Encart EBV DOT

SÉROLOGIE VIRALE
Pour le dépisttage de l’EBV
Po
BV, co
com
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éféér
érence.
Mode opératoire
1
2
3
4
5
PRÉPARATION
Préchauffer la station de travail (56°C).
Identifier chaque bandelette. Préparer
4 cuves de réaction en plaçant 2 ml
de diluant dans , 2 ml d’activateur
dans et 2 ml de conjugué dans .
Laisser incuber 10 mn.
DÉPÔT DES SÉRUMS
Ajouter 10 μl de sérum échantillon
dans .
Sérologie spécifique de l’EBV
par technique Dot-Blot (IgG / IgM)
PRÉPARATION
1
DÉPÔT DES SÉRUMS
INCUBATION BANDELETTE
3
Trempage
1
1
2
3
LAVAGE
10 sec.
5
ACTIVATEUR
Lavage
10 sec.
G
G
G
G
1
2
10 fois
G
G
G
G
3
7
SÉCHAGE ET LECTURE
Éliminer l’eau résiduelle (papier
absorbant). Bien laisser sécher avant
d’interpréter le résultat. Pour un
résultat positif, le spot doit être
distinct avec un cercle bien délimité
(surface colorée plus ou moins
intense).
8
10 fois
G
G
G
G
1
2
3
4
2
3
30 mn
4
5 mn
SÉCHAGE ET LECTURE
S é ro
Lavage
10 sec.
Contrôle Négatif
Blot
logie E
BV par technique Dot-
Coffrets Immunodot EBV
Contrôle Positif
5 mn
MONO G ET MONO M
L’EBV PAR TECHNIQUE IMMUNODOT... UNE EXCLUSIVITÉ BMD !
ImmunoDot EBV Mono G : Coffret de 50 tests : .................................................................. Réf. GB 6085
ImmunoDot EBV Mono M : Coffret de 50 tests : .................................................................. Réf. GB 6585
Tous les tests ImmunoDot EBV Mono G et Mono M sont CE
DM 01 - 08/06
8
RÉVÉLATEUR
Plonger la bandelette dans , bien
homogénéiser, puis laisser incuber
5 mn. Procéder à un lavage.
RÉVÉLATEUR
Révélateur
2 ml Lavage
10 sec.
4
1
7
4
CONJUGUÉ
6
10 fois
G
G
G
G
ACTIVATEUR
Plonger la bandelette dans , bien
homogénéiser, puis laisser incuber
5 mn. Procéder à un lavage.
CONJUGUÉ
Plonger la bandelette dans , bien
homogénéiser, puis laisser incuber
30 mn. Mettre 2 ml de réactif 4
dans . Procéder à un lavage, puis
laisser incuber 5 mn dans la solution
de lavage.
3
60 mn
30 sec.
10 mn
4
2
4
5 mn
6
10 fois
G
G
G
G
INCUBATION DE LA
BANDELETTE
Avant de lancer la technique,
immerger la bandelette 30 secondes
dans l’eau distillée (flacon de lavage).
Plonger la bandelette dans , bien
homogénéiser (agiter 10 fois de bas
en haut), puis laisser incuber 60 mn.
LAVAGE
Laver la bandelette en agitant
10 secondes de gauche à droite.
Éliminer l’eau résiduelle (papier
absorbant).
2
Diluant Activateur Conjugué
2 ml
2 ml
2 ml
POUR IDENTIFIER LES ANTICORPS EBV,
immédiatement et au coup par coup.
BIOMEDICAL DIAGNOSTICS
ACTIPOLE 25 • 4 - 6, BD DE BEAUBOURG • CROISSY-BEAUBOURG
77435 MARNE LA VALLÉE CEDEX 2
TÉL : 01.64.62.10.12 • FAX : 01.64.62.09.66
E-mail : [email protected] • www.bmd-net.com
IIm
mmunnoD
oDoott EBVV M
Moon
onnoo G & M
Moonnoo M : Au plluss prèès dee laa
Nomenclatturre.... et une réponsee à tooutes voss atttentes !
90% de la population adulte est
infectée par l'EBV. Le diagnostic
Contrôle positif
repose sur l'interprétation du profil sérologique.
Contrôle Hétérophiles (niveau 1)
Contrôle Hétérophiles (niveau 2)
M
L'EPSTEIN-BARR
VIRUS :
EBV-VCA IgM
Contrôle CMV IgM
Contrôle Négatif
RAPPEL DES ASPECTS CLINIQUES.
Elle peut conduire à des
pathologies malignes,
comme les lymphomes
du sujet immunodéprimé,
le carcinome indifférencié
du nasopharynx,
la leucoplasie orale
chevelue, ou le lymphome
de Burkitt.
DANS LE
LES
ESS FOR
FORRME
MESS CCL
M
CLI
LINNIIQUES
ATYPIQUES
ES, LEE DIA
IAG
AGGNO
NOSTIC
PEEUT S’AVÉRER
AVÉÉRER
REER DIF
IFFFICCILE
LE.
En effet, d’autres agents
infectieux (tels les virus
CMV, HSV, VIH, ou
Toxoplasma gondii) sont
responsables de syndromes
mononucléosiques dont
l’étiologie doit être
recherchée. Les tests
ImmunoDot EBV Mono G
& Mono M permettent de
détecter spécifiquement les
anticorps anti-EBV EBNA
IgG, VCA IgG et VCA IgM.
Infection passée
EBV VCA IgG + EBNA IgG
regroupés sur 1 même test.
Contrôle positif
VCA IgG
EFFICACITÉ :
Détection de tous les
marqueurs de l’EBV
permettant
de dater l’infection
EBV-VCA IgG
EBV-EBNA IgG
Contrôle CMV IgG
ContrôleToxoplasma
gondii (IgG)
Anticorps
hétérophiles
EBNA IgG
Contrôle négatif
Recherche des IgM vrais,
neutralisation des FR.
VCA IgM
0
UNE
NE RÉA
RÉA
ÉACT
CTI
TIVAT
VATION
IONN DU VIRUS
EBV PEUT SURV
RVEENIR CHEZ
L’IIM
MMUNNO
NOD
ODDÉPR
ÉPPRIM
IMÉ
MÉ.
Phase de
convalescence
Taux des anticorps
Dûe au virus d’EpsteinBarr (EBV), la MNI
est un syndrome
lymphoprolifératif
transitoire, aigu, fébrile,
d’évolution bénigne. Des
formes asymptomatiques
sont fréquentes chez
l’enfant. Cette infection
est très largement
répandue (95% des
adultes), avec persistance
du virus à l’état latent
dans les Lymphocytes B.
Infection
primaire
G
Période
d’incubation
LA MONONUUCLÉÉOOSE
INFE
FECTIIEEUUSSE (MNI).
1
2
4
6
TECHNOLOGIE :
Technique EIA sur support
membranaire
8
14
26
53
semaines
LES ANTICORPS APPARAISSENT AU COURS DE LA PRIMO-INFECTION
SELON LA CINÉTIQUE SUIVANTE : Le diagnostic sérologique de l’infection à
l’EBV est assuré par la détection conjointe des anticorps IgM et IgG (EBNA IgG, VCA
IgG, VCA IgM). Les EA IgM n'apparaissent que de façon inconstante (70% des MNI).
ImmunoDot
Mono G
ImmunoDot
Mono M
VCA
IgG
EBNA
IgG
ACs*
MNI
VCA
IgM
-
-
-
-
Le diagnostic sérologique de l’EBV
au coup par coup
ImmunoDot EBV Mono G & Mono M ont été conçus pour une
détection spécifique des anticorps anti-EBV EBNA IgG, VCA IgG
et VCA IgM. Ces tests sont réalisables patient par patient, grâce
à une technique Dot-Blot alliant immunologie de pointe et très
grande souplesse d’utilisation afin d’apporter à vos cliniciens la
réponse immédiatement opérationnelle qu’ils attendent.
FLEXIBILITÉ
Une réponse à J-zéro et
au coup par coup
Technique unitaire, coûts
parfaitement maitrisés
ImmunoDot EBV Mono G
& Mono M est une exclusivité
BMD.
Interprétation
Stade de l’infection EBV
ÉVALUATION DE LA TECHNIQUE IMMUNODOT EBV MONO M (RÉSUMÉ)
Sujet séronégatif
(non infecté)
-
-
-/+
+
Infection primaire
(phase très précoce)
+
-
-/+
+
Infection primaire
+
-/+
-
+
Fin d’infection primaire
(phase transitoire)
+
+
-
-
Infection ancienne
(95 % de la population adulte)
* ACs : Anticorps hétérophiles
L’INTERPRÉTATION EST LA SUIVANTE : La présence d’anticorps anti-VCA IgG et anti-
EBNA IgG, en l’absence d’anticorps anti-VCA IgM, signe une infection ancienne. La recherche
des VCA-IgM permet le diagnostic d’une infection récente ou évolutive.
BRENGEL-PESCE K,
BUISSON M,
SEIGNEURIN J-M.
Laboratoire de Virologie,
CHU de Grenoble.
100 sérums ont été testés. Le
choix des sérums s’est fait
selon plusieurs types de profils
sérologiques obtenus en IF :
- 14 individus séronégatifs,
- 20 infections anciennes
(sérologie positive normale),
- 39 primo-infections à l’EBV
(MNI, le plus souvent),
- 27 patients présentant
une infection aigüe (dûe à un autre
virus).
ImmunoDot EBV Mono M
versus IF. Résultats :
CA-IgM : - Sensibilité : 97,6 %
- Spécificité : 96,3 %
- Reproductibilité
inter-essais : 100 %
“La reproductibilité du coffret
est excellente puisque 15 sérums
sur 15 testés présentent
un résultat identique à celui
de la première détermination.”