Chromatographie de colorants alimentaires

La santé. Chapitre 3 (identification)
Activités expérimentales
Analyse de colorants (excipients).
On souhaite analyser la composition d’un colorant vert pouvant être utilisé dans un médicament, en tant
qu'excipient.
Pour cela, on dispose du colorant vert de composition inconnue, de tartrazine (E102 colorant jaune), d'azorubine
(E122 colorant rouge) et de bleu de méthylène (colorant bleu).
Remarque : De la même façon, on pourrait identifier les constituants d'un arôme de banane.
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Activités expérimentales
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Analyse de colorants (excipients).
Éléments de correction.
On peut réliser une CCM (chromatographie sur couche mince, voir documment annexe).
On peut noter que (suite aux différentes réflexions et aux différents tatonnements pour réaliser l’expérience) :
- Pour que les hauteurs des différents taches puissent âtre comparées, il faut placer les dépots sur une même
ligne horizontale (la ligne de dépots, tracée en pointillés sur la plaque à CCM) ;
- Pour plus de précision, les dépots doivent être assez petits (mais suffisemment visibles) ;
- Pour que l'éluant monte le long de la plaque à CCM (par capillarité), le bas de la plaque à CCM doit être
maintenue dans l'éluant ;
- Pour que les dépots ne se dissolvent pas dans l'éluant, les dépots ne doivent pas plonger dans l'éluant (la ligne
de dépots doit rester au-dessus de l'éluant) ;
- Pour que les taches montent bien verticalement, la plaque à CCMne doit pas toucher les bors de la cuve à
CCM ;
- Pour que l'expérience ne soit pas faussée, le matériel ne doit plus être bougée dès lors que la plaque à CCM
est plongée dans la cuve à CCM ;
On observe que :
- Une fois la plaque déposée dans la cuve, l'éluant (le solvant) monte le long
de la plaque.
- En montant, l'éluant entraîne plus ou moins les diverses espèces chimiques ;
- Le colorant inconnu donne deux taches : une (de couleur jaune) qui a été
entraînée à la même hauteur que celle donnée par la tartrazine et une (de
couleur bleue) qui n'a été entraînée à la même hauteur qu'aucun des trois
colorants de référence.

Interprétation :
On est en présence de deux phases : une phase fixe (la plaque à chromatographie) et une phase mobile
(l'éluant).
Les espèces chimiques sont en plus ou moins grande interaction avec chaque phase : elles ont une plus ou
moins grande affinité pour la plaque à chromatographie et elles sont plus ou moins solubles dans l'éluant.
L'azorubine doit présenter une faible affinité pour le papier Wattman et doit être très soluble dans le mélange
éthanol-eau.
Le bleu de méthylène doit présenter une grande affinité pour le papier Wattman et doit être peu soluble dans le
mélange éthanol-eau.
La tartrazine doit avoir des propriétés intermédiaires.
Analyse du chromatogramme :
Le colorant "inconnu" est un mélange d'au moins 2 espèces chimiques (car il donne 2 taches).
Une des taches (de couleur jaune) donnée par le colorant "inconnu" a été entraînée à la même hauteur que celle
donnée par la tartrazine ; le colorant "inconnu" contient donc très probablement de la tartrazine.
Aucune des taches données par le colorant "inconnu" n'a été entraînée à la même hauteur que celle donnée par
l'azorubine ; le colorant "inconnu" ne contient donc pas d'azorubine.
Aucune des taches données par le colorant "inconnu" n'a été entraînée à la même hauteur que celle donnée par
le bleu de méthylène ; le colorant "inconnu" ne contient donc pas de bleu de méthylène.
En conclusion, le colorant inconnu est un mélange d'au moins deux espèces chimiques : de la tartrazine
(colorant jaune) et un colorant bleu non identifié qui n'est pas le bleu de méthylène (ni l'azorubine).
La santé. Chapitre 3 (identification)
Activités expérimentales
Analyse de colorants (excipients).
Liste du matériel.
Pour chaque binôme :
□ papier à chromatographie (papier Wattman)
□ cuve à chromatographie avec couvercle et de quoi maintenir le papier Wattman verticalement (pinces croco)
Au bureau, pour tous :
□ en 2 exemplaires : bleu de méthylène + pique à apéritif + pot à yaourt
□ en 2 exemplaires : tartrazine E102 (colorant jaune) + pique à apéritif + pot à yaourt
□ en 2 exemplaires : azorubine E122 (colorant rouge) + pique à apéritif + pot à yaourt
□ en 2 exemplaires : colorant vert appelé inconnu (mélange de bleu patenté E131 et de tartrazine E131) + pique
à apéritif + pot à yaourt
□ 250 mL d'éluant (2/3 vol éthanol et 1/3 vol eau) avec petit bécher
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