Microscopie Orange G Certistain CI16230

1.15925.0025
1.15925.1000
Microscopie
Orange G Certistain® C.I.16230
7.
Laver à l’eau courante pendant 3 à 5 min
8.
Laver à l’alcool 50 %
9.
Laver à l’alcool 70 %
10. Laver à l’alcool 80 %
11. Laver à l’alcool 96 %
12. Colorer dans la solution d’orange G pendant 3 min
13. Laver à l’alcool 96 %
14. Laver à l’alcool 96 %
15. Colorer dans une solution polychrome EA 31 ou EA 50 pendant 3
min
Application
Colorant pour la coloration de Papanicolaou en cytologie.
La coloration de Papanicolaou est la méthode de coloration la plus utilisée
pour le matériel cytologique. Dans une première phase, les noyaux sont
colorés avec une solution d’hématoxyline. Les noyaux apparaissent bleus,
violet foncé à noirs.
La seconde phase consiste en une coloration cytoplasmique avec une solution
de coloration orange, qui rend particulièrement bien les cellules mûres et
kératinisées. Les structures cibles se colorent en orange d’intensités
différentes. Pour la troisième phase de la coloration, on utilise la solution
appelée polychrome, qui est un mélange d’éosine, de vert lumière SF et de
brun Bismarck. La différenciation de l’épithélium pavimenteux est représentée
avec la solution polychrome.
Matériel
Echantillons gynécologiques et non-gynécologiques comme crachats, urine,
ponctions-biopsies à l’aiguille fine, liquides d’épanchement, liquides de lavage.
Fixation
Fixation humide immédiate avec le fixatif en aérosol Merckofix® ou fixation
humide immédiate dans l’éthanol 96 % pendant au moins 30 min.
Réactifs
Merck art. n° 115925 Orange G Certistain®
Colour Index No.
C.I. 16230
Colour Index Name:
Acid Orange 10
25 g
Art. n° 100583 Acide phosphotungstique hydraté p. a.
Art. n° 100971 Ethanol 96 % très pur
100 g
1l
Nécessaire en complément
Art. n° 109253
Solution de Papanicolaou 1a,
solution d’hématoxyline de Harris
Art. n° 109254
Solution de Papanicolaou 1b,
solution d’hématoxyline S
Art. n° 109271
Solution de Papanicolaou 3a,
solution polychrome EA 31
Art. n° 109272
Solution de Papanicolaou 3b,
solution polychrome EA 50
Art. n° 109270
Solution de Papanicolaou 3c,
solution polychrome EA 65
Art. n° 109269
Solution de Papanicolaou 3d,
solution polychrome EA 65
500 ml, 1 l, 2,5 l
500 ml, 2,5 l
500 ml, 2,5 l
500 ml, 1 l, 2,5 l
100 ml
100 ml, 2,5 l
Préparation
Solution de coloration orange G
Dissoudre 0,5 g d’orange G Certistain® dans 100 ml d’éthanol, ajouter 0,015 g
d’acide phosphotungstique hydraté et mélanger jusqu’à dissolution complète.
Filtrer avant l’emploi.
16. Déshydrater à l’alcool 96 %
17. Déshydrater à l’alcool 96 %
18. Déshydrater à l’alcool absolu pendant 5 min
19. Déshydrater dans les mêmes proportions à l’alcool absolu et au NeoClear® ou au xylène
20.
Clarifier dans le Neo-Clear® ou le xylène
21.
Clarifier dans le Neo-Clear® ou le xylène pendant 2 min
Monter avec Neo-Mount® (pour le Neo-Clear®) ou néo-Entellan® (pour le
xylène)
Résultat
Coloration avec
Cytoplasmes
cyanophiles
(basophiles)
éosinophiles
(acidophiles)
kératinisés
3a/EA 31
3b/EA 50
3c/EA 65
3d/EA 65
vert intensif
vert bleu
rouge clair
roses
roses
rouges
vert bleu
tendre
roses
orangé rose
orangé rose
rouge brun
orangé rose
Erythrocytes
rouges
rouges
rouge brun
rouges
Noyaux cellulaires
Micro-organismes
Trichomonades
bleus, noirs, violet foncé
bleu gris
vert gris
Remarque
Le microscope utilisé doit respecter les exigences d’un laboratoire de
diagnostics médicaux.
Suivre le mode d’emploi pour le fixateur.
Les solutions de coloration utilisées pour la coloration de Papanicolaou sont
prêtes à l’emploi, une dilution n’est pas nécessaire, elle diminue le résultat de la
coloration et leur stabilité.
En cas d’utilisation d’un appareil de coloration, respecter le manuel de
l’utilisateur du fabricant de l’appareil et du logiciel.
Eliminer l’excédent d’huile pour immersions avant l’archivage.
Préparation des échantillons
Tous les échantillons doivent être traités conformément aux règles de l’art.
Tous les échantillons doivent être clairement identifiés.
Utiliser des instruments appropriés pour le prélèvement d’échantillons et la
préparation, respecter les instructions du fabricant pour l’emploi/l’utilisation.
Mode opératoire
Coloration manuelle:
Diagnostic
1.
Laver à l’alcool 96 %*.
2.
Laver à l’alcool 80 %*.
3.
Laver à l’alcool 70%*.
Les diagnostiques ne doivent être effectués que par des personnes autorisées
et entraînées. Chaque étape doit être effectuée sous contrôle, afin d’exclure
toute possibilité de résultat erroné.
Les nomenclatures en vigueur doivent être utilisées.
Des tests plus poussés seront choisis et réalisés selon des méthodes
reconnues.
4.
Laver à l’alcool 50 %*.
*Avec Merckofix® les phases 1 à 4 sont supprimées
Stockage
5.
Laver à l’eau distillée
Stocker le colorant entre + 5 °C et + 30 °C.
Utiliser le colorant jusqu’à la date de péremption indiquée.
6.
Colorer dans la solution d’hématoxyline de Harris pendant 3 min ou
dans la solution d’hématoxyline S 2 à 3 min
Stabilité
Après la première ouverture du flacon, conserver entre +5°C et +30°C et utiliser
jusqu’à la date de péremption.
Tenir les flacons toujours bien fermés.
Remarques sur l’utilisation
Pour éviter les erreurs, la coloration doit être effectuée par un personnel qualifié.
Réservé à une utilisation professionnelle.
Respecter les directives nationales relatives à la sécurité au travail et à
l’assurance de la qualité.
Utiliser des microscopes équipés conformément au standard.
Protection contre les infections
Veiller impérativement à une protection efficace conformément aux directives
des laboratoires.
Consignes d‘élimination
Eliminer l’emballage conformément à la réglementation en vigueur.
Les solutions usagées et les solutions dont la date de péremption est dépassée
doivent être traitées comme des déchets dangereux, en respectant les directives
locales relatives à l’élimination des déchets. Pour commander les instructions
sur l’élimination des déchets, cliquer sur le Quick Link « Hints for Disposal of
Microscopy Products » sur www.microscopy-products.com. Au sein de l’UE
s’applique le règlement CE) n° 1272/2008 relatif à la classification, à l’étiquetage
et à l’emballage des substances et des mélanges, modifiant et abrogeant les
directives 67/548/CEE et 1999/45/CE et modifiant le règlement (CE) N°
1907/2006.
Réactifs auxiliaires
Art. n° 103981
Art. n° 100974
Art. n° 104699
Art. n° 115577
Art. n° 106965
Art. n° 107961
Art. n° 109016
Art. n° 109843
Art. n° 100974
Art .n° 100983
Art. n° 108681
Merckofix®
100 ml
Ethanol 96 % dénaturé
1 l, 2,5 l
pour analyse EMSURE®
Huile pour immersions
100 ml, 500 ml
Huile pour immersions
100 ml
selon ISO 8036 modifiée
Essence de cèdre
100 ml, 500 ml
néo-Entellan®
100 ml, 500 ml
®
Neo-Mount
500 ml
®
Neo-Clear
5l
(remplaçant du xylène)
Ethanol
1l, 2,5l
dénaturé avec1 % d'éthylméthylcétone
pour analyse EMSURE®
Ethanol absolu pour analyse
1l, 2,5 l
EMSURE® ACS, ISO, Reag. Ph Eur
Xyléne pour analyse
1l, 2,5 l
EMSURE® ACS, ISO, Reag. Ph Eur
Classification des matières dangereuses
Art. n° 115925
Tenir compte de la classification des matières dangereuses indiquée sur
l’étiquette et des indications de la fiche de données de sécurité.
La fiche de données de sécurité de Merck est disponible sur Internet et sur
demande.
Composants principaux des produits
Art. n° 115925
C.I. 16230
C16H10N2Na2O7S2
M = 452,37g/mol
Teneur en colorant >/= 80%
Status: Juin 2014