LDL Direct CP ABX Pentra

ABX Pentra
LDL Direct CP
ABX Pentra LDL Direct CP
Réf. : A11A01638
Volume R1 : 28 ml
Volume R2 : 10 ml
Réactif de diagnostic destiné au dosage quantitatif
in-vitro du cholestérol LDL (LDL-C) dans le sérum
et le plasma par colorimétrie.
2007/12/11
A93A00162L FR
A11A01638
28 ml
10 ml
Intérêt clinique
Les lipoprotéines plasmatiques sont des particules sphériques
contenant des quantités variables de cholestérol, de triglycérides, de
phospholipides et de protéines. Les phospholipides, le cholestérol
libre et les protéines constituent la face extérieure des lipoprotéines ;
le noyau, quant à lui, contient surtout du cholestérol estérifié et des
triglycérides. Ces particules permettent de dissoudre et de transporter
le cholestérol et les triglycérides dans la circulation sanguine.
Les proportions relatives de protéines et de lipides déterminent la
densité de ces lipoprotéines et constituent une base permettant leur
classification (1). Les différentes classes de lipoprotéines sont les
suivantes : chylomicrons, lipoprotéines de très faible densité (VLDL),
lipoprotéines de faible densité (LDL) et lipoprotéines de haute densité
(HDL). De nombreuses études cliniques ont montré que les effets des
lipoprotéines sur le risque de cardiopathie ischémique étaient très
différents en fonction de la classe de lipoprotéines concernée (2-4).
Toutes les études s’accordent à considérer le cholestérol LDL comme le
facteur clé dans la pathogénie de l’athérosclérose et des cardiopathies
ischémiques (2-8), alors que le cholestérol HDL apparaît comme ayant
un effet protecteur. En dépit d’un taux de cholestérol total situé dans
la plage de valeurs normales, une augmentation du cholestérol LDL
peut être observée, associée à une augmentation du risque de
cardiopathie ischémique (4).
Méthode
ABX Pentra LDL Direct CP est une méthode de dosage homogène
permettant de déterminer directement le taux de LDL-C dans le sérum
ou le plasma, sans aucun prétraitement ou étape de centrifugation
préalable.
Form-0846 Rev. 2
La méthode se présente sous forme de deux réactifs et varie en
fonction des propriétés d’un détergent unique. Ce détergent (Réactif
1) dissout uniquement les particules autres que les lipoprotéines LDL.
Le cholestérol libéré est consommé par la cholestérol estérase et la
cholestérol oxydase au cours d’une réaction sans formation de couleur.
Un deuxième détergent (Réactif 2) dissout les particules LDL restantes
et un coupleur chromogène permet la formation de couleur. La couleur
produite lors de la réaction enzymatique avec le LDL-C en présence du
coupleur est proportionnelle à la quantité de cholestérol LDL présente
dans l’échantillon.
HORIBA ABX
BP 7290
34184 Montpellier- cedex 4 - France
Réactifs
ABX Pentra LDL Direct CP est prêt à l’emploi.
Réactif 1 : Tampon MES (pH 6,3)
Détergent 1
< 1.0 %
Cholestérol estérase
< 1500 U/l
Cholestérol oxydase
< 1500 U/l
Peroxydase
< 1300 ppg U/l
4-aminoantipyrine
< 0.1 %
Acide ascorbique Oxydase
< 3000 U/l
Conservateur
Réactif 2 : Tampon MES (pH 6,3)
Détergent 2
< 1.0 %
N,N-bis(4-sulfobutyl)-toluidine, disodium
< 1,0 mM
(DsBmT)
Conservateur
Le réactif ABX Pentra LDL Direct CP doit être utilisé conformément à
la présente notice. HORIBA ABX ne peut garantir ses résultats si ces
conditions ne sont pas respectées.
Utilisationa
Retirer les deux bouchons de la cassette. En cas de présence de
mousse, la retirer en utilisant une pipette en plastique. Positioner les
opercules respectives, réf. GBM0969 sur R1 et réf. GBM0970 sur R2 et
placer la cassette dans le compartiment réactif de l’ABX Pentra 400 en
position réfrigérée.
a. Modification entre les indices K et L: nouvelle utilisation.
S.A.S. au capital de 41.700.000 € - RCS Montpellier 328 031 042 - SIRET 328 031 042 000 42 - APE 332 B
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ABX Pentra
LDL Direct CP
Calibrateur
Pour la calibration, utiliser :
ABX Pentra LDL Cal, Réf. A11A01678 (non inclus)
2 x 1 ml (lyophilisat)
Contrôle
Pour le contrôle qualité interne, utiliser :
ABX Pentra N Control, Réf. A11A01653 (non inclus)
10 x 5 ml (lyophilisat)
ABX Pentra P Control, Réf. A11A01654 (non inclus)
10 x 5 ml (lyophilisat)
Chaque contrôle doit être testé quotidiennement et/ou après chaque
calibration.
La fréquence des contrôles et les intervalles de confiance doivent être
adaptés aux exigences du laboratoire et aux directives spécifiques de
votre pays. Les résultats doivent être situés dans les limites de
confiance définies. Chaque laboratoire établira la procédure à suivre si
les résultats se situent en dehors des limites de confiance.
Matériels nécessaires mais non fournis
• Analyseur de biochimie.
• Équipement standard de laboratoire.
Échantillon
Le patient doit être à jeun pour la prise de sang.
Les échantillons recommandés sont les suivants : sérum, plasma traité
à l’EDTA ou à l’héparine de sodium.
• Sérum : Prélever le sang total par ponction veineuse et laisser
coaguler. Centrifuger et extraire le sérum dès que possible après le
prélèvement (dans les 3 heures) (9).
• Plasma : Les échantillons doivent être recueillis sur EDTA ou héparine
de sodium. Centrifuger et extraire le plasma dès que possible après
le prélèvement (dans les 3 heures) (9).
Si les échantillons ne sont pas immédiatement analysés, les conserver
entre 2 et 8°C pendant 5 jours au maximum.
Si les échantillons ne sont pas utilisés dans un délai de 5 jours, les
conserver à -80°C. Ils peuvent être congelés une fois.
Consulter le document NCCLS H18-A pour de plus amples informations
sur le prélèvement, la manipulation et la conservation des échantillons
(10).
Remarque : Ne pas utiliser d’anticoagulants contenant du citrate.
Valeurs normales
Les valeurs suivantes établies par le NCEP (Programme national
d’éducation sur le cholestérol) permettent la classification des
patients et sont utilisées dans le cadre de la prévention et de la prise
en charge des cardiopathies ischémiques (9).
Cholestérol LDL
Classification
< 130 mg/dl (< 3,36 mmol/l)
Normal
130 - 159 mg/dl (3,36 - 4,11 mmol/l) Risque potentiel
160 mg/dl (4,14 mmol/l)
Risque élevé
Nous recommandons à chaque laboratoire d’établir ses propres valeurs
normales.
Conservation et stabilité
Les réactifs, non ouverts, sont stables jusqu’à la date de péremption
figurant sur l’étiquette s’ils sont conservés entre 2 et 8°C et s’ils ne
sont pas exposés à la lumière directe du soleil.
Stabilité après ouverture : se référer au paragraphe “ Performances sur
ABX Pentra 400 ”.
Ne pas congeler les réactifs.
Procédures
Les instructions de test sur d’autres automates que l’ABX Pentra 400
sont disponibles sur demande.
Traitement des déchets
Se référer à la législation locale en vigueur.
Précautions générales
1. Réactif de diagnostic in-vitro, à usage professionnel uniquement.
2. Ne pas pipeter à la bouche.
3. Les cassettes réactifs sont à usage unique et leur mise aux déchets
doit être effectuée conformément aux législations locales en
vigueur.
4. Se référer à la MSDS associée au réactif.
Performances sur ABX Pentra 400
Les performances présentées ci-dessous ont été obtenues sur
l’analyseur ABX Pentra 400.
Nombre de tests : 100 tests
Stabilité des réactifs dans l’analyseur :
Une fois ouvert, le réactif conditionné en cassette et positionné dans
la partie réfrigérée de l’ABX Pentra 400 est stable 97 jours.
Volume d’échantillon : 2,4 μl/test
Limite de détection :
La limite de détection, déterminée en suivant les recommandations du
protocole Valtec (11), est de 0,04 mmol/l.
S.A.S. au capital de 41.700.000 € - RCS Montpellier 328 031 042 - SIRET 328 031 042 000 42 - APE 332 B
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LDL Direct CP
Exactitude et précision :
• Répétabilité (précision intra-série)
3 échantillons de concentrations basse, moyenne et haute ainsi que 2
contrôles ont été testés 20 fois en suivant les recommandations du
protocole Valtec (11).
Contrôle normal
Contrôle pathologique
Échantillon 1
Échantillon 2
Échantillon 3
Moyenne mmol/l
1,58
1,94
2,88
3,66
4,94
Moyenne mmol/l
1,57
1,92
4,05
4,95
Avertissement
Il est de la responsabilité de l’utilisateur de vérifier si ce document est
applicable au réactif utilisé.
Bibliographie
CV %
5,59
6,39
3,94
4,04
Linéarité et intervalle de mesure:
La linéarité du réactif a été déterminée en suivant
recommandations du protocole NCCLS, EP6-P (13).
Linéarité basse : 0,04 mmol/l; linéarité haute : 10 mmol/l.
Facteur de conversion :
mmol/l x 0,387 = g/l
mmol/l x 38,7 = mg/dl
Version de l’application software correspondante: 3.xx
CV %
1,01
2,82
0,91
1,00
0,63
• Reproductibilité (précision inter-série)
2 échantillons de niveaux bas et haut ainsi que 2 contrôles ont été
dosés en double pendant 20 jours (2 séries par jour) selon les
recommandations du protocole NCCLS, EP5-A (12).
Contrôle normal
Contrôle pathologique
Échantillon 1
Échantillon 2
contrôle(s) de qualité sont en dehors de l’intervalle établi.
les
Corrélation :
99 échantillons de patients ont été dosés comparativement à un
réactif commercialisé pris comme référence en suivant les
recommandations du protocole NCCLS, EP9-A2 (14).
L’équation de la droite d’allométrie obtenue est :
Y = 0,9 x + 0,02 avec un coefficient de corrélation r2 = 0,9883.
Interférences :
Hémoglobine :
Pas d’interférence significative jusqu’à une
concentration de 195 μmol/l
Triglycérides :
Pas d’interférence significative jusqu’à une
concentration de 7 mmol/l
Bilirubine totale : Pas d’interférence significative jusqu’à une
concentration de 500 μmol/l
Bilirubine directe : Pas d’interférence significative jusqu’à une
concentration de 185 μmol/l
Stabilité de la calibration a:
Le réactif est calibré à J0. La stabilité de la calibration est vérifiée en
testant 2 échantillons de contrôle.
La stabilité de la calibration est d’au moins 14 jours.
Remarque : Il est recommandé d’effectuer une nouvelle calibration après
chaque changement de lots de réactifs ou lorsque les résultats du ou des
1. Centers for Disease Control/National Institutes of Health Manual,
’’Biosafety in Microbiological and Biomedical Laboratories’’, 1988.
I have also seen this as: Richardson J.H./ and Barkley W.E. eds.
Biosafety in Microbiological and Biomedical Laboratories, U.S.
Dept. of Health and Human Services, Public Health Service, HHS
Publication No. (CDC) 84-8395, Washington, DC,1984.
2. National Comittee for Clinical Laboratory Standards, Preparation
and Testing of Reagent Water in the Clinical Laboratory - Third
Edition; Approved Guideline NCCLS Document C3-A3, 1997.
3. Gotto A.M., Lipoprotein Metabolism and the Etiology of
Hyperlipidemia, Hospital Practice, 23: Suppl. 1, 4 (1988).
4. Crouse J.R. et al., Studies of low density lipoprotein molecular
weight in human beings with coronary artery disease, J. Lipid Res.,
26:566 (1985).
5. Badimon, J.J. et al., Regression of Atherosclerotic lesions by High
Density Lipoprotein Plasma Fraction in the cholesterol-Fed Rabbit,
Journal of Clinical Investigation, 85:1234 (1990).
6. Castelli W.P. et al., HDL Cholesterol anf Other Lipids in Coronary
Heart Disease, Circulation, 55:767 (1977).
7. Barr D.P. et al., Protein-lipid Relationships in Human Plasma, Am.
J. Med., 11:480 (1951).
8. Gordon T., et al., High Density Lipoprotein As a Protective Factor
Against Coronary Heart Disease, Am. J. Med., 62:707 (1977).
9. Bachorik P.S. et al., National Cholesterol Education Program
Recommendations for Measurement of Low-Density Lipoprotein
Cholesterol: Executive Summary, Clinical Chemistry, Vol.41, No.
10:1414 (1995).
10. National Comittee for Clinical Laboratory Standards, Procedures for
the Handling and Processing of Blood Specimens, Approved
Guideline NCCLS Document H18-A, Number 12, Vol. 10, 1990.
11. Vassault A., Grafmeyer D. Naudin C. et al., Protocole de validation
de techniques (document B), Ann. Biol. Clin., 1986, 44, 686-745.
12. Evaluation of Precision Performance of Clinical Chemistry Devices,
Approved Guideline, NCCLS document EP5-A, Vol. 19, No. 2,
february 1999.
13. Evaluation of the Linearity of Quantitative Analytical Methods,
Proposed Guideline, NCCLS document EP6-P, Vol. 6, No. 18,
september 1986.
14. Method Comparison and Bias Estimation Using Patient Samples,
Approved Guideline, 2nd ed., NCCLS document EP9-A2, Vol. 22, No.
19, 2002.
a. Modification entre les indices K et L: modification de la stabilité de la calibration
S.A.S. au capital de 41.700.000 € - RCS Montpellier 328 031 042 - SIRET 328 031 042 000 42 - APE 332 B
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LDL Direct CP
S.A.S. au capital de 41.700.000 € - RCS Montpellier 328 031 042 - SIRET 328 031 042 000 42 - APE 332 B
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