précaution de minimiser la formation d’aérosols lors du retrait des bouchons en n’agitant pas les tubes avant ouverture. Si le test est négatif, ajouter Positif Rouge / orange* Jaune brillant Rose * Germes Test C. striatum* (NCTC 12078) C. ulcerans (NCTC 12077) PYZ + - CYS + URE + Cet isolat est catalogué C. xerosis, mais a été identifié comme C. striatum. Limites Utiliser des colonies isolées d’une culture jeune. Ces cultures doivent avoir été caractérisées comme corynébactéries par les tests simples comme par exemple la morphologie et l’aspect des colonies. Références Bibliographie disponible sur demande. IFU155 NB 06/08 V6 MAST est une marque déposée *La formule peut varier pour optimiser les performances