Insert - Cromakit

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Insert - Cromakit
PLASMASCANN® ISI: 1,5
PLASMASCANN® ISI:1,5
TROMBOPLASTINA CALCICA
Para diagnóstico “in vitro”
CALCIUM THROMBOPLASTIN
For “in vitro” diagnostic
Sumario
El tiempo de protrombina o tiempo de Quick es el tiempo, necesario para la coagulación
de un plasma una vez recalcificado al que se ha añadido un factor de coagulación
externo (Tromboplastina) . Tiempos anormalmente largos respecto a los valores
obtenidos en sujetos sanos, indican deficiencias en los factores de coagulación.
Plasmascann es una tromboplastina cálcica liofilizada, que permite determinar
variaciones en los factores de coagulación, especialmente factores VII y X, deprimidos
en el tratamiento con derivados cumarínicos, deficiencia de vitamina K, hepatopatías o
por alguna anormalidad hereditaria en el sistema de coagulación.
El reactivo, obtenido a partir de un extracto de cerebro de conejo, se estandariza lote
a lote mediante la técnica de Hills-Ingram.
Reactivos
Kit 10 x 2 ml (Ref. 99 70 14). Contiene:
A. 10 viales de tromboplastina cálcica.
Kit 10 x 4 ml (Ref. 99 62 21). Contiene:
A. 10 viales de tromboplastina cálcica.
Ref. 99 70 30
Curva de calibración
Utilizar un “pool” de plasmas citratados, procedentes de no menos de 5 individuos
varones sanos (18-40 años).
--
1/2
1/3
1/4
1/10
Plasma Citrato (ml)
Dilución
1
1
1
1
1
Sol. 0.9% NaCl (ml)
--
1
2
3
9
% Coagulación
100%
50%
33%
25%
10%
Tiempo orientativo (seg)
10-12
13-15
17-19
20-22
40-45
Los tiempos de coagulación obtenidos con la anteriores diluciones se representan
frente a la inversa de la dilución. En la recta obtenida se interpolan los resultados de
los pacientes para convertir tiempos de coagulación en % de actividad.
Ref. 99 70 40
Summary
Prothrombin or Quick time is the time, in seconds, necessary for a plasma to clot at
37ºC, once an external coagulation factor (thromboplastin) and Ca2+ has been added.
Abnormally long times with regard to those obtained for healthy people indicate a
deficiency in some of the components of the coagulation system.
Plasmascann is a calcium thromboplastin, freeze-dried, that allows the determination
of variations in those coagulation factors (especially factors VII and X) that have been
depressed during the treatment with coumarinic derivatives, in vitamin K deficiency,
hepatopathy or due to a hereditary abnormally in the coagulation system.
The reagent has been obtained from a rabbit brain extract, and it is standardized from
lot to lot according to the technique of Hills-Ingram.
Reagents
Kit 10 x 2 ml (Ref. 99 70 14). Contents:
A. 10 vials of calcium thromboplastin.
Kit 10 x 4 ml (Ref. 99 62 21). Contents:
A. 10 vials of calcium thromboplastin.
Ref. 99 70 30
Calibration curve
From a pool of citrated plasmas, of at least five healthy male donors (18-40 years old),
make the following dilutions:
Dilution
Reactivo de trabajo
El vial reconstruido con el volumen de agua desionizada indicado en la etiqueta
contiene:
Tromboplastina con la actividad suficiente para promover la coagulación del plasma en
las condiciones del ensayo.
CaCl : 0,0125 M.
2Estabilizantes y conservantes.
Conservación y estabilidad
El reactivo sin rehidratar es estable hasta la fecha de caducidad indicada en la
etiqueta, almacenado a 2-8ºC. El reactivo reconstruido es estable una semana en las
mismas condiciones de temperatura.
Muestra
Para la obtención del plasma mezclar cuidadosamente 9 partes de sangre recién
extraída con 1 parte de solución al 3,8 % (0,13 M) de citrato trisódico trihidratado (Ref.
99 59 59). Centrifugar a 3.000 rpm/5 min y separar el sobrenadante.
Mantener la muestra a 2-8ºC hasta el momento del ensayo. No demorar la prueba más
de 2-3 h. desde la extracción.
Procedimiento
1.
2.
3.
4.
5.
Rehidratar un vial de Plasmascann, agitar suavemente y esperar 10 min.
para la homogenización completa.
Incubar el reactivo a 37º C/ 10-15 min.
Dispensar 0,1 ml. de plasma en tubo de hemólisis, e incubar a
37º C / 2,5 min.
Añadir 0,2 ml de Plasmascann atemperado a 37º C.
Poner en marcha un cronómetro y determinar el tiempo de formación
del coágulo (tiempo de Quick).
Resultados
Pueden expresarse en seg., en % de actividad o en INR.
Para determinar los porcentajes de actividad de las muestras, los valores en
segundos se interpolan en la tabla adjunta o en la curva de calibración del
reactivo.
La expresión de los resultados como INR se utiliza para la normalización y el seguimiento de los valores en sujetos sometidos a terapias
con anticoagulantes. Ver folleto adjunto.
Valores usuales
Expresados en % de actividad 80-100 % para plasmas normales. El intervalo
terapéutico con anticoagulantes orales es del orden del 20 - 35 %.
Es aconsejable que cada laboratorio establezca sus propios márgenes, en
función de la metódica usada
Nota
Si el reactivo se utiliza en un aparato de deteción automática de formación del coágulo
deberán tenerse en cuenta las caractéristicas de programación de cada aparato al
proceder al ensayo.
QUIMICA CLINICA APLICADA S.A.
Empresa Certificada ISO 9001 / ISO 13485
A 7 Km 1081 – P.O. Box 20 - E43870 AMPOSTA / SPAIN
Tel. ++ 34 (977) 70. 62. 30 Fax ++ 34 (977) 70. 30. 40
Revisión: Octubre 2011
PRO4_REG9_PLASMA
Tiempo de Plasma Normal ( seg )
10.5
10.5
11.0
11.5
12.0
12.5
13.0
13.5
14.0
14.5
15.0
15.5
16.0
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20.0
21
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29
30
32
34
36
38
40
42
44
46
48
50
11.0
100%
88
79
71
65
60
54.5
51
48
45
42.5
40
38
36
34.5
33
31.5
30
29
28
26
24
23
21.5
20
19
18
17.5
16.5
16
14.5
13.5
12.5
12
11
100%
88
78
71
65
59
55
51
48
46
43
10
38
36
35
33
32
30.5
29
27
25
23.5
22
21
19.5
19
18
17
16
15
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13
12
11.5
10
10
11.5
100%
89
80
72
66
60.5
56
52
49
45.5
43
41
39
37
35
33.5
31.5
31
28.5
26.5
24
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20.5
19.5
18.5
17.5
17
15.5
14.5
14
12.5
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11
10
12.0
100%
90.5
81
73
67
61
57
53
50
46
44
41
39
37.5
35.5
34
32.5
30
28
26
24
23
21.5
20
19
18
17.5
16
15
13.5
13
12
11.5
10.5
12.5
100%
93
83
75
68.5
63
58
53
49
47.5
45
42
40
38
36.5
35
32
29.5
27.5
25.5
24
22.5
21
20
19
18
17
15.5
14
13.5
12.5
11.5
11
10.5
10
13.0
100%
95
85
77
70
64.5
60
55.5
52
49
46
43.5
41
39
37
34
31.5
29
27
25.5
24
22.5
21.5
20
19
17.5
16
15
14
13
12
11.5
11
10.5
10
1/4
1/10
1
1
1
Sol. 0.9% NaCl (ml)
--
1
2
3
9
% Coagulability
100%
50%
33%
25%
10%
Time (sec) orientative
10-12
13-15
17-19
20-22
40-45
VALUES OF CLOTTING TIMES – PERCENTAGES OF PROTHROMBIN
Working reagent
Plasmascann vial once rehydrated with the volume of deionized water stated on the
label contains:
Thromboplastin: Sufficient activity to promote the coagulation of plasma in the assay
conditions.
CaCl2 0.0125 M and Stabilizers.
Storage and stability
The lyophilized reagent is stable, when kept at 2º-8º C, until the expiration date stated
on the label. Once rehydrated will remain stable for one week at the same temperature
conditions.
Sample
Mix carefully 9 parts of fresh blood with 1 part of trihydrated trisodium citrate 3.8%
(0.13 M, Ref.99 59 59). Centrifuge at 3.000 rpm / 5 min. and separate the supernatant
plasma. Store in the refrigerator until prior to assay. (Not more than 2 hours).
Procedure
1.
2.
3.
4.
5.
Rehydrate a Plasmascann vial, mix gently and wait 10 min.for the
homogenisation of the reagent.
Incubate the reagent at 37ºC / 10 – 15 min.
Dispense 0.1 ml of the plasma sample into a tube.and incubate at
37º C / 2.5 min.
Add 0.2 ml of Plasmascann reagent (at 37º C).
Start the stopwatch immediately and measure the time for the clot to be
formed (Quick time).
Results
Can be expressed in seconds, in percentages of activity or in IN ratio.
The percentage of activity can be obtained with the aid of the Table or the
calibration curve.
The INR results are used with patient treated with oral
Anticoagulants. See atached insert.
Usual values
In percentage of activity: 80-100 % for normal plasma samples. Therapeutic
interval 20-35 % aproximately (oral anticoagulants).
It is advisable that each laboratory obtains its own therapeutic iterval for
the methodology used.
Valores promedios obtenidos con distintos lotes de PLASMASCANN.
Limitaciones del método
Trazas de detergente o restos de sangre en el material de vidrio pueden dar lugar
a errores en la determinación.
Una temperatura incorrecta del baño, proporciones inadecuadas de citrato en el
plasma o la utilización de muestras envejecidas pueden dar lugar a valores erróneos.
Desechar plasmas de la VSG. Si la punción venosa resulta laboriosa, existe el
riesgo de aspirar tromboplastina tisular.
1/3
1
Ref. 99 70 40
Optionally, 1x500 ml trihydrated trisodium citrate, 3.8 % (Ref. 99 59 59). Ready to use.
Tiempos de
Plasmas
(seg)
1/2
1
Quick time is determined by the above mentioned technique. These values can be
plotted on a graph vs the inverse of dilution and the plasma times of the patients will
be interpolated for having % of coagulability.
VALORES TIEMPOS DE COAGULACION - PORCENTAJES DE PROTROMBINA
Opcionalmente, 1x500 ml citrato trisódico trihidratado al 3,8% (Ref. 99 59 59).
Listo para su uso.
--
Citrate plasma (ml)
Time of the
Plasma
sample
(sec)
10.5
11.0
11.5
12.0
12.5
13.0
13.5
14.0
14.5
15.0
15.5
16.0
16.5
17.0
17.5
18.0
18.5
19.0
19.5
20.0
21
22
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24
25
26
27
28
29
30
32
34
36
38
40
42
44
46
48
50
Time of the Normal Plasma
10.5
11.0
100%
88
79
71
65
60
54.5
51
48
45
42.5
40
38
36
34.5
33
31.5
30
29
28
26
24
23
21.5
20
19
18
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16.5
16
14.5
13.5
12.5
12
11
100%
88
78
71
65
59
55
51
48
46
43
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38
36
35
33
32
30.5
29
27
25
23.5
22
21
19.5
19
18
17
16
15
14
13
12
11.5
10
10
11.5
100%
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80
72
66
60.5
56
52
49
45.5
43
41
39
37
35
33.5
31.5
31
28.5
26.5
24
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19.5
18.5
17.5
17
15.5
14.5
14
12.5
11.5
11
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100%
90.5
81
73
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61
57
53
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46
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41
39
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35.5
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30
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19
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10.5
10
12.5
100%
93
83
75
68.5
63
58
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47.5
45
42
40
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36.5
35
32
29.5
27.5
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24
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21
20
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18
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15.5
14
13.5
12.5
11.5
11
10.5
10
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100%
95
85
77
70
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60
55.5
52
49
46
43.5
41
39
37
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31.5
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27
25.5
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22.5
21.5
20
19
17.5
16
15
14
13
12
11.5
11
10.5
10
Mean values obtained with different PLASMASCANN lots.
Note
For automated systems refer to the appropiate instruction manual.
Limitations of the procedure
Traces of detergent or blood in the glassware can give false results. Likewise, a wrong
temperature in the water bath, unadequate proportions in the blood-citrate mixture or
the use of aged samples whether for time or temperature, will give rise to erroneous
values in the determination. Discard plasma samples from the ESR.
In the case the venous puncture became arduous, the risk of an undesirable tissue
thromboplastin aspiration is run.
Bibliografía
Sultan, C., Priolet, G., Beuzart, Y., Rosa, R., Josso, F. (1979). Técnicas en
hematologia, 1a. Ed, 186-188.
Hills, M., Ingram, I.C. (1973). Brit. J. Hematol., 25, 445-451
Heckermann, H.J. (1979). Thromb. Res., 15, 769-780
References
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hematologia, 1a. Ed, 186-188.
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Heckermann, H.J. (1979). Thromb. Res., 15, 769-780.
QUIMICA CLINICA APLICADA S.A.
ISO 9001 / ISO 13485 Certified Company
A 7 Km 1081 – P.O. Box 20 - E43870 AMPOSTA / SPAIN
Tel. ++ 34 (977) 70. 62. 30 Fax ++ 34 (977) 70. 30. 40
Revision: October 2011
PRO4_REG9_PLASMA
PLASMASCANN® ISI:1,5
THROMBOPLASTINE CALCIQUE
Pour le diagnostic “in vitro”
Résumé
Le temps de prothrombine ou temps de Quick est le temps nécessaire pour la
coagulation d’un plasma recalcifié, auquel a été ajouté un facteur de coagulation
externe (thromboplastine). Des temps anormalement longs, par rapport aux valeurs
obtenues chez les sujets sains, indiquent un déficit en facteurs de la coagulation.
Plasmascann est une thromboplastine calcique lyophilisée permettant de déterminer
des variations des facteurs de la coagulation, notamment des facteurs VII et X,
abaissés en cas de traitement avec des dérivés coumariniques, de déficit en vitamine
K, de maladies hépatiques ou d’anomalie héréditaire du système de coagulation.
Le réactif, obtenu à partir d’un extrait de cerveau de lapin, est standardisé lot par lot au
moyen de la technique de Hills-Ingram.
Courbe d’étalonnage
Utiliser un pool de plasmas citratés provenant de pas moins de 5 hommes sains (18
à 40 ans):
Réactifs
Kit 10 x 2 ml (Réf. 99 70 14). Contenu:
A. 10 fioles de thromboplastine calcique.
Kit 10 x 4 ml (Réf. 99 62 21). Contenu:
A. 10 fioles de thromboplastine calcique.
Réf. 99 70 30
Les temps de coagulation obtenus avec les dilutions précédentes sont représentés
par rapport à l’inverse de la dilution. Interpoler les résultats des patients sur la droite
obtenue pour transformer les temps de coagulation en pourcentage d’activité.
Réf. 99 70 40
VALEURS TEMPS DE COAGULATION - POURCENTAGES DE PROTHROMBINE
Réactif de travail
Le contenu de la fiole reconstitué avec le volume d’eau déionisée indiqué sur l’étiquette
contient:
Thromboplastine possédant l’activité suffisante pour favoriser la coagulation du plasma
dans les conditions de l’essai.
CaCl: 0,0125 M
Stabilisants et conservateurs.
Conservation et stabilité
Le réactif non réhydraté est stable jusqu’à la date de péremption indiquée sur l’étiquette
à une température comprise entre 2 et 8 ºC. Après reconstitution, le réactif est stable
pendant une semaine sous les mêmes conditions de température.
Échantillon
Pour obtenir le plasma, mélanger délicatement 9 volumes de sang fraichement prélevé
avec 1 volume de solution à 3,8 % (0,13 M) de citrate trisodique trihydraté (Réf. 99 59
59). Centrifuger à 3 000 tours par minute pendant 5 minutes et séparer le surnageant.
Conserver l’échantillon à une température comprise entre 2 et 8 ºC jusqu’au moment
de l’essai. Effectuer l’essai dans les 2 à 3 heures suivant le prélèvement.
Mode opératoire
2.
3.
4.
5.
Réhydrater le contenu d’une fiole de Plasmascann, agiter doucement et
attendre 10 minutes pour obtenir l’homogénéisation complète.
Incuber le réactif à 37 ºC pendant 10 à 15 minutes.
Verser 0,1 ml de plasma dans un tube à hémolyse, puis incuber à 37 ºC
pendant 2,5 minutes.
Ajouter 0,2 ml de Plasmascann porté à 37 ºC.
Mettre un chronomètre en marche et déterminer le temps de formation
du caillot (temps de Quick).
Résultats
Ils peuvent être exprimés en secondes, en pourcentage d’activité ou en INR.
Pour déterminer les pourcentages d’activité des échantillons, interpoler les
valeurs en secondes dans le tableau ci-contre ou sur la courbe d’étalonnage
du réactif.
On utilise l’expression des résultats comme INR pour la normalisation
et le suivi des valeurs chez les sujets soumis à des traitements avec des
anticoagulants. Voir notice ci-jointe.
Valeurs usuelles
Elles sont exprimées en pourcentage d’activité (80 à 100 %) pour les plasmas normaux. L’intervalle thérapeutique avec des anticoagulants oraux est
de l’ordre de 20 à 35 %.
Il est conseillé que chaque laboratoire établisse ses propres valeurs, en fonction de la méthode utilisée.
Remarque
Si le réactif est utilisé dans un appareil de détection automatique de formation du
caillot, il est conseillé de tenir compte des caractéristiques de programmation de
chaque appareil lors de l’essai.
QUIMICA CLINICA APLICADA S.A.
Entreprise certifiée ISO 9001 / ISO 13485
A 7 Km 1081 – P.O. Box 20 - E43870 AMPOSTA / SPAIN
Tel. ++ 34 (977) 70. 62. 30 Fax ++ 34 (977) 70. 30. 40
Révision: October 2011
Dilution
1/2
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1/4
1
1
1
1
1
Sol. 0.9% NaCl (ml)
--
1
2
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9
1/10
% de coagulation
100%
50%
33%
25%
10%
Temps à titre indicatif (s)
10-12
13-15
17-19
20-22
40-45
Temps de
plasmas
(s)
Est également disponible: 1 x 500 ml de citrate trisodique trihydraté à 3,8 %
(Réf. 99 59 59). Prêt à l’emploi.
1.
--
Plasma citraté (ml)
10.5
11.0
11.5
12.0
12.5
13.0
13.5
14.0
14.5
15.0
15.5
16.0
16.5
17.0
17.5
18.0
18.5
19.0
19.5
20.0
21
22
23
24
25
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38
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50
Temps de plasma normal (s)
10.5
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54.5
51
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40
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33
31.5
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28
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21.5
20
19
18
17.5
16.5
16
14.5
13.5
12.5
12
11
100%
88
78
71
65
59
55
51
48
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43
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38
36
35
33
32
30.5
29
27
25
23.5
22
21
19.5
19
18
17
16
15
14
13
12
11.5
10
10
11.5
100%
89
80
72
66
60.5
56
52
49
45.5
43
41
39
37
35
33.5
31.5
31
28.5
26.5
24
23
22
20.5
19.5
18.5
17.5
17
15.5
14.5
14
12.5
11.5
11
10
12.0
100%
90.5
81
73
67
61
57
53
50
46
44
41
39
37.5
35.5
34
32.5
30
28
26
24
23
21.5
20
19
18
17.5
16
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13.5
13
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11.5
10.5
12.5
100%
93
83
75
68.5
63
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45
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35
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22.5
21
20
19
18
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14
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12.5
11.5
11
10.5
10
13.0
100%
95
85
77
70
64.5
60
55.5
52
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43.5
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31.5
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20
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17.5
16
15
14
13
12
11.5
11
10.5
10
Valeurs moyennes obtenues avec des lots différents de PLASMASCANN.
Limites de la méthode
La présence de traces de détergent ou de restes de sang sur le matériel en verre peut
donner lieu à des erreurs lors de la détermination.
Une température incorrecte du bain, des proportions inadéquates de citrate dans
le plasma ou l’utilisation d’échantillons anciens peuvent donner lieu à des valeurs
erronées.
Rejeter les plasmas de la VSG. Si la ponction veineuse s’avère difficile, il existe le
risque d’aspirer de la thromboplastine tissulaire.
Bibliographie
Sultan, C., Priolet, G., Beuzart, Y., Rosa, R., Josso, F. (1979). Técnicas en
hematologia, 1e éd., 186-188.
Hills, M., Ingram, I.C. (1973). Brit. J. Hematol., 25, 445-451
Heckermann, H.J. (1979). Thromb. Res., 15, 769-780
PRO4_REG9_PLASMA
958 412 886
629 636 705
http://www.cromakit.es/
Calle Tucumán 8 Nave B 18200 Maracena (Granada)

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