Anti-TPO - Laboratoire de biologie médicale du Quai Vallière

F
SYSTEM
Anti-TPO
2K47
B2K472
56-0791/R1
Anti-TPO
Lire attentivement cette notice avant d'utiliser le dosage et suivre scrupuleusement les instructions. La fiabilit
des rsultats du dosage ne peut pas tre garantie si ces instructions ne sont pas strictement respectes.
© 2005 Abbott / Printed in Germany / ARCHITECT Anti-TPO
Juillet 2005
Lgende des symboles utiliss
Rfrence
Numro de lot
Pour diagnostic in vitro
Date d'expiration
Conserver entre 2 et 8 °C
Cupules ractionnelles
Godets-chantillons
Consulter les instructions d'utilisation
Septum
Bouchons de remplacement
Numro de srie
Produit par
Fisher Scientific, 8365 Valley Pike,
Middletown, VA 22645, USA
pour Abbott Laboratories,
Abbott Park, IL 60064, USA
Lot de ractifs
Mandataire
CD-ROM de dosages
Fabricant
ABBOTT
Max-Planck-Ring 2
65205 Wiesbaden
Germany
+49-6122-580
ABBOTT
Diagnostics Division
Numro de contrle
L'explication complte des symboles utiliss pour la dnomination des
composants se trouve au paragraphe "Ractifs".
1
DENOMINATION
Kit de ractifs ARCHITECT Anti-TPO (2K47)
ARCHITECT® Anti-TPO
•
DOMAINE D'APPLICATION
ARCHITECT Anti-TPO est un dosage immunologique microparticulaire par
chimiluminescence (CMIA) sur l'ARCHITECT i pour la dtermination
quantitative des autoanticorps de type IgG dirigs contre la thyroperoxydase
(anti-TPO) dans le srum et le plasma humains. Le dosage ARCHITECT
Anti-TPO constitue une aide dans le diagnostic des maladies thyrodiennes.
•
RESUME ET EXPLICATION DU TEST
•
En 1957, Trotter et coll.1 ont t les premiers dmontrer que de nombreux
patients atteints de la thyrodite d’Hashimoto prsentaient des concentrations
sanguines dcelables en autoanticorps dirigs contre un antigne thyrodien
distinct de celui de la thyroglobuline. Cette dcouverte a t confirme en
1958 par Roitt et Doniach2 et l'antigne en question a t appel antigne
microsomal thyrodien. Depuis, il a t dmontr que la plupart des
autoanticorps dirigs contre l'antigne microsomal thyrodien reconnaissaient
la thyroperoxydase (TPO).3
La TPO est une enzyme glycoprotique lie la membrane dont le poids
est de 107 kD environ. In vivo, elle participe la iodation de la tyrosine
permettant la synthse de T3 et T4.4 La ractivit autoimmune contre la
TPO est prsume tre de nature polyclonale et htrogne, avec un
minimum de 6 dterminants antigniques reconnus, comprenant des pitopes
conformationnels et linaires.5,6 En outre, la proportion de chaque type (G ou
M) ou sous-type (G1 G4) d'immunoglobulines ainsi que leur affinit varient
largement d'un patient l'autre.7,8 Contrairement aux autoanticorps dirigs
contre la thyroglobuline (anti-Tg), ceux dirigs contre la TPO fixent le
complment,9 sont potentiellement nocifs et peuvent avoir un rle pathogne
dans la maladie thyrodienne autoimmune (destructive).10,11 Dans la majorit
des cas de thyrodite d'Hashimoto, de myxdme primaire et de maladie
de Graves-Basedow, les autoanticorps anti-TPO sont souvent prsents
conjointement des anticorps anti-Tg. La relation existant entre les maladies
thyrodiennes autoimmunes et la grossesse a suscit un intrt important
avec la reconnaissance des syndromes de maladies thyrodiennes
postpartum.12 Les anticorps anti-TPO sont dcelables dans la plupart des
cas de thyrodite postpartum et il a t dmontr que la prsence
d'autoanticorps en dbut de grossesse tait associe avec un risque lev
d'hypothyrodie asymptomatique postpartum.13-17
Chez les patients prsentant de petits goitres, il est frquent de dceler des
anticorps anti-TPO en l'absence d'autoanticorps anti-thyroglobuline ; jusqu'
64 % des cas d'hypothyrodie autoimmune sont associs la prsence
d'anticorps anti-TPO seuls.18 En outre, les anticorps anti-TPO sont souvent
dcels chez des patients atteints d'autres maladies autoimmunes telles
que l'arthrite rhumatode, la maladie d'Addison et le diabte de type I.19-21
De faibles concentrations de ces anticorps sont galement dcelables chez
20 % des individus asymptomatiques au maximum,22 en particulier chez les
personnes ges23 et plus frquemment chez les femmes que chez les
hommes, bien que la signification clinique de ces autoanticorps ne soit pas
claire.
1 ou 4 flacon(s) (6,6 ml chacun) de microparticules
recouvertes de thyroperoxydase (recombinante) dans du tampon MES
contenant un stabilisant de protines (bovines). Conservateur : agents
antimicrobiens.
1 ou 4 flacon(s) (5,9 ml) de conjugu d'anticorps anti-IgG
humaine (souris, monoclonal) marqu l'acridinium dans du tampon
MES contenant un stabilisant de protines (bovines). Conservateur :
agents antimicrobiens.
1 ou 4 flacons (10,0 ml) de diluant de dosage dans du
tampon MES. Conservateur : agents antimicrobiens.
Autres ractifs
Solution de practivation ARCHITECT i
•
Solution de practivation contenant
1,32 % (m/v) d'eau oxygne.
Solution d'activation ARCHITECT i
Solution d'activation contenant de l'hydroxyde
•
de sodium 0,35 N.
Tampon de lavage ARCHITECT i
•
Tampon de lavage contenant une solution saline
tamponne au phosphate. Conservateur : agent antimicrobien.
PRECAUTIONS ET RESTRICTIONS D'EMPLOI
Pour diagnostic in vitro.
Mesures de scurit
•
•
ATTENTION : Ce produit ncessite la manipulation d'chantillons
humains. Il est recommand de considrer tous les composants d'origine
humaine comme potentiellement infectieux et de les manipuler selon les
rgles "OSHA Standard on Bloodborne Pathogens".24 Les matriaux
contenant ou susceptibles de contenir des agents infectieux doivent tre
manipuls selon les rgles de scurit biologique de niveau 225 ou autres
rgles de scurit biologique en vigueur.26,27
Les microparticules contiennent du ferricyanure de potassium et sont
classifies selon les directives de la Communaut Europenne (CE)
comme : nocives (Xn). Les risques particuliers (R) et les conseils de
prudence (S) attribus cette substance sont les suivants :
R32
S35
S36
S46
•
PRINCIPES BIOLOGIQUES DE LA METHODE
ARCHITECT Anti-TPO est un dosage immunologique en deux tapes pour
la dtermination quantitative des anticorps anti-TPO dans le srum et le
plasma humains utilisant la technologie de dosage immunologique
microparticulaire par chimiluminescence (CMIA) avec des protocoles de
dosage flexibles, appele Chemiflex®.
Dans un premier temps, l'chantillon, le diluant de dosage et les
microparticules paramagntiques recouvertes de TPO sont mis en prsence
et incubs. Les anticorps anti-TPO prsents dans l'chantillon se lient aux
microparticules recouvertes de TPO. Aprs lavage, le conjugu d'anticorps
anti-IgG humaine marqu l'acridinium est ajout dans un deuxime temps.
Aprs un deuxime cycle d'incubation et de lavage, les solutions de
practivation et d'activation sont ajoutes au mlange ractionnel. La raction
chimiluminescente rsultante est mesure en units relatives de lumire
(URL). Il existe une relation directe entre la quantit d'anticorps anti-TPO
prsents dans l'chantillon et le nombre d'URL dtectes par le systme
optique ARCHITECT i*. Pour de plus amples informations concernant
l'analyseur et la technologie du dosage, se rfrer au chapitre 3 du Manuel
Technique ARCHITECT.
Au contact d'un acide, dgage un gaz trs toxique.
Ne se dbarrasser de ce produit et de son rcipient
qu'en prenant toutes prcautions d'usage.
Porter un vtement de protection appropri.
En cas d'ingestion, consulter immdiatement un
mdecin et lui montrer l'emballage ou l'tiquette.
La solution d'activation ARCHITECT i contient de l'hydroxyde de sodium
(NaOH) et est classifie selon les directives de la Communaut
Europenne (CE) comme : irritante (Xi). Les risques particuliers (R) et
les conseils de prudence (S) attribus cette substance sont les suivants :
R41
S25
S26
Risque de lsions oculaires graves.
Eviter le contact avec les yeux.
En cas de contact avec les yeux, laver
immdiatement et abondamment avec de l'eau et
consulter un spcialiste.
S35
Ne se dbarrasser de ce produit et de son rcipient
qu'en prenant toutes prcautions d'usage.
S36/39 Porter un vtement de protection appropri et un
appareil de protection des yeux/du visage.
S46
En cas d'ingestion, consulter immdiatement un
mdecin et lui montrer l'emballage ou l'tiquette.
•
Pour les produits non classifis comme dangereux par la Directive
Europenne 1999/45/EC, une fiche de scurit est disponible pour les
professionnels sur simple demande.
Prcautions d'emploi
• Ne pas utiliser les kits de ractifs au-del de leur date d'expiration.
• Ne pas mlanger les ractifs provenant d'un mme kit ou de kits de
ractifs diffrents.
• Avant de charger le kit de ractifs ARCHITECT Anti-TPO sur l'analyseur
pour la premire fois, le flacon de microparticules doit tre homognis
afin de remettre en suspension les microparticules qui se sont dposes
pendant le transport. Pour de plus amples informations sur
l'homognisation des microparticules, se rfrer au paragraphe
"Procdure du dosage" dans la section "Procdure" de cette notice.
* i = dosage immunologique
REACTIFS
Kit de ractifs, 100 tests
REMARQUE : Certains conditionnements ne sont pas disponibles dans tous
les pays ; contacter votre distributeur local.
2
•
•
•
•
•
•
Des septums DOIVENT tre utiliss afin d'empcher l'vaporation
et la contamination des ractifs et d'assurer leur intgrit. La fiabilit
des rsultats du dosage ne peut pas tre garantie si les septums
ne sont pas utiliss conformment aux instructions de cette notice.
Afin d'viter toute contamination, porter des gants propres lors de
l'application d'un septum sur un flacon de ractif dbouch.
Avant de placer le septum sur un flacon de ractif dbouch, le plier en
2 pour s'assurer que les fentes sont ouvertes. Si les fentes sont fermes,
continuer plier doucement le septum de manire les ouvrir.
Une fois qu'un septum a t plac sur un flacon de ractif ouvert, ne pas
retourner le flacon afin d'viter toute fuite de ractif et de ne pas fausser
les rsultats du dosage.
Avec le temps, il se peut que des liquides rsiduels schent la surface
du septum. Il s'agit de sels secs qui n'ont aucune incidence sur la
performance du dosage.
Pour de plus amples informations sur les prcautions d'emploi lors du
fonctionnement de l'analyseur, se rfrer au chapitre 7 du Manuel
Technique ARCHITECT.
Aucun autre anticoagulant n'a t valid pour l'utilisation avec le dosage
ARCHITECT Anti-TPO. Suivre les instructions du fabricant pour le traitement
des tubes de prlvement de srum ou de plasma.
• Lors de l'valuation de sries d'chantillons, il est recommand d'utiliser
le mme type d'chantillons pendant toute l'tude.
• L'ARCHITECT i n'est pas configur pour dtecter le type d'chantillon
utilis pour le dosage. Il revient par consquent l'utilisateur de vrifier
que les types d'chantillons corrects sont utiliss pour le dosage
ARCHITECT Anti-TPO.
Etats des chantillons
• Ne pas utiliser d'chantillons prsentant les caractristiques suivantes :
• chantillons inactivs par la chaleur
• chantillons prlevs sur des cadavres ou fluides corporels autres
que le srum ou le plasma
• contamination microbienne vidente
• Manipuler les chantillons patients avec prcaution afin d'viter toute
contamination croise. Il est recommand d'utiliser des pipettes ou des
embouts usage unique.
• Vrifier l'absence de bulles dans tous les chantillons. Si des bulles sont
prsentes, les liminer l'aide d'un btonnet avant l'analyse. Utiliser un
btonnet neuf pour chaque chantillon afin d'viter toute contamination
croise.
• Les chantillons de srum et de plasma ne doivent pas contenir de fibrine,
de globules rouges ou d'autres particules en suspension.
• Pour les chantillons de srum, s'assurer que le caillot s'est compltement
form avant de les centrifuger. Certains chantillons, en particulier ceux
provenant de patients sous traitement anticoagulant ou thrombolytique,
peuvent prsenter des temps de coagulation levs. Si l'chantillon est
centrifug avant la formation complte du caillot, la prsence de fibrine
peut entra ner des rsultats errons.
Conditions de conservation
• Le kit de ractifs ARCHITECT Anti-TPO doit tre conserv
entre 2 et 8 °C en position verticale et peut tre utilis
immdiatement aprs sa sortie du rfrigrateur (2 8 °C).
• Les ractifs sont stables jusqu' leur date d'expiration s'ils sont conservs
et manipuls selon les indications du fabricant.
• Le kit de ractifs ARCHITECT Anti-TPO peut tre conserv bord de
l'ARCHITECT i pendant 30 jours au maximum. Au-del de ce dlai, le kit
de ractifs doit tre jet. Pour de plus amples informations sur le suivi de
la stabilit bord des ractifs, se rfrer au chapitre 5 du Manuel
Technique ARCHITECT.
• Les ractifs peuvent tre conservs l'intrieur ou l'extrieur de
l'ARCHITECT i. Si les ractifs sont retirs de l'analyseur, les conserver
entre 2 et 8 °C (munis de septums et de bouchons de remplacement) en
position verticale. Pour les ractifs conservs l'extrieur de l'analyseur,
il est recommand de les laisser dans leurs portoirs et emballage d'origine
afin de les maintenir dans une position verticale. Si le flacon de
microparticules (muni d'un septum) ne reste pas dans une position
verticale pendant sa conservation au rfrigrateur l'extrieur de
l'analyseur, le kit de ractifs doit tre jet. Aprs avoir retir des ractifs
de l'analyseur, il faut initialiser une lecture du carrousel ractifs afin
d'actualiser leur temps de stabilit dans l'appareil.
Prparation pour l'analyse
• Les chantillons patients d'aspect trouble doivent tre centrifugs avant
d'tre analyss. Aprs centrifugation, viter de prlever l'chantillon au
niveau de la couche lipidique (si elle est prsente) lors du pipetage dans
un godet-chantillon ou un tube secondaire.
• Les chantillons doivent tre homogniss AVEC SOIN aprs
dconglation, en les passant au Vortex une vitesse FAIBLE ou en les
retournant doucement, puis centrifugs avant emploi de fa on liminer
les globules rouges ou les particules en suspension et obtenir des
rsultats cohrents. Eviter les conglations et dconglations rptes.
• Analyser tous les chantillons (chantillons de patients, contrles et
calibrateurs) dans les 3 heures suivant leur chargement dans l'analyseur.
Pour de plus amples informations sur les conditions de conservation
des chantillons dans l'appareil, se rfrer au chapitre 5 du Manuel
Technique ARCHITECT.
Indications de dtrioration des ractifs
Un contrle dont la valeur se situe en dehors des limites spcifies peut
indiquer une dtrioration des ractifs ou des erreurs techniques. Les
rsultats des chantillons analyss dans la mme srie ne sont pas valides
et ces chantillons devront tre ranalyss. Une recalibration du dosage
peut tre ncessaire. Pour de plus amples informations sur le dpannage,
se rfrer au chapitre 10 du Manuel Technique ARCHITECT.
Conservation
• Si le dosage est effectu plus de 8 heures aprs le prlvement, sparer
le srum ou le plasma du gel sparateur de plasma ou de srum, des
globules rouges ou du caillot. Les chantillons spars du gel sparateur,
des globules rouges ou du caillot peuvent tre conservs jusqu' 72
heures entre 2 et 8 °C.
• Les chantillons peuvent tre conservs congels une temprature
infrieure ou gale -10 °C pendant 30 jours au maximum.
FONCTIONNEMENT DE L'APPAREIL
•
•
•
•
Avant d'effectuer le dosage, le fichier du dosage ARCHITECT Anti-TPO
doit tre install sur l'ARCHITECT i partir du CD-ROM de dosages
ARCHITECT i - Addition B. Pour de plus amples informations concernant
l'installation du fichier du dosage ainsi que la visualisation et la
modification des paramtres de dosage, se rfrer au chapitre 2 du
Manuel Technique ARCHITECT.
Pour de plus amples informations sur l'impression des paramtres de
dosage, se rfrer au chapitre 5 du Manuel Technique ARCHITECT.
Pour une explication dtaille du fonctionnement de l'analyseur, se rfrer
au Manuel Technique ARCHITECT.
L'unit de rsultat par dfaut du dosage ARCHITECT Anti-TPO est la
UI/ml*.
* UI = Unit internationale (IU = International Unit)
Transport
• Lorsque des chantillons sont expdis, il est recommand de les sparer
du gel sparateur de srum ou de plasma, des globules rouges ou du
caillot. Les chantillons expdier doivent tre conditionns et tiquets
conformment la lgislation rgissant le transport des chantillons
cliniques et des substances infectieuses. Les chantillons doivent tre
expdis congels (sur carboglace). Ne pas dpasser les dures de
conservation indiques prcdemment.
PRELEVEMENT ET PREPARATION DES ECHANTILLONS POUR
L'ANALYSE
PROCEDURE
Matriel fourni
• 2K47 Kit de ractifs ARCHITECT Anti-TPO
Types d'chantillons utiliser
• Les tubes de prlvement d'chantillons suivants peuvent tre utiliss
pour le dosage ARCHITECT Anti-TPO :
Srum
Plasma
Verre
Plastique
Matriel ncessaire mais non fourni
• Analyseur ARCHITECT i
• Aucun additif
(sans revtement)
• Tubes sparateurs de srum
•
• Hparinate de lithium
• Tubes sparateurs de
plasma avec hparinate
de lithium
• EDTA
• Hparinate de lithium
• Tubes sparateurs de
plasma avec hparinate
de lithium
• Hparinate de sodium
• EDTA
•
•
3
- Version internationale (
3K53 ARCHITECT i
l'exception des Etats-Unis) - Addition B
2K47-01 Calibrateurs ARCHITECT Anti-TPO
2K47-10 Contrles ARCHITECT Anti-TPO
•
ARCHITECT i
•
ARCHITECT i
•
ARCHITECT i
•
ARCHITECT i
•
ARCHITECT i
•
ARCHITECT i
•
• ARCHITECT i
• Pipettes ou embouts de pipettes (facultatif)
Pour de plus amples informations sur le matriel requis pour les procdures
de maintenance, se rfrer au chapitre 9 du Manuel Technique ARCHITECT.
Procdure d'analyse
• Avant de charger le kit de ractifs ARCHITECT Anti-TPO sur l'analyseur
pour la premire fois, le flacon de microparticules doit tre homognis
afin de remettre en suspension les microparticules qui se sont dposes
pendant le transport.
• Retourner le flacon de microparticules 30 fois.
• Examiner le flacon pour s'assurer que les microparticules sont remises
en suspension. S'il reste encore des microparticules colles au flacon,
continuer retourner ce dernier jusqu' ce qu'elles soient
compltement remises en suspension.
• Si les microparticules ne se remettent pas en suspension, NE
PAS LES UTILISER. Contacter Abbott Assistance.
• Une fois les microparticules remises en suspension, retirer et jeter le
bouchon. Retirer un septum de la pochette en portant des gants
propres. Plier le septum en 2 pour s'assurer que les fentes sont
ouvertes. Placer soigneusement le septum dans l'ouverture du flacon.
• Si ncessaire, programmer une calibration.
• Pour de plus amples informations sur les demandes de calibration,
se rfrer au chapitre 6 du Manuel Technique ARCHITECT.
• Programmer les analyses.
• Pour de plus amples informations sur les demandes d'analyse des
chantillons de patients et des contrles, se rfrer au chapitre 5 du
Manuel Technique ARCHITECT.
• Charger le kit de ractifs ARCHITECT Anti-TPO sur l'ARCHITECT i.
• Vrifier que tous les ractifs requis sont prsents. S'assurer que
chaque flacon de ractif est recouvert d'un septum.
• Le volume minimum d'chantillon requis est calcul par le systme et
imprim sur le rapport Liste des demandes. Ne pas prlever plus de 10
rpliques partir du mme godet-chantillon. Vrifier que le volume
d'chantillon adquat est prsent dans le godet chantillon avant
d'effectuer le dosage.
• Echantillon prioritaire : 75 µl pour le premier dosage ARCHITECT
Anti-TPO, plus 25 µl pour chaque dosage ARCHITECT Anti-TPO
supplmentaire effectu sur le mme godet-chantillon.
• Echantillon analys en routine dans les 3 heures qui suivent le
chargement dans l'appareil : 150 µl pour le premier dosage
ARCHITECT Anti-TPO, plus 25 µl pour chaque dosage ARCHITECT
Anti-TPO supplmentaire effectu sur le mme godet-chantillon.
• Afin de minimiser les pertes par vaporation, tous les chantillons
(chantillons de patients, calibrateurs et contrles) devront tre
analyss dans les 3 heures qui suivent leur chargement dans
l'ARCHITECT i.
• En cas d'utilisation de tubes primaires ou aliquots, utiliser la jauge
chantillon afin de s'assurer que le volume d'chantillon de patient
est suffisant.
• Prparer les calibrateurs et les contrles.
• Les calibrateurs et les contrles ARCHITECT Anti-TPO doivent tre
prpars conformment aux instructions figurant dans les notices
respectives.
• Pour obtenir les volumes requis des calibrateurs et des contrles
ARCHITECT Anti-TPO, tenir les flacons la verticale et distribuer 5
gouttes de chacun des calibrateurs ou contrles dans les godetschantillons respectifs.
• Charger les chantillons.
• Pour de plus amples informations sur le chargement des chantillons,
se rfrer au chapitre 5 du Manuel Technique ARCHITECT.
•
Appuyer sur la touche LANCER. L'analyseur procde aux tapes
suivantes :
• Dplace l'chantillon vers le point d'aspiration.
• Charge une cupule ractionnelle (CR) dans la couronne ractionnelle.
• Aspire et distribue l'chantillon dans la CR.
• Dplace la CR d'une position et distribue le diluant de dosage et les
microparticules dans la CR.
• Homognise, incube et lave le mlange ractionnel.
• Ajoute le conjugu dans la CR.
• Homognise, incube et lave le mlange ractionnel.
• Ajoute les solutions de practivation et d'activation.
• Mesure l'mission chimiluminescente pour dterminer la quantit
d'anticorps anti-TPO prsents dans l'chantillon.
• Evacue le contenu de la CR vers la poubelle pour dchets liquides et
dcharge la CR dans la poubelle pour dchets solides.
• Calcule le rsultat.
Pour obtenir une performance optimale, il est important de suivre les
procdures de maintenance de routine dcrites au chapitre 9 du Manuel
Technique ARCHITECT. Si votre laboratoire requiert une maintenance
plus frquente, se conformer ces exigences.
Procdures de dilution des chantillons
Les chantillons dont la concentration en anticorps anti-TPO est suprieure
1 000,00 UI/ml sont annots ">1000.00" et peuvent tre dilus l'aide du
protocole de dilution automatique ou de la procdure de dilution manuelle.
Protocole de dilution automatique
•
•
Selon ce protocole, l'analyseur effectue une dilution au 1/2 de l'chantillon,
puis calcule automatiquement la concentration de l'chantillon avant
dilution et enregistre le rsultat.
Les chantillons dont la concentration en anticorps anti-TPO est
suprieure 2 000,00 UI/ml sont annots ">2000.00" quand ils sont
analyss avec le protocole de dilution automatique. Ces chantillons
peuvent tre dilus avec la procdure de dilution manuelle.
Procdure de dilution manuelle
•
Les dilutions manuelles doivent tre effectues de la manire suivante :
• La dilution manuelle recommande pour le dosage anti-TPO est de
1/20e.
• Avant de diluer un chantillon, distribuer environ 10 gouttes de
calibrateur A ARCHITECT Anti-TPO dans un tube propre utiliser
dans l'tape suivante.
• Transfrer 190 µl de calibrateur A ARCHITECT Anti-TPO du tube
prpar lors de l'tape prcdente dans un autre tube propre et ajouter
10 µl de l'chantillon patient.
• Saisir le facteur de dilution dans l'cran Demande de patient ou
Demande de contrle. Le systme utilisera ce facteur de dilution afin
de calculer automatiquement la concentration de l'chantillon avant
la dilution. Cette concentration constituera le rsultat enregistr. La
dilution doit tre effectue de sorte que le rsultat de l'chantillon
dilu (avant application du facteur de dilution) soit suprieur la
sensibilit du dosage (5,61 UI/ml).
• Pour de plus amples informations sur les demandes de dilution, se
rfrer au chapitre 5 du Manuel Technique ARCHITECT.
Calibration
• Pour la calibration du dosage ARCHITECT Anti-TPO, analyser les
calibrateurs A, B, C, D, E et F en double. Un chantillon de chaque
niveau de contrle ARCHITECT Anti-TPO doit ensuite tre analys afin
de pouvoir valuer la calibration du dosage. S'assurer que les valeurs
des contrles du dosage se situent dans les limites de concentration
spcifies dans la notice des contrles. Les calibrateurs doivent tre
chargs en position prioritaire.
• Plage de calibration : 0,00 1 000,00 UI/ml.
• Lorsque la calibration du dosage ARCHITECT Anti-TPO a t accepte
et mmorise, tous les chantillons suivants peuvent tre analyss sans
effectuer de nouvelle calibration, sauf si :
• Un kit de ractifs portant un nouveau numro de lot est utilis.
• Les valeurs des contrles se trouvent en dehors des limites spcifies.
• Pour de plus amples informations sur la procdure de calibration d'un
dosage, se rfrer au chapitre 6 du Manuel Technique ARCHITECT.
4
PROCEDURES DU CONTROLE DE QUALITE
CARACTERISTIQUES SPECIFIQUES
Le contrle de qualit recommand pour le dosage ARCHITECT Anti-TPO
consiste analyser un chantillon de chaque niveau de contrle une fois
toutes les 24 heures d'utilisation. Si les procdures du contrle de qualit du
laboratoire exigent une utilisation plus frquente des contrles pour vrifier
les rsultats d'analyse, se conformer ces exigences.
Les valeurs des contrles ARCHITECT Anti-TPO doivent se situer dans les
limites spcifies dans la notice des contrles. Si ce n'est pas le cas, les
rsultats des chantillons analyss dans la mme srie ne sont pas valides
et ces chantillons devront tre ranalyss. Une recalibration peut alors
tre ncessaire.
Reproductibilit
Le dosage ARCHITECT Anti-TPO est con u de manire fournir une
reproductibilit < 10 % (CV total) pour les chantillons > 5,61 UI/ml.
Une tude a t mene pour le dosage ARCHITECT Anti-TPO conformment
au protocole EP5-A du National Committee for Clinical Laboratory Standards
(NCCLS).31 Le contrle positif ARCHITECT Anti-TPO et 3 panels humains
ont t analyss en double sur 3 appareils, l'aide de 3 lots de ractifs, 2
fois par jour, pendant 20 jours. Une seule courbe de calibration a t utilise
pour chaque lot de ractifs pendant toute l'tude. Les donnes de cette
tude sont rsumes dans le tableau suivant.*
Vrification des performances du dosage
Pour de plus amples informations sur les protocoles de vrification des
performances du dosage mentionnes dans la notice, se rfrer l'Annexe B
du Manuel Technique ARCHITECT. Le dosage ARCHITECT Anti-TPO
appartient au groupe 1. Utiliser les calibrateurs ARCHITECT Anti-TPO la
place des MasterChecks® comme dcrit dans l'Annexe B du Manuel
Technique ARCHITECT.
Echantillon
•
1
A
B
C
A
B
C
A
B
C
80
80
80
80
80
80
80
80
80
A
B
C
A
B
C
A
B
C
1
Panel 1
2
3
LIMITES DE LA METHODE
•
Conc.
moyenne
(UI/ml)
3
Annotations
• La rubrique "Annotations" peut contenir des informations sur certains
rsultats. Une description des annotations qui peuvent appara tre dans
cette rubrique est fournie au chapitre 5 du Manuel Technique ARCHITECT.
•
n
2
Calculs
Le dosage ARCHITECT Anti-TPO utilise une mthode de traitement des
donnes par ajustement de la courbe logistique 4 paramtres (4PLC,
pondration en Y) pour crer une courbe de calibration.
•
Lot
ractifs
Contrle
positif
RESULTATS
•
Analyseur
La dtermination des anticorps ne reprsente qu'un paramtre d'un
processus de diagnostic critres multiples. Dans le cadre d'un diagnostic
de maladie thyrodienne, il convient d'utiliser une combinaison de
diffrentes mthodes d'examens en association avec les symptmes
cliniques.
Environ 20 % des chantillons asymptomatiques peuvent contenir des
autoanticorps anti-TPO, ce qui reflte la prvalence dans les populations
apparemment saines. La prvalence des anticorps anti-TPO peut
galement dpendre de l'ge, du sexe et des facteurs gographiques
de la population slectionne.
Il se peut que la dilution de certains chantillons ne soit pas linaire en
raison de l'htrognit des proprits physiochimiques des
autoanticorps.
Les chantillons prlevs sur des patients auxquels ont t administres
des prparations d'anticorps monoclonaux de souris des fins
diagnostiques ou thrapeutiques peuvent contenir des anticorps humains
anti-souris (HAMA).28 De tels chantillons peuvent donner des rsultats
faussement levs ou abaisss lorsqu'ils sont tests avec des kits de
dosage qui utilisent des anticorps monoclonaux de souris.28,29 Les
rsultats de dosage qui ne concordent pas avec les autres observations
cliniques peuvent ncessiter des informations complmentaires pour
tablir un diagnostic.
Les anticorps htrophiles prsents dans le srum humain peuvent ragir
avec les immunoglobulines des ractifs, interfrant ainsi avec les dosages
immunologiques in vitro.30 La prsence d'anticorps htrophiles dans
un chantillon de patient peut entra ner l'obtention de valeurs
anormales.30 Pour tablir un diagnostic, de plus amples informations
peuvent tre ncessaires.
1
2
Panel 2
3
1
2
Panel 3
3
Intra-srie
E.T.
CV (%)
Total
E.T. CV (%)
74,85
74,20
74,63
77,42
75,32
74,59
75,41
75,48
76,66
2,11
1,89
2,01
2,11
1,92
1,73
2,13
1,90
2,42
2,8
2,6
2,7
2,7
2,5
2,3
2,8
2,5
3,2
2,16
2,04
2,17
3,25
2,54
2,57
2,52
2,13
2,87
2,9
2,7
2,9
4,2
3,4
3,4
3,3
2,8
3,7
80
80
80
80
80
80
80
80
80
1,57
1,46
1,64
1,60
1,53
1,52
1,47
1,47
1,52
0,08
0,06
0,09
0,09
0,06
0,10
0,08
0,07
0,14
4,8
3,8
5,6
5,3
3,9
6,7
5,3
4,7
9,5
0,10
0,09
0,10
0,12
0,11
0,12
0,11
0,13
0,15
6,5
5,8
6,1
7,6
7,2
7,7
7,8
8,5
9,8
A
B
C
A
B
C
A
B
C
80
80
80
80
80
80
80
80
80
20,98
21,14
21,51
21,27
21,62
20,82
21,00
21,77
21,24
0,65
0,61
0,71
0,61
0,66
0,67
0,73
0,60
0,70
3,1
2,9
3,3
2,9
3,0
3,2
3,5
2,7
3,3
0,76
0,66
0,75
0,98
0,90
0,85
0,86
0,84
0,89
3,6
3,1
3,5
4,6
4,2
4,1
4,1
3,8
4,2
A
B
C
A
B
C
A
B
C
80
80
80
80
80
80
80
80
80
214,78
221,79
216,71
219,32
224,54
218,73
212,91
225,46
228,17
5,14
4,73
5,36
4,41
4,04
5,76
6,11
5,15
5,80
2,4
2,1
2,5
2,0
1,8
2,6
2,9
2,3
2,5
6,48
5,82
6,36
8,61
13,37
13,18
6,84
5,67
7,09
3,0
2,6
2,9
3,9
6,0
6,0
3,2
2,5
3,1
* Donnes reprsentatives ; les rsultats obtenus peuvent varier d'un laboratoire
l'autre.
Sensibilit fonctionnelle
Lors d'une tude, des panels humains, prsentant des concentrations
comprises entre 0,16 et 1,20 UI/ml, ont t analyss en double sur 1
analyseur, pendant 10 jours, l'aide de 2 lots de ractifs et de 3 calibrations,
pour un total de 40 rpliques par panel. Les CV (%) totaux (combinant les
composantes de la variance par rplique, srie, jour et lot de ractifs) ont
t calculs et tracs en fonction de la concentration moyenne. Une courbe
rciproque a ensuite t trace l'aide de ces donnes et la valeur de
sensibilit fonctionnelle du dosage a t calcule comme tant gale la
concentration correspondant un coefficient de variation de 20 % de la
courbe ajuste. La plus faible valeur obtenue par le dosage ARCHITECT
Anti-TPO prsentant un CV de 20 % est de 0,50 UI/ml.*
VALEURS ATTENDUES
Une tude a t mene avec des chantillons de srum humain prlevs
sur une population de 236 sujets apparemment sains. Tous les chantillons
ont fourni des valeurs de TSH situes dans la plage des valeurs de rfrence.
9 chantillons de cette population ont fourni des rsultats positifs par un
dosage anti-TPO disponible dans le commerce et ont t exclus de l'tude
destine dterminer la plage de rfrence. La concentration du 97,5me
percentile de la population restante tait de 5,61 UI/ml. Pour la population
tudie, la plage des valeurs normales est < 5,61 UI/ml. 97,8 % (222/227)
de cette population ont fourni des valeurs comprises dans la plage de
rfrence.* Cette plage de rfrence est propose titre indicatif ; chaque
laboratoire devra tablir des valeurs de rfrence appropries aux populations
de patients qu'il dessert, en tenant compte de l'ge, du sexe, des facteurs
gographiques et des pratiques cliniques.
* Donnes reprsentatives ; les rsultats obtenus peuvent varier d'un laboratoire
l'autre.
Sensibilit analytique
Le dosage ARCHITECT Anti-TPO a t con u de manire fournir une
sensibilit analytique < 1,0 UI/ml. La sensibilit analytique du dosage
ARCHITECT Anti-TPO, dfinie comme tant gale la concentration 2
carts-types au-dessus du calibrateur A ARCHITECT Anti-TPO (0,0 UI/ml) a
t dtermine comme tant gale 0,16 UI/ml * avec un intervalle de
confiance 95 % (n = 48 sries, 10 rpliques du calibrateur A et 4 rpliques
du calibrateur B par srie).
* Donnes reprsentatives ; les rsultats obtenus peuvent varier d'un laboratoire
l'autre.
* Donnes reprsentatives ; les rsultats obtenus peuvent varier d'un laboratoire
l'autre.
5
Linarit
Selon une tude effectue sur la base du protocole EP6-A32 du NCCLS, le
dosage ARCHITECT Anti-TPO est linaire entre 3,0 et 1 000,0 UI/ml.
Evaluation d'autres substances potentiellement interfrentes
L'interfrence potentielle des anticorps HAMA et du facteur rhumatode (FR)
dans le dosage ARCHITECT Anti-TPO est < 15 %. Lors d'une tude, le
dosage ARCHITECT Anti-TPO a t valu en analysant des chantillons
contenant des HAMA et le FR pour une valuation supplmentaire de la
spcificit clinique. Des chantillons positifs pour les HAMA et des
chantillons positifs pour le FR ont t valus pour dterminer le
pourcentage d'interfrence avec des concentrations d'anticorps anti-TPO
surcharges comprises entre 163,0 et 184,3 UI/ml. Les valeurs du
pourcentage d'interfrence absolu moyen sont rsums dans le tableau
ci-aprs.*
Vrification par autodilution
Le protocole de dilution automatique ARCHITECT Anti-TPO fournit un
pourcentage de rcupration allant jusqu’ 15 % des chantillons dilus
manuellement. Lors d'une tude, le protocole de dilution automatique (1/2)
a t compar la procdure de dilution manuelle au 1/2 l'aide de 9
chantillons humains dont les concentrations en anticorps anti-TPO taient
suprieures celle du calibrateur E (250 UI/ml). La dilution manuelle a t
effectue l'aide du calibrateur A ARCHITECT Anti-TPO. Les rsultats de
rcupration (%) observs sont rsumes dans le tableau suivant.*
Echantillon
1
2
3
4
5
6
7
8
9
Dilution automatique (UI/ml)
861,25
684,49
844,36
724,55
709,46
1 105,65
948,43
840,77
966,48
Dilution manuelle
(UI/ml)
% de
rcupration**
859,27
703,64
847,62
757,09
688,49
1 106,18
931,80
851,72
998,45
100,2
97,3
99,6
95,7
103,1
100,0
101,8
98,7
96,8
Dilution automatique (UI/ml)
–––––––––––––––––––––––
Dilution manuelle (UI/ml)
Bilirubine
Hmoglobine
Protines totales (taux bas)
Protines totales (taux lev)
Triglycrides
x 100
10
10
2,1
1,6
Thyrodite d'Hashimoto
n
Positifs (%)
Maladie de Graves
n
Positifs (%)
89
50
75
50
64,0
74,0
92,0
100,0
* Donnes reprsentatives ; les rsultats obtenus peuvent varier d'un laboratoire
l'autre.
CONCORDANCE
La performance du dosage ARCHITECT Anti-TPO a t compare celle
d'un autre dosage immunologique pour la dtermination des anticorps
anti-TPO, disponible dans le commerce. Lors de cette tude, 500 chantillons
provenant de sujets apparemment en bonne sant et de patients prsentant
une maladie thyrodienne auto-immune (maladie de Graves et thyrodite
d'Hashimoto) ont t analyss. Une rplique de chaque chantillon a t
analyse par le dosage ARCHITECT Anti-TPO, sur trois analyseurs, l'aide
de 3 lots de ractifs. Les rsultats ont t compars ceux obtenus avec un
dosage immunologique disponible dans le commerce (dosage de
comparaison). Les donnes de cette tude sont rsumes dans le tableau
suivant.*
Concentration de la substance
potentiellement interfrente
20 mg/dl
1 000 mg/dl
4
g/dl
10
g/dl
1 000 mg/dl
ARCHITECT Anti-TPO
Evaluation d'chantillons provenant de patients atteints de maladies
Ngatifs
Positifs
auto-immunes et d'chantillons titres levs d'IgG
L'interfrence potentielle d'chantillons provenant de patients atteints de
maladies auto-immunes et d'chantillons titres levs d'IgG avec le dosage
ARCHITECT Anti-TPO est < 15 %. Lors d'une tude, le dosage ARCHITECT
Anti-TPO a t valu en analysant des chantillons provenant de patients
atteints de maladies auto-immunes diagnostiqus et des chantillons titres
levs d'IgG. Les chantillons analyss ont t surchargs d'anticorps antiTPO et prsentaient des concentrations comprises entre 131,44 et 568,78 UI/ml.
Les rsultats de pourcentage d'interfrence absolu moyen sont rsums
dans le tableau ci-aprs.*
Anticorps anti-nuclaires
Arthrite rhumatode
Lupus rythmateux systmique
Diabte sucr insulino-dpendant
Maladie de Crohn
Sclrose en plaques
Colite ulcreuse
Hyperglobulinmie (IgG lev)
Positif pour HAMA
Positif pour FR
Etude 1
Etude 2
* Donnes reprsentatives ; les rsultats obtenus peuvent varier d'un laboratoire
l'autre.
Facteur clinique
% d'interfrence
absolu
SENSIBILITE CLINIQUE
Lors de deux tudes, la sensibilit clinique a t value en analysant 139
chantillons de patients cliniquement diagnostiqus comme atteints de
thyrodite d'Hashimoto et 125 chantillons de patients atteints de la maladie
de Graves. Le diagnostic clinique a t tabli selon les critres des
laboratoires respectifs. La prsence d'autoanticorps dirigs contre la
thyroglobuline et/ou la TPO ne constituait pas ncessairement un critre de
diagnostic de maladie de Graves-Basedow et de thyrodite d'Hashimoto.
Les donnes de ces tudes sont rsumes dans le tableau suivant.*
Interfrence
L'interfrence potentielle de taux levs de bilirubine, d'hmoglobine, de
triglycrides et de protines totales dans le dosage ARCHITECT Anti-TPO
est < 15 % aux concentrations indiques.
Une tude a t mene pour le dosage ARCHITECT Anti-TPO sur la base
du protocole EP7-A 33 du NCCLS. Les substances potentiellement
interfrentes suivantes ont t ajoutes des chantillons prsentant des
taux d'anticorps anti-TPO compris entre 45,07 et 361,64 UI/ml. L'interfrence
moyenne observe lors de cette tude tait comprise entre -3,6 % et +3,7 %.*
Substance potentiellement
interfrente
Nombre
d'chantillons
* Donnes reprsentatives ; les rsultats obtenus peuvent varier d'un laboratoire
l'autre.
* Donnes reprsentatives ; les rsultats obtenus peuvent varier d'un laboratoire
l'autre.
**% de rcupration =
Autres substances
potentiellement
interfrentes
Dosage de comparaison
Ngatifs
Positifs
242
5
32
221
Concordance = 92,6 %
* Donnes reprsentatives ; les rsultats obtenus peuvent varier d'un laboratoire
l'autre.
BIBLIOGRAPHIE
1.
2.
Interfrence moyenne absolue (%)
3.
1,6
1,6
1,1
1,0
2,4
1,7
1,5
0,9
4.
5.
6.
* Donnes reprsentatives ; les rsultats obtenus peuvent varier d'un laboratoire
l'autre.
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