Fiche technique en PDF

Biomaghreb
PRESENTATION
Ré.f 20041(50 Tests
Rèf. 20039
(200 Tests TGO) TGO + 50 Tests TGP)
R1: 2 x 100 ml
R1 : 1 x 50ml
R3: 2 x 100 ml
R2 : 1 x 50 ml
R3 : 1 x 100 ml
R4: 1 x 14 ml
R4: 1 x 9ml
Réf. 20048
(100 Tests TGP)
R2: 2 x 50ml
R3: 2 x 50 ml
R4: 1 x 9ml
TRANSAMINASES
Rèf. 20049
(100 Tests TGO)
R1: 2 x 50ml
R3: 2 x 50ml
R4: 1 x 9ml
Méthode colorimétrique
Etablissement de la courbe d’étalonnage sur papier
millimétré:
- en abscisse: nombre d’unités/ml
- en ordonnée: densités optiques
PRINCIPE
Détermination colorimétrique de l’activité TGO ou TGP
selon les réactions suivantes :
2- Dosage
Pour chaque sérum, préparer les tubes suivants:
TGO: Aspartate + α cétoglutarate TGO oxaloacetate+ glutamate
TGP: Alanine + α cétoglutarate TGP pyruvate + glutamate
Le pyruvate ou l’oxaloacétate formés sont dosés sous
forme de leurs dérivés 2,4 dinitrophénylhydrazones.
Réactif 1
Réactif 2
REACTIFS
TGO
1 ml
-
TGP
1 ml
0,2 ml
0,2 ml
Incuber 5 min à 37°C
Réactif 1
Substrat TGO
Tampon phosphate pH 7,5
aspartate
α cétoglutarate
85 mmol/l
200 mmol/l
2 mmol/l
tampon phosphate pH 7,5
alanine.
α cétoglutarate.
95 mmol/l
200 mmol/l
2 mmol/I
Réactif 3
Réactif de coloration 2,4 dinitrophénylhydrazine
1 mmol/l
Réactif 2
Substrat TGP
Réactif 4
Sérum
Mélanger et
mettre à 37°C
exactement
1 heure
Réactif 3
1 ml
exactement
30 min
1 ml
Mélanger. Laisser 20 min à température ambiante.
Soude 0,4 N
10 ml
10 ml
Mélanger. Attendre 5 min. Photométrer dans les mêmes
conditions que la courbe d’étalonnage.
étalon pyruvate
STABILITE
3- Stabilité de la coloration :...................1 heure
Les réactifs sont stables plusieurs années à 2-8°C.
Le réactif 3 est à conserver à l’abri de la lumière
Réactif auxiliaire : Soude 0,4 N
ECHANTILLONS
4- RÉSULTATS
Déterminer à partir de la courbe d’étalonnage le
nombre d’unités TGO et TGP par ml de sérum.
Sérum
Hémolyse génante
LINEARITE
Pour une activité TGO > 150 unités/ml, et TGP > 125
unités/ml, refaire la détermination en diluant l’échantillon au
1/10ème dans une solution de chlorure de sodium à 9 g/l.
Multiplier alors le chiffre lu sur la courbe par 10.
MODE OPERATOIRE
Longueur d’onde :
505 nm (490 à 520 nm)
Zéro de l’appareil :
eau distillée
1- Courbe d’étalonnage
Dans des tubes à essai répartir (en ml) :
N° des tubes
Eau distillée
Réactif 1
Réactif 4
Réactif 3
1
0,2
1
1
2
0,2
0,9
0,1
1
3
0,2
0,8
0,2
1
4
0,2
0,7
0,3
1
VALEURS USUELLES
TGO : < 40 unités/ml
TGP : < 45 unités/ml
5
0,2
0,6
0,4
1
BIBLIOGRAPHIE
REiTMANS; FRANKELS.
Am. d. Clin. Path. 28,56 (1957).
Mélanger. Laisser 20 min à température ambiante.
Soude 0,4 N
10
10
10
10
10
Mélanger. Attendre 5 min. Photométrer
UnitésTGO/ml
Unités TGP/ml
0
0
22
25
55
50
95 150
83 126
23
FT Fr 15
Déc 2007