Application du test développement embryonnaire de - envlit
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Application du test développement embryonnaire de - envlit
Application du test développement embryonnaire de bivalve à la surveillance du milieu marin Quiniou Françoise*, Delesmont Régis**, Delesmont Edith** * Ifremer Brest - DEL/PC ** Institut Pasteur de Lille - Laboratoire Littoral de Gravelines Principe La méthodologie adoptée est inspirée du protocole E.P.A. : EPA/OPPTS 850-1055 Avril 1996 - " Bivalve acute toxicity test (Embryo-larval) ". Le milieu de référence est constitué par l'eau de mer synthétique (Zaroogian et al., 1969) ou l'eau de mer naturelle filtrée. L'émission des gamètes des mollusques matures est déclenchée par chocs thermiques modérés. Après fécondation en eau de référence, les œufs sont répartis dans les milieux à tester (env. 20 000 par litre). Manteau hypertrophié Larve D normale Le stade larve "D", atteint en 24 h à 24 °C pour l'huître creuse et 48 h à 20 °C pour la moule, détermine la durée du test. Les résultats sont exprimés en taux de réussite de développement, déterminé pour chaque concentration testée sur 100 larves par replicat (pourcentage brut qui peut être corrigé en fonction des Témoins). La dose déterminant 50 % de larves anormales (CI50) est déterminée graphiquement ou par la méthode des Probits. Le contrôle qualité de chaque série d'essais, est assuré par la réalisation d'un test avec le sulfate cuivre (CuSO4) : toxique de référence. Applications Effluent anormales Pourcentage net de larves 100 50 0 10 100 Sédiment 110 Contamination chimique 100 90 80 70 60 50 40 30 20 10 0 -10 0,1 1 10 concentration (mg/kg de sédiment sec) Pourcentage net de larves anormales Eau de mer utilisée dans un process industriel Développement bloqué au stade embryon Larves de Crassostrea gigas Niveau 1 GEODE Niveau 2 GEODE 10000 1000 100 10 1 0,1 Mercure Arsenic Cuivre Plomb PCB Concentration en Concentration en effluent (g/l) sédiment (g/l) Comparaison des toxicités de l'effluent brut (en rouge) et de l'effluent épuré (en bleu) CI 50 = 1.1. Toxique de référence Nombre d'observations Pourcentage de larves Normales Rivières 100 80 60 40 20 0 Témoin Douve Orne Dives Seine 18 16 14 12 10 8 6 4 2 0 1 10 100 CI 50 72 déterminations réalisées entre 1993 et 1999. Huîtres en provenance de Gravelines, Barfleur et Arcachon. Tests réalisés en eau de mer naturelle ou de synthèse Moyenne : CI50 = 8,9 ± 3,1 ug Cu/l (µg/l) Résultats obtenus avec le sulfate de cuivre Eaux de rivières testées à la dilution 1/10, salinité 30 Conclusions Remerciements Ces travaux ont pu être réalisés grâce au soutien du RNO. Le test développement embryonnaire de bivalves est applicable aux milieux liquides ainsi qu'à l'étude des sédiments contaminés. Il permet d'évaluer la toxicité des milieux testés et d'en suivre leur évolution. Les tests réalisés, depuis 1993, avec le sulfate de cuivre (Cu/SO4), toxique de référence, ont permis de vérifier la sensibilité du test, sa fiabilité et sa reproductibilité en eau de mer naturelle comme en eau de synthèse.