resumes des posters (p1 – p28)
Transcription
resumes des posters (p1 – p28)
RESUMES DES POSTERS (P1 – P28) SOMMAIRE LABORATOIRE DE MICROORGANISMES ET PATHOLOGIE HUMAINE (LR-SP-03-SP) P1 : IMPACT DE L’INFECTION À CHLAMYDIA TRACHOMATIS SÉROVAR E SUR LA FERTILITÉ DES SOURIS MÂLES SWISS. H.SELLAMI, R.GDOURA, I.MABROUK, L. KESKES, M. AOUNI, A. HAMMAMI 1. Laboratoire de Microbiologie, CHU Habib Bourguiba Sfax. P2: PRÉVALENCE DES INFECTIONS SEXUELLEMENT TRANSMISES ET COMPORTEMENTS SEXUELS DES FEMMES UTILISANT LA CONTRACEPTION HORMONALE. Zribi N1, Znazen A1, Maazoun L2, Khrouf S2, Hammami A1. 1. Laboratoire de Microbiologie, CHU Habib Bourguiba Sfax. LABORATOIRE DE GENETIQUE MOLECULAIRE HUMAINE LAB-B-01 P3: RECHERCHE DE LA MUTATION HÉTÈROPLASMIQUE M.14709T>C DANS LE GÈNE DE L’ARNTGLU AU NIVEAU DE L'ADN MITOCHONDRIAL CHEZ DEUX FAMILLES TUNISIENNES ATTEINTES DE DIABÈTE MITOCHONDRIAL (DM). Najla Mezghani 1, Emna Mkaouar1, Mouna Mnif 2, Nadia Charfi 2, Nabila Rekik 2, Saoussan Youssef 1, Mohamed Abid 2, Faiza Fakhfakh1 1- Laboratoire de Génétique Moléculaire Humaine. Faculté de Médecine de Sfax ; 2- Service d’Endocrinologie. CHU. H Chaker. Sfax. TunisiLGMH P4: VARIABILITÉ D’EXPRESSION DANS LE SYNDROME D’ALLGROVE : GÈNE MODIFICATEUR OU FACTEUR ENVIRONNEMENTAL. Fakhri Kallabi1, Hassen Kamoun1,2, Neila Belghith1,2, Hajer Aloulou3, Dorra Sellami4, Ali Amouri5, Mongia Hachicha3, Faiza Fakhfakh1 1- Laboratoire de Génétique Moléculaire Humaine – Faculté de médecine de Sfax 2- Service de Génétique Médicale – hôpital Hédi Chaker - Sfax 3- Service de Pédiatrie – hôpital Hédi Chaker - Sfax 4- Service d’Ophtalmologie – hôpital Habib Bourguiba P5: UNE NOUVELLE DOUBLE MUTATION ET UNE NOUVELLE VARIATION IDENTIFIÉES DANS LE GÈNE MECP2 CHEZ DES PATIENTES TUNISIENNES ATTEINTES DU SYNDROME DE RETT. Nourhene Fendri-Kriaa1, Emna Mkaouar-Rebai1, Dorsaf Moalla1, Neila Belguith1, Nacim Louhichi1, Ramzi Zemni2, Foued Slama2, Chahnez Triki3, Faiza Fakhfakh1 et le groupe tunisien d’étude sur le retard mental 1. Laboratoire de Génétique Moléculaire Humaine; 2. Unité d’immunologie; 3. Service de Neurologie Infantile P6: EST-CE DES VARIATIONS DE SÉQUENCES INTRONIQUES VRAISEMBLABLEMENT BÉNIGNES PEUVENT MODULER L’EXPRESSION DES GÈNES ?. Olfa Siala (1), Ikhlass Hadj Salem (1), Abdelaziz Tlili (1), Imen Ammar (1), Hanen Belguith (1), Faiza Fakhfakh (1). Laboratoire de Génétique Moléculaire Humaine, Faculté de Médecine de Sfax, Sfax, Tunisie. P7: IDENTIFICATION DE DEUX MUTATIONS RESPONSABLES DU DÉFICIT CONGÉNITAL EN FACTEUR XIII DE COAGULATION CHEZ 8 FAMILLES TUNISIENNES: CONFIRMATION MOLÉCULAIRE D’UN EFFET FONDATEUR. Nacim Louhichi1, Moez Medhaffar2, Ikhlass Hajsalem1, Emna Mkaouar-Rebai1, Nourhene FendriKriaa1, Houda Kanoun1, Firas Yaïch1, Tawfik Souissi2, Moez Elloumi2 and Faiza Fakhfakh1 1. Laboratoire de Génétique Moléculaire Humaine, Faculté de médicine de Sfax. 2. Service d’Hématologie, C.H.U. Hédi Chaker de Sfax. P8: DESCRIPTION D’UNE NOUVELLE MUTATION DE NOVO DANS LE GÈNE DE L’ATPASE 8 CHEZ UN PATIENT TUNISIAN ATTEINT D’UNE CYTOPATHIE MITOCHONDRIALE. Emna Mkaouar-Rebai, Fatma Kammoun, Imen Chamkha, Nadège Kammoun, Ines Hsairi, Chahnez Triki, and Faiza Fakhfakh, Laboratoire de Génétique Moléculaire Humaine, Faculté de Médecine de Sfax, Tunisia P9: ETUDE DU POLYMORPHISME (CAG)n DE LA POLYMERASE GAMMA (POLG) CHEZ L’HOMME INFERTILE. Baklouti S.1, Ghorbel. M1, Chakroun. N2, Sellami. A2, Fakhfakh. F1, Ammar-KeskesL2. 1 : Laboratoire de Génétique Moléculaire Humaine, Faculté de Médecine de Sfax. 2 : Laboratoire d’Histologie, Faculté de Médecine de Sfax P10: ETUDE DES POLYMORPHISMES SNP DES GENES DE L’ADN MITOCHONDRIAL CHEZ L’HOMME INFERTILE DANS LA POPULATION TUNISIENNE. Baklouti S.1, Ghorbel. M1, Chakroun. N2, Sellami. A2, Fakhfakh. F1, Ammar-KeskesL2. 1 : Laboratoire de Génétique Moléculaire Humaine, Faculté de Médecine de Sfax. 2 : Laboratoire d’Histologie, Faculté de Médecine de Sfax. P11: ACTIVATION DE LA CASPASE3 AU COURS DE LA CONGELATION DES SPERMATOZOIDES HUMAINS DANS L’AZOTE LIQUIDE. ZRIBI NASSIRA, CHAKROUN FEKI NOZHA, EL EUCH HENDA, GARGOURI JALEL, FAKHFAKH FAIZA, AMMAR KESKKES LEILA Faculté de Médecine de Sfax P12 : ÉTUDE DES EFFETS DE LA SUPPLEMENTATION IN VITRO DE LA QUERCETINE SUR LA QUALITE DES SPERMATOZOÏDES DANS DES CONDITIONS DE STRESS OXYDANT. Fatma BEN ABDALLAH a,b, Nassira ZRIBI a,b, Fayza FAKHFEKH a& Leila AMMAR-KESKES a,b. a Laboratoire de Génétique Moléculaire Humaine, Faculté de Médecine de Sfax, Tunisie. b Laboratoire d'Histologie Embryologie, Faculté de Médecine de Sfax, Tunisie. UNITE D’ANATOMIE HISTO-EMBRYOLOGIE 99/UR/08-60 P13: LA DISSÉMINATION ASCITIQUE MALIGNE RENFORCE LE POUVOIR ANTIOXYDANT DE 2 LIGNÉES TUMORALES GÉNÉRATRICES DE MÉTASTASES OSSEUSES : WALKER 256/B ET MATLYLU. Riadh BADRAOUI, Stéphane Blouin, Tarek REBAI 1: Laboratoire d’Histologie-Embryologie, Faculté de Médecine de Sfax. P14: PLACE DU DOSAGE SERIQUE DE L’AMH ET DE L’INHIBINE B DANS L’EVALUATION DE LA FONCTION OVARIENNE CHEZ LA FEMME. Azza Ben Salem1, Mouna Mnif2, Afifa Sellami1, Nozha Chakroun1, Mehdi Kammoun2, Belhassen Ben Ayed3, Mohamed Guermazi3, Mohamed Abid2, Tarek Rebaï1, Leila Ammar-Keskes1. 1: Laboratoire d’Histologie-Embryologie, Faculté de Médecine de Sfax. P15: PLACE DU DOSAGE SERIQUE ET SEMINAL DE L’AMH ET DE L’INHIBINE B DANS L’EVALUATION DU STATUT DE LA SPERMATOGENESE CHEZ L’HOMME INFERTILE. Azza Ben Salem1, Afifa Sellami1, Nozha Chakroun1, Belhassen Ben Ayed2, Mohamed Guermazi2, Tarek Rebaï1, Leila Ammar-Keskes1. 1 :Laboratoire d’Histologie-Embryologie, Faculté de Médecine de Sfax. P16: DÉTECTION D’UNE MUTATION COMMUNE (N308D) DU GÈNE PTPN11 CHEZ DEUX TUNISIENS PORTEURS DE SYNDROME DE NOONAN. Rim Louati (1-2), Nouha Bouayed Abdelmoula (1-2), Imen Trabelsi (1-3), Leila Abid (1-3), Samir Kammoun (3), Tarek Rebai (1-2) 1-Unité de Recherche Anatomie – Histologie et Embryologie 2-Laboratoire d’Histologie Faculté de Médecine de Sfax 3-Service de Cardiologie CHU Hédi Chaker de Sfax P17: A CASE OF A TUNISIAN PATIENT WITH CONGENITAL ICHTHYOSIFORM ERYTHRODERMA AND DE NOVO RECIPROCAL TRANSLOCATION T(6;8) (P25;Q21): IS IT A COINCIDENCE OR A DISRUPTED GENE. Nouha Bouayed Abdelmoula, Rim Louati, Mounira Meddeb, Tarek Rebai. Laboratoire d’Histologie Faculté de Médecine de Sfax, P18: IDIOPATHIC PREMATURE OVARIAN FAILURE IN 79 YOUNG WOMEN: CYTOGENETIC ANALYSIS AND GENETIC COUNSELLING RESULTS. Nouha Bouayed Abdelmoula, Mounira Meddeb, Ahlem Amouri, Rim Louati, Tarek Rebai. Laboratoire d’Histologie Faculté de Médecine de Sfax, P19: SYNDROME DE TURNER EN MOSAÏQUE CHEZ DEUX « FAUSSES JUMELLES » AVEC UN PHENOTYPE DISCORDANT : QUELLES SONT LES MECANISMES ? QUELLES SONT LES LIMITES DU CARYOTYPE LYMPHOCYTAIRE STANDARD ?. ABDELMOULA NB. (1), BEN ROMDHANE ALOULOU W. (2), LOUATI R. (1), CHERIF M. (3), REBAI T. (1) (1) Laboratoire d’Histologie, Faculté de Médecine de Sfax TUNISIE (2) Service de Pédiatrie, Hôpital de Gabes TUNISIE (3) Laboratoire de Cytogénétique LP Tunis TUNISIE P 20: EFFET DE LA VARIATION SAISONNIERE SUR LA QUALITE DU SPERME CHEZ L’HOMME CONSULTANT POUR INFERTILITE DU COUPDaoud Salima1, Chakroun Nozha1, Sellami Afifa1, Ben Ayed Belhassen2, Guermazi Mohamed2, Rebai Tarek1, Ammar-Keskes Leila1. 1-Laboratoire d’Histologie-Embryologie, Faculté de Médecine de Sfax 2-Service de Maternité de Sfax, laboratoire d'histologie embryologie faculté de médecine de Sfax UNITE D’ETUDE DE LA PHYSIOPATHOLOGIE ET DE LA THERAPEUTIQUE DE L'ENVENIMATION SCORPIONIQUE 99/UR/08-71 P 21: MEDICAMENTS ET SANTE REPRODUCTIVE MASCULINE. A Sellami1 ,hozzi2 , H Affes2, N Chakroun1, S Hammami 2, S Daoud1, Z Sahnoun2, T Rebai1, L Keskes1, K M Zeghal2. 1-Laboratoire d’Histologie, Faculté de Médecine de Sfax, 2-Laboratoire de Pharmacologie, Faculté de Médecine de Sfax UNITE DE SURDITE ET CANCERS ORL 99/UR/08-05 P22: MICRODELETION 22Q11 ET MANIFESTATIONS ORL. J. Moalla, Am. Chakroun, I. Achoru,A. Chakroun I. Charfeddine, A. Ghorbel Service ORL P23: SURDITÉ PROFESSIONNELLE A PROPOS DE 200 CAS. B. Hammami, M. Mnejja, S. Kallel, L. Bougacha, A. Chakroun, I. Charfeddine, A. Ghorbel P24: LES SURDITÉS GÉNÉTIQUES DE L’ENFANT EN TUNISIE BILAN DE 17 ANS DE RECHERCHE. Ilhem Charfeddine, Malek Mnejja, Sabeur Masmoudi*, Hmani Mounira*, Jihène Moalla, Boutheina Hammami, Adel Chakroun, Mohamed Drira, Hammadi Ayadi *, Faiza Fakhfakh*, Abdelmonem Ghorbel P25 : SURDITÉ PROFESSIONNELLE A PROPOS DE 200 CAS. B. Hammami, M. Mnejja, S. Kallel, L. Bougacha, A. Chakroun, I. Charfeddine, A. Ghorbel UNITE DE TOXICOLOGIE PROFESSIONNELLE ET ENVIRONNEMENT (05/UR/07-03) P26: FACTEURS DE RISQUE ENVIRONNEMENTAUX PROFESSIONNELS DES ASTHMES ALLERGIQUES DÉCLARÉS À LA CNAM (2004-2008). A. Derbel1, D. Rebai.1 M.Loukil2, A.Abdelhedi1, O. Gargouri1, M.Bouzid2, A.Masmoudi2, Gharbi N. 2,Marouen Jamoussi S.2 UR Toxicologie Professionnelle et de L'Environnement Faculté de médecine Sfax UNITE D’HEMATOLOGIE : MALADIES DES CELLULES SANGUINES, MALADIES DE L’HEMOSTASE, DANS LE SUD TUNISIEN (01/UR/08-16) P 27: TUNISIAN FANCONI ANEMIA STUDY GROUP TFASG: CREATION OF A WEB SITE AND THE TUNISIAN FANCONI ANEMIA REGISTRY TFAR. S.HDIJI MSEDDI1, L.KAMMOUN1, H.BELLAAJ2, L.AISSAOUI3, L.TORJEMANE4, Y.BEN YOUSSEF5, H.LEGHEZAL5, A.AMOURI6, S ABDELHAK6, M.HACHICHA1, M.FRIKHA7and TFASG8 1:HEDI CHAKER HOSPITAL, SFAX Tunisia; 2:Intelligent Control, design & Optimization of complex Systems ENIS, SFAX Tunisia; 3:AZIZA OTHMANA HOSPITAL, TUNIS Tunisia; 4:Centre National de Greffe de Moelle Osseuse, TUNIS Tunisia; 5:FARHAT HACHED HOSPITAL, SOUSSE Tunisia; 6:PASTEUR INSTITUTE, TUNIS Tunisia; 7:HABIB BOURGUIBA HOSPITAL, SFAX Tunisia, 8:Tunisian Fanconi Anemia Study Group CHU Hédi Chaker P 28: HÉMOPATHIES MALIGNES PROFESSIONNELLES : À PROPOS DE 12 CAS. M.Ghorbel1, S.Jamoussi2, S.Mseddi1, M.Elloumi1, T.Souissi1, M.L.Masmoudi21 Service Hématologie, Sfax-Tunisie2 : Service pathologies professionnelles, Sfax-Tunisie CHU Hédi Chaker LABORATOIRE E MICROORGANISMES ET PATHOLOGIE HUMAINE (LR-SP-03-SP) P1 : IMPACT DE L’INFECTION À CHLAMYDIA TRACHOMATIS SÉROVAR E SUR LA FERTILITÉ DES SOURIS MÂLES SWISS H.SELLAMI, R.GDOURA, I.MABROUK, L. KESKES, M. AOUNI, A. HAMMAMI Faculté de Médecine de Sfax Introduction: L’infection à C. trachomatis représente la première cause des IST évoluant le plus souvent à bas bruit. Elle engendre des séquelles redoutables et notamment l’infertilité. Le rôle de C. trachomatis dans la genèse de l’infertilité féminine a été démontré. Toutefois, son rôle dans la genèse de l’infertilité masculine reste controversé. Méthodes: L’objectif de notre travail était d’étudier l’impact de l’infection in vivo à C. trachomatis sérovar E sur les paramètres spermatiques (mobilité, vitalité, morphologie et numération), l’apoptose des spermatozoïdes et le pouvoir fécondant des souris mâles fertiles. Nous avons procédé à une inoculation de deux lots de souris mâles fertiles: un lot de 60 souris infectées avec une dose ID50 préalablement déterminée de 106 CE de C. trachomatis et un lot de 60 souris témoins inoculées avec le milieu 2SP. Résultats: L’infection in vivo des souris mâles par les CE de C. trachomatis a provoqué une diminution significative de la mobilité, de la vitalité et des formes normales des spermatozoïdes en comparaison avec les spermatozoïdes des souris témoins 7, 15, 21 et 30 jours après inoculation. Une diminution significative de la numération des spermatozoïdes des souris infectées a été observée uniquement 30 jours après inoculation en comparaison avec les souris témoins. Ces résultats montrent que l’infection à C. trachomatis entraîne une altération des paramètres spermatiques. La recherche des marqueurs d’apoptose par cytométrie de flux a montré une augmentation du pourcentage des spermatozoïdes apoptotiques 7, 15 et 21 jours après inoculation et une augmentation du pourcentage des spermatozoïdes nécrotiques 21 et 30 jours après inoculation chez les souris infectées par C. trachomatis en comparaison avec les souris témoins. Ces résultats montrent que l’infection par C. trachomatis pourrait entraîner une induction de l’apoptose qui contribue à la lyse des spermatozoïdes et par conséquent à la diminution de leur numération. Afin d’étudier le retentissement de l’infection à C. trachomatis sur le pouvoir fécondant des souris mâles, nous avons comparé le pourcentage de gestation et le nombre de descendants des femelles accouplées avec des souris mâles infectées avec ceux des femelles accouplées avec des souris mâles témoins. Une diminution du pourcentage des femelles gestantes accouplées avec des souris mâles infectées ainsi que du nombre de leurs descendants ont été observées. Notre étude montre que l’infection à C. trachomatis peut retentir sur le pouvoir fécondant des souris mâles. Conclusion: Dans ce travail, nous avons développé un premier modèle animal afin d'étudier l'impact de l'infection in vivo à C. trachomatis sérovar E sur les paramètres spermatiques, l'apoptose des spermatozoïdes et le pouvoir fécondant des souris mâles. Notre étude a montré que l'infection des souris mâles fertiles par C. trachomatis a provoqué une altération des paramètres spermatiques (mobilité, vitalité, morphologie et numération) et une atteinte de l'intégrité des spermatozoïdes et peut retentir sur le pouvoir fécondant des souris mâles. P 2: PRÉVALENCE DES INFECTIONS SEXUELLEMENT TRANSMISES ET COMPORTEMENTS SEXUELS DES FEMMES UTILISANT LA CONTRACEPTION HORMONALE Zribi N1, Znazen A1, Maazoun L2, Khrouf S2, Hammami A1. 1. Laboratoire de Microbiologie, CHU Habib Bourguiba Sfax. Introduction: L’utilisation de la contraception hormonale (CH) a augmenté dans tout le monde surtout dans les pays en voie de développement. Cette méthode de contraception était incriminée comme un facteur favorisant les infections sexuellement transmises (IST). L’objectif de notre travail était de décrire le comportement sexuel des femmes utilisant une CH et de rapporter la prévalence des IST dans cette population. Méthodes: Nous avons inclus dans ce travail prospectif 220 femmes consultantes à l’office national de la famille et de la population. Selon la méthode de contraception utilisée, ces femmes étaient divisées en 2 groupes : celles sous CH (groupe d’étude, n= 34) et celles utilisant une autre méthode [groupe témoin : stérilet (n= 65), sans contraception (n= 83), autres (n=38)]. Les caractéristiques démographiques, comportementales et cliniques étaient colligées. Des prélèvements vaginaux et endocervicaux étaient pratiqués de façon systématique à la recherche de Trichomonas vaginalis (TV) par examen direct à l’état frais et à la recherche de Chlamydia trachomatis (CT) et de Neisseria gonorrhoeae (NG) par PCR CT/NG Cobas Amplicor. Résultats: L’âge moyen des femmes du groupe d’étude était de 29,7 ans contre 34,6 ans pour le groupe témoin (p= 0,001). Les femmes utilisant la CH étaient non mariées dans 50% des cas contre 19,3% pour les autres femmes (p<0,001). Plus d’un partenaire sexuel durant les trois derniers mois était noté chez 4 femmes (11,8%) dans le groupe d’étude et chez 5 femmes (2,7%) dans le groupe témoin (p= 0,034). Les partenaires sexuels des femmes utilisant la CH avaient des antécédents d’IST plus que les partenaires des autres femmes (41,2% versus 20,4% ; p = 0,015). L’utilisation des préservatifs était notée dans 50% des cas pour les femmes du groupe d’étude contre 34,9% des cas pour le groupe contrôle (p= 0,095). La prévalence de chaque microorganisme dans le groupe d’étude et le groupe témoin était respectivement de 17,6% contre 5,9% pour CT (p= 0,03) ; de 8,8% contre 4,3% pour NG (p= 0,38) et de 17,6% contre 7,5% pour TV (p=0,059). Conclusion: Les femmes utilisant la CH étaient plus jeunes et avaient un comportement sexuel à risque plus que les autres femmes. Ceci explique que la prévalence de CT était significativement plus élevée chez ces femmes. D’autres études ont expliqué l’augmentation du risque de l’infection à CT chez ces femmes par l’ectropion induit par les hormones qui rend les cellules épithéliales plus susceptibles à l’infection. De même, l’ectropion permet un meilleur prélèvement des cellules cervicales et donc un meilleur diagnostic. Le dépistage systématique de l’infection à CT chez les femmes qui demande les pilules aux pharmacies serait alors justifié. LABORATOIRE DE GENETIQUE MOLECULAIRE HUMAINE LAB-B-01 P 3: RECHERCHE DE LA MUTATION HÉTÈROPLASMIQUE M.14709T>C DANS LE GÈNE DE L’ARNTGLU AU NIVEAU DE L'ADN MITOCHONDRIAL CHEZ DEUX FAMILLES TUNISIENNES ATTEINTES DE DIABÈTE MITOCHONDRIAL (DM) Najla Mezghani 1, Emna Mkaouar1, Mouna Mnif 2, Nadia Charfi 2, Nabila Rekik 2, Saoussan Youssef 1, Mohamed Abid 2, Faiza Fakhfakh1 1- Laboratoire de Génétique Moléculaire Humaine. Faculté de Médecine de Sfax ; 2- Service d’Endocrinologie. CHU. H Chaker. Sfax. Tunisie. LGMH Introduction: Les maladies mitochondriales se caractérisent par leurs hétérogénéités et par un déficit de la chaîne respiratoire résultant d’anomalies touchant l’ADN mitochondrial ou l’ADN nucléaire codant des protéines mitochondriales . Dans ce cadre, plusieurs mutations et polymorphismes mitochondriaux ont été associés au diabète mitochondrial. Méthodes: Extraction de l’ADN génomique à partir du sang : L’ADN a été extrait à partir des prélèvements sanguins chez les patients des deux familles Tunisiennes selon le protocole standard au phénol/chloroforme. La recherche de la mutation m.14709T>C au niveau du gène de l’ARNt Glu par PCR-RFLP a été effectué par les méthodes PCR-RFLP et PCR- SSP. La recherche de la mutation m.3243A>G au niveau du gène de l’ARNt Leu(UUR) été effectué par les méthodes PCR-RFLP et séquençage automatique. Résultats: Par PCR-RFLP: Présence de la mutation m.14709T>C à l’état hétéroplasmique chez tous les patients de la famille 1. Par PCR-RFLP et PCR- SSP: Présence de la mutation m.14709T>C à l’état hétéroplasmique chez tous les patients de la famille 2, sauf un seul patient chez qui la mutation m.14709T>C est absente. Par PCR-RFLP et par séquençage automatique : Absence de la mutation m.3243A>G du gène de l’ARNtLeu(UUR) chez tous les patients des 2 familles Tunisiennes. Conclusion: La présence de la mutation m.14709T>C au niveau du gène de l’ARNt Glu à l’état hétèroplasmique est en faveur de l’association de cette mutation avec le diabète mitochondrial chez les 2 familles étudiées. P 4: VARIABILITÉ D’EXPRESSION DANS LE SYNDROME D’ALLGROVE : GÈNE MODIFICATEUR OU FACTEUR ENVIRONNEMENTAL Fakhri Kallabi1, Hassen Kamoun1,2, Neila Belghith1,2, Hajer Aloulou3, Dorra Sellami4, Ali Amouri5, Mongia Hachicha3, Faiza Fakhfakh1 1- Laboratoire de Génétique Moléculaire Humaine – Faculté de médecine de Sfax 2- Service de Génétique Médicale – hôpital Hédi Chaker - Sfax 3- Service de Pédiatrie – hôpital Hédi Chaker - Sfax 4- Service d’Ophtalmologie – hôpital Habib Bourguiba Introduction: Le syndrome d’Allgrove est une maladie héréditaire rare associant une alacrymie, une achalasie et une maladie d’Addison. Des signes neurologiques peuvent être observés dans le tiers des cas. Ce syndrome est transmis selon le mode autosomique récessif. Le gène AAAS responsable de ce syndrome est localisé sur le chromosome 12 en 12q13 et code pour une protéine appelée ALADIN. Méthodes: Notre étude concerne 20 patients appartenant à 12 familles Maghrébines (10 familles tunisiennes et 2 familles libyennes). Les 20 patients présentent au moins deux signes de la triade caractéristique du syndrome. Notre stratégie d’analyse cible la mutation majoritaire au Maghreb (IVS14 + 1G → A) par PCR-RFLP, puis confirmant la mutation par séquençage de la région flanquant cette mutation chez un cas index de chaque famille. Résultats: Cette stratégie nous a permis de détecter la mutation (IVS14 + 1G → A) à l’état homozygote chez les 20 patients et à l’état hétérozygote chez leurs parents disponibles. Conclusion: L’absence d’hétérogénéité allélique du syndrome d’Allgrove dans les pays du Maghreb permet un diagnostic moléculaire ciblé, un dépistage facile des hétérozygotes dans les familles à risque et un conseil génétique éclairé. La variabilité de l’expression clinique du syndrome d’Allgrove chez nos vingt patients, présentant la même mutation, serait-elle liée à un gène modificateur ou à un facteur environnemental ? P 5: UNE NOUVELLE DOUBLE MUTATION ET UNE NOUVELLE VARIATION IDENTIFIÉES DANS LE GÈNE MECP2 CHEZ DES PATIENTES TUNISIENNES ATTEINTES DU SYNDROME DE RETT Nourhene Fendri-Kriaa1, Emna Mkaouar-Rebai1, Dorsaf Moalla1, Neila Belguith1, Nacim Louhichi1, Ramzi Zemni2, Foued Slama2, Chahnez Triki3, Faiza Fakhfakh1 et le groupe tunisien d’étude sur le retard mental 1. Laboratoire de Génétique Moléculaire Humaine; 2. Unité d’immunologie; 3. Service de Neurologie Infantile Introduction: Le syndrome de Rett (SR) est une maladie neurodégénérative chronique d’origine inconnue qui touche presque exclusivement les filles. Il est caractérisé par un retard psychomoteur apparaissant entre l’âge de 6 et 18 mois avec plusieurs critères de diagnostic dont la stéréotypie des mains est le signe le plus caractéristique. C’est une maladie héréditaire liée au chromosome X qui se transmet selon un mode dominant. Elle est causée essentiellement par des mutations dans le gène MECP2 (en X28) codant pour une protéine appelée Methyl-CpG-Binding Protein 2 (MeCP2). L’objectif de ce travail est de chercher les mutations et/ou les polymorphismes au niveau du gène MECP2 chez sept patientes Tunisiennes atteintes du syndrome de Rett classique. Méthodes: Cette recherche a été réalisée par séquençage direct des 4 exons du gène et des séquences introniques flanquantes. La prédiction in silico et la recherche d’éventuel site de polyadénylation ont été effectué en utilisant le programme ESE finder et le programme PolyA_SVM (version 2.2) respectivement. Résultats: Les résultats de séquençage ont montré la présence d’une double mutation chez une patiente dont la première p.R306C change un acide aminé et la deuxième c.1461+98insA génère un nouveau site de polyadénylation hypothétique dans la région 3’UTR du gène MECP2. Une nouvelle variation c.1461+92C>G a été aussi détectée au niveau de la région 3’UTR chez une autre patiente. Cette variation est distante de 34pb d’un site de polyadénylation avec un score de 4.085. La prédiction in silico a montré que cette variation est localisée au niveau d’un enhancer d'épissage qui pourrait affecter l’expression du gène. Deux autres mutations ont été retrouvées chez 5 patients : la même mutation p.T158M a été détectée chez 4 patients et la mutation p.R168X chez une seule patiente. Conclusion: En conclusion, cette étude a permis de mettre en évidence la possibilité de coexistence de deux mutations sur le gène MECP2 chez une même patiente atteinte du syndrome de Rett. P 6: EST-CE DES VARIATIONS DE SÉQUENCES INTRONIQUES VRAISEMBLABLEMENT BÉNIGNES PEUVENT MODULER L’EXPRESSION DES GÈNES ? Olfa Siala (1), Ikhlass Hadj Salem (1), Abdelaziz Tlili (1), Imen Ammar (1), Hanen Belguith (1), Faiza Fakhfakh (1). Laboratoire de Génétique Moléculaire Humaine, Faculté de Médecine de Sfax, Sfax, Tunisie. Introduction: La découverte de séquences régulatrices de l’épissage qu’elles soit activatrices (enhancers) ou inhibitrices (silencers) a révélé que de nombreuses variations génétiques incluant des mutations et/ou des polymorphismes, considérées jusqu’alors comme silencieuses, abolissent ou créent des motifs activateurs d’épissage reconnus par les facteurs d’épissage de type protéines SR (SF2/ASF, SC35, SRp40 et SRp55)., mais aussi des éléments inhibiteurs de l’épissage reconnus par les membres de la famille des hnRNP. Méthodes: Dans notre étude, le séquençage automatique des gènes LAMA2 (65 exons) et SGCG (8 exons) respectivement responsables des formes MDC1A et LGMD2C de dystrophies musculaires a été effectué. Des études bioinformatiques ont été ensuite réalisées utilisant le programme ESEfinder pour la caractérisation des enhancers, ainsi que le programme MFOLD pour étudier l’effet des nouvelles variations nucléotidiques sur la structure secondaire de l’ARNm. Résultats: De nouveaux polymorphismes ont été retrouvés dans le gène LAMA2 et SGCG, et qui n’existent pas dans la dernière version des banques de données publiées. Il s’agit des polymorphismes c.3174+22_23insAT et c.6085+12delA respectivement au niveau des introns 22 et 42 du gène LAMA2 ; ainsi que du polymorphisme c.*102A/C dans la région 3’UTR du gène SGCG. Le dépistage de ces variations chez 210 individus issus de 5 populations méditerranéennes (Tunisienne, Marocaine, Algérienne, Libanaise et Française) a montré qu’elles sont présentes à l’état homozygote chez tous les sujets testés. Le programme ESEfinder a montré que la variation c.*102A/C crée un enhancer qui se lie à la protéine SR « SF2/ASF » avec un score de 3.9 largement supérieur à la valeur du seuil significatif (1.9). Pour le gène LAMA2, l’ESEfinder a montré que la variation c.3174+22_23insAT n’a pas d’effet sur la composition en enhancers; alors que le polymorphisme c.6085+12delA se trouve dans la région de liaison entre le consensus d’épissage en 5’ et la protéine U1snRNA du spliceosome. Le programme MFOLD a montré que c.*102A/C est accompagné de plusieurs variations structurale touchant la position, le nombre et l’orientation des boucles externes. Cependant, le polymorphisme c.3174+22_23insAT n’a pas d’effet sur la structure secondaire de l’ARN; alors que c.6085+12delA a un effet remarquable sur la totalité de la structure de l’ARNm. Conclusion: En conclusion, ces résultats suggèrent une corrélation étroite entre la structure secondaire de l’ARNm et le recrutement des constituants du spliceosome, entre autre les protéines SR, siège de l’épissage. En plus, la contribution des variations de séquences sur la diversité structurale et fonctionnelle du métabolisme de l’ARNm pourrait fournir un aperçu sur les mécanismes fondamentaux de l’expression des gènes. P 7: IDENTIFICATION DE DEUX MUTATIONS RESPONSABLES DU DÉFICIT CONGÉNITAL EN FACTEUR XIII DE COAGULATION CHEZ 8 FAMILLES TUNISIENNES: CONFIRMATION MOLÉCULAIRE D’UN EFFET FONDATEUR Nacim Louhichi1, Moez Medhaffar2, Ikhlass Hajsalem1, Emna Mkaouar-Rebai1, Nourhene Fendri-Kriaa1, Houda Kanoun1, Firas Yaïch1, Tawfik Souissi2, Moez Elloumi2 and Faiza Fakhfakh1 1. Laboratoire de Génétique Moléculaire Humaine, Faculté de médicine de Sfax. 2. Service d’Hématologie, C.H.U. Hédi Chaker de Sfax. Introduction: Le déficit congénital en facteur XIII est une coagulopathie rare à transmission autosomique récessive, révélée le plus fréquemment par une hémorragie à la chute du cordon ombilical. Cette affection est caractérisée par une très grande hétérogénéité génétique. Notre étude a porté sur des patients atteints de déficit congénital en facteur XIII, appartenant à des familles du Sud Tunisien. Nous nous sommes intéressés au cours de ce travail à l’identification des mutations touchant le gène F13A responsable de ce déficit, à l’étude des polymorphismes de ce gène et à la recherche d’une association possible polymorphisme/maladie pour un meilleur conseil génétique. Méthodes: Après extraction de l’ADN génomique à partir du sang périphérique total, les 14 exons codants ainsi que leurs séquences introniques flanquant du gène F13A ont été amplifiés par PCR puis séquencés. Résultats: L’alignement des séquences obtenues avec les séquences de références du gène F13A par la bioinformatique a permis l’identification de deux mutations : une insertion d’un C dans l’exon 7 à la position c.869 de l’ARN messager et une transition G>A au niveau de l’exon 10 en position c.1226. La première mutation est responsable de la modification des 8 acides aminés succédant la position de l’insertion et de l’apparition d’un stop prématuré générant une protéine tronquée alors que la deuxième est une mutation faux sens générant la substitution d’un seul acide aminé Arginine en position 408 par la Glutamine. Ces deux mutations touchent le domaine catalytique de la sous unité A du facteur XIII. L’étude génétique de deux marqueurs de type STR localisés au niveau du gène F13A confirment la présence d’un même allèle ancestral pour les deux marqueurs qui ségrége avec la mutation « c.869insC » la plus fréquente chez nos patients. En effet, l’étude génétique du marqueur HUMF13A01 a montré une association de 4 répétitions (AAAG) avec la mutation « c.869insC ». Ce nombre de répétition est différent pour la mutation « c.1226G>A. L’analyse des séquences d’un nouveau marqueur généré HUMF13A02 confirme la présence d’un même allèle ancestral qui ségrége avec la mutation « c.869insC ». Conclusion: L’identification des mutations est d’un grand intérêt pour les patients ainsi que leurs familles puisqu’un diagnostic anténatal et un conseil génétique seront mis à leur disposition. P 8: DESCRIPTION D’UNE NOUVELLE MUTATION DE NOVO DANS LE GÈNE DE L’ATPASE 8 CHEZ UN PATIENT TUNISIAN ATTEINT D’UNE CYTOPATHIE MITOCHONDRIALE Emna Mkaouar-Rebai, Fatma Kammoun, Imen Chamkha, Nadège Kammoun, Ines Hsairi, Chahnez Triki, and Faiza Fakhfakh, Laboratoire de Génétique Moléculaire Humaine, Faculté de Médecine de Sfax, Tunisia Introduction: Les maladies mitochondriales regroupent une variété de pathologies dont le dénominateur commun est un déficit de la chaîne respiratoire mitochondriale résultant d’anomalies touchant l’ADN mitochondrial ou l’ADN nucléaire codant des protéines mitochondriales. Les cytopathies mitochondriales sont responsables d’un large spectre de maladies humaines et les patients peuvent montrer des tableaux cliniques très variables. Méthodes: Nous avons séquencé la totalité du génome mitchondrial chez un patient présentant un tableau clinique évocateur d'une cytopathie mitochondriale. En effet, il a montré un retard psychomoteur et staturo-pondéral avec une hyper intensité paraventriculaire de la substance blanche. Il a montré aussi des convulsions, une leucodystrophie et une surdité congénitale associées à une tétraplégie et une cécité centrale. Son IRM cérébrale a montré l’implication du noyau interpédonculaire, une atrophie du cervelet et du tronc et des anomalies de la substance blanche. Résultats: Les résultats ont montré la présence de 19 polymorphismes connues en une nouvelle mutation heteroplasmique (97 %) au niveau du nucleotide 8411 (p.M16V) touchant le gène de l’ATPase 8 mitochondrial. Cette mutation est absente chez la mère du patient et chez 120 témoins de la population Tunisienne. Elle est donc une nouvelle mutation de novo. Conclusion: Plusieurs arguments plaident en faveur de la pathogeneicité de la mutation hétéroplasmique m.8411A>G : sa présence chez un patient et son absence chez 120 témoins, elle touche un acide aminé bien conservé de la protéine de l'ATPase 8 qui est impliquée dans la synthèse de l'ATP. Ainsi, cette mutation serait responsable de l'atteinte mitochondriale chez le patient étudié. P 9: ETUDE DU POLYMORPHISME (CAG)n DE LA POLYMERASE GAMMA (POLG) CHEZ L’HOMME INFERTILE Baklouti S.1, Ghorbel. M1, Chakroun. N2, Sellami. A2, Fakhfakh. F1, Ammar-KeskesL2. 1 : Laboratoire de Génétique Moléculaire Humaine, Faculté de Médecine de Sfax. 2 : Laboratoire d’Histologie, Faculté de Médecine de Sfax Introduction: Environ 10% des cas d’infertilité masculine sont dus à des causes génétiques. Les anomalies les plus fréquentes sont les aberrations chromosomiques et les anomalies géniques, essentiellement les microdélétions du chromosome Y, identifiées principalement chez les hommes azoospermiques et oligospermiques sévères. Récemment, la relation entre les anomalies mitochondriales et l’infertilité masculine a été bien documentée. En effet, il a été rapporté que le polymorphisme CAG du gène nucléaire POLG (15q25) de la polymérase gamma mitochondriale est associé à l’infertilité masculine dans certaines populations. L’objectif de ce travail était de rechercher une association entre le polymorphisme CAG du gène POLG avec l’infertilité masculine dans la population tunisienne. Méthodes: L’étude du polymorphisme CAG du gène POLG a porté sur 216 patients infertiles et 123 hommes fertiles et a été faite par PCR, suivie d’un génotypage après électrophorèse sur gel d’acrylamide à 10% et dans certains cas par séquençage direct. Résultats: L’étude du polymorphisme CAG du gène POLG a montré conformément à certaines données de la littérature, une association entre ce polymorphisme et l’infertilité masculine. Nous avons trouvé que la majorité des patients infertiles (84,26%) et des hommes fertiles (97,6%) avait un nombre de répétition CAG égal à 10 (génotype homozygote 10/10). Cependant, les génotypes homozygote 10/ 10 et hétérozygote 10/ 10, étaient significativement plus fréquents chez les patients infertiles (4,6% et 11,11%, respectivement) que chez les patients fertiles (0,8% et 1,6%, respectivement). Conclusion: L’analyse des données de l’étude moléculaire a montré une association entre le polymorphisme des répétitions CAG de la POLG et l’infertilité masculine dans la population Tunisienne. P 10: ETUDE DES POLYMORPHISMES SNP DES GENES DE L’ADN MITOCHONDRIAL CHEZ L’HOMME INFERTILE DANS LA POPULATION TUNISIENNE Baklouti S.1, Ghorbel. M1, Chakroun. N2, Sellami. A2, Fakhfakh. F1, Ammar-KeskesL2. 1 : Laboratoire de Génétique Moléculaire Humaine, Faculté de Médecine de Sfax. 2 : Laboratoire d’Histologie, Faculté de Médecine de Sfax. Introduction: Ces dernières années et avec le développement des recherches sur les maladies mitochondriales, plusieurs études ont montré l’implication des anomalies mitochondriales dans l’infertilité masculine, particulièrement chez les patients ayant des troubles de la mobilité spermatique. Ces anomalies sont liées à des polymorphismes ou mutations/délétions de gène mitochondriaux, codant pour certaines protéines de la chaîne respiratoire mitochondriales, intervenant dans la phosphorylation oxydative et la production d’ATP, nécessaire à la mobilité spermatique. En Tunisie, aucune étude n'a été réalisée sur la relation entre les anomalies mitochondriales et l’infertilité masculine. Dans le but de contribuer à l’étude de l’implication des variations (polymorphismes/mutations) de l’ADN mitochondrial dans les anomalies du sperme, nous avons entrepris une étude génétique chez des hommes infertiles portant sur quatre gènes mitochondriaux. Méthodes: L’étude a porté sur 21 patients infertiles (11 patients asthénospermiques et 10 normospermiques) qui ont bénéficié d’un spermogramme (selon la méthode standardisé&e de l’OMS) et d’une analyse génétique par PCR de l’ADN lymphocytaire, en utilisant 5 couples d’amorces, amplifiant 4 gènes mitochondriaux COXI, COXII, ATPase6 et Cytb, suivie par un séquençage automatique à l’aide du séquençeur ABI3100. Résultats: Le résultat du séquençage nous a permis de déceler 38 polymorphismes déjà décrits dans d’autres populations et 6 nouveaux polymorphismes, non décrits dans les études antérieures (2 dans COXI, 2 dans ATPase6 et 2 dans Cytb). Deux des nouveaux polymorphismes trouvés dans COXI et ATPase6 induisent un changement d’acide aminé dans les protéines correspondantes et ont concerné 3 patients asthénospermiques. Parmi les polymorphismes déjà décrits, 5 induisent un changement d’acide aminé et ont concerné également des patients asthénospermiques (3 dans ATPase6 et 2 dans Cytb). Les autres polymorphismes trouvés dans notre population d’étude n’induisent pas de changement d’acides aminés et ont été observés aussi bien chez les patients normospermiques qu’asthénospermiques. Conclusion: Nos résultats préliminaires semblent indiquer que certains polymorphismes induisant un changement d’acides aminés sont impliqués dans l’altération de la mobilité spermatique, puisque ils sont absents chez les patients normospermiques. Ils semblent indiquer aussi que les polymorphismes n’induisant pas de changements d’acides aminés (synonymes) sont relativement fréquents aussi bien chez les patients asthénospermiques que normospermiques. Cette étude devrait être poursuivie sur un nombre plus important de patients, afin de mieux caractériser les polymorphismes des gènes mitochondriaux et de déterminer leur degré d’implication dans l’asthénospermie et dans l’infertilité masculine. P 11: ACTIVATION DE LA CASPASE3 AU COURS DE LA CONGELATION DES SPERMATOZOIDES HUMAINS DANS L’AZOTE LIQUIDE. ZRIBI NASSIRA, CHAKROUN FEKI NOZHA, EL EUCH HENDA, GARGOURI JALEL, FAKHFAKH FAIZA, AMMAR KESKKES LEILA Faculté de Médecine de Sfax Introduction: Parmi les techniques utilisées en assistance médicale à la procréation (AMP), la cryoconservation des spermatozoïdes, constitue un outil incontournable en pratique courante de l’AMP. Néanmoins, la congélation provoque des altérations au niveau des membranes et du noyau des spermatozoïdes, liées probablement à un stress oxydant et à une activation des voies de l’apoptose, dont les effecteurs principaux sont les caspases. Récemment, l’activation de ces enzymes a été détectée dans le sperme frais ou après congélation/décongélation. La compréhension des mécanismes responsables des dommages cellulaires induit par la cryoconservation pourrait aider à améliorer les techniques de congélation du sperme. L’objectif de ce travail était de déterminer l’implication éventuelle de la caspase3, dans les dommages induits par cryoconservation du sperme chez l’homme infertile. Méthodes: L’étude a porté sur 8 hommes consultants pour infertilité au laboratoire d’Histologie Embryologie de la Faculté de Médecine de Sfax. Un spermogramme selon le procédé standardisé de l’OMS (mobilité, vitalité, numération des spermatozoïdes, morphologie et numération leucocytaire) a été effectué avant congélation. Les spermes ont été ensuite congelés dans l’azote liquide selon un protocole utilisant un cryoprotecteur commercialisé (SpermFreeze®) durant une période de 7 jours. La mobilité et la vitalité spermatiques ont été analysées après décongélation. L’étude de l’activation de caspase 3, a été effectuée avant et après congélation par la technique de cytométrie de flux utilisant un kit commercialisé (FLICA TM Immunochemistry Technology, LLC). Résultats: Nous avons trouvé que la cryoconservation a provoqué une diminution significative de la mobilité (43.13±4% vs 25.63±5.2%; p< 0.001) et de la vitalité (74.75±3.3 vs 52.63±2; p< 0.001) des spermatozoïdes. Par ailleurs, le pourcentage de spermatozoïdes présentant des caspases actives a significativement augmenté après congélation (26.46±2.2 vs 47.18±5.2%; p= 0.01). Conclusion: Nos résultats sont en accord avec d’autres études qui ont rapporté que le processus de congélation/décongélation induit une activation des caspases suggérant une activation de l’apoptose. Dans la littérature, il a été démontré que la congélation augmente le pourcentage des spermatozoïdes présentant des modifications cellulaires caractéristiques de l’apoptose, telles que l’externalisation de phosphatidylsérine membranaire, la fragmentation de l’ADN nucléaire et la chute du potentiel membranaire mitochondrial. Toutes ces données suggèrent le rôle de l’apoptose dans l’altération des capacités fécondantes du spermatozoïde après congélation/décongélation. P 12 : ÉTUDE DES EFFETS DE LA SUPPLEMENTATION IN VITRO DE LA QUERCETINE SUR LA QUALITE DES SPERMATOZOÏDES DANS DES CONDITIONS DE STRESS OXYDANT Fatma BEN ABDALLAH a,b, Nassira ZRIBI a,b, Feiza FAKHFEKH a& Leila AMMARKESKES a,b. a Laboratoire de Génétique Moléculaire Humaine, Faculté de Médecine de Sfax, Tunisie. b Laboratoire d'Histologie Embryologie, Faculté de Médecine de Sfax, Tunisie. Introduction: L’objectif de cette étude était d’étudier les effets du stress oxydant sur les capacités fonctionnelles des spermatozoïdes des rats et de tester les éventuels effets protecteurs de nouvelles molécules antioxydantes. Nous avons ainsi testé in vitro les effets de la Quercétine sur les paramètres fonctionnels, la peroxydation lipidique et les défenses antioxydantes des spermatozoïdes soumis in vitro à une situation de stress oxydant. Méthodes: Notre protocole d’étude a comporté différentes situations expérimentales au cours desquelles nous avons incubé pendant 3 h à 32 οC des spermatozoïdes avec le peroxyde d’hydrogène (H2O2) (100 uM) pour induire un stress oxydant, avec la Quercétine (10,100 et 200 uM) et avec la Quercétine (100 et 200 uM ) et H2O2 (100 uM) . Nous avons ensuite évalué la mobilité, la vitalité, la morphologie, la peroxydation lipidique et les activités des enzymes antioxydantes (SOD, CAT et GPx) spermatiques. Résultats: Nous avons constaté que l'exposition au H2O2 à augmenté significativement le niveau de la peroxydation lipidique et les anomalies morphologiques associés à une diminution significative de la motilité, de la viabilité et des activités enzymatiques antioxydantes. Lorsque la Quercétine a été ajoutée dans le milieu de culture, il y a une amélioration des défenses antioxydantes associée d’une protection contre les endommagements induites par la H2O2 notamment sur les paramètres fonctionnels spermatiques et sur le niveau de la peroxydation lipidique. Conclusion: Cette étude a démontré qu'une supplémentation en Quercétine pourrait protéger contre endommagements des spermatozoïdes par l’H2O2. Mots clés: Quercétine, Toxicologie In vitro, Défenses antioxydantes, Paramètres fonctionnels spermatiques. UNITE D’ANATOMIE HISTO-EMBRYOLOGIE 99/UR/08-60 P 13: LA DISSÉMINATION ASCITIQUE MALIGNE RENFORCE LE POUVOIR ANTIOXYDANT DE 2 LIGNÉES TUMORALES GÉNÉRATRICES DE MÉTASTASES OSSEUSES : WALKER 256/B ET MATLYLU Riadh BADRAOUI, Stéphane Blouin, Tarek REBAI Faculté de Médecine de Sfax Introduction: Les métastases osseuses sont une complication fréquente de plusieurs tumeurs solides. Le cancer du sein et le cancer de prostate sont les plus ostéophiles et les plus fréquemment associés à des métastases osseuses. Cette étude s'intéresse au statut antioxydant de 2 souches de cellules tumorales, à pouvoir métastatique, avant et après 2 passages ascitiques successifs. Méthodes: Pour chaque souche de cellules cancéreuses (Walker 256/B : adénocarcinome de la glande mammaire et MatLyLu : adénocarcinome prostatique), 107 cellules ont été injectées en intraperitonéal pour induction d'ascites. Après 7 jours, les cellules en suspension des ascites ont été récupéré et utilisées pour une seconde simulation d’ascite et pour des analyses biochimiques. Les taux de lipopéroxydation (TBARS) et des activités enzymatiques antioxydantes [superoxyde dismutase (SOD), glutathione peroxidase (GSH-Px), et catalase (CAT)] ont été évalués. Des comparaisons avec des teneurs obtenues pour des cellules maintenues dans des milieux de culture ont été effectuées. Résultats: Nos résultats montrent que les disséminations ascitiques ont entraîné des diminutions statistiquement significatives de la teneur du TBARS, à l'exception du 1er ascite pour les cellules MatLyLu, accompagnée des augmentations des activités enzymatiques antioxydantes (SOD, GSH-Px, et CAT) du 1er et du 2nd passages ascitiques par apport aux contrôles. Conclusion: En conclusion, ces résultats pourraient suggérer que la dissémination ascitique maligne, au cours des processus métastatiques, renforcerait le pouvoir antioxydant des cellules cancéreuses malignes. P 14: PLACE DU DOSAGE SERIQUE DE L’AMH ET DE L’INHIBINE B DANS L’EVALUATION DE LA FONCTION OVARIENNE CHEZ LA FEMME. Azza Ben Salem1, Mouna Mnif2, Afifa Sellami1, Nozha Chakroun1, Mehdi Kammoun2, Belhassen Ben Ayed3, Mohamed Guermazi3, Mohamed Abid2, Tarek Rebaï1, Leila AmmarKeskes1. 1: Laboratoire d’Histologie-Embryologie, Faculté de Médecine de Sfax. Introduction: Chez la femme, l’hormone antimullériennne (AMH) est synthétisée par les cellules de la granulosa des follicules ovariens en faibles quantités et sa concentration plasmatique décline au cours du temps, parallèlement à la diminution de la réserve ovarienne. L’inhibine B est également produite par les cellules de la granulosa des petits follicules antraux et préantraux sous le contrôle de la FSH. Ces deux marqueurs sont utilisés actuellement pour étudier la fonction gonadique femelle et évaluer la réserve folliculaire chez la femme ayant des troubles de la fertilité. L’objectif de notre travail était d’évaluer l’apport du dosage de l’AMH et de l’inhibine B dans l’exploration des anomalies des fonctions ovariennes et de l’infertilité féminine. Méthodes: Il s’agit d’une étude préliminaire qui a porté sur 23 femmes, réparties en deux groupes : G1, 7,6 ans, ayant des troubles±constitué par 15 patientes d’âge moyen égal à 30,7 de la fonction reproductive (ovaires polykystiques, insuffisance ovarienne, aménorrhée primaire ou secondaire) et suivies au service d’endocrinologie et au service de gynécologie du CHU Hédi Chaker de Sfax; un groupe témoin G2 formé par 8 femmes fertiles. Nous avons dosé l’AMH et l’inhibine B dans le sérum sanguin utilisant une technique immunoenzymatique de type sandwich à l’aide de kits ELISA (Kit DSL-10-14400 ACTIVE® MIS/AMH et Kit DSL-10-84100i ACTIVE® INHIBINE B). L’analyse statistique a été réalisée à l’aide du logiciel SPSS version 18.0 (test de Student et test de Spearman et Pearson). Résultats: Nous avons trouvé une grande variabilité des concentrations de l’AMH et de l’inhibineB dans le sérum chez les deux groupes, avec des valeurs extrêmes allant de (de 0 à 5,8 ng/ml AMH sérique et de 0 à 156pg/ml pour l’inhibine B). Les valeurs moyennes de l’AMH sérique (ng/ml) étaient significativement plus faibles dans le groupe G1 que dans G2 (1,02±1,50 vs 4,8±0,9 respectivement; p=0,04). Cependant, les taux moyens de l’inhibine B (pg/ml) étaient proches dans les deux groupes (78,33 dans G1 vs 63,8 dans G2, p=0,9). Les taux de l’AMH étaient corrélés avec l’âge des femmes (r=-0,6; p=0,007) et faiblement corrélés avec les taux de FSH sérique (r=-0,872, p=0,05); alors que l’inhibine B était fortement corrélée à la FSH sérique (r=-0,978, p=0,02). Chez les patientes présentant une insuffisance ovarienne et/ou une aménorrhée primaire ou secondaire (n=10), l’AMH sérique était faible dans tous les cas; par contre, l’inhibine B était normale chez 60 % de ces patientes (6/10). Conclusion: L’AMH et l’inhibine B sont deux bons marqueurs biologiques de la fonction ovarienne. Cependant, il semble d’après cette étude préliminaire que l’AMH a une meilleure valeur évaluative de la fonction ovarienne et de la réserve folliculaire. Elle pourrait constituer un bon marqueur pour la prédiction des résultats de la stimulation ovarienne et de l’assistance médicale à la procréation chez les femmes prise en charge pour infertilité. P 15: PLACE DU DOSAGE SERIQUE ET SEMINAL DE L’AMH ET DE L’INHIBINE B DANS L’EVALUATION DU STATUT DE LA SPERMATOGENESE CHEZ L’HOMME INFERTILE. Azza Ben Salem1, Afifa Sellami1, Nozha Chakroun1, Belhassen Ben Ayed2, Mohamed Guermazi2, Tarek Rebaï1, Leila Ammar-Keskes1. 1 :Laboratoire d’Histologie-Embryologie, Faculté de Médecine de Sfax. Introduction: L’hormone antimüllérienne (AMH) et l’inhibine B sont deux glycoprotéines faisant partie de la famille de TGFß (Transforming Grouth Factor). Chez l’homme, ces hormones sont produites essentiellement par les cellules de Sertoli testiculaires et constituent des marqueurs spécifiques de la différenciation de ces cellules. La sécrétion de ces hormones est bidirectionnelle avec prédominance au niveau du côté apical de la cellule de Sertoli vers les tubes séminifères par rapport au côté basal vers la circulation sanguine. Ainsi, la concentration de ces marqueurs peut être déterminée dans le liquide séminal et dans le sérum de l’adulte. L’objectif de ce travail était de déterminer l’intérêt du dosage de l’AMH et de l’inhibine B chez l’homme infertile pour l’évaluation du profil de la spermatogenèse et une meilleure orientation de la prise en charge de l’infertilité du couple. Méthodes: L’étude a porté sur 58 hommes infertiles suivis au laboratoire d’Histologie de la Faculté de Médecine de Sfax pour exploration d’une infertilité du couple : 15 patients azoospermiques (G1), 14 patients oligospermiques (G2) et 29 patients normospermiques (G3). Un dosage de l’AMH et l’inhibine B a été effectué dans le sérum sanguin et dans le plasma séminal, utilisant une technique immunoenzymatique de type sandwich à l’aide de kits ELISA (Kit DSL-10-14400 ACTIVE® MIS/AMH). L’analyse statistique a été réalisée à l’aide du logiciel SPSS version 18.0 (test de student et test de Spearman et Pearson). Résultats: L’âge moyen des patients 2,8 ans.±5,36 ans avec une durée moyenne d’infertilité de 3,9±était de 35,77 Nous avons trouvé une grande variabilité des valeurs de l’AMH, aussi bien dans le sérum que dans le plasma séminal dans les trois groupes, avec des valeurs extrêmes allant de (0 à12ng/ml pour l’AMH sérique et de 0,06 à 39,63ng/ml pour l’AMH séminale). Les valeurs moyennes de l’AMH séminale étaient 13,1 et±1,06; 5,4±significativement plus faible dans G1 que dans G2 et G3 (0,87 7,06, Respectivement, p=0,04). Les valeurs moyennes de l’AMH sérique±4,27 étaient plus faibles dans G1 que dans G2 et G3, mais la différence n’est pas significative (p=0,3). Par contre, le nombre de patients ayant une AMH sérique basse, était significativement plus élevé dans G1 que dans G2 et G3 (40% versus 33% et 4,7%, respectivement ; p=0,02). Concernant l’inhibineB, les concentrations sériques et séminales (pg/ml) étaient très variables dans les trois groupes. Le taux moyen de l’inhibine B sérique était significativement 142,4 ;±81,4 et 290,8±105,3; 187,6±plus faible dans G1 que dans G2 et G3 (101,9 Respectivement avec p<0,05). Par ailleurs, l'inhibineB sérique était positivement corrélée à la numération spermatique (r= 0,39; p=0,006) et avec l’inhibineB séminale (r=0,44; p=0,001). Enfin, nous avons trouvé une corrélation significative et positive entre les taux de l’AMH et de l’inhibine B sériques (r=0,375 p=0,009), mais aussi entre les taux de l’AMH et de l’inhibine B séminales (r=0,8; p=0,0001). Conclusion: Nos résultats confirment les données de la littérature concernant la valeur de L’AMH et de l’inhibine B comme marqueurs de la spermatogenèse chez l’homme. Leurs dosage sérique pourrait faire partie intégrante du bilan hormonal chez l’homme infertile présentant une azoospermie ou oligospermie sévère, mais l’apport de ces marqueurs reste aléatoire dans la prédiction du résultat de la biopsie testiculaire chez les patients azoospermiques, vu la grande variabilité des concentrations de ces hormones dans les liquides biologiques (sérique, plasma séminal). P 16: DÉTECTION D’UNE MUTATION COMMUNE (N308D) DU GÈNE PTPN11 CHEZ DEUX TUNISIENS PORTEURS DE SYNDROME DE NOONAN Rim Louati (1-2), Nouha Bouayed Abdelmoula (1-2), Imen Trabelsi (1-3), Leila Abid (1-3), Samir Kammoun (3), Tarek Rebai (1-2) 1-Unité de Recherche Anatomie – Histologie et Embryologie 99 /UR/ 08 60 Faculté de Médecine de Sfax 2-Laboratoire d’Histologie Faculté de Médecine de Sfax 3-Service de Cardiologie CHU Hédi Chaker de Sfax Introduction: Le syndrome de Noonan (NS, MIM # 163950) est une affection de développement qui n’en finit pas de livrer ses secrets biochimiques. Ce syndrome est génétiquement et cliniquement hétérogène. Sa transmission suit un mode autosomique dominant. Il se caractérise par une dysmorphie faciale distinctive associée souvent à une cardiopathie congénitale dont la plus fréquente est la sténose pulmonaire valvulaire dysplasique. Il est lié à des mutations du gène PTPN11 (PTPN11, MIM # 176876), codant pour la protéine tyrosine phosphatase SHP2, a été identifié comme étant responsable d'environ 30-60% des cas de SN. Méthodes: Afin d’explorer le spectre mutationnel du gène PTPN11 chez les patients suspects d’être porteurs d’un NS colligés dans le Service de Cardiologie de Sfax, le séquençage bidirectionnel des exons hot spot : 3, 8, et 13 à été réalisé dans le laboratoire d’Histologie Embryologie de la Faculté de Médecine de Sfax. Résultats: Parmi les mutations identifiées, nous avons découvert chez deux patients (un adulte de 68 ans et un enfant de 4 ans), une mutation prévalente au cours du syndrome de Noonan. Il s’agit de la mutation p.N308D révélée à l’état hétérozygote. C’est une mutation faux sens située au niveau de l’exon 8 du gène PTPN11 qui code pour le domaine PTP. Cette mutation entraîne la substitution d’asparagine 308 par l’acide aspartique (c.922 A>G) ce qui déstabilise la confirmation inactive de la protéine SHP2 avec un gain de fonction protéique engendrant le NS. Conclusion: En se basant sur les études de corrélation phénotype – génotype, il semble que les mutations de l’exon 8 du gène PTPN11 soient associées à la sténose pulmonaire valvulaire dysplasique, comme le manifeste nos deux patients. Cette association pourrait être expliquée par la prévalence de la mutation N308D. D’autres études ont montré que les patients porteurs de la mutation N308D ont un développement psychomoteur moins affecté et peuvent même suivre un enseignement traditionnel. Cette constation ne semble pas être valide pour nos deux patients qui présentent un retard mental modéré ainsi que des difficultés de communications et de langage. Une revue de la littérature avec détermination des caractéristiques du phénotype NS associé à la N308D du gène PTPN11 sera présentée dans ce travail. P 17: A CASE OF A TUNISIAN PATIENT WITH CONGENITAL ICHTHYOSIFORM ERYTHRODERMA AND DE NOVO RECIPROCAL TRANSLOCATION T(6;8) (P25;Q21): IS IT A COINCIDENCE OR A DISRUPTED GENE Nouha Bouayed Abdelmoula, Rim Louati, Mounira Meddeb, Tarek Rebai Laboratoire d’Histologie Faculté de Médecine de Sfax, Tunisia Introduction: Objectives We report the case of a Tunisian 34 year-old man, of normal intelligence, who was referred to us for chromosomal analysis because of severe oligospermia and for whom a de novo reciprocal translocation which disrupts 6p25 and 8q21 chromosomal bands was show. Méthodes: Material The patient was the first child born to a consanguineous healthy father and mother. He was affected at birth by a skin disease diagnosed as an erythrokeratoderma. He was the only case of this skin phenotype in the family which was with no other history, especially of other skin disorder and mental retardation. The patient was never genetically investigated and was treated for his skin disease at France. Severe oligospermia (1,8 Million SPZ/ml) was detected two years after marriage. He and his wife are candidates to an ICSI treatment. Methods Chromosome analysis was carried out from peripheral blood using standard cell culture techniques. GTG and RHG banding were performed.Cytogenetic analysis of blood lymphocytes from the parents was also done by RHG banding. Résultats: Results and commentaries Cytogenetic analysis of 15 cells revealed a de novo reciprocal translocation; t(6;8)(p25;q21). A relation ship between skin phenotype of our patient and translocation breakpoints is strongly suggested. To explain this relation ship, several theories will be proposed. The main is a disruption of critical gene by the translocation, such as SLURP1 gene at 8qter of Meleda disease. P 18: IDIOPATHIC PREMATURE OVARIAN FAILURE IN 79 YOUNG WOMEN: CYTOGENETIC ANALYSIS AND GENETIC COUNSELLING RESULTS Nouha Bouayed Abdelmoula, Mounira Meddeb, Ahlem Amouri, Rim Louati, Tarek Rebai. Laboratoire d’Histologie Faculté de Médecine de Sfax, Tunisie Introduction: Premature ovarian failure (POF) is defined as primary or secondary amenorrhea associated with high follicle-stimulating hormone levels and hypoestrogenism. POF-related genetic abnormalities range from X chromosome abnormalities which are the leading identifiable cause of POF (such as Turner syndrome) to assorted deletions and translocations to mutations in specific genes. Potential molecular mechanisms include nonspecific chromosome effects that impair meiosis as well as both dominant and recessive mutations in X-linked genes such as FMR1. Mutations in autosomal genes (like FSHR, FOXL2, GALT and BMP15) have also been related to POF. ObjectivesHere, we report a retrospective study that was carried out in patients affected by premature ovarian failure with primary (n=35) or secondary amenorrhea (n=44) and referred to our genetic counsel at Laboratory of Histology at University of Medicine of Sfax. Méthodes: Methods After routine gynecologic examination, ultrasonography and endocrine examination, all patients were analysed by using RHG and/or GTG chromosomal diagnoses. Résultats: Results The mean patient age was 22.6 years. The patients presented with three clinical patterns: lack of pubertal development, primary amenorrhea with interrupted puberty and secondary amenorrhea with normal puberty. Among 35 cases of primary amenorrhea, 13 cases had abnormal karyotype with numerical or structural abnormalities of X chromosome and 3 cases of 46,XY females. karyotypes of patients with secondary amenorrhea were abnormal in 5 cases with Xq chromosome deletions associated or not to a 45,X cell line. Conclusion: Conclusions In this study, cytogenetic abnormalities seem to be more frequent in primary POF than secondary POF and mainly involve the X chromosome. Women with different cytogenetic types of Turner's syndrome should be diagnosed at young age and beneficiate of a carefully followed throughout life. Genetic counseling is very hard for these patients but Mutational analysis of candidate genes in these women with idiopathic POF is needed to determine which genes contribute to the cause of this disorder. A possible future prospect is cryopreservation of ovarian tissue containing immature follicles before the onset of early menopause that why affected women would need a careful genetic counselling before conception, followed by prenatal assessment. P 19: SYNDROME DE TURNER EN MOSAÏQUE CHEZ DEUX « FAUSSES JUMELLES » AVEC UN PHENOTYPE DISCORDANT : QUELLES SONT LES MECANISMES ? QUELLES SONT LES LIMITES DU CARYOTYPE LYMPHOCYTAIRE STANDARD ? ABDELMOULA NB. (1), BEN ROMDHANE ALOULOU W. (2), LOUATI R. (1), CHERIF M. (3), REBAI T. (1) (1) Laboratoire d’Histologie, Faculté de Médecine de Sfax TUNISIE (2) Service de Pédiatrie, Hôpital de Gabes TUNISIE (3) Laboratoire de Cytogénétique LP Tunis TUNISIE Introduction: Le syndrome de Turner chez des jumeaux monozygotes homocaryotes est rarement décrit contrairement aux cas de la gémellité monozygote hétérocaryote où la monosomie X est souvent due à une erreur de malségrégation chromosomique post-zygotique Méthodes: Nous rapportons le cas de deux filles issues d’une grossesse gémellaire bi amniotique bi choriale et chez les quelles un caryotype sanguin a été pratiqué devant la suspicion d’un syndrome de Turner chez l’une d’entre elles. L’une des deux jumelles présentait un cou palmé, un lymphœdème des deux membres inférieurs, un PPU et une malformation rénale. Son caryotype sanguin a révélé un mosaïcisme 45,X[12]/46,XX[38]. Sa soeur jumelle qui ne présentait aucun signe Turnérien a été alors explorée par sécurité, étant donné la notion de grossesse gémellaire bien que « fausse gémellité ». Résultats: Le résultat de l’étude cytogénétique lymphocytaire était surprenante avec découverte d’une formule chromosomique en mosaïque 45,X[10]/46,XX[20]. Les résultats de l’étude cytogénétique ont soulevé de nombreuses interrogations quant au mécanisme et moyens de confirmation de l’hypothèse la plus probable. Conclusion: En effet, la grossesse gémellaire considérée comme dizygote, serait très probablement monozygote di-amniotique dichoriale, ce qui représente 30% des grossesses gémellaires monozygotes. Dans ce cas, la division de l'œuf unique fécondé survient rapidement, dans un délai inférieur ou égale à deux jours par rapport à la fécondation ou la grossesse est encore au stade de 2 à 4 blastomères. L’accident chromosomique pourvoyeur de l’état de mosaïcisme chez les deux jumeaux pourrait être soit une malsegrégation postzygotique trop précoce, soit plus probablement une erreur méiotique durant la gamétogenèse. De plus, la discordance phénotypique entre les deux jumelles peut être due à une distribution tissulaire variable des populations cellulaires 45,X et 46,XX avec un effet de dosage génique. Il peut s’agir aussi d’un mosaïcisme limité au sang périphérique secondaire à des anastomoses placentaires durant la vie intra-utérine. Pour vérifier ces différentes hypothèses et préciser le pronostic notamment de fertilité de la jumelle de phénotype normal il serait utile de compléter l’exploration par une étude cytogénétique sur fibroblastes cutanés couplée à une hybridation in situ fluorescente et une analyse moléculaire pour confirmer ou infirmer la monozygotie. P 20: EFFET DE LA VARIATION SAISONNIERE SUR LA QUALITE DU SPERME CHEZ L’HOMME CONSULTANT POUR INFERTILITE DU COUPLE. Daoud Salima1, Chakroun Nozha1, Sellami Afifa1, Ben Ayed Belhassen2, Guermazi Mohamed2, Rebai Tarek1, Ammar-Keskes Leila1. 1-Laboratoire d’Histologie-Embryologie, Faculté de Médecine de Sfax 2-Service de Maternité de Sfax, laboratoire d'histologie embryologie faculté de médecine de Sfax Introduction: La relation entre les facteurs environnementaux et l’hypofertilité est sujet de controverses. Parmi ces facteurs, la variation saisonnière a été incriminée dans certaines perturbations des paramètres spermatiques (Carlsen et al. 2004). Cependant, peu d’études se sont intéressées à ce sujet, essentiellement en Tunisie. L’objectif de notre étude était de rechercher un éventuel effet du changement saisonnier sur la qualité du sperme. Méthodes: Il s’agit d’une étude rétrospective portant sur des patients consultant pour infertilité du couple, durant une période de 5 ans (2005-2009) et ayant bénéficié d’un spermogramme réalisé selon la méthode standardisée de l’OMS; seuls les patients admis en saison hivernale (Décembre à Février) et en saison estivale (Juin à Août) et ayant une numération de spermatozoïdes (spz) ≥ 10 millions/ml ont été inclus dans l’étude (n=735). Nous avons distingué ainsi deux groupes : GE (spermogramme réalisé en été, n=319) et GH (spermogramme réalisé en hiver, n=416). Une étude descriptive et analytique des différentes données clinico-biologiques a été réalisée à l’aide du logiciel SPSS 18. Résultats: L’âge moyen des patients étaient de 36,6±6,7 ans (comparables dans les deux groupes, p=0,3). L’étude des données du spermogramme a montré que la concentration moyenne des spz a été similaire dans les deux groupes (74,6±62 x106/ml dans GH vs 79±90x106/ml dans GE, p=0,4). Cependant, la mobilité totale des spz était significativement supérieure dans GE que dans GH (41,4 ± 12 % vs 39,1 ± 13 %, p=0,01). De même pour la mobilité progressive rapide (14,2 ± 7 % vs 10 ± 8 %, p<0,001). La concentration moyenne des leucocytes était également significativement plus élevée dans GH que dans GE (0,65x106 élément/ml vs 0,37x106 élément/ml, p=0,006). De même, la fréquence de la leucospermie (taux de leucocytes > 1 million/ml de sperme) était significativement plus importante dans GH (15,5 % vs 9,3 %, p=0,01). Concernant l’étude morphologique des spz, le taux moyen des anomalies de la pièce intermédiaire était plus élevé dans GH (23,6±9% vs 20,6±8%, p<0,001). Conclusion: A l’opposé de certaines études occidentales qui ont rapporté une baisse de la concentration en spz en été par augmentation de la température scrotale (Jorgensen N et al, Human Reprod 2000), nos résultats n’ont pas montré un effet de la variation saisonnière sur la numération des spz. Ceci pourrait être en rapport avec une meilleure adaptation à la chaleur (acclimatisation), sous notre climat tempéré pendant la quasi totalité de l’année. Cependant, nos résultats ont montré une diminution de la mobilité, une augmentation des anomalies morphologiques des spz (pièce intermédiaire) et de la leucospermie (inflammation/infection) en hiver. Ces constatations semblent être plutôt en rapport avec un biais de recrutement des patients selon les saisons, avec un meilleur suivi des patients porteurs d’infection génitale ou de varicocèle en hiver qu’en été, et ne reflètent pas vraisemblablement un effet négatif de la saison hivernale sur les paramètres spermatiques. Dans la littérature, il est établi que le refroidissement du sperme in vitro retentit négativement sur la mobilité par diminution de l’activité enzymatique antioxydante des spz (Chatterjee et al, Mol Reprod Dev 2001). En conclusion, la disparité des résultats entre les études souligne la nécessité d’études prospectives tenant compte des variations inter et intra-individuelles et des particularités géographiques, climatiques et ethniques des différentes populations étudiées, afin de mieux établir les effets des variations saisonnières sur les caractéristiques du sperme et sur la fertilité masculine. UNITE D’ETUDE DE LA PHYSIOPATHOLOGIE ET DE LA THERAPEUTIQUE DE L'ENVENIMATION SCORPIONIQUE 99/UR/08-71 P 21: MEDICAMENTS ET SANTE REPRODUCTIVE MASCULINE A Sellami1 , H Ghozzi2 , H Affes2, N Chakroun1, S Hammami 2, S Daoud1, Z Sahnoun2, T Rebai1, L Keskes1, K M Zeghal2. 1-Laboratoire d’Histologie, Faculté de Médecine de Sfax, 2-Laboratoire de Pharmacologie, Faculté de Médecine de Sfax Introduction: En dehors de la chimiothérapie largement impliquée, de nombreux médicaments ont été incriminés dans la perturbation transitoire ou définitive de la fonction reproductrice masculine. L’exposition prolongée à ces médicaments constitue un facteur de risque d’infertilité chez certains patients. L’objectif de ce travail était d’établir une liste des médicaments à effets délétères sur la fertilité masculine et de décrire les différents mécanismes d’altération de la reproduction chez l’homme par ces produits thérapeutiques. Méthodes: Les données de la littérature internationale et les mentions légales du dictionnaire Vidal® concernant la responsabilité de certains médicaments dans les troubles de la santé reproductive masculine ont été colligées. Résultats: Les médicaments les plus couramment rencontrés pouvant affecter le potentiel de fertilité masculine sont essentiellement les agents alkylants et cytostatiques, certains médicaments psychotropes (neuroleptiques, antidépresseurs tricycliques, antiépileptiques), la salazopyrine, certains antihypertenseurs (la spironolactone, les inhibiteurs calciques) et antiinfectieux (nitrofuranes, gentamicine, Niridazole), la colchicine, les hypolipémiants (les statines et les fibrates) et les stéroïdes anabolisants. L’effet néfaste de ces médicaments peut être lié à un effet gonadotoxique direct de la molécule ou de ses métabolites à l’origine d’un blocage de la cinétique cellulaire dans l'épithélium séminifère et d’une altération de la structure de l’ADN des cellules germinales. Un effet indirect de ces produits peut se traduire par l'altération de la fonction gonadotrophique hypothalamo-hypophysaire ou par l’interférence avec les facterurs hormonaux de régulation de la spermatogenèse. De même, certains médicaments peuvent entraîner des modifications structurales et fonctionnelles des spermatozoïdes responsables de la détérioration de certains paramètres spermatiques essentiels pour la fécondance du spermatozoïde (mobilité, vitalité, morphologie). De nombreux médicaments ont été incriminés également dans la survenue de troubles sexuels notamment les dysfonctions érectiles, les troubles de l’éjaculation et la baisse de libido. Conclusion: Dans une évaluation approfondie de la fertilité du partenaire masculin, la prise de médicaments doit faire partie de la démarche diagnostique puisque la réversibilité de l'effet délétère et l'espoir de concevoir après l’arrêt de l’exposition est possible dans certains cas. Ce facteur iatrogène peut s'associer à d'autres causes d’infertilité masculine mais constitue incontestablement un facteur aggravant. Les moyens à mettre en œuvre, pour modifier la prescription thérapeutique font appel à une prise en charge multidisciplinaire. Cependant, dans certains cas, ces médicaments ne peuvent pas être arrêtés ou remplacés, et la cryoconservation de sperme avant le traitement est recommandée. UNITE DE SURDITE ET CANCERS ORL 99/UR/08-05 P 22: MICRODELETION 22Q11 ET MANIFESTATIONS ORL J. Moalla, Am. Chakroun, I. Achoru,A. Chakroun I. Charfeddine, A. Ghorbel Service ORL Introduction: La microdélétion 22q11, une anomalie chromosomique liée à une perte de la partie proximale du bras long du chromosome 22 n’st pas très connue. Sa fréquence est estimée à 1 pour 4000 naissances. Méthodes: Ce travail est une mise au point et un appel à la recherche de cette mutation devant plusieurs types de manifestations ORL et générales. Résultats: L’expression clinique de la microdélétion 22 q 11 est très variable avec souvent présence de pathologies, cardiaque, rénale, thymique et de troubles psychomoteurs. Les tableaux cliniques les plus fréquents sont représentés par le syndrome de Di-George et le syndrome vélo-cardio-facial. L’examen ORL est primordial et s’acharne à rechercher essentiellement une dysmorphie faciale qui représente l’élément le plus constant du tableau clinique. Plusieurs manifestations ORL peuvent être observées au cours de la microdélétion 22q11. En plus de la dysmorphie faciale, l’insuffisance vélopharyngée et les fentes palatines sont aussi fréquentes et décrites dans le syndrome vélo-cardio-facial. Les troubles du langage et de la parole, les otites à répétition sont des signes non spécifiques, mais pouvant être observées en cours de la microdélétion 22 q11. Rarement sont décrites les sténoses sous glottiques et les pathologies de l’arbre respiratoire. La microdélétion 22 q11 n’est pas indentifiable sur un caryotype standard et nécessite pour sa mise en évidence un test de Fish par la technique d’hybridation in situ à l’aide de sondes moléculaires de la région 22q11. La microdélétion 22q11 se transmet selon un mode dominant et dans 10 à 20 % des cas, l’un des parents est porteur de cette microdélétion. L’exploration familiale est alors indispensable et un grand nombre de formes peu symptomatiques sont probablement méconnues. Le conseil génétique est primordial. P 23: SURDITÉ PROFESSIONNELLE A PROPOS DE 200 CAS B. Hammami, M. Mnejja, S. Kallel, L. Bougacha, A. Chakroun, I. Charfeddine, A. Ghorbel Service ORL Introduction: La surdité professionnelle (SP) est considérée comme l’altération irréversible de l’audition consécutive à l’exposition prolongée aux ambiances sonores élevées résultant de l’exercice de la profession. C’est une pathologie invalidante pour l’individu et la société. Nous rapportons une étude portant sur 200 malades atteints de SP en analysant les caractéristiques des malades et du milieu professionnel afin de préciser les SP indemnisables. Méthodes: Notre étude est rétrospective à propos de 200 patients colligés au service ORL et Chirurgie Cervico-Faciale du CHU HB Sfax sur une période de 18 ans (1990- 2007). Il s’agissait de malades adressés pour expertise médicale et chez qui la surdité a été présumée d’origine professionnelle. Tous les malades ont eu une exploration auditive par audiométrie tonale. Les PEA ont été réalisés en cas de surdité asymétrique ou suspicion de simulation. Notre travail a comporté une étude descriptive achevée par le calcul d’IPP, ainsi qu’une étude analytique visant à chercher les facteurs influençant la gravité de la perte auditive. Résultats: L’incidence de la SP était en nette augmentation depuis 1990 réalisant une incidence moyenne de 13 cas par an. L’âge moyen de nos patients était de 46 ans (extrêmes de 15 et 61 ans) avec une nette prédominance masculine (99%). Le secteur de métallurgie était le premier secteur ayant engendré une SP avec un taux de 27,5%. Il était suivi par les secteurs de menuiserie (10%) et celui d’industrie mécanique d’autos (6%). La durée moyenne d’exposition au bruit était de 23 ans (2 et 44 ans). La perte auditive moyenne était de 50 dB et la majorité des patients avait une déficience auditive moyenne ou légère. Il s’agissait d’une surdité de perception bilatérale symétrique dans 96% des cas. Le PEA a été pratiqué chez 11% des patients et il a confirmé le diagnostic de surdité de perception dans tous les cas. La SP était indemnisable dans 147 cas (73,5%). Le taux moyen d’IPP était de 30,43% (extrêmes de 18 et 70%). L’étude analytique a montré que l’âge et l’ancienneté sont des facteurs aggravant la perte auditive moyenne (PAM). Aucune relation entre le secteur d’activité et la PAM n’a été identifiée statistiquement. Conclusion: La surdité professionnelle est une pathologie fréquente à l’échelle nationale et internationale. Ces dernières années, elle occupe dans notre pays la première place avec un taux de 30% des maladies professionnelles. Le pourcentage des malades indemnisables est proportionnel à la durée d’exposition et au niveau sonore. Le calcul du taux d’IPP par la formule pondérée aux fréquences, adoptée encore par la législation tunisienne, est actuellement de plus en plus discuté. En effet, cette formule manque de précision vu l’intrication avec la presbyacousie. En France et depuis 2003, le calcul de PAM repose sur la concordance d’examens audiométriques tonaux et vocaux et le calcul de l’indicateur devient par la formule : (d500 + d1000 + d2000 + d4000)/4. Cette suppression des coefficients revient à multiplier par 2.5 le poids du déficit à 4 KHz qui est très sensible aux effets de vieillissement. En Tunisie, la commission Médicale doit motiver sa décision positivement dans la prise en compte d’une presbyacousie dans la détermination du taux d’IPP. Le calcul d’IPA (indice précoce d’alerte) est basé sur les pertes de l’audition pour les premières fréquences touchées en cas d’exposition au bruit, permettant ainsi de détecter un risque avant d’arriver à des pertes importantes. Ceci est utile pour mettre en œuvre une prévention. P 24: LES SURDITÉS GÉNÉTIQUES DE L’ENFANT EN TUNISIE BILAN DE 17 ANS DE RECHERCHE Ilhem Charfeddine, Malek Mnejja, Sabeur Masmoudi*, Hmani Mounira*, Jihène Moalla, Boutheina Hammami, Adel Chakroun, Mohamed Drira, Hammadi Ayadi *, Faiza Fakhfakh*, Abdelmonem Ghorbel - Service ORL Introduction: Les surdités génétiques de l’enfant ont vu des avancées remarquables dans le domaine de la recherche. Le but est de rapporter les résultats de la recherche en Tunisie de point de vue clinique et génétique. Méthodes: Depuis 1991 jusqu’à ce jour, plus de deux cents familles tunisiennes, ayant au moins deux enfants malentendants, ont été étudiées. Ces familles appartiennent à 13 gouvernorats. L’approche généalogique et clinique a été faite essentiellement par déplacement sur terrain de l’équipe d’ORL de Sfax. L’analyse moléculaire des ADN a été faite par l’équipe de génétique moléculaire humaine de Sfax. Résultats:1. Cliniques : Six cent sujets atteints ainsi que leurs apparentés ont été examinés. La répartition entre les deux sexes était équitable. Il s’agissait d’une surdité familiale dans tous les cas. Le nombre d’atteints par famille variait de 2 à 24. La surdité était isolée dans 90% et syndromique dans 10% des cas. Les surdités isolées étaient autosomiques récessives (DFNB) dans 100% des cas. Dans les cas de surdité isolée, l’atteinte a été prélinguale dans tous les cas. Elle était légère dans 10,3%, moyenne dans 13,8% et sévère à profonde dans 76%. Elle était bilatérale et symétrique dans tous les cas. Concernant les surdités syndromiques, les études ont décelé 5 familles du Sud Tunisien porteuses d’un syndrome de Pendred et 11 familles ( soit 5 %) atteintes d’un syndrome d’Usher (8 familles d’Usher 1 et 3 familles d’Usher 2). Dans le syndrome d’Usher, la surdité était bilatérale et profonde dans tous les cas d’Usher 1 et modérée à sévère dans tous les cas d’Usher 2. L’épreuve calorique a montré une aréflexie vestibulaire chez les malades Usher 1 et une réflectivité normale chez les malades Usher 2. Une rétinite pigmentaire a été retrouvée chez tous les malades. Dans le syndrome de Pendred, la surdité était neurosensorielle pure dans 87,5% et mixte à prédominance neurosensorielle dans 12,5%. Elle était bilatérale sévère à profonde dans tous les cas et symétrique dans 85%. La surdité était prélinguale ou postlinguale précoce dans tous les cas sans notion de fluctuation évidente. Le goitre thyroïdien a été retrouvé dans 46,5%. Une dilatation bilatérale de l’aqueduc du vestibule a été retrouvée dans tous les où un scanner des rochers a été réalisé. Le test au perchlorate, réalisé dans 8 cas, était négatif dans tous les cas. 2. Génétique : Pou r les surdités isolées, les deux premiers gènes rapportés dans le monde, ont été décrits à partir de familles tunisiennes en 1994 (DFNB1, DFNB2). Depuis les études ont abouti à l’identification de 10 loci (DFNB3, DFNB4, DFNB7/11, DFNB8/10, DFNB13, DFNB31, DFNB32, DFNB63, DFNB66 et DFNB67) et 7 gènes. Il s’agissait de nouvelles localisations, décrites pour la première fois dans le monde, dans 3 cas (DFNB32, DFNB63, DFNB66). Par ailleurs, les mutations identifiées dans notre population sont : 35delG, E47X, 291insA, M5991, L445W, M147T, W251C, P404L, 2423delG PR34X, PR 389X et PW588X, p.W588X. La mutation 35delG était largement prédominante ( 80%). Pour le syndrome de Pendred, les travaux génétiques ont pu identifier une mutation du gène PDS propre de notre population : L445W. Un effet fondateur de ces mutations a été démontré pour les surdités isolées et le syndrome de Pendred. Pour le syndrome d’Usher, nous avons découvert 5 gènes /11 responsables de ce syndrome : USH1B, USH1C, USH1D, USH1G et USH2. Conclusion: Les travaux dans ce domaine doivent s’élargir et inclure les autres gouvernorats tunisiens dans l’espoir d’élaborer une biopuce comportant les différentes mutations responsables de surdités héréditaires en Tunisie et d’élargir le conseil génétique à toutes les familles tunisiennes. L’étude de ces surdités génétiques permet d’expliquer la cause de surdité aux parents qui nous consultent avec un enfant sourd et surtout de leur présenter un conseil génétique seul moyen de prévenir l’apparition de nouveaux cas d’handicapés. P 25 : SURDITÉ PROFESSIONNELLE A PROPOS DE 200 CAS B. Hammami, M. Mnejja, S. Kallel, L. Bougacha, A. Chakroun, I. Charfeddine, A. Ghorbel Service ORL Introduction: La surdité professionnelle (SP) est considérée comme l’altération irréversible de l’audition consécutive à l’exposition prolongée aux ambiances sonores élevées résultant de l’exercice de la profession. C’est une pathologie invalidante pour l’individu et la société. Nous rapportons une étude portant sur 200 malades atteints de SP en analysant les caractéristiques des malades et du milieu professionnel afin de préciser les SP indemnisables. Méthodes: Notre étude est rétrospective à propos de 200 patients colligés au service ORL et Chirurgie Cervico-Faciale du CHU HB Sfax sur une période de 18 ans (1990- 2007). Il s’agissait de malades adressés pour expertise médicale et chez qui la surdité a été présumée d’origine professionnelle. Tous les malades ont eu une exploration auditive par audiométrie tonale. Les PEA ont été réalisés en cas de surdité asymétrique ou suspicion de simulation. Notre travail a comporté une étude descriptive achevée par le calcul d’IPP, ainsi qu’une étude analytique visant à chercher les facteurs influençant la gravité de la perte auditive. Résultats: L’incidence de la SP était en nette augmentation depuis 1990 réalisant une incidence moyenne de 13 cas par an. L’âge moyen de nos patients était de 46 ans (extrêmes de 15 et 61 ans) avec une nette prédominance masculine (99%). Le secteur de métallurgie était le premier secteur ayant engendré une SP avec un taux de 27,5%. Il était suivi par les secteurs de menuiserie (10%) et celui d’industrie mécanique d’autos (6%). La durée moyenne d’exposition au bruit était de 23 ans (2 et 44 ans). La perte auditive moyenne était de 50 dB et la majorité des patients avait une déficience auditive moyenne ou légère. Il s’agissait d’une surdité de perception bilatérale symétrique dans 96% des cas. Le PEA a été pratiqué chez 11% des patients et il a confirmé le diagnostic de surdité de perception dans tous les cas. La SP était indemnisable dans 147 cas (73,5%). Le taux moyen d’IPP était de 30,43% (extrêmes de 18 et 70%). L’étude analytique a montré que l’âge et l’ancienneté sont des facteurs aggravant la perte auditive moyenne (PAM). Aucune relation entre le secteur d’activité et la PAM n’a été identifiée statistiquement. Conclusion: La surdité professionnelle est une pathologie fréquente à l’échelle nationale et internationale. Ces dernières années, elle occupe dans notre pays la première place avec un taux de 30% des maladies professionnelles. Le pourcentage des malades indemnisables est proportionnel à la durée d’exposition et au niveau sonore. Le calcul du taux d’IPP par la formule pondérée aux fréquences, adoptée encore par la législation tunisienne, est actuellement de plus en plus discuté. En effet, cette formule manque de précision vu l’intrication avec la presbyacousie. En France et depuis 2003, le calcul de PAM repose sur la concordance d’examens audiométriques tonaux et vocaux et le calcul de l’indicateur devient par la formule : (d500 + d1000 + d2000 + d4000)/4. Cette suppression des coefficients revient à multiplier par 2.5 le poids du déficit à 4 KHz qui est très sensible aux effets de vieillissement. En Tunisie, la commission Médicale doit motiver sa décision positivement dans la prise en compte d’une presbyacousie dans la détermination du taux d’IPP. Le calcul d’IPA (indice précoce d’alerte) est basé sur les pertes de l’audition pour les premières fréquences touchées en cas d’exposition au bruit, permettant ainsi de détecter un risque avant d’arriver à des pertes importantes. Ceci est utile pour mettre en œuvre une prévention. UNITE DE TOXICOLOGIE PROFESSIONNELLE ET ENVIRONNEMENT (05/UR/07-03) P 26: FACTEURS DE RISQUE ENVIRONNEMENTAUX PROFESSIONNELS DES ASTHMES ALLERGIQUES DÉCLARÉS À LA CNAM (2004-2008) A. Derbel1, D. Rebai.1 M.Loukil2, A.Abdelhedi1, O. Gargouri1, M.Bouzid2, A.Masmoudi2 , Gharbi N. 2,Marouen Jamoussi S.2 UR Toxicologie Professionnelle et de L'Environnement Faculté de médecine Sfax Introduction: Les auteurs rapportent 35 cas d’asthme allergique (AA) déclarés à la CNAM durant les 5 dernières années de Janvier 2004 au mois Décembre 2008. Méthodes: Il s’agit d’une étude rétrospective ayant intéresse tous les cas d’asthmes déclarés auprès de la CNAM de 2004 à 2008 au titre de la maladie professionnelles. Résultats: Sur un total de 408 maladies professionnelles déclarées durant cette période, 35 cas présentent un asthme allergique, soit un taux de 9%. L’asthme est associé à une rhinite dans 6cas et à une atteinte cutanée dans 2 cas. Le secteur alimentaire est le plus incriminé, soit dans presque un quart des cas (23%), suivi de celui de la confection et de la filature (14%). Le secteur de la chimie et celui de la construction métallique (11%) viennent en troisième position. L’origine professionnelle de l’asthme est reconnue dans 21 cas (60%). Sur les 14 cas de rejet par la commission de reconnaissance des maladies professionnelles, le motif était d’ordre administratif dans 2 cas seulement. L’enquête sur les lieux de travail n’était pas favorable à une origine professionnelle dans 11 cas. Les allergies posent des problèmes d’inaptitude difficiles à résoudre, et même des problèmes de mise en invalidité tout aussi difficiles à obtenir, notamment pour le personnel qualifié. Conclusion: La prévention quoique le seul moyen thérapeutique efficace mais semble être également difficile, d’une part en raison de la multiplicité et de la diversité des agents responsables et d’autre part du fait de facteurs individuels imprévisibles. UNITE D’HEMATOLOGIE : MALADIES DES CELLULES SANGUINES, MALADIES DE L’HEMOSTASE, DANS LE SUD TUNISIEN (01/UR/08-16) P 27: TUNISIAN FANCONI ANEMIA STUDY GROUP TFASG: CREATION OF A WEB SITE AND THE TUNISIAN FANCONI ANEMIA REGISTRY TFAR S.HDIJI MSEDDI1, L.KAMMOUN1, H.BELLAAJ2, L.AISSAOUI3, L.TORJEMANE4, Y.BEN YOUSSEF5, H.LEGHEZAL5, A.AMOURI6, S ABDELHAK6, M.HACHICHA1, M.FRIKHA7and TFASG8 1:HEDI CHAKER HOSPITAL, SFAX Tunisia; 2:Intelligent Control, design & Optimization of complex Systems ENIS, SFAX Tunisia; 3:AZIZA OTHMANA HOSPITAL, TUNIS Tunisia; 4:Centre National de Greffe de Moelle Osseuse, TUNIS Tunisia; 5:FARHAT HACHED HOSPITAL, SOUSSE Tunisia; 6:PASTEUR INSTITUTE, TUNIS Tunisia; 7:HABIB BOURGUIBA HOSPITAL, SFAX Tunisia, 8:Tunisian Fanconi Anemia Study Group CHU Hédi Chaker Introduction: Fanconi Anemia FA is a rare inherited disease characterized by congenital abnormalities, progressive bone marrow failure and a predisposition to malignancy. It is clinically and genetically heterogeneous. For these reasons, in addition to the international Fanconi Anemia Registry (IFAR), several groups have been created and they constitute sources of information relative to their countries, such as the German Registry of Fanconi Anemia, The Registry of Fanconi Anemia of India, The Registre Italiano Anemia Di Fanconi... in Tunisia, a group for the study of FA, the Tunisian Fanconi Anemia Study group TFASG, was created in 1998. Actually, among its objectives is the creation of a web site of the group, and the setting up of the Tunisian Fanconi Anemia registry TFAR by the retrospective and prospective registration of the FA patients. Méthodes: web site is established at the address www.fanconi-tunisie.net, and will be published on the net since July 2009. For the registry, several sources of information are used to note down the patients: all the departments of haematology and of pediatrics, and the cytogenetics laboratories in Tunisia. The diagnosis of the disease is based on the cytogenetic study: chromosomal breaks induced by MMC superior than 30% and/or DEB superior than 10% of the cells, ± progressive aplastic anemia ± malformative syndrome. Résultats: The first function of the site is to present the TFASG, its history, its objectives, to standardize the cytogenetic diagnosis of FA in Tunisia, to give pages of information in Arabic and in French for the patients and their families and the physicians...The second function of the site is to give a presentation of the Tunisian Fanconi Anemia Registry TFAR by an electronic index file which gives data relative to the patients. This file contains the identification of the patient; the familial history; the malformative syndrome; the hematologic, cytogenetic and molecular biology data; the treatment and the evolution. About 150 patients are now being registered. Information in the files and concerning patients are accessible only to the group members by the means of a login and a pass word. Patient inclusion and data modification are made possible only by the group coordinator. Conclusion: Throughout this web site, the group introduces itself to the world. It allows standardization of treatment and care of the disease in Tunisia. This register has already allowed collecting information on FA in Tunisia, and it appears that the disease is relatively frequent. Insufficiencies in diagnosis and management have been noted. P 28: HÉMOPATHIES MALIGNES PROFESSIONNELLES : À PROPOS DE 12 CAS M.Ghorbel1, S.Jamoussi2, S.Mseddi1, M.Elloumi1, T.Souissi1, M.L.Masmoudi21 Service Hématologie, Sfax-Tunisie2 : Service pathologies professionnelles, Sfax-Tunisie CHU Hédi Chaker Introduction: Dés que le diagnostic d’hémopathie maligne est porté, il est licite de chercher une étiologie potentiellement professionnelle. Actuellement ; seuls le benzène et les radiations ionisantes sont reconnus comme facteurs causals certains des leucémies. L’objectif de cette étude est d’analyser les liens de causalité retenus entre l’exposition aux toxiques et les hémopathies observées. Méthodes: Notre étude est rétrospective. Elle a concerné douze cas d’hémopathies malignes diagnostiqués et suivis au service d’hématologie de Sfax déclarées comme maladie professionnelle. Dés que le diagnostic est posé, un interrogatoire professionnel approfondi est mené par le service de pathologies professionnelles du CHU Hédi Chaker et une étude de poste est réalisé par les ingénieurs de sécurité de la CNAM afin d’identifier et de caractériser un éventuelle exposition à un agent cancérigène avec recueil de tous les métiers exercés par le patient ainsi que les entreprises, les postes de travail occupés et les produits manipulés. Résultats: Douze cas d’hémopathies malignes ont été colligés. Il s’agit de 9 hommes et 3 femmes d’âge compris entre 27 et 63 ans. Nous avons retenus les diagnostics de LAM chez cinq patients, deux cas de syndrome myélodysplasique, deux cas de lymphome non hodgkinien, un cas de LAL et un cas de LLC. Devant l’exposition chronique à des agents cancérigènes notamment le benzène (durée variant de 3 à 31 ans ), l’absence des moyens efficaces de prévention, la majorité des patients ont bénéficié d’une déclaration au titre de maladie professionnelle et retenus comme telle. De ce fait, une collaboration entre hématologiste et médecin de travail à la recherche d’antécédents professionnels d’éxpositions toxiques chez tous les malades atteints d’hémopathies malignes s’avère nécessaire dans l’espoir d’assurer la prise en charge médico légale des affections où l’exercice professionnel a été reconnu responsable.